Biopacemaker acceleration without increased synchronization by chronic exposure to phorbol myristate acetate

L'activité électrique du coeur est initiée par la génération spontanée de potentiels d'action venant des cellules pacemaker du noeud sinusal (SN). Toute dysfonction au niveau de cette région entraîne une instabilité électrique du coeur. La majorité des patients souffrant d'un noeud sinusal déficient nécessitent l'implantation chirurgicale d'un pacemaker électronique; cependant, les limitations de cette approche incitent à la recherche d'une alternative thérapeutique. La base moléculaire des courants ioniques jouant un rôle crucial dans l'activité du noeud sinusal sont de plus en plus connues. Une composante importante de l'activité des cellules pacemakers semble être le canal HCN, responsable du courant pacemaker If. Le facteur T-box 3 (Tbx3), un facteur de transcription conservé durant le processus de l'évolution, est nécessaire au développement du système de conduction cardiaque. De précédentes études ont démontré que dans différentes lignées cellulaires le Phorbol 12-myristate 13-acetate (PMA) active l'expression du gène codant Tbx3 via des réactions en cascade partant de la protéine kinase C (PKC). L'objectif principal de cette étude est de tester si le PMA peut augmenter la fréquence et la synchronisation de l'activité spontanée du pacemaker biologique en culture. Plus précisément, nous avons étudié les effets de l'exposition chronique au PMA sur l'expression du facteur de transcription Tbx3, sur HCN4 et l'activité spontanée chez des monocouches de culture de myocytes ventriculaires de rats néonataux (MVRN). Nos résultats démontrent que le PMA augmente significativement le facteur transcription de Tbx3 et l'expression ARNm de HCN4, favorisant ainsi l'augmentation du rythme et de la stabilité de l'activité autonome. De plus, une diminution significative de la vitesse de conduction a été relevée et est attribuée à la diminution du couplage intercellulaire. La diminution de la vitesse de conduction pourrait expliquer l'effet négatif du PMA sur la synchronisation de l'activité autonome du pacemaker biologique. Ces résultats ont été confirmés par un modèle mathématique multicellulaire suggérant que des fréquences et résistances intercellulaires plus élevée pourraient induire une activité plus stable et moins synchrone. Cette étude amène de nouvelles connaissances très importantes destinées à la production d'un pacemaker biologique efficient et robuste.

Phorbol-12-myristate-13-acetate induces nociceptin in human Mono Mac 6 cells via multiple transduction signalling pathways.

BACKGROUND Nociceptin in the peripheral circulation has been proposed to have an immunoregulatory role with regards to inflammation and pain. However, the mechanisms involved in its regulation are still not clear. The aim of this study was to investigate signalling pathways contributing to the regulation of the expression of nociceptin under inflammatory conditions. METHODS Mono Mac 6 cells (MM6) were cultured with or without phorbol-12-myristate-13-acetate (PMA). Prepronociceptin (ppNOC) mRNA was detected by RT-qPCR and extracellular nociceptin by fluorescent-enzyme immunoassay. Intracellular nociceptin and phosphorylated kinases were measured using flow cytometry. To evaluate the contribution of various signalling pathways to the regulation of ppNOC mRNA and nociceptin protein, cells were pre-treated with specific kinase inhibitors before co-culturing with PMA. RESULTS ppNOC mRNA was expressed in untreated MM6 at low concentrations. Exposure of cells to PMA upregulated ppNOC after nine h compared with controls without PMA (median normalized ratio with IQR: 0.18 (0.15-0.26) vs. 0 (0-0.02), P<0.01). Inhibition of mitogen-activated protein kinases specific for signal transduction reversed the PMA effects (all P<0.001). Induction of nociceptin protein concentrations in PMA stimulated MM6 was prevented predominantly by identity of ERK inhibitor (P<0.05). CONCLUSIONS Upregulation of nociceptin expression by PMA in MM6 cells involves several pathways. Underlying mechanisms involved in nociceptin expression may lead to new insights in the treatment of pain and inflammatory diseases.

National training course, emergency medical technician - paramedic. Instructor's lesson plans. Module IV: general pharmacology.

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Behavioral pharmacology of human drug dependence /

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A laboratory manual of experimental pharmacology for veterinary students.

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Pharmacology. Laboratory manual; notes on the comparative physiological and biochemical basis of pharmacology.

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Veterinary pharmacology and therapeutics.

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