A Mycobacterial Phosphoribosyltransferase Promotes Bacillary Survival by Inhibiting Oxidative Stress and Autophagy Pathways in Macrophages and Zebrafish

Mycobacterium tuberculosis employs various strategies to modulate host immune responses to facilitate its persistence in macrophages. The M. tuberculosis cell wall contains numerous glycoproteins with unknown roles in pathogenesis. Here, by using Concanavalin A and LC-MS analysis, we identified a novel mannosylated glycoprotein phosphoribosyltransferase, encoded by Rv3242c from M. tuberculosis cell walls. Homology modeling, bioinformatic analyses, and an assay of phosphoribosyltransferase activity in Mycobacterium smegmatis expressing recombinant Rv3242c (MsmRv3242c) confirmed the mass spectrometry data. Using Mycobacterium marinum-zebrafish and the surrogate MsmRv3242c infection models, we proved that phosphoribosyltransferase is involved in mycobacterial virulence. Histological and infection assays showed that the M. marinum mimG mutant, an Rv3242c orthologue in a pathogenic M. marinum strain, was strongly attenuated in adult zebrafish and also survived less in macrophages. In contrast, infection with wild type and the complemented Delta mimG: Rv3242c M. marinum strains showed prominent pathological features, such as severe emaciation, skin lesions, hemorrhaging, and more zebrafish death. Similarly, recombinant Msm Rv3242c bacteria showed increased invasion in non-phagocytic epithelial cells and longer intracellular survival in macrophages as compared with wild type and vector control M. smegmatis strains. Further mechanistic studies revealed that the Rv3242c- and mimG-mediated enhancement of intramacrophagic survival was due to inhibition of autophagy, reactive oxygen species, and reduced activities of superoxide dismutase and catalase enzymes. Infection with MsmRv3242c also activated the MAPK pathway, NF-kappa B, and inflammatory cytokines. In summary, we show that a novel mycobacterial mannosylated phosphoribosyltransferase acts as a virulence and immunomodulatory factor, suggesting that it may constitute a novel target for antimycobacterial drugs.

Metal Complexes of Curcumin for Cellular Imaging, Targeting, and Photoinduced Anticancer Activity

CONSPECTUS: Curcumin is a polyphenolic species. As an active ingredient of turmeric, it is well-known for its traditional medicinal properties. The therapeutic values include antioxidant, anti-inflammatory, antiseptic, and anticancer activity with the last being primarily due to inhibition of the transcription factor NF-kappa B besides affecting several biological pathways to arrest tumor growth and its progression. Curcumin with all these positive qualities has only remained a potential candidate for cancer treatment over the years without seeing any proper usage because of its hydrolytic instability involving the diketo moiety in a cellular medium and its poor bioavailability. The situation has changed considerably in recent years with the observation that curcumin in monoanionic form could be stabilized on binding to a metal ion. The reports from our group and other groups have shown that curcumin in the metal-bound form retains its therapeutic potential. This has opened up new avenues to develop curcumin-based metal complexes as anticancer agents. Zinc(II) complexes of curcumin are shown to be stable in a cellular medium. They display moderate cytotoxicity against prostate cancer and neuroblastoma cell lines. A similar stabilization and cytotoxic effect is reported for (arene)ruthenium(II) complexes of curcumin against a variety of cell lines. The half-sandwich 1,3,5-triaza-7-phosphatricyclo-3.3.1.1]decane (RAPTA)-type ruthenium(II) complexes of curcumin are shown to be promising cytotoxic agents with low micromolar concentrations for a series of cancer cell lines. In a different approach, cobalt(III) complexes of curcumin are used for its cellular delivery in hypoxic tumor cells using intracellular agents that reduce the metal and release curcumin as a cytotoxin. Utilizing the photophysical and photochemical properties of the curcumin dye, we have designed and synthesized photoactive curcumin metal complexes that are used for cellular imaging by fluorescence microscopy and damaging the cancer cells on photoactivation in visible light while being minimally toxic in darkness. In this Account, we have made an attempt to review the current status of the chemistry of metal curcumin complexes and present results from our recent studies on curcumin complexes showing remarkable in vitro photocytotoxicity. The undesirable dark toxicity of the complexes can be reduced with suitable choice of the metal and the ancillary ligands in a ternary structure. The complexes can be directed to specific subcellular organelles. Selectivity by targeting cancer cells over normal cells can be achieved with suitable ligand design. We expect that this methodology is likely to provide an impetus toward developing curcumin-based photochemotherapeutics for anticancer treatment and cure.

