Photodynamic and Antibiotic Therapy Impair the Pathogenesis of Enterococcus faecium in a Whole Animal Insect Model

Enterococcus faecium has emerged as one of the most important pathogens in healthcare-associated infections worldwide due to its intrinsic and acquired resistance to many antibiotics, including vancomycin. Antimicrobial photodynamic therapy (aPDT) is an alternative therapeutic platform that is currently under investigation for the control and treatment of infections. PDT is based on the use of photoactive dye molecules, widely known as photosensitizer (PS). PS, upon irradiation with visible light, produces reactive oxygen species that can destroy lipids and proteins causing cell death. We employed Galleria mellonella (the greater wax moth) caterpillar fatally infected with E. faecium to develop an invertebrate host model system that can be used to study the antimicrobial PDT (alone or combined with antibiotics). In the establishment of infection by E. faecium in G. mellonella, we found that the G. mellonella death rate was dependent on the number of bacterial cells injected into the insect hemocoel and all E. faecium strains tested were capable of infecting and killing G. mellonella. Antibiotic treatment with ampicillin, gentamicin or the combination of ampicillin and gentamicin prolonged caterpillar survival infected by E. faecium (P = 0.0003, P = 0.0001 and P = 0.0001, respectively). In the study of antimicrobial PDT, we verified that methylene blue (MB) injected into the insect followed by whole body illumination prolonged the caterpillar survival (P = 0.0192). Interestingly, combination therapy of larvae infected with vancomycin-resistant E. faecium, with antimicrobial PDT followed by vancomycin, significantly prolonged the survival of the caterpillars when compared to either antimicrobial PDT (P = 0.0095) or vancomycin treatment alone (P = 0.0025), suggesting that the aPDT made the vancomycin resistant E. faecium strain more susceptible to vancomycin action. In summary, G. mellonella provides an invertebrate model host to study the antimicrobial PDT and to explore combinatorial aPDT-based treatments.

O emprego da metodologia de superfície de resposta no desenvolvimento de um novo produto simbiótico, fermentado com Enterococcus faecium CRL 183 e Lactobacillus helveticus ssp jugurti 416, à base de extratos aquosos de soja e de Yacon (Smallanthus sonchifolius)

Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo (FAPESP)

Avaliação do simbiótico fermentado com Enterococcus faecium CRL 183 e Lactobacillus helveticus ssp jugurti 416, à base de extratos aquosos de soja e de yacon (Smallanthus sonchifolius) no controle do desenvolvimento do Diabetes Mellitus

Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES)

Densidade e resistência a antimicrobianos de Enterococcus sp e Escherichia coli isoladas de águas, areias e algas do gênero Sargassum de praias recreacionais do Litoral Norte do Estado de São Paulo

Pós-graduação em Ciências Biológicas (Microbiologia Aplicada) - IBRC

Avaliação in vitro de caracteristicas probióticas do enterococcus faecium CRL 183 e do Lactobacillus helveticus ssp jugurti 416

Pós-graduação em Alimentos e Nutrição - FCFAR

Influência do consumo de Iogurte de soja fermentado com Enterococcus faecium na microbiota intestinal de animais e humanos

Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES)

Alterações comportamentais, psicológicas, de higiene bucal e presença de microrganismos superinfectantes e viruses da família herpesviridae em pacientes mantidas em programa de desintoxicação para dependentes químicos

Pós-graduação em Odontologia - FOA

Ocorrência de microrganismos oportunistas e superinfectantes em crianças com 6, 12 e 18 meses de idade e suas mães

Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES)

Efeito de uma bebida probiótica (Enterococcus faecium CRL 183 e Bifidobacterium longum ATCC 15707) à base de extrato aquoso de soja no desenvolvimento de colite quimicamente induzida em ratos

Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico (CNPq)

Avaliação da adição da Lactobacillus acidophilus CRL 1014 e Enterococcus faecium CRL 183 sobre a microbiota intestinal em Simulador do Ecossistema Microbiano Humano (SEMH)

Os micro-organismos probióticos são utilizados em vários produtos alimentícios ou em suplementos alimentares. Simuladores intestinais representam uma opção de realização de estudos com a microbiota intestinal. O simulador do ecossistema microbiano humano (SEMH) consiste em uma sucessão de cinco reatores conectados que representam as diferentes partes do trato gastrointestinal humano com seus respectivos valores de pH, tempo de residência e capacidade volumétrica. O SEMH foi utilizado para estudar o efeito do Enterococcus faecium CRL 183 e do Lactobacillus acidophilus CRL 1014 sobre a microbiota intestinal nativa. Inicialmente, o inóculo preparado com fezes humanas foi introduzido nos três reatores, responsáveis por simular o cólon ascendente, transverso e descendente. Após duas semanas de estabilização foi adicionado, diariamente, durante quatro semanas, E. faecium CRL 183 e L. acidophilus CRL 1014 contendo 108 UFC/mL nos três compartimentos que simulam o cólon ascendente, transverso e descendente. Após as quatro semanas de tratamento o sistema permaneceu durante duas semanas sem adição de probióticos. Durante todo o experimento, foi realizado semanalmente a composição da microbiota intestinal baseada na enumeração de bactérias aeróbias e anaeróbias totais, Enterococcus spp., Lactobacillus spp., Bifidobacterium spp., Enterobactérias e Clostridium spp. Semanalmente, também, foram realizadas análises de ácidos graxos de cadeia curta (acetato, butirato e propionato) e amônia. Através da análise microbiológica observou-se alterações significativas na composição da microbiota do SEMH no decorrer do período do experimento. Alterações significativas também foram observadas na concentração de amônia e de AGCC, podendo assim observar a influência da inoculação de probióticos na microbiota nativa e os metabólitos produzidos por ela

