Fragment N2, a caspase-3-generated RasGAP fragment, inhibits breast cancer metastatic progression

The p120 RasGAP protein negatively regulates Ras via its GAP domain. RasGAP carries several other domains that modulate several signaling molecules such as Rho. RasGAP is also a caspase-3 substrate. One of the caspase-3-generated RasGAP fragments, corresponding to amino acids 158-455 and called fragment N2, was previously reported to specifically sensitize cancer cells to death induced by various anticancer agents. Here, we show that fragment N2 inhibits migration in vitro and that it impairs metastatic progression of breast cancer to the lung. Hence, stress-activated caspase-3 might contribute to the suppression of metastasis through the generation of fragment N2. These results indicate that the activity borne by fragment N2 has a potential therapeutic relevance to counteract the metastatic process.

Caspase-3 and RasGAP: a stress-sensing survival/demise switch.

The final decision on cell fate, survival versus cell death, relies on complex and tightly regulated checkpoint mechanisms. The caspase-3 protease is a predominant player in the execution of apoptosis. However, recent progress has shown that this protease paradoxically can also protect cells from death. Here, we discuss the underappreciated, protective, and prosurvival role of caspase-3 and detail the evidence showing that caspase-3, through differential processing of p120 Ras GTPase-activating protein (RasGAP), can modulate a given set of proteins to generate, depending on the intensity of the input signals, opposite outcomes (survival vs death).

A WXW Motif Is Required for the Anticancer Activity of the TAT-RasGAP317-326 Peptide.

TAT-RasGAP317-326, a cell-permeable 10-amino acid-long peptide derived from the N2 fragment of p120 Ras GTPase-activating protein (RasGAP), sensitizes tumor cells to apoptosis induced by various anticancer therapies. This RasGAP-derived peptide, by targeting the deleted in liver cancer-1 (DLC1) tumor suppressor, also hampers cell migration and invasion by promoting cell adherence and by inhibiting cell movement. Here, we systematically investigated the role of each amino acid within the RasGAP317-326 sequence for the anticancer activities of TAT-RasGAP317-326. We report here that the first three amino acids of this sequence, tryptophan, methionine, and tryptophan (WMW), are necessary and sufficient to sensitize cancer cells to cisplatin-induced apoptosis and to reduce cell migration. The WMW motif was found to be critical for the binding of fragment N2 to DLC1. These results define the interaction mode between the active anticancer sequence of RasGAP and DLC1. This knowledge will facilitate the design of small molecules bearing the tumor-sensitizing and antimetastatic activities of TAT-RasGAP317-326.

RasGAP Shields Akt from Deactivating Phosphatases in Fibroblast Growth Factor Signaling but Loses This Ability Once Cleaved by Caspase-3.

Fibroblast growth factor receptors (FGFRs) are involved in proliferative and differentiation physiological responses. Deregulation of FGFR-mediated signaling involving the Ras/PI3K/Akt and the Ras/Raf/ERK MAPK pathways is causally involved in the development of several cancers. The caspase-3/p120 RasGAP module is a stress sensor switch. Under mild stress conditions, RasGAP is cleaved by caspase-3 at position 455. The resulting N-terminal fragment, called fragment N, stimulates anti-death signaling. When caspase-3 activity further increases, fragment N is cleaved at position 157. This generates a fragment, called N2, that no longer protects cells. Here, we investigated in Xenopus oocytes the impact of RasGAP and its fragments on FGF1-mediated signaling during G2/M cell cycle transition. RasGAP used its N-terminal Src homology 2 domain to bind FGFR once stimulated by FGF1, and this was necessary for the recruitment of Akt to the FGFR complex. Fragment N, which did not associate with the FGFR complex, favored FGF1-induced ERK stimulation, leading to accelerated G2/M transition. In contrast, fragment N2 bound the FGFR, and this inhibited mTORC2-dependent Akt Ser-473 phosphorylation and ERK2 phosphorylation but not phosphorylation of Akt on Thr-308. This also blocked cell cycle progression. Inhibition of Akt Ser-473 phosphorylation and entry into G2/M was relieved by PHLPP phosphatase inhibition. Hence, full-length RasGAP favors Akt activity by shielding it from deactivating phosphatases. This shielding was abrogated by fragment N2. These results highlight the role played by RasGAP in FGFR signaling and how graded stress intensities, by generating different RasGAP fragments, can positively or negatively impact this signaling.

Recueil de lettres et de pièces originales, et de copies de pièces indiquées comme telles dans le dépouillement qui suit.