Glioblastoma-derived Macrophage Colony-stimulating Factor (MCSF) Induces Microglial Release of Insulin-like Growth Factor-binding Protein 1 (IGFBP1) to Promote Angiogenesis

Glioblastoma (grade IV glioma/GBM) is the most common primary adult malignant brain tumor with poor prognosis. To characterize molecular determinants of tumor-stroma interaction in GBM, we profiled 48 serum cytokines and identified macrophage colony-stimulating factor (MCSF) as one of the elevated cytokines in sera from GBM patients. Both MCSF transcript and protein were up-regulated in GBM tissue samples through a spleen tyrosine kinase (SYK)-dependent activation of the PI3K-NF kappa B pathway. Ectopic overexpression and silencing experiments revealed that glioma-secreted MCSF has no role in autocrine functions and M2 polarization of macrophages. In contrast, silencing expression of MCSF in glioma cells prevented tube formation of human umbilical vein endothelial cells elicited by the supernatant from monocytes/microglial cells treated with conditioned medium from glioma cells. Quantitative proteomics based on stable isotope labeling by amino acids in cell culture showed that glioma-derived MCSF induces changes in microglial secretome and identified insulin-like growth factor-binding protein 1 (IGFBP1) as one of the MCSF-regulated proteins secreted by microglia. Silencing IGFBP1 expression in microglial cells or its neutralization by an antibody reduced the ability of supernatants derived from microglial cells treated with glioma cell-conditioned medium to induce angiogenesis. In conclusion, this study shows up-regulation of MCSF in GBM via a SYK-PI3K-NF kappa B-dependent mechanism and identifies IGFBP1 released by microglial cells as a novel mediator of MCSF-induced angiogenesis, of potential interest for developing targeted therapy to prevent GBM progression.

High performance sol-gel spin-coated titanium dioxide dielectric based MOS structures

High-kappa TiO2 thin films have been fabricated using cost effective sol-gel and spin-coating technique on p-Si (100) wafer. Plasma activation process was used for better adhesion between TiO2 films and Si. The influence of annealing temperature on the structure-electrical properties of titania films were investigated in detail. Both XRD and Raman studies indicate that the anatase phase crystallizes at 400 degrees C, retaining its structural integrity up to 1000 degrees C. The thickness of the deposited films did not vary significantly with the annealing temperature, although the refractive index and the RMS roughness enhanced considerably, accompanied by a decrease in porosity. For electrical measurements, the films were integrated in metal-oxide-semiconductor (MOS) structure. The electrical measurements evoke a temperature dependent dielectric constant with low leakage current density. The Capacitance-voltage (C-V) characteristics of the films annealed at 400 degrees C exhibited a high value of dielectric constant (similar to 34). Further, frequency dependent C-V measurements showed a huge dispersion in accumulation capacitance due to the presence of TiO2/Si interface states and dielectric polarization, was found to follow power law dependence on frequency (with exponent `s'=0.85). A low leakage current density of 3.6 x 10(-7) A/cm(2) at 1 V was observed for the films annealed at 600 degrees C. The results of structure-electrical properties suggest that the deposition of titania by wet chemical method is more attractive and cost-effective for production of high-kappa materials compared to other advanced deposition techniques such as sputtering, MBE, MOCVD and AID. The results also suggest that the high value of dielectric constant kappa obtained at low processing temperature expands its scope as a potential dielectric layer in MOS device technology. (C) 2015 Elsevier Ltd. All rights reserved.