Efeito da adição de inulina no crescimento, resistência gastrintestinal e capacidade de remoção de colesterol de Lactobacillus helveticus 416 e Enterococcus faecium CRL 183

O objetivo do presente estudo foi verificar o efeito da adição de um prebiótico nas características de crescimento, resistência às condições do trato gastrintestinal e remoção de colesterol in vitro, das cepas de Enterococcus faecium CRL183 e Lactobacillus helveticus 416. A fonte de prebiótico foi composta por Inulina GR – Orafti, sendo testadas as seguintes concentrações: 1,0%, 2,0%, 3,0%; 4,0%; 5,0% e 6,0% p/v). Para a avaliação da resistência às condições do trato gastrintestinal, os microrganismos foram colocados em contato com um fluido gástrico simulado por 2 horas (9g/L de NaCl, 3g/L de pepsina, pH 1,8) e com um fluido intestinal simulado por 3 horas (0,9g/L de pancreatina, 12,5g/L de bicarbonato de sódio e 6,0 g/L de Oxgall). Após o período de contato com os fluidos, foram realizadas diluições seriais e plaqueamento em meios específicos. No estudo de redução de colesterol, meios de cultura contendo inulina e colesterol (1%) foram inoculados com as cepas probióticas e incubados em anaerobiose a 37°C/24h. A capacidade de redução do colesterol foi determinada pela diferença entre a concentração de colesterol adicionada ao meio de cultura e a de colesterol residual. Os resultados foram submetidos à análise de variância e teste de médias de Tukey (p≤0,05). A adição de inulina não resultou em alteração no ciclo logarítmico de crescimento dos microrganismos. Porém, quando os dados foram submetidos à análise estatística, constatou-se que a adição de 1% a 4% de inulina inibiu o crescimento de Lactobacillus helveticus 416, sendo que para as concentrações de 5% a 6% estas alterações não foram perceptíveis. A cepa de Enterococcus faecium CRL 183 apresentou crescimento superior na presença de 2% e 4% de inulina. Após o contato com o fluido gástrico simulado, observou-se redução de 1 ciclo logarítmico no crescimento da cepa... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo)

Avaliação in vitro da ação de substâncias químicas auxiliares, clorexidina e medicações intracanais sobre C. albicans, E. faecalis, E. coli e sua endotoxina em canais radiculares: [recurso eletrônico]

The purpose of this study was to evaluate the antimicrobial activity of chlorhexidine gel 2% as auxiliary chemical substance on the biomechanical preparation (BMP) and medication intracanal (ICM) on C. albicans, E. faecalis, E. coli and their endotoxin in root canals. We used 48 single-rooted human teeth divided into four groups according to dressing ICM: 1) Ca(OH)2 + pyrogen-free saline solution; 2) 2% chlorhexidine gel (CLX); 3) Ca(OH)2 + CLX, and; 4) pyrogen-free saline solution (control group). Were collected the contents of root canals to confirm the presence of microorganisms (confirmation), immediately after instrumentation (1st collection), after 7 days of the BMP (2nd collection), after 14 days of the action of ICM (3rd Collection) and 7 days after removal of the ICM (4 th collection). Were performed: the evaluation of antimicrobial activity and the content analysis of endotoxins for all sampling tests. The results were statistically analyzed using Kruskall-Wallis and Dunn tests with a significance of 5%. It was found that the CLX as auxiliary chemical substance has significantly reduced microorganisms confirmation collection when compared. In relation to the neutralization of endotoxin, it was found that the 1st and 2nd collections presented a decrease of 92.03% and 98.10% in mean percentage respectively, when compared to the confirmation collection. In the 3rd and 4th samplings, the Ca (OH)2 + CLX group showed the best results. It was concluded that the BMP and the ICM were able to eliminate the tested microrganisms, however, they were not able to completely eliminate endotoxins root canal

Diversidade e evolução da microbiota lática autóctone em queijo Muçarela de búfala e aplicação tecnológica dos isolados

Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES)

Saliva contamination by opportunistic microorganisms in drug addiction females

In recent decades there has been a significant increase in the consumption of legal and illegal drugs, and most of such compounds are able to induce dependence and this increase was observed mainly in females. This drug addiction increases susceptibility to several infectious agents, especially opportunistic microorganisms. The objective of this study was to evaluate the occurrence of opportunistic bacteria and yeasts in the mouth of drug addiction patients and non-addicted patients with different periodontal conditions. The study included 50 addiction patients and 200 non-addiction subjects. Intra and extraoral clinical examinations were performed and saliva samples were transferred to saline solution and the presence of members of the family Enterobacteriaceae, genera Enterococcus and Pseudomonas, as well fungi of the genus Candida was evaluated by culture. Samples were cultivated onto selective and non-selective media under aerobic conditions, at 37oC, for 24 -48 h. Identification of selected microorganisms were carried out through biochemical tests. Chi-square test was used to evaluate the data when three or more categories were involved. Higher detection frequencies of Candida species, family Enterobacteriaceae, E. faecalis, Pseudomonas sp. and P. aeruginosa in addiction patients were verified. It was found that patients addicted to both genders showed a higher occurrence of members of the Enterobacteriaceae, which were also associated with bone loss only in patients with drug addiction.

Fermentation by gut microbiota cultured in a simulator of the human intestinal microbial ecosystem is improved probiotic Enterococcus faecium CRL 183

Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo (FAPESP)