Contient : 1 Lettre du roi « CHARLES » IX au « Sr de Montmorency, mareschal de France... A Thoulouse, le VIIIe jour de fevrier 1565 » ; 2 Lettre du roi « CHARLES » IX au « duc de Nevers, pair de France... A Chaune, le XVIIIe jour de aoust 1567 » ; 3 Lettre du roi « CHARLES » IX au « duc de Nevers,... lieutenant general delà les montz... A Chaune, le XVIIIe jour de aoust 1567 » ; 4 Lettre de « CATERINE » DE MEDICIS au duc de Nevers, « A Chaune, le XXme jour de aoust 1567 » ; 5 Lettre de « CATERINE [DE MEDICIS]... à monseigneur l'evesque de Conserans [Menaud de Martres]... A Nogent sur Seine, le VIIe jour d'avril M. V.C. XLVIII, apres Pasques » ; 6 Lettre du roi « CHARLES » IX au « duc de Nevers,... A Paris, le cinquiesme jour de juing 1572 » ; 7 Lettre de « FRANÇOYS [DE CLEVES]... à monseigneur de Rasay, cappitaine et gouverneur de Maisieres... A Chaallons, ce XVIIe jour d'apvril 1548 » ; 8 Lettre d'ANNE DE « MONTMORENCY [connétable de France]... à monseigneur [l'évêque] de Conserans... De Amboise, le IIIIe jour d'avril » ; 9 Lettre d'ANNE DE « MONTMORENCY,... à monseigneur l'evesque de Conserans... D'Amboise, le XIIIe jour d'avril » ; 10 Lettre d'ANNE DE « MONTMORENCY,... à monseigneur de Conserans,... De Fere en Tardenois, ce XXIIIe avril » ; 11 Lettre d'ANNE DE « MONTMORENCY,... à monseigneur l'evesque de Conserans... De Chantilly, le XIIIe jour de may » ; 12 Copie d'une lettre d'ANNE DE « MONTMORENCI » à « monseigneur de Conserans,... A Paris, ce VIIIe de may mil V.C. XLVII » ; 13 Lettre d'ANNE DE « MONTMORENCY,... à monseigneur de Conserans,... De Chantilly, le XXIe jour de juillet » ; 14 Lettre d'ANNE DE « MONTMORENCY » à « monseigneur de Conserans,... De Berryseau, le XXIIIIe juillet » ; 15 Lettre d'ANNE DE « MONTMORENCY,... à monseigneur de Conserans,... A Braye Conte Robert, le XVIIe jour de juillet » ; 16 Lettre d'ANNE DE « MONTMORENCY,... à monseigneur [l']evesque de Conserans,... De Charenton, ce jour de Nostre Dame de septembre » ; 17 Lettre d'ANNE DE « MONTMORENCY,... à monseigneur l'evesque de Conserans,... De Fontainebleau, ce XXVIIe jour de septembre 1547 » ; 18 Lettre d'ANNE DE « MONTMORENCY,... à monseigneur de Conserans,... De Chantilly, ce dernier jour de septembre » ; 19 Lettre d'ANNE DE « MONTMORENCY,... à monseigneur de Conserans,... De Chantilly, ce XXIIIe jour d'octobre » ; 20 Lettre d'ANNE DE « MONTMORENCY,... à monseigneur l'evesque de Conserans,... De Poissy, ce XXIIIIe octobre » ; 21 Lettre d'ANNE DE « MONTMORENCY,... à monseigneur de Cozerans,... De Fontainebleau, ce dernier jour d'octobre » ; 22 Lettre d'ANNE DE « MONTMORENCY,... à monseigneur de Conserans,... D'Escouen, le IIIe jour de novembre » ; 23 Lettre d'ANNE DE « MONTMORENCY,... à monseigneur de Conserans,... A Chantilly, ce VIe jour de novembre » ; 24 Lettre d'ANNE DE « MONTMORENCY,... à monseigneur l'evesque de Conserans,... De Yere lez Nonnains, le VIIe jour de novembre » ; 25 Lettre de « JEHAN [DE BUZ], e[vêque] de Meaulx... à monseigneur de Coserans,... De Villemarueil, ce quatriesme jour de may mil cinq cens quarante deux » ; 26 Lettre de « GUY [XVII, comte] DE LAVAL,... à monseigneur... de Coserans,... A Paris, ce VIe de febvrier M.V.C.XLI » ; 27 Lettre de « GUY [XVII, comte] DE LAVAL,... à monseigneur de Coserans,... A Vitré, le XXIXe jour de mars mil V.C. quarente et ung » ; 28 Lettre d'ANNE DE « MONTMORENCY,... à monseigneur de Conserans,... De Fontaynebleau, le Xe jour de novembre V.C.XL » ; 29 Lettre de « GUY [XVII, comte] DE LAVAL,... à monseigneur de Conserans,... A Paris, le XVe jour de febvrier » ; 30 Lettre de « GUY DE LAVAL,... à monseigneur de Coserans,... A Bloys, ce VIIIe jour de mars, l'an mil V.C.XL » ; 31 Reçu délivré par « GUY, conte DE LAVAL », à « Menault de Marthory, evesque de Coserans,... A Coloummiers en Brye, le dernier jour de mars, l'an mil cinq cens quarante trois, apres Pasques » ; 32 Lettre de « GUY DE LAVAL,... à monseigneur de Coserans,... A Bloys, ce VIIIme jour de mars » ; 33 Lettre de « GUY DE LAVAL,... à monseigneur de Coserans,... A Bloys, ce XIe jour de mars » ; 34 Lettre de « GUY DE LAVAL,... à monseigneur de Coserans,... A Villanche, ce XXVIIIme jour de mars » ; 35 Lettre de « GUY DE LAVAL,... à monseigneur de Conserans,... A Vitré, le IIIe jour de may » ; 36 Lettre de « GUY DE LAVAL,... à monseigneur de Conserans,... A Vitré, le Xe de may » ; 37 Lettre de « GUY DE LAVAL,... à monseigneur de Coserans,... A Chastellerault, ce quatriesme juing » ; 38 Lettre de « GUY DE LAVAL,... à monseigneur de Coserans,... A Chastellerault, ce XVe juing » ; 39 Lettre de « GUY DE LAVAL,... à monseigneur de Coserans,... A l'abbaye de Trouare, ce XXVe juung M. V.C.XLV » ; 40 Lettre de « GUY DE LAVAL,... à monseigneur de Conserans,... A Longjumeau, ce XVIe juillet » ; 41 Lettre de « GUY DE LAVAL,... à monseigneur de Conserans,... A Paris, le dernier jour d'octobre » ; 42 Lettre de « GUY DE LAVAL,... à monseigneur de Conserans,... A Fere, ce dymanche VIe jour de novembre » ; 43 Lettre de « GUY DE LAVAL,... à monseigneur de Coserans,... A Paris, ce XIXe novembre » ; 44 Copie d'une lettre du connétable ANNE DE « MONTMORENCY,... à monseigneur le conte de Laval,... D'Amboyse, ce XIIe avril 1540 » ; 45 Copie d'une lettre de l'évêque de « Coserans [MENAUD DE MARTRES]... à madame de Laval,... A Colomyers, ce XXVIe séptembre mil V.C.XLVII » ; 46 Lettre de « GUY DE LAVAL,... à monseigneur le duc de Nyvernoys,... A Lorriz, ce Xe jour de may 1554 » ; 47 Lettre de « RENEE DE LORRAINE [abbesse de Saint-Pierre de Reims]... à monsieur le duc de Nevers,... De Reims, ce XIXe de jeung 1554 » ; 48 Lettre de « JEHAN DE BRETAYGNE [duc d'Étampes]... à monsieur le duc de Nyvernoys,... De Maulepvrier, ce IIIIe jour de novembre 1554 » ; 49 Lettre de « MADELENE DE MAILLY,... à madame la duchesse de Nevers,... De Roucy, ce XVe jour de febvrier 1558 » ; 50 Lettre de « RENE DE MAILLY,... à monseigneur le duc de Nivernois,... De Monstreul, le XVIIe de febvrier 1558 » ; 51 Lettre de « CHANTEREAU,... à monseigneur le duc de Nevers,... De Villiers Costeretz, ce VIIIe de mars 1558 » ; 52 Lettres des gens de « conseil aux comptes à Nevers... à monseigneur » le duc de Nevers. « De Nevers, ce penultime jour de mars 1559 » ; 53 Lettre de « CHARLES DE ROUCY, e[vêque] de Soissons... à monseigneur le duc de Nivernois,... A Reims, ce XXIIe de septembre 1559 » ; 54 Lettre de « DE ROCHECHOUART,... à monseigneur le duc de Nyvernoys,... De Rems, ce XXIIIe jour de septembre V.C.LIX » ; 55 Lettre de « CHARLES DU MOLIN,... à monseigneur le duc de Nyvernoys,... De Paris, ce Xe janvier 1560 » ; 56 Lettre de « D'ESTAMPLE,... à monseigneur de La Herbaudure,... receveur general des finances de monseigneur [le duc de Nevers]... De Annet, le XXe jour de janvier 1560 » ; 57 Lettre de « GUILLAUME DE CROY,... à madame la marquise de Rynel,... A Chierves, le XXVIIe de janvyer 1560 » ; 58 Lettre de « KATERINE DE CLAI[VES]... à madame la comtesse de Senighan,... De Joinville, ce XIIIe jour de febvrier 1560 » ; 59 Lettre d'« ANTHOINETTE [DE BOURBON]... à madame la contesse de Senighan,... De Joinville, ce XIIIIe jour de febvrier 1560 » ; 60 Lettre des gens du « conseil aux comptes à Nevers... à monseigneur [le duc de Nevers]... De Nevers, ce XXIXe jour de may 1560 » ; 61 Lettre des gens du « conseil et des comptes à Nevers... à monsieur