DLTS analysis of amphoteric interface defects in high-TiO2 MOS structures prepared by sol-gel spin-coating

High-kappa TiO2 thin films have been fabricated from a facile, combined sol-gel spin - coating technique on p and n type silicon substrate. XRD and Raman studies headed the existence of anatase phase of TiO2 with a small grain size of 18 nm. The refractive index `n' quantified from ellipsometry is 2.41. AFM studies suggest a high quality, pore free films with a fairly small surface roughness of 6 angstrom. The presence of Ti in its tetravalent state is confirmed by XPS analysis. The defect parameters observed at the interface of Si/TiO2 were studied by capacitance - voltage (C - V) and deep level transient spectroscopy (DLTS). The flat - band voltage (V-FB) and the density of slow interface states estimated are -0.9, -0.44 V and 5.24x10(10), 1.03x10(11) cm(-2); for the NMOS and PMOS capacitors, respectively. The activation energies, interface state densities and capture cross -sections measured by DLTS are E-V + 0.30, E-C - 0.21 eV; 8.73x10(11), 6.41x10(11) eV(-1) cm(-2) and 5.8x10(-23), 8.11x10(-23) cm(2) for the NMOS and PMOS structures, respectively. A low value of interface state density in both P-and N-MOS structures makes it a suitable alternate dielectric layer for CMOS applications. And also very low value of capture cross section for both the carriers due to the amphoteric nature of defect indicates that the traps are not aggressive recombination centers and possibly can not contribute to the device operation to a large extent. (C) 2015 Author(s).

High temperature thermoelectric properties of Zr and Hf based transition metal dichalcogenides: A first principles study

We investigate the electronic and thermal transport properties of bulk MX2 compounds (M = Zr, Hf and X = S, Se) by first-principles calculations and semi-classical Boltzmann transport theory. The band structure shows the confinement of heavy and light bands along the out of plane and in-plane directions, respectively. This results in high electrical conductivity (sigma) and large thermopower leading to a high power factor (S-2 sigma) for moderate n-type doping. The phonon dispersion demonstrates low frequency flat acoustical modes, which results in low group velocities (v(g)). Consequently, lowering the lattice thermal conductivity (kappa(latt)) below 2 W/m K. Low kappa(latt) combined with high power factor results in ZT > 0.8 for all the bulk MX2 compounds at high temperature of 1200 K. In particular, the ZT(max) of HfSe2 exceeds 1 at 1400 K. Our results show that Hf/Zr based dichalcogenides are very promising for high temperature thermoelectric application. (C) 2015 AIP Publishing LLC.

Analysis of SUMOylated proteins using SUMO-traps

6 p. [+ 7 p. Supplementary Information]

Control of gene expression by modulated self-assembly

Numerous transcription factors self-assemble into different order oligomeric species in a way that is actively regulated by the cell. Until now, no general functional role has been identified for this widespread process. Here, we capture the effects of modulated self-assembly in gene expression with a novel quantitative framework. We show that this mechanism provides precision and flexibility, two seemingly antagonistic properties, to the sensing of diverse cellular signals by systems that share common elements present in transcription factors like p53, NF-kappa B, STATs, Oct and RXR. Applied to the nuclear hormone receptor RXR, this framework accurately reproduces a broad range of classical, previously unexplained, sets of gene expression data and corroborates the existence of a precise functional regime with flexible properties that can be controlled both at a genome-wide scale and at the individual promoter level.

An evaluation of geographic and annual variation in morphometric characters and gill-raker counts of yellowfin tuna, Thunnus albacares, from the Pacific Ocean

