Effect of Lactobacillus delbrueckii on cholesterol metabolism in germ-free mice and on atherogenesis in apolipoprotein E knock-out mice

Elevated blood cholesterol is an important risk factor associated with atherosclerosis and coronary heart disease. Several studies have reported a decrease in serum cholesterol during the consumption of large doses of fermented dairy products or lactobacillus strains. The proposed mechanism for this effect is the removal or assimilation of intestinal cholesterol by the bacteria, reducing cholesterol absorption. Although this effect was demonstrated in vitro, its relevance in vivo is still controversial. Furthermore, few studies have investigated the role of lactobacilli in atherogenesis. The aim of the present study was to determine the effect of Lactobacillus delbrueckii on cholesterol metabolism in germ-free mice and the possible hypocholesterolemic and antiatherogenic action of these bacteria using atherosclerosis-prone apolipoprotein E (apo E) knock-out (KO) mice. For this purpose, Swiss/NIH germ-free mice were monoassociated with L. delbrueckii and fed a hypercholesterolemic diet for four weeks. In addition, apo E KO mice were fed a normal chow diet and treated with L. delbrueckii for 6 weeks. There was a reduction in cholesterol excretion in germ-free mice, which was not associated with changes in blood or liver cholesterol concentration. In apo E KO mice, no effect of L. delbrueckii was detected in blood, liver or fecal cholesterol. The atherosclerotic lesion in the aorta was also similar in mice receiving or not these bacteria. In conclusion, these results suggest that, although L. delbrueckii treatment was able to reduce cholesterol excretion in germ-free mice, no hypocholesterolemic or antiatherogenic effect was observed in apo E KO mice.

Lactobacillus delbrueckii UFV-H2b20 induces type 1 cytokine production by mouse cells in vitro and in vivo

Lactobacillus delbrueckii UFV-H2b20 has been shown to increase clearance of bacteria injected into the blood of germ-free mice. Moreover, it induces the production of type 1 cytokines by human peripheral mononuclear cells. The objective of the present study was to investigate the production of inflammatory cytokines [interleukin-12 (IL-12 p40), tumor necrosis factor-α (TNF-α), and interferon-γ (IFN-γ)] triggered in vitro by live, heat-killed or lysozyme-treated L. delbrueckii UFV-H2b20 and in vivo by a live preparation. Germ-free, L. delbrueckii-monoassociated and lipopolysaccharide (LPS)-resistant C3H/HeJ mice were used as experimental models. UFV-H2b20 induced the production of IL-12 p40 and TNF-α by peritoneal cells and IFN-γ by spleen cells from germ-free or monoassociated Swiss/NIH mice and LPS-hyporesponsive mice (around 40 ng/mL for IL-12 p40, 200 pg/mL for TNF-α and 10 ng/mL for IFN-γ). Heat treatment of L. delbrueckii did not affect the production of these cytokines. Lysozyme treatment decreased IL-12 p40 production by peritoneal cells from C3H/HeJ mice, but did not affect TNF-α production by these cells or IFN-γ production by spleen cells from the same mouse strain. TNF-α production by peritoneal cells from Swiss/NIH L. delbrueckii-monoassociated mice was inhibited by lysozyme treatment. When testing IL-12 p40 and IFN-γ levels in sera from germ-free or monoassociated Swiss/NIH mice systemically challenged with Escherichia coli we observed that IL-12 p40 was produced at marginally higher levels by monoassociated mice than by germ-free mice (40 vs 60 ng/mL), but IFN-γ was produced earlier and at higher levels by monoassociated mice (monoassociated 4 and 14 ng/mL 4 and 8 h after infection, germfree 0 and 7.5 ng/mL at the same times). These results show that L. delbrueckii UFV-H2b20 stimulates the production of type 1 cytokines in vitro and in vivo, therefore suggesting that L. delbrueckii might have adjuvant properties in infection in which these cytokines play a major role.

Identification and in vitro production of Lactobacillus antagonists from women with or without bacterial vaginosis

Lactobacilli isolated from the vaginal tract of women with and without bacterial vaginosis (BV) were identified and characterized for the production of antagonists. Bacterial samples were isolated from healthy women (N = 16), from patients with clinical complaints but without BV (N = 30), and from patients with BV (N = 32). Identification was performed using amplified ribosomal DNA restriction analysis. Production of antagonistic compounds was evaluated by the double-layer diffusion technique using Gram-positive (N = 9) and Gram-negative bacteria (N = 6) as well as yeast (N = 5) as indicator strains. Of a total of 147 isolates, 133 were identified as pertaining to the genus Lactobacillus. Lactobacillus crispatus was the species most frequently recovered, followed by L. johnsonii and L. jensenii. Statistical analysis showed that L. crispatus was more frequent in individuals without BV (P < 0.05). A higher production of antagonists was noted in L. crispatus isolates from healthy women (P < 0.05). More acidic local pH and higher H2O2 production by isolated lactobacilli from healthy women suggest these mechanisms as the possible cause of this antagonism. In conclusion, a significant correlation was detected between the presence and antagonistic properties of certain species of Lactobacillus and the clinical status of the patients.

De calore plantarum proprio 2

Nimiösivulla myös motto: Omne quod vivit, sive animal sive terra editum, id vivit propter inclusum in eo calorem. Cicero.

De calore plantarum proprio 1

Nimiösivulla myös motto: Omne quod vivit, sive animal sive terra editum, id vivit propter inclusum in eo calorem. Cicero.

De arcanis plantarum

Invokaatio: I.N.D.