le bailly de Nivernoys... De Nevers, ce XXIXe jour de may 1560 » ; 62 Lettre de « LAMOIGNON,... à monseigneur [le duc de Nevers]... De Paris, ce XXVIIe janvier » ; 63 Lettre des gens du conseil des « comptes à Nevers... à monseigneur [le duc de Nevers]... De Nevers, ce VIe jour de jung 1561 » ; 64 Lettre de « HAVIRLET,... à monsieur Lamaignon,... A Hambye, ce XIe de juing 1561 » ; 65 État des revenus du roi d'Espagne, « Don Felipe », en l'année 1562. En espagnol ; 66 Lettre de « FRANÇOYS [II DE NEVERS]... à La Herbaudure,... A St Germain, le XIIIIe jour d'aoust 1562 » ; 67 Lettre de « FRANÇOYS [II DE NEVERS]... à La Herbaudure,... De St Germain en Laye, le penultime jour d'aoust 1562 » ; 68 Lettre de « FRANÇOYS [II DE NEVERS]... à La Herbaudure,... A St Germain en Laye, le Ve jour de septembre 1562 » ; 69 Lettre d'ANNE DE « MONTMORENCY,... à monseigneur le prince de Portian,... De Troyes, le dernier jour de mars 1563 » ; 70 Lettre de « ROBERT DE LA MARK [duc DE BOUILLON]... à... monsieur le prince de Portian,... De Chaallons, ce XIXe apvril 1564 » ; 71 Lettre d'« ANTHOINE DE CROY,... à monsieur de Sturmes,... De Chasteau Porcian, ce XXIe jour d'avril 1564 » ; 72 Lettre de « JEHAN DE BRETAYGNE [duc d'Étampes]... à monseigneur [l'évêque] de Conserans... De Boussac, ce VIIIe jour de fevrier » ; 73 Lettre de « JEHAN DE BRETAYGNE,... à monsieur l'evesque de Conserans... De Boussac, ce XXVIe jour de fevrier » ; 74 Lettre de « JEHAN DE BRETAYGNE,... à monsieur l'evesque de Conserans... D'Estampes, ce jour de Pasques » ; 75 Lettre de « CHARLES DE LUXEMBOURG,... à monseigneur l'evesque de Conserans... De Boussac, ce XXVe jour de febvrier » ; 76 Lettre de « CHARLES DE LUXEMBOURG,... à... monseigneur l'evesque de Conzerans... De Boussac, ce XXVe jour de febvrier » ; 77 Lettre de « CHARLES DE LUXEMBOURG,... à monseigneur [l'évêque] de Conserans... De Boussac, ce VIIIe de mars » ; 78 Lettre de « CHARLES DE LUXEMBOURG,... à... monseigneur [l'évêque] de Conserans... De Boussac, ce IXe de mars » ; 79 Lettre de « DE THOU,... à monseigneur de Coserans » ; 80 Fragment de lettre de « MARTIN DE JOUY,... De Paris, ce premier lundi de caresme XIIe febvrier » ; 81 Lettre de « F[RANÇOIS, cardinal] DE TOURNON, ar[chevêque] de Bourges... De Yvry, ce XXIIIIe de fevrier » ; 82 Lettre de « DE THOU,... à monseigneur de Coserans,... A Boisdaulphin, ce Vme may » ; 83 Lettre de « F[RANÇOIS], cardinal DE TOURNON,... à monseigneur de Conserans,... De Bayonne, le XIXe jour de may » ; 84 Lettre de « DE ROCHECHOUART,... à monseigneur le president Seguier et à monseigneur de La Mongnon,... De Lyon, ce XVIe juing » ; 85 Lettre de « JEHAN DE LAVAL,... à monseigneur... [l']evesque de Conserans... De Maysdon, ce XVme jour d'aoust » ; 86 Lettre de « F[BANÇOIS], cardinal DE TOURNON,... à monseigneur de Conzerans,... De Villiers Costeretz, ce XIIIe de septembre » ; 87 Lettre d' « ODET DE FOYX » à « monseigneur de Coserans,... A Parme, le XVe jour de novembre » ; 88 Lettre de « HENRY DE FOIX,... à... monseigneur de Coserans,... A Conches, le XXVIe jour d'avril » ; 89 Lettre de « HENRY DE FOIX,... à... monseigneur de Conserans,... De Fontainebleau, ce XXVIII may » ; 90 Lettre de « HENRY DE FOIX,... à... monseigneur de Coserans,... A Fontainebleau, le dernier jour de may » ; 91 Lettre de « HENRY DE FOIX,... à... monseigneur de Coserans,... De Paris, ce XIIIIe de juing » ; 92 Lettre de « HENRY DE FOIX,... à... monseigneur de Conserans,... A Villiers Costerez, ce IIe de septembre » ; 93 Lettre de « HENRY DE FOIX,... à... monseigneur de Conserans,... De Milly, ce XIIIIe novembre » ; 94 Lettre de « CLAUDE DE FOIX,... à... monseigneur de Conzerans,... A Parys, ce XIIIe de may » ; 95 Lettre de « CLAUDE DE FOIX,... à... monseigneur de Conzerans,... A Laval, ce XXIe de decenbre » ; 96 Lettre de « CLAUDE DE FOIX,... à... monseigneur de Conzerans,... A Laval, ce Xe de mars » ; 97 Lettre de « CLAUDE DE FOIX,... à... monseigneur de Conzerans,... A Estempes, ce IIIIme d'abvyr » ; 98 Lettre de « CLAUDE DE FOIX,... à... monseigneur de Conzerans,... A Parys, ce XXVIme d'oubz » ; 99 Lettre de « CLAUDE DE FOIX,... à monseigneur de Conserant,... A Vitré, ce XXVIme de janvyer » ; 100 Lettre de « CLAUDE DE FOIX,... à monseigneur de Conserans,... A Monjaut, ce XIXe d'apvirl » ; 101 Lettre de « CLAUDE DE FOIX,... à monseigneur de Conzerant,... A Laval, ce XVIIIIe de janvyer » ; 102 Lettre de « CLAUDE DE FOIX,... à monseigneur de Conserans,... A Laval, le IIIIe jour d'aoust » ; 103 Lettre de « CLAUDE DE FOIX,... à monseigneur de Conserans,... A Laval, le XXme octobre » ; 104 Lettre de « HENRY DE FOIX,... à... monseigneur de Conserans,... A Evreux, ce sabmedy premier jour de may » ; 105 Lettre de « CLAUDE DE FOIX,... à... monseigneur de Conserans,... A Laval, le Vme septembre » ; 106 Lettre de « CLAUDE DE FOIX,... à monseigneur de Conserans,... A Laval, le XXIIe jour d'octobre » ; 107 Lettre de « CLAUDE DE FOIX.... à... monseigneur de Conzerans,... De Tours, ce XV de desanbre » ; 108 Lettre de « CLAUDE DE FOYS,... à monseigneur de Conserans,... A Chasteaubriant, ce XXVIIIe jour d'octobre » ; 109 Lettre de « CLAUDE DE FOIX,... à monseigneur de Conserans,... A Vitré, ce VIe jour d'aoust » ; 110 Lettre de « DE ROUGIER, Sr DE MARL RAS,... à monseigneur le prince de Pourcian,... A Lyon, le XXVIIIe may 1563 » ; 111 Lettre de « FEUQUERES,... à monsieur le prince de Porcian,... Du Boys de Vincennes, se IIIe de jung » ; 112 Lettre de « JAQUES DE CLEVES,... à monsieur le prince de Porcian,... De Vitry, le XXVIIe avril 1563 » ; 113 Lettre de « JAQUES [DE CLEVES]... à messieurs les president Seguyer et Lamongnon, conseiller du roy en sa court de parlement à Paris... De Lion, ce XXVe jour de jung 1564 » ; 114 Lettre de « DUBROC,... à messeigneurs Seguyer,... et Lamoignon,... D'Aucerre, ce Vme aoust V.C.LXIIII » ; 115 Extrait d'une « lettre missive envoyée en la chambre des comptes à Nevers par Me Edme Vincent, bailly de Beauche, en datte du XIXe jour de juillet 1564 » ; 116 Lettre des « gens du conseil et des comptes à Nevers... à messrs Seguyer,... president, et Lamoignon, conseiller en la cour de parlemant... De Nevers, ce tiers jour d'aoust 1564 » ; 117 Vidimus donné le « 20 mars 1566 » des « lectres des franchises de l'isle de Ré », octroyées par le roi CHARLES VI en 1408 ; 118 Lettre de « GUILLAUME RABOT,... à la royne... De Metz, ce VIIIe d'avril 1567 » ; 119 Minute de « lectres de la royne [CATHERINE DE MEDICIS] au lantgrave de Hessen, du XIIe jour d'avril 1567 » ; 120 Minute de « lectres du roy [CHARLES IX] au lantgrave de Hessen, du XIIe jour d'avril 1567 » ; 121 Lettre de « BILLIAR,... à monseigneur le duc de Nivernoys,... De Lyon, le XXIIIIe jour de may 1567 » ; 122 « Coppie d'une lectre escripte de la main de monseigneur... le cardinal [CHARLES] DE BOURBON,... Orleans, 1573, 7 janvier » ; 123 Formules de médicaments. En italien ; 124 Lettre, en italien, de « GASPAR BARCHINO,... Di Milano, l'otto d'aprile 1569 » ; 125 Fragment d'un acte, en latin, daté du 4 novembre 1566, relatif à certains arrangements avec un débiteur et ses créanciers ; 126 « Chifre pour faire de nuit entendre ce que l'on veult... par M. ANTONIO DONI,... 1569 » ; 127 « Extret des monstres faittes cejourduy des compagnies tant italienes que françoieses... Belleville, 1561, 10 novembre »