ENGLISH: Samples of yellowfin tuna, Thunnus albacares, collected from five areas of the Pacific Ocean (Mexico, Ecuador, Australia, Japan, and Hawaii) between January and May of 1988 and 1990 were examined for spatiotemporal variation in morphometric characters and gill-raker counts. 'Iwo-factor analysis of variance, with area and year treated as grouping factors, indicated a significant difference in the means of the total gill-raker counts among fish from different areas, but no significant difference between fish caught in different years. The morphometric data were adjusted by allometric formulae to remove size effects. The correct classification rates for the five groups, using discriminant function analysis, based on adjusted morphometric characters, were 77.60/0 for the samples from 1988 and 74.40/0 for those from 1990. These are 72.00/0 and 68.00/0 (Cohen's kappa statistic) better than would have occurred chance. The pattern of geographic variability, however, is unstable for these two years, thus requiring separate discriminant functions for each year. Although there is annual variability in the morphometric characters, these results demonstrate that the stocks examined are morphometrically distinguishable and that their phenetic relationships reflect their geographic origin. SPANISH: Se examinaron muestras de atún aleta amarilla, Thunnus albacares, tomadas de cinco áreas del Océano Pacífico (México, Ecuador, Australia, Japón, y Hawaii) entre enero y mayo de 1988 y 1990, para descubrir variaciones espaciotemporales en las características morfométricas y los conteos de branquiespinas. Un análisis de varianza de dos factores, con área y año como factores de agrupación, indicó una diferencia significativa en los promedios de los conteos de branquiespinas totales entre peces de distintas áreas, pero ninguna entre peces capturados en distintos años. Se ajustaron los datos morfométricos con fórmulas alométricas para eliminar los efectos de la talla del pez. En un análisis de función discriminante, las tasas de clasificación correcta de los cinco grupos, basadas en características morfométricas ajustadas, fueron 77.60/0 para las muestras de 1988 y 74.40/0 para aquellas de 1990. Estas cifras son 72.00/0 y 68.00/0 (estadístico de kappa de Cohen) mejores de lo que se hubiera obtenido al azar. Sin embargo, la variabilidad geográfica es inestable en estos dos años, requiriendo por lo tanto funciones discriminantes separadas para cada año. Aunque existe variabilidad anual en las características morfométricas, estos resultados demuestran que los stocks examinados son morfamétricamente distinguibles, y que su relación fenética refleja su origen geográfico. (PDF contains 31 pages.)

Efetividade da aplicação semestral de verniz fluoretado no controle da cárie dentária em pré-escolares: resultados após 12 meses de acompanhamento

O presente estudo teve como objetivos avaliar se a aplicação de verniz fluoretado com periodicidade semestral em crianças pré-escolares reduz o número de crianças com lesões de cárie em dentina na dentição decídua, diminui a incidência de lesões de cárie em esmalte e dentina, está inversamente associado à ocorrência de dor e abscesso dentário e produz quaisquer efeitos adversos. A população de estudo consistiu de 200 crianças na faixa etária de 12 a 48 meses, recrutadas em uma unidade de saúde pública da cidade do Rio de Janeiro, as quais foram alocadas aleatoriamente nos grupos teste (verniz fluoretado Duraphat) e controle (verniz placebo). Para o registro da incidência de cárie, as crianças foram examinadas na linha de base e a cada seis meses, durante um ano, por dois odontopediatras previamente treinados e calibrados (Kappa=0,85). A ocorrência de dor, abscesso e efeitos adversos foi verificada a partir de entrevistas com os responsáveis. Os participantes, os seus responsáveis, os operadores e os examinadores desconheciam a qual grupo cada criança pertencia. No final do período de acompanhamento, 71 crianças do grupo teste e 77 do grupo controle foram avaliadas. Constatou-se que, nos grupos teste e controle, o número de crianças com novas lesões de cárie em dentina foi igual a 13 e 20 (teste Qui-quadrado, p=0,34) e que a média do incremento de cárie considerando apenas lesões em dentina (c3eos) foi de 1,1(dp=3,4) e de 1,4(dp=2,8), respectivamente (teste de Mann-Whitney, p=0,29). Uma criança apresentou dor de dente e abscesso dentário e outras duas crianças apresentaram apenas dor de dente. Todas pertenciam ao grupo teste. Com relação aos efeitos adversos, encontrou-se que uma criança pertencente ao grupo controle relatou ardência na cavidade bucal após a aplicação do placebo e que o responsável por um participante do grupo teste sentiu-se incomodado com a coloração amarelada dos dentes da criança após a aplicação do verniz fluoretado. Concluiu-se que a aplicação de verniz fluoretado com periodicidade semestral em crianças pré-escolares é segura e parece contribuir para o controle da progressão de cárie. Contudo, é necessário um período de acompanhamento mais longo para se obter evidência conclusiva a respeito da efetividade dessa intervenção. Não houve associação entre a ocorrência de dor e abscesso dentário e o uso profissional do verniz fluoretado.