Spicilegium plantarum cryptogamarum Sveciae, pro argumento publicae disputationis, in Regiae Academiae Aboënsis aud. maj. venia experientissimae facultatis medicae, d. XVIII Dec. h. a. MDCCXCIV, horis solitis agendae, propositum, vindicibus auctore Carolo Birgero Rutström, ph. & m. d. med. adj. & botan. demonstr. et Johanne Gustavo Haartman, stipendiario Haartmanniano natione Australi

Dedikaatio: Carolus Adamus Wachtmeister.

De progressu cognitionis plantarum cryptogamicarum 1

Arkit: 1 arkintunnukseton lehti, A-B4. - S. [2] tyhjä.

De nutrimento plantarum

Invokaatio: Deo moderatore.

De radicibus plantarum

Invokaatio: A kai O.

De foliis plantarum

Invokaatio: Auspice Deo.

De transpiratione plantarum

Invokaatio: I.N.J.

De seminibus plantarum

Invokaatio: D.J.

Cultura lática mista com potencial de aplicação como cultura iniciadora em produtos cárneos

Bactérias viáveis adicionadas em produtos cárneos com a finalidade de melhorar a qualidade sanitária, as características sensoriais e reduzir nitritos, são denominadas de cultura iniciadora. Pode ser constituída de cultura pura ou mista com habilidade em produzir substâncias antimicrobianas como ácido lático e bacteriocinas, capazes de inibir microrganismos indesejáveis ao produto alimentício. Neste trabalho, avaliou-se algumas associações entre bactérias láticas, Lactobacillus, Pediococcus e Enterococcus, visando obter culturas láticas com habilidade bioquímica para fermentação homolática; alta viabilidade celular; tolerância ao sais NaCl e NaNO2; capacidade de reduzir nitritos e inibir patógenos como S. aureus; Salmonella spp. e E. coli enteropatogênica. Os cultivos foram desenvolvidos em MRS, incubados a 37ºC por 48 horas. O ácido lático foi determinado por Cromatografia Líquida de Alta Eficiência. Nitrito residual foi determinado por espectrofotometria. A fermentação homolática com melhor produção de ácido lático (4,61%) e alta viabilidade celular (3 x 10(15) UFC/mL) foi obtida pela cultura constituída de L. curvatus, L. plantarum, P. acidilactici e E. faecium . A cultura mista selecionada apresentou alta viabilidade celular (1x10(14) UFC/mL), mesmo em altas concentrações de NaCl e NaNO2. O caldo fermentado apresentou 99% de redução do nitrito inicial. A cultura lática mista selecionada inibiu S. aureus, Salmonella spp. e E. coli em ágar BHI. Em lingüiça frescal, observou-se a diminuição da contagem de S. aureus e coliformes totais em relação ao controle. Salmonella spp. não foi detectada nas amostras testadas. Os resultados mostram a possibilidade de aplicação da cultura mista selecionada como cultura iniciadora em produtos cárneos.

Translocação de Lactobacillus acidophilus em ratos alimentados com dieta rica em colesterol e ácido cólico suplementada com probiótico

Lactobacillus acidophilus é um microrganismo bastante estudado e componente comum de probióticos. No entanto, ainda há pouca informação sobre a translocação deste microrganismo para órgãos do corpo. O presente trabalho visou investigar a taxa de translocação de Lactobacillus acidophilus em ratos que receberam uma dieta rica em colesterol, suplementada com um concentrado de células de L. acidophilus NCFM, visto que, o consumo deste, tem sido indicado como adjunto dietético para indivíduos hipercolesterolêmicos. Foram utilizados 130 ratos machos Wistar, com peso médio inicial de 250±32g, distribuídos em 4 grupos experimentais, sendo: Padrão, com 40 animais e Controle, LDR (Leite Desnatado Reconstituído) e P (Probiótico) com 30 animais cada. O grupo Padrão recebeu a dieta AIN-93G durante todo o período experimental (42dias). Os demais grupos receberam a mesma dieta acrescida de 1% de colesterol e 0,1% de ácido cólico. Durante 14 dias (do 1º ao 14º dia), o grupo LDR recebeu 0,1mL/dia/animal de leite desnatado reconstituído a 10% de sólidos não gordurosos e o grupo P, recebeu 0,1mL/dia/animal de probiótico contendo 10(10) UFC/mL de Lactobacillus acidophilus NCFM. A taxa de translocação foi monitorada no 14º, 28º e 42º dias de experimentação (tempo 0, 14 e 28 dias após o término do consumo do probiótico, respectivamente) no baço, coração, fígado e rins. Nos órgãos dos animais dos grupos Padrão, Controle e LDR não foi observado crescimento de microrganismos nos tempos avaliados. Verificou-se translocação para o baço, coração, fígado e rins dos animais do grupo que recebeu probiótico (grupo P). O número de células de Lactobacillus encontrado nos órgãos foram, em UFC/órgão: baço (8,6 x 10²); fígado (4,8 x 10²); coração (4,7 x 10²) e rins (1,3 x 10²). Constatou-se diferença significativa (p<0,05) na contagem de células encontradas no baço, em comparação aos demais órgãos analisados. Entre o fígado e o coração, não foi observada diferença significativa (p>0,05), mas ambos diferiram estatisticamente dos rins (p<0,05). Observou-se uma eliminação constante das células translocadas após o término do consumo do probiótico, de acordo com os diferentes órgãos. O baço apresentou o maior número de células translocadas (860 UFC/órgão), no entanto, foi o órgão que as eliminou mais rapidamente. Ao final do período analisado, 69,8% das células presentes no baço, haviam sido eliminadas.