Learning experience and identity development as a research assistant /

What research learning experiences do current students have as research assistants (RAs) in the Faculty of Education at Brock University? How do the experiences of research assistants contribute to the formation of a researcher identity and influence future research plans? Despite the importance of these questions, there seems to be very little research conducted or written about the experiences of research assistants as they engage in the research process. There are few resources to which research assistants or their advisors can refer regarding graduate student research learning experiences. The purpose of this study was to understand the kinds of learning experiences that 4 RAs (who are enrolled in the Faculty of Education at Brock University, St. Catharines, Ontario) have and how those experiences contribute to their identities as researchers. Through interviews with participants, observations of participants, and textual documents produced by participants, I have (a) discovered what 4 RAs have learned while engaged in one or more research assistantships and (b) explored how these 4 RAs' experiences have shaped their identities as new researchers. My research design provided a separate case study for each participant RA, including myself as a research participant. Then as a collective, I studied all 4 cases as a case study in itself in the form of a cross-analysis to identify similarities and differences between cases. Using a variety of writing forms and visual narratives, I analyzed and interpreted the experiences of my participants utilizing arts-based literature to inform my analysis and thesis format. The final presentation includes electronic diagrams, models, poetry, a newsletter, a website presentation, and other representational arts-based forms.This thesis is a resource for current and future research assistants who can learn from the research assistant experiences presented in the research. Faculty members who hire research assistants to assist them with their research will also benefit from reading about RAs' learning experiences from the RAs' perspective. The information provided in this thesis document is a resource to inform future policies and research training initiatives in faculty departments and offices at universities. Consequently, this thesis also informs researchers (experienced and inexperienced) about how to conduct research in ways that benefit all parties and provide insight into potential ways to improve research assistantship practices.

Hydraulic and fluvial geomorphological models for a bedrock channel reach of the Twenty Mile Creek /

Bedrock channels have been considered challenging geomorphic settings for the application of numerical models. Bedrock fluvial systems exhibit boundaries that are typically less mobile than alluvial systems, yet they are still dynamic systems with a high degree of spatial and temporal variability. To understand the variability of fluvial systems, numerical models have been developed to quantify flow magnitudes and patterns as the driving force for geomorphic change. Two types of numerical model were assessed for their efficacy in examining the bedrock channel system consisting of a high gradient portion of the Twenty Mile Creek in the Niagara Region of Ontario, Canada. A one-dimensional (1-D) flow model that utilizes energy equations, HEC RAS, was used to determine velocity distributions through the study reach for the mean annual flood (MAF), the 100-year return flood and the 1,000-year return flood. A two-dimensional (2-D) flow model that makes use of Navier-Stokes equations, RMA2, was created with the same objectives. The 2-D modeling effort was not successful due to the spatial complexity of the system (high slope and high variance). The successful 1 -D model runs were further extended using very high resolution geospatial interpolations inherent to the HEC RAS extension, HEC geoRAS. The modeled velocity data then formed the basis for the creation of a geomorphological analysis that focused upon large particles (boulders) and the forces needed to mobilize them. Several existing boulders were examined by collecting detailed measurements to derive three-dimensional physical models for the application of fluid and solid mechanics to predict movement in the study reach. An imaginary unit cuboid (1 metre by 1 metre by 1 metre) boulder was also envisioned to determine the general propensity for the movement of such a boulder through the bedrock system. The efforts and findings of this study provide a standardized means for the assessment of large particle movement in a bedrock fluvial system. Further efforts may expand upon this standardization by modeling differing boulder configurations (platy boulders, etc.) at a high level of resolution.