Reprodutibilidade de um índice para diagnóstico e avaliação da atividade de lesões de cárie dentária na dentição decídua

O objetivo do presente estudo clínico é verificar a reprodutibilidade intra e interexaminadores de um critério de diagnóstico de cárie dentária (Nyvad et al. 1999) aplicado na dentição decídua, e avaliar o tempo médio necessário para a realização do exame clínico utilizando o referido critério. O mesmo é baseado na combinação de métodos visuais e táteis e propõe a diferenciação entre lesões ativas e inativas, tanto para lesões cavitadas quanto para não cavitadas. A amostra total consistiu de 80 crianças de três a sete anos de idade, de ambos os sexos, estudantes do Centro Educacional Terra Santa (Petrópolis/ RJ). Os responsáveis assinaram um termo de consentimento livre e esclarecido e o trabalho foi aprovado pelo Comitê de Ética em Pesquisa do HUPE-UERJ. Os exames foram realizados após escovação supervisionada, em consultório odontológico sob iluminação artificial, após 3-5s de secagem com ar comprimido, por dois examinadores treinados pelas autoras do índice e calibrados. As concordâncias intra e interexaminadores foram avaliadas pelo percentual de concordância (%) e pelo teste kappa (k), considerando a superfície dentária como unidade de análise e os seguintes pontos de corte: 1) hígida versus cariada; 2) ativa versus inativa; 3) descontinuidade versus hígida; e 4) cavitada versus hígida. O % e o valor de k para confiabilidade interexaminadores para cada ponto de corte foram: 1) % = 0,97 e k = 0,82 (IC: 0,80 - 0,85); 2) % = 0,98 e k = 0,80 (IC: 0,76 - 0,83); 3) % = 0,99 e k = 0,90 (IC: 0,88 - 0,93); 4) % = 99,0 e k = 0,95 (IC: 0,92 - 0,97). O % e o valor de k para confiabilidade intraexaminador para cada ponto de corte foram: 1) % = 0,98 e k = 0,86 (IC: 0,84 - 0,86); 2) % = 0,99 e k = 0,86 (IC: 0,83 - 0,89); 3) % = 0,99 e k = 0,94 (IC: 0,92 - 0,96); 4) % = 0,99 e k = 0,98 (IC: 0,96 - 0,99). O maior % de discordância (65,3% - 158/242) concentrou-se na diferenciação entre supefícies hígidas e lesões não cavitadas: 33,5% (81/242) entre superfície hígida e lesão não cavitada inativa; 26,0% (63/242), entre superfície hígida e lesão não cavitada ativa; e 5,8% (14/242), entre lesão não cavitada ativa e lesão não cavitada inativa. O tempo necessário para realização do exame clínico foi em média 226,5s (128,53). Conclui-se que o índice apresentou reprodutibilidade variando de substancial à quase perfeita e um tempo de exame viável, mostrando-se consistente e reproduzível para a realização de estudos clínicos de cárie dentária na dentição decídua.

Análise comparativa in vivo da detecção de lesões de cárie oclusal e proximal por meio de exame visual (ICDAS), exame radiográfico e transiluminação por fibra ótica (FOTI)