Region Connection Calculus: Composition Tables and Constraint Satisfaction Problems

Qualitative spatial reasoning (QSR) is an important field of AI that deals with qualitative aspects of spatial entities. Regions and their relationships are described in qualitative terms instead of numerical values. This approach models human based reasoning about such entities closer than other approaches. Any relationships between regions that we encounter in our daily life situations are normally formulated in natural language. For example, one can outline one's room plan to an expert by indicating which rooms should be connected to each other. Mereotopology as an area of QSR combines mereology, topology and algebraic methods. As mereotopology plays an important role in region based theories of space, our focus is on one of the most widely referenced formalisms for QSR, the region connection calculus (RCC). RCC is a first order theory based on a primitive connectedness relation, which is a binary symmetric relation satisfying some additional properties. By using this relation we can define a set of basic binary relations which have the property of being jointly exhaustive and pairwise disjoint (JEPD), which means that between any two spatial entities exactly one of the basic relations hold. Basic reasoning can now be done by using the composition operation on relations whose results are stored in a composition table. Relation algebras (RAs) have become a main entity for spatial reasoning in the area of QSR. These algebras are based on equational reasoning which can be used to derive further relations between regions in a certain situation. Any of those algebras describe the relation between regions up to a certain degree of detail. In this thesis we will use the method of splitting atoms in a RA in order to reproduce known algebras such as RCC15 and RCC25 systematically and to generate new algebras, and hence a more detailed description of regions, beyond RCC25.

La justification du droit d'auteur dans l'environnement numérique

"Mémoire présenté à la Faculté des études supérieures en vue de l'obtention du grade de Maître en droit (L.L.M.) option Technologies de l'information"

Rôle du système rénine-angiotensine intrarénal dans l’hypertension et les dommages rénaux chez les souris transgéniques diabétiques

Plusieurs expériences et études cliniques ont démontré que l’activation du système rénine-angiotensine (RAS) peut induire l’hypertension, un facteur de risque majeur pour les maladies cardiovasculaires et rénales. L’angiotensinogène (Agt) est l’unique substrat du RAS. Cependant, il n’a pas encore été démontré si l’activation du RAS intrarénal peut à elle seule induire des dommages rénaux, indépendamment de l’hypertension systémique, et ainsi jouer un rôle prépondérant dans la progression de la néphropathie diabétique. Afin d’explorer le rôle du RAS intrarénal dans les dommages rénaux, un diabète a été induit par l’injection de streptozotocin chez des souris transgéniques (Tg) surexprimant l’Agt de rat dans les cellules des tubules proximaux du rein (RPTC). Les souris Tg diabétiques ont été traitées soit avec des inhibiteurs du RAS (perindopril et losartan), de l’insuline ou une combinaison des deux pour 4 semaines avant d’être euthanasiées. Pour une autre étude, des souris Tg non-diabétiques ont été traitées soit avec des inhibiteurs du RAS, l’hydralazine (vasodilatateur) ou l’apocynine (inhibiteur de la NADPH oxydase) pour une période de 8 semaines avant l’euthanasie. Des souris non-Tg ont été utilisées comme contrôles. Des cellules immortalisées de tubule proximal de rat (IRPTC) transfectées de manière stable avec un plasmide contenant l’Agt ou un plasmide contrôle ont été employées comme modèle in vitro. Nos résultats ont démontré que les souris Tg présentaient une augmentation significative de la pression systolique, l’albuminurie, l’apoptose des RPTC et l’expression de gènes pro-apoptotiques par rapport aux souris non-Tg. Les mêmes changements ont été observés chez les souris Tg diabétiques par rapport aux souris non-Tg diabétiques. L’insuline et/ou les inhibiteurs du RAS ont permis d’atténuer ces changements, sauf l’hypertension qui n’était réduite que par les inhibiteurs du RAS. Chez les IRPTC transfectées avec l’Agt in vitro, les hautes concentrations de glucose augmentent l’apoptose et l’activité de la caspase-3 par rapport aux cellules contrôles et l’insuline et/ou les inhibiteurs du RAS empêchent ces augmentations. En plus des changements physiologiques, les RPTC des souris Tg présentent aussi une augmentation significative de la production des espèces réactive de l’oxygène (ROS) et de l’activité de la NADPH oxydase, ainsi qu’une augmentation de l’expression du facteur de croissance transformant-beta 1 (TGF-β1), de l’inhibiteur activateur du plasminogène de type 1 (PAI-1), des protéines de la matrice extracellulaire, du collagène de type IV et de la sousunité p47 de la NADPH oxydase. Le traitement des souris Tg avec l’apocynine et le perindopril a permis d’améliorer tous ces changements, sauf l’hypertension qui n’était pas corrigée par l’apocynine. D’autre part, l’hydralazine a prévenu l’hypertension, sans modifier l’albuminurie, l’apoptose des RPTC ou l’expression des gènes pro-apoptotiques. Ces résultats montrent bien que l’activation du RAS intrarénal et l’hyperglycémie agissent de concert pour induire l’albuminurie et l’apoptose des RPTC, indépendamment de l’hypertension systémique. La génération des ROS via l’activation de la NADPH oxydase induit en partie l’action du RAS intrarénal sur l’apoptose des RPTC, la fibrose tubulo-interstitielle et l’albuminurie chez les souris Tg. D’autre part, une expérience en cours a tenté d’encore mieux délimiter les effets de l’activation du RAS intrarénal, tout en éliminant la néphrotoxicité du STZ. Pour cette étude, les souris Tg surexprimant l’Agt de rat dans leurs RPTC ont été croisées aux souris Ins2Akita, un modèle spontané de diabète de type I, afin de générer des souris Akita-rAgt-Tg. Les résultats préliminaires indiquent que le RAS intrarénal est activé dans les souris Akita et que la combinaison avec l’hyperglycémie induit du stress du réticulum endoplasmique (ER) dans les RPTC in vivo. Le stress du ER contribue à l’apoptose des RPTC observée dans le diabète, à tout le moins dans le modèle Akita. Le traitement avec des inhibiteurs du RAS permet d’atténuer certains des dommanges rénaux observés dans les souris Akita-rAgt-Tg.

Endothelin-1 and H2O2-induced signaling in vascular smooth muscle cells : modulation by CaMKII and Nitric oxide

L’endothéline-1 (ET-1) est un peptide vasoactif extrêmement puissant qui possède une forte activité mitogénique dans les cellules du muscle lisse vasculaire (VSMCs). Il a été démontré que l’ET-1 est impliquée dans plusieurs maladies cardio-vasculaires, comme l’athérosclérose, l'hypertension, la resténose après l'angioplastie, l’insuffisance cardiaque et l'arythmie. L’ET-1 exerce ses effets via plusieurs voies de signalisation qui incluent le Ca2+, les protéines kinases activées par les mitogènes (MAPKs) y compris les kinases régulées par les signaux extracellulaires (ERK1/2) et la voie de la phosphatidylinositol 3-kinase (PI-3K)/protein kinase B (PKB). Plusieurs études ont démontré que les dérivés réactifs de l'oxygène (ROS) peuvent jouer un rôle important dans la signalisation d’ERK1/2 et de PKB induite par plusieurs facteurs de croissance et hormones. Nous avons précédemment montré que l'ET-1 produit des ROS qui agissent comme médiateur de la signalisation cellulaire induite par l’ET-1. Le peroxyde d’hydrogène (H2O2), une molécule qui appartient à la famille des ROS, peut activer les voies de la MAPK et de la PKB dans les VSMCs. Par ailleurs, nos résultats suggèrent également que le Ca2+ et la calmoduline (CaM) sont essentiels pour la phosphorylation d’ERK1/2, de p38 et de PKB induite par le H2O2 dans les VSMCs. La Ca2+/CaM-dependent protein kinases II (CaMKII) est une sérine/thréonine protéine kinase multifonctionnelle activée par le Ca2+/CaM. Il a été montré que la CaMKII est impliquée dans les voies de signalisation induite par le H2O2 dans les cellules endothéliales. Cependant, le rôle de la CaMKII dans la phosphorylation d’ERK1/2, de PKB et de la proline-rich tyrosine kinase 2 (Pyk2) induite par l’ET-1 et le H2O2, de même que son rôle dans l’effet hypertrophique et prolifératif de l’ET-1 dans les VSMCs demeure inexploré. Le monoxyde d’azote (NO) est une molécule vasoactive impliquée dans la régulation de plusieurs réponses hormonales. Le NO peut moduler la signalisation contrôlant la croissance cellulaire induite par plusieurs agonistes d’où son rôle protecteur dans le système vasculaire. Des études ont montré que le NO peut inhiber la voie de Ras/Raf/ERK1/2 et la voie de PKB induite par le facteur de croissance endothélial (EGF) et l’angiotensine II (Ang II). Beaucoup d’autres travaux ont mis en évidence un cross-talk entre les voies de signalisation activées par l’ET-1 et le NO. La capacité du NO à inhiber la signalisation intracellulaire induite par l’ET-1 dans les VSMCs demeure inconnue. Le travail présenté dans cette thèse vise à déterminer le rôle du système Ca2+-CaM-CaMKII dans la phosphorylation d’ERK1/2, de PKB et de Pyk2 induite par l’ET-1 et le H2O2 ainsi que son rôle dans la croissance et la prolifération cellulaire induites par l’ET-1 dans les VSMCs. Nous avons également testé le rôle du NO dans la phosphorylation d’ERK1/2, de PKB et de Pyk2 ainsi que la synthèse protéique induite par l’ET-1. Dans la première partie de notre étude, nous avons examiné le rôle de la CaMKII dans la phosphorylation d’ERK1/2 et de PKB induite par l’ET-1 dans les VSMCs en utilisant trois approches différentes i.e. l'usage d'inhibiteurs pharmacologiques, un peptide auto-inhibiteur de la CaMKII (CaMKII AIP) et la technique de siRNA. Nous avons démontré que la CaMKII est impliquée dans la phosphorylation d’ERK1/2 et de PKB induite par l’ET-1 dans les VSMCs. Des études précédentes ont montré à l’aide d’inhibiteurs pharmacologiques comme le KN-93 que l'Ang II et les agents induisant une augmentation de la concentration en Ca2+ intracellulaire comme l’ionomycine, provoquent la phosphorylation d’ERK1/2 via la CaM dans les VSMCs. Cependant, en utilisant différentes approches, nos études ont montré pour la première fois une implication de la CaMKII dans la phosphorylation d’ERK1/2 et de PKB induite par l’ET-1 dans les VSMCs. Nous avons également rapporté pour la première fois, un rôle crucial de la CaMKII dans la pathophysiologie vasculaire associée à l’ET-1 puisque l’activation de la CaMKII joue un rôle important dans l’hypertrophie et la croissance cellulaire. Dans la deuxième partie, à la lumière des études précédentes qui montraient que les ROS agissent comme médiateurs de la signalisation induite par l’ET-1 dans les VSMCs, nous avons examiné si la CaMKII est également impliquée dans l’activation des voies d’ERK1/2 et de PKB induite par le H2O2. En utilisant des approches pharmacologiques et moléculaires, nous avons montré, comme pour l’ET-1, que la CaMKII joue un rôle critique en amont de la phosphorylation d’ERK1/2, de PKB et de Pyk2 induite par le H2O2. Nous avons précédemment montré que la transactivation du récepteur de type I de l’insulin-like growth factor (IGF-1R) est nécessaire à l’activation de PKB induite par le H2O2. Pour cette raison, nous avons examiné l'effet de l'inhibition de la CaMKII par l’inhibiteur pharmacologique ou par le knock-down de la CaMKII sur la phosphorylation d’IGF-1R induite par le H2O2. Les résultats démontrent que la CaMKII joue un rôle critique en amont de la phosphorylation d’ERK1/2, de PKB et d’IGF-1R induite par le H2O2. Dans la troisième partie de notre étude, nous avons également examiné le mécanisme moléculaire par lequel le NO exerce ses effets anti-mitogéniques et anti-hypertrophiques dans la signalisation induite par l’ET-1. En testant l'effet de deux différents donneurs de NO (S-nitroso-N-acetylpenicillamine (SNAP), sodium nitroprusside (SNP)) et un inhibiteur de NO synthase, le N (G)-nitro-L-arginine methyl ester (L-NAME) dans la phosphorylation d’ERK1/2, de PKB et de Pyk2 induite par l’ET-1, nous avons observé que le NO a un effet inhibiteur sur la signalisation induite par l’ET-1 dans les VSMCs. Par ailleurs, le 8-Br-GMPc, un analogue du GMPc, a un effet similaire à celui des deux donneurs du NO, tandis que l’oxadiazole quinoxaline (ODQ), un inhibiteur de la guanylate cyclase soluble, inverse l'effet inhibiteur du NO. Nous concluons que le NO diminue la phosphorylation d’ERK1/2, de PKB et de Pyk2 induite par l’ET-1 d’une manière dépendante du GMPc. Le NO inhibe aussi les effets hypertrophiques de l’ET-1 puisque le traitement avec le SNAP diminue la synthèse des protéines induite par l’ET-1. En résumé, les études présentées dans cette thèse démontrent que l’ET-1 et le H2O2 sont des activateurs de la phosphorylation d’ERK1/2, de PKB et de Pyk2 dans les VSMCs et que la CaMKII s’avère nécessaire pour ce processus, en agissant en amont de l’activation de IGF-1R induite par le H2O2 dans les VSMCs. Elles montrent également que le NO inhibe la phosphorylation d’ERK1/2, de PKB et de Pyk2 induite par l’ET-1. Enfin, nos travaux suggèrent aussi que l’activation de la CaMKII stimule la synthèse des protéines et de l’ADN induites par l’ET-1 alors que le NO inhibe la synthèse des protéines induite par ET-1. Mots clés: Endothéline ; Peroxyde d'hydrogène ; CaMKII ; Monoxyde d’azote ; Système vasculaire ; PKB; ERK1/2; IGF-1R; Hypertrophie.