O objetivo do presente trabalho foi avaliar in vivo a detecção de cárie através do exame visual ICDAS, transiluminação por fibra ótica combinado ao ICDAS e exame radiográfico. Um total de 2.279 superfícies proximais e cicatrículas e fissuras em incisivos superiores, pré-molares e molares permanentes e 272 superfícies em molares decíduos em72 escolares (8 a 18 anos) foram avaliadas por um examinador treinado. Os sete escores para detecção de cárie primária do sistema visual ICDAS foram aplicados. Dois equipamentos de transiluminação por fibra ótica foram avaliados: FOTI Schott (SCH), com ponta de fibra ótica com 0,5mm de diâmetro, e FOTI Microlux (MIC), com diâmetro da ponta 3 mm. Durante o exame combinado FOTI/ICDAS, a fibra ótica era utilizada tanto para iluminar quanto para transiluminar a superfície sob avaliação. O exame radiográfico (RX) consistiu de radiografias interproximais posteriores e periapicais anteriores. Os exames foram realizados em consultório odontológico após escovação supervisionada. No primeiro dia de exame, o exame visual utilizando o ICDAS era realizado e em seguida, o exame combinado ao MIC ou SCH. Logo após era realizado o exame radiográfico. Após uma semana, novamente o ICDAS era realizado, e em seguida o exame combinado com o equipamento de FOTI não utilizado na semana anterior. Os exames foram repetidos em 10 pacientes após intervalo mínimo de uma semana para avaliação da reprodutibilidade intra-examinador, a qual apresentou valores de 0,95 (ICDAS), 0,94 (MIC), 0,95 (SCH) e 0,99 (RX) pelo kappa ponderado. Em cicatrículas e fissuras de permanentes, o RX julgou que um número maior de superfícies apresentava lesão em dentina (53) do que os outros métodos (34 a 36); porém não detectou nenhuma lesão em esmalte, as quais foram identificadas pelo ICDAS (94), SCH (107) e MIC (91). Em proximais permanentes, a transiluminação por fibra ótica identificou maior número de proximais como lesão em esmalte - 150 (SCH) e 139 (MIC) - do que o exame visual (106), enquanto o RX identificou somente 43. Em oclusais de decíduos, os quatro métodos julgaram um número aproximadamente similar de superfícies sem lesão (52 a 59) ou com lesão em dentina (21 a 26), assim como para lesões proximais em dentina (31 a 36). Entretanto um número reduzido de lesões proximais decíduas em esmalte foi julgado pelo exame radiográfico (3) em comparação com os outros métodos (15 a 16). Em decíduos, o ICDAS e o FOTI combinado ao exame visual julgaram maior número de lesões proximais em esmalte que o exame radiográfico, sendo que número similar de lesões em dentina foram classificadas pelos quatro métodos em oclusais e proximais de molares decíduos. Em cicatrículas e fissuras de permanentes, tanto o exame visual ICDAS quanto sua combinação aos dois equipamentos de transiluminação apresentaram maior similaridade de superfícies julgadas como lesão em esmalte ou como lesão em dentina, enquanto o exame radiográfico classificou mais superfícies como lesão em dentina e nenhuma como lesão em esmalte. A adição da transiluminação por fibra ótica ao exame visual aumentou em um terço a detecção das lesões cariosas proximais julgadas em dentina pelo ICDAS isoladamente e aproximadamente quadruplicou o número daquelas assim classificadas pela avaliação radiográfica em permanentes.

Segmentação e classificação de imagens destinadas ao mapeamento digital do Parque Nacional da Serra dos Órgãos (PARNASO)

Na perspectiva ambiental, o Parque Nacional da Serra dos Órgãos (PARNASO) é o Parque Nacional mais pesquisado no Brasil e configura-se como uma importante Unidade de Conservação inserida no estado do Rio de Janeiro, devido à sua importância ambiental para o estado. Localizado em quatro municípios da região serrana: Teresópolis, Petrópolis, Magé e Guapimirim foi constatado que essa área tem passado por alguns problemas, relativamente recentes, de ocupação desordenada devido à expansão urbana em sua vizinhança caracterizada por pressão antrópica. Através do processamento de imagens digitais, mais especificamente as etapas de segmentação e classificação, foi possível ilustrar o processo de ocupação humana por meio de documentos cartográficos. Além de estes processos possibilitarem a geração de mapas de uso da Terra e cobertura vegetal, com o intuito de auxiliar e dar fomento à execução de atividades, o mapeamento digital configura-se numa importante ferramenta para a análise ambiental, contribuindo para o posterior zoneamento da área de estudo. Adotaram-se classes temáticas de uso e ocupação da Terra com o propósito de permitir a classificação das imagens digitais trabalhadas. São elas: afloramento rochoso, área urbana, agricultura e vegetação. Estudos foram feitos no sentido de indicar e explorar as funcionalidades das ferramentas SPRING e DEFINIENS e resultados foram comparados a partir do uso de imagens LANDSAT, CBERS, SPOT e IKONOS chegando-se a resultados de que no sistema SPRING, os melhores parâmetros a serem escolhidos foram similaridade 10 e área 400. Já para o sistema DEFINIENS, constatou-se que o processo de segmentação multinível permitiu o alcance de resultados mais rápidos, do ponto de vista computacional, do que o processo de segmentação único utilizado normalmente entre os sistemas de processamento de imagens digitais como o SPRING. Já sob a ótica do processo de classificação de imagens, a pesquisa constituiu em avaliar este mecanismo por meio de dois indicadores: o de exatidão/acurácia e o índice Kappa. Neste sentido, observaram-se tendências de melhores resultados no sistema SPRING.