Analyse cinétique des rétinaldéhydes déshydrogénases recombinantes de type 3 et 4 de souris

Les Rétinal déshydrogénases (RALDHs) catalysent irréversiblement la déshydrogénation du Rétinal en Acide Rétinoïque (AR) qui est impliqué dans l’embryogenèse et la différenciation tissulaire. Pour comprendre le rôle dans la biosynthèse de l’AR des RALDHs type 3 et 4 de souris, nous avons déterminé leurs propriétés cinétiques ainsi que leur comportement en présence de différents inhibiteurs. Les tests enzymatiques sont effectués avec une préparation d’enzyme recombinante, tagguée avec 6 histidines, purifiée sur colonne Ni-NTA (Qiagen). L’activité enzymatique est évaluée en quantifiant la production d’AR par chromatographie liquide à haute performance (HPLC) en phase inversée. Les constantes cinétiques ont été déterminées pour les isomères du rétinal tout-trans, 9-cis et 13-cis. La RALDH4 catalyse les isomères 9-cis et 13-cis de rétinal, elle présente un faible KM (3μM) pour les deux isomères et a une efficacité catalytique élevée pour le 9-cis rétinal 3.4 fois supérieure au 13-cis rétinal. La RALDH3 est spécifique au tout-trans rétinal avec un KM de 4 μM et une efficacité élevée. β-Ionone, inhibiteur possible pour la RALDH4, inhibe l’activité avec le rétinal 9-cis et 13-cis, mais n’influence pas l’activité de la RALDH3. Le para-hydroxymercuribenzoïque (p-HMB) inhibe l’activité de deux isoenzymes. Le cation MgCl2 augmente par 3 fois l’oxydation du rétinal 13-cis par la RALDH4, diminue l’oxydation du 9-cis rétinal et influence faiblement la RALDH3. Ces données enrichissent les connaissances sur les caractéristiques cinétiques des RALDHs recombinantes de souris de types 3 et 4 et fournissent des éclaircissements sur la biogenèse de l’acide rétinoïque in vivo.

La présence phénicienne en Syrie du Nord à l’Âge du Fer, 1000-500 av. J.C.

RÉSUMÉ Cette étude porte sur la présence phénicienne en Syrie du Nord uniquement pendant la première moitié de l’Âge du Fer, i.e entre 1000 et 500 av. J.C. Elle est fondée sur l’analyse des données archéologiques et littéraires des principaux sites côtiers de cette région, al Mina, Ras el Bassit, Tell Kazel, Tell Soukas et Amrit. Après une présentation des caractéristiques culturelles de la civilisation phénicienne, j’aborde l’analyse de ces sites. Les données qui permettent de prouver une présence phénicienne dans la région s’avèrent nombreuses et j’en conclus que les Phéniciens devaient constituer une minorité importante de la population de ces sites, au même titre que les Grecs ou les Chypriotes, la majorité étant d’origine syrienne. Mais dans certains cas, notamment sur les sites les plus proches des grandes capitales phéniciennes, il n’est pas impossible qu’ils aient été majoritaires. L’étude illustrera par ailleurs l’importance du rôle des cités de la Syrie du Nord dans les échanges commerciaux et culturels avec les autres cultures du Sud-Est du bassin méditerranéen, notamment celles de la Grèce, île de Chypre, de la Cilicie et de la Syrie intérieure.

Caractérisation fonctionnelle de la GTPase Ran dans le cancer épithélial de l'ovaire

Le cancer épithélial de l’ovaire est le plus létal des cancers gynécologiques. Les tumeurs de l’ovaire se divisent en différentes classes reflétant l’étendue de la maladie. Les tumeurs à faible potentiel de malignité présentent une survie relative à 5 ans de 90%, alors que pour les tumeurs invasives, la survie à 5 ans chute drastiquement à 35-40%. Au laboratoire, nous avons précédemment identifié la protéine Ran, un membre de la superfamille des GTPases Ras, comme marqueur fortement exprimé dans les cancers épithéliaux de l’ovaire de haut grade et de haut stade dont la surexpression est associée à un mauvais pronostic. Ran est déjà connue pour contribuer au transport nucléocytoplasmique et à la progression du cycle cellulaire, mais son rôle dans le cancer ovarien n’est pas bien défini. En utilisant une approche de shRNA inductibles à la tétracycline basée sur les lentivirus, nous avons montré que la diminution de l’expression de Ran dans des lignées cellulaires agressives du cancer de l’ovaire affecte drastiquement la prolifération cellulaire par l’induction d’une apoptose caspase-3 dépendante. Par un essai de tumeurs en xénogreffes, nous avons démontré que la déplétion de Ran résulte en une diminution de la tumorigenèse et que la formation éventuelle de tumeurs est associée à une sélection des cellules tumorales ayant la capacité de ré-exprimer la protéine Ran. Ces résultats suggèrent un rôle critique pour Ran dans la survie et la tumorigénicité des cellules du cancer ovarien, indiquant que Ran pourrait être une cible thérapeutique intéressante.

Le diabète maternel influence la morphogenèse rénale et la programmation périnatale

Le diabète maternel est un facteur de risque majeur pour le développement de malformations congénitales. Dans le syndrome de l’embryopathie diabétique, l’exposition prolongée du fœtus à de hautes concentrations ambientes de glucose induit des dommages qui peuvent affecter plusieurs organes, dont les reins. Les malformations rénales sont la cause de près de 40 pourcent des cas d’insuffisance rénale infantile. L’hyperglycémie constitue un environnement utérin adverse qui nuit à la néphrogenèse et peut causer l’agenèse, la dysplasie (aplasie) ou l’hypoplasie rénale. Les mécanismes moléculaires par lesquels les hautes concentrations ambientes de glucose mènent à la dysmorphogenèse et aux malformations demeurent toutefois mal définis. Le diabète maternel prédispose aussi la progéniture au développement d’autres problèmes à l’âge adulte, tels l’hypertension, l’obésité et le diabète de type 2. Ce phénomène appelé ‘programmation périnatale’ a suscité l’intérêt au cours des dernières décennies, mais les mécanismes responsables demeurent mal compris. Mes études doctorales visaient à élucider les mécanismes moléculaires par lesquels le diabète maternel ou un environnement in utero hyperglycémique affecte la néphrogenèse et programme par la suite la progéniture a développer de l’hypertension par des observations in vitro, ex vivo et in vivo. Nous avons utilisé les cellules MK4, des cellules embryonnaires du mésenchyme métanéphrique de souris, pour nos études in vitro et deux lignées de souris transgéniques (Tg) pour nos études ex vivo et in vivo, soient les souris HoxB7-GFP-Tg et Nephrin-CFP-Tg. Les souris HoxB7-GFP-Tg expriment la protéine fluorescente verte (GFP) dans le bourgeon urétérique (UB), sous le contrôle du promoteur HoxB7. Les souris Nephrin-CFP expriment la protéine fluorescente cyan (CFP) dans les glomérules, sous le contrôle du promoteur nephrin spécifique aux podocytes. Nos études in vitro visaient à déterminer si les hautes concentrations de glucose modulent l’expression du gène Pax2 dans les cellules MK4. Les cellules MK4 ont été traitées pendant 24h avec du milieu contenant soit 5mM D-glucose et 20mM D-mannitol ou 25mM D-glucose et avec ou sans antioxydants ou inhibiteurs de p38 MAPK, p44/42 MAPK, PKC et NF-kB. Nos résultats ont démontré que le D-glucose élevé (25mM) augmente la génération des espèces réactives de l’oxygène (ROS) dans les cellules MK4 et induit spécifiquement l’expression du gène Pax2. Des analogues du glucose tels le D-mannitol, L-glucose ou le 2-Deoxy-D-glucose n’induisent pas cette augmentation dans les cellules MK4. La stimulation de l’expression du gène Pax2 par le D-glucose dans les cellules MK4 peut être bloquée par des inhibiteurs des ROS et de NF-kB, mais pas par des inhibiteurs de p38 MAPK, p44/42 MAPK ou PKC. Ces résultats indiquent que la stimulation de l’expression du gène Pax2 par les concentrations élevées de glucose est due, au moins en partie, à la génération des ROS et l’activation de la voie de signalisation NF-kB, et non pas via les voies PKC, p38 MAPK et p44/42 MAPK. Nos études ex vivo s’intéressaient aux effets d’un milieu hyperglycémique sur la morphogenèse de la ramification du bourgeon urétérique (UB). Des explants de reins embryonnaires (E12 à E18) ont été prélevés par micro-dissection de femelles HoxB7-GFP gestantes. Les explants ont ensuite été cultivés dans un milieu contenant soit 5mM D-glucose et 20mM D-mannitol ou 25mM D-glucose et avec ou sans antioxydants, catalase ou inhibiteur de PI3K/AKT pour diverses durées. Nos résultats ont démontré que le D-glucose stimule la ramification du UB de manière spécifique, et ce via l’expression du gène Pax2. Cette augmentation de la ramification et de l’expression du gène Pax2 peut être bloquée par des inhibiteurs des ROS et de PI3K/AKT. Ces études ont démontré que les hautes concentrations de glucose altèrent la morphogenèse de la ramification du UB via l’expression de Pax2. L’effet stimulant du glucose semble s’effectuer via la génération des ROS et l’activation de la voie de signalisation Akt. Nos études in vivo visaient à déterminer le rôle fondamental du diabète maternel sur les défauts de morphogenèse rénale chez la progéniture. Dans notre modèle animal, le diabète maternel est induit par le streptozotocin (STZ) chez des femelles HoxB7-GFP gestantes (E13). Les souriceaux ont été étudiés à différents âges (naissants et âgés de une, deux ou trois semaines). Nous avons examiné leurs morphologie rénale, nombre de néphrons, expression génique et les événements apoptotiques lors de cette étude à court terme. La progéniture des mères diabétiques avait un plus faible poids, taille et poids des reins, et possédait des glomérules plus petits et moins de néphrons par rapport à la progéniture des mères contrôles. La dysmorphogenèse rénale observée est peut-être causée par l’augmentation de l’apoptose des cellules dans la région du glomérule. Nos résultats ont montré que les souriceaux nés de mères diabétiques possèdent plus de podocytes apoptotiques et plus de marquage contre la caspase-3 active dans leurs tubules rénaux que la progéniture des mères contrôles. Les souriceaux des mères diabétiques montrent une augmentation de l’expression des composants du système rénine angiotensine (RAS) intrarénal comme l’angiotensinogène et la rénine, ainsi qu’une augmentation des isoformes p50 et p65 de NF-kB. Ces résultats indiquent que le diabète maternel active le RAS intrarénal et induit l’apoptose des glomérules, menant à une altération de la morphogenèse rénale de la progéniture. En conclusion, nos études ont permis de démontrer que le glucose élevé ou l’environnement in utero diabétique altère la morphogenèse du UB, qui résulte en un retard dans la néphrogenèse et produit des reins plus petits. Cet effet est dû, au moins en partie, à la génération des ROS, à l’activation du RAS intrarénal et à la voie NF-kB. Nos études futures se concentreront sur les mécanismes par lesquels le diabète maternel induit la programmation périnatale de l’hypertension chez la progéniture adulte. Cette étude à long terme porte sur trois types de progénitures : adultes nés de mères contrôles, diabétiques ou diabétiques traitées avec insuline pendant la gestation. Nous observerons la pression systolique, la morphologie rénale et l’expression de divers gènes et protéines. Nous voulons de plus déterminer si la présence d’un système antioxydant (catalase) peut protéger la progéniture des effets néfastes des ROS causés par l’environnement in utero hyperglycémique. Les souris Catalase-Tg expriment la catalase spécifiquement dans les tubules proximaux et nous permettrons d’explorer notre hypothèse sur le rôle des ROS dans notre modèle expérimental de diabète maternel.