The promoter of cell growth- and RNA protection-associated SND1 gene is activated by endoplasmic reticulum stress in human hepatoma cells

Background: Staphyloccocal nuclease domain-containing protein 1 (SND1) is involved in the regulation of gene expression and RNA protection. While numerous studies have established that SND1 protein expression is modulated by cellular stresses associated with tumor growth, hypoxia, inflammation, heat- shock and oxidative conditions, little is known about the factors responsible for SND1 expression. Here, we have approached this question by analyzing the transcriptional response of human SND1 gene to pharmacological endoplasmic reticulum (ER) stress in liver cancer cells. Results: We provide first evidence that SND1 promoter activity is increased in human liver cancer cells upon exposure to thapsigargin or tunicamycin or by ectopic expression of ATF6, a crucial transcription factor in the unfolded protein response triggered by ER stress. Deletion analysis of the 5'-flanking region of SND1 promoter identified maximal activation in fragment (-934, +221), which contains most of the predicted ER stress response elements in proximal promoter. Quantitative real- time PCR revealed a near 3 fold increase in SND1 mRNA expression by either of the stress- inducers; whereas SND1 protein was maximally upregulated (3.4-fold) in cells exposed to tunicamycin, a protein glycosylation inhibitor. Conclusion: Promoter activity of the cell growth- and RNA-protection associated SND1 gene is up-regulated by ER stress in human hepatoma cells.

Alveolar nitric oxide and its role in pediatric asthma control assessment

Resumen Background: Nitric oxide can be measured at multiple flow rates to determine proximal (maximum airway nitric oxide flux; Jaw(NO)) and distal inflammation (alveolar nitric oxide concentration; CA(NO)). The main aim was to study the association among symptoms, lung function, proximal (maximum airway nitric oxide flux) and distal (alveolar nitric oxide concentration) airway inflammation in asthmatic children treated and not treated with inhaled glucocorticoids. Methods: A cross-sectional study with prospective data collection was carried out in a consecutive sample of girls and boys aged between 6 and 16 years with a medical diagnosis of asthma. Maximum airway nitric oxide flux and alveolar nitric oxide concentration were calculated according to the two-compartment model. In asthmatic patients, the asthma control questionnaire (CAN) was completed and forced spirometry was performed. In controls, differences between the sexes in alveolar nitric oxide concentration and maximum airway nitric oxide flux and their correlation with height were studied. The correlation among the fraction of exhaled NO at 50 ml/s (FENO50), CA(NO), Jaw(NO), forced expiratory volume in 1 second (FEV1) and the CAN questionnaire was measured and the degree of agreement regarding asthma control assessment was studied using Cohen's kappa. Results: We studied 162 children; 49 healthy (group 1), 23 asthmatic participants without treatment (group 2) and 80 asthmatic patients treated with inhaled corticosteroids (group 3). CA(NO) (ppb) was 2.2 (0.1-4.5), 3 (0.2-9.2) and 2.45 (0.1-24), respectively. Jaw(NO) (pl/s) was 516 (98.3-1470), 2356.67 (120-6110) and 1426 (156-11805), respectively. There was a strong association (r = 0.97) between FENO50 and Jaw(NO) and the degree of agreement was very good in group 2 and was good in group 3. There was no agreement or only slight agreement between the measures used to monitor asthma control (FEV1, CAN questionnaire, CA(NO) and Jaw(NO)). Conclusions: The results for CA(NO) and Jaw(NO) in controls were similar to those found in other reports. There was no agreement or only slight agreement among the three measure instruments analyzed to assess asthma control. In our sample, no additional information was provided by CA(NO) and Jaw(NO).