Zinc chelatase in human lymphocytes: detection of the enzymatic defect in erythropoietic protoporphyria

We describe a fluorometric assay for heme synthetase, the enzyme that is genetically deficient in erythropoietic protoporphyria. The method, which can readily detect activity in 1 microliter of packed human lymphocytes, is based on the formation of zinc protoheme from protoporphyrin IX. That zinc chelatase and ferrochelatase activities reside in the same enzyme was shown by the competitive action of ferrous ions and the inhibitory effects of N-methyl protoporphyrin (a specific inhibitor of heme synthetase) on zinc chelatase. The Km for zinc was 11 micrograms and that for protoporphyrin IX was 6 microM. The Ki fro ferrous ions was 14 microM. Zinc chelatase was reduced to 15.3% of the mean control activity in lymphocytes obtained from patients with protoporphyria, thus confirming the defect of heme biosynthesis in this disorder. The assay should prove to be useful for determining heme synthetase in tissues with low specific activity and to investigate further the enzymatic defect in protoporphyria.

Nitrogen Metabolism in leaves of a tank epiphytic bromeliad: Characterization of a spatial and functional division

The leaf is considered the most important vegetative organ of tank epiphytic bromeliads due to its ability to absorb and assimilate nutrients. However, little is known about the physiological characteristics of nutrient uptake and assimilation. In order to better understand the mechanisms utilized by some tank epiphytic bromeliads to optimize the nitrogen acquisition and assimilation, a study was proposed to verify the existence of a differential capacity to assimilate nitrogen in different leaf portions. The experiments were conducted using young plants of Vriesea gigantea. A nutrient solution containing NO(3)(-)/NH(4)(+) or urea as the sole nitrogen source was supplied to the tank of these plants and the activities of urease, nitrate reductase (NR), glutamine synthetase (GS) and glutamate dehydrogenase (NADH-GDH) were quantified in apical and basal leaf portions after 1, 3, 6, 9, 12, 24 and 48 h. The endogenous ammonium and urea contents were also analyzed. Independent of the nitrogen sources utilized, NR and urease activities were higher in the basal portions of leaves in all the period analyzed. On the contrary. GS and GDH activities were higher in apical part. It was also observed that the endogenous ammonium and urea had the highest contents detected in the basal region. These results suggest that the basal portion was preferentially involved in nitrate reduction and urea hydrolysis, while the apical region could be the main area responsible for ammonium assimilation through the action of GS and GDH activities. Moreover, it was possible to infer that ammonium may be transported from the base, to the apex of the leaves. In conclusion, it was suggested that a spatial and functional division in nitrogen absorption and NH(4)(+) assimilation between basal and apical leaf areas exists, ensuring that the majority of nitrogen available inside the tank is quickly used by bromeliad`s leaves. (C) 2011 Elsevier GmbH. All rights reserved.

The search of a genetic basis for noise-induced hearing loss (NIHL)

Background and aim: Knowledge about the genetic factors responsible for noise-induced hearing loss (NIHL) is still limited. This study investigated whether genetic factors are associated or not to susceptibility to NIHL. Subjects and methods: The family history and genotypes were studied for candidate genes in 107 individuals with NIHL, 44 with other causes of hearing impairment and 104 controls. Mutations frequently found among deaf individuals were investigated (35delG, 167delT in GJB2, Delta(GJB6- D13S1830), Delta(GJB6- D13S1854) in GJB6 and A1555G in MT-RNR1 genes); allelic and genotypic frequencies were also determined at the SNP rs877098 in DFNB1, of deletions of GSTM1 and GSTT1 and sequence variants in both MTRNR1 and MTTS1 genes, as well as mitochondrial haplogroups. Results: When those with NIHL were compared with the control group, a significant increase was detected in the number of relatives affected by hearing impairment, of the genotype corresponding to the presence of both GSTM1 and GSTT1 enzymes and of cases with mitochondrial haplogroup L1. Conclusion: The findings suggest effects of familial history of hearing loss, of GSTT1 and GSTM1 enzymes and of mitochondrial haplogroup L1 on the risk of NIHL. This study also described novel sequence variants of MTRNR1 and MTTS1 genes.

Role of the Mitochondrial Mutations, m. 827A > G and the Novel m. 7462C > T, in the Origin of Hearing Loss

Samples from 30 deaf probands exhibiting features suggestive of syndromic mitochondrial deafness or from families with maternal transmission of deafness were selected for investigation of mutations in the mitochondrial genes MT-RNR1 and MT-TS1. Patients with mutation m. 1555A>G had been previously excluded from this sample. In the MT-RNR1 gene, five probands presented the m. 827A>G sequence variant, of uncertain pathogenicity. This change was also detected in 66 subjects of an unaffected control sample of 306 Brazilian individuals from various ethnic backgrounds. Given its high frequency, we consider it unlikely to have a pathogenic role on hereditary deafness. As to the MT-TS1 gene, one proband presented the previously known pathogenic m. 7472insC mutation and three probands presented a novel variant, m. 7462C>T, which was absent from the same control sample of 306 individuals. Because of its absence in control samples and association with a family history of hearing impairment, we suggest it might be a novel pathogenic mutation.

Enhancement of the citrulline-nitric oxide cycle in astroglioma cells by the proline-rich peptide-10c from Bothrops jararaca venom

The biological activity of the proline rich decapeptde Bj PRO 10c a processing product of the C type natriuretic peptide precursor protein, expressed in the brain and the venom gland of the pit viper Bothrops jararaca, was originally attributed to the inhibition of the somatic angiotensm converting enzyme activity with subsequent ant hypertensive effect However recent results suggest broader biological activity may also be involved in the cardiovascular effects of this peptide Here we show that Bj PRO 10c enhances and sustains the generation of nitric made (NO) by regulating argininosuccinate synthase activity and thereby velocity of the citrulline NO cycle Bj PRO 10c-mediated effects not restricted to the cardiovascular system since NO production was also induced in cells of astroglial origin Bj PRO 10c was internalized by C6 astroglioma cells where it induces NO production and upregulation of the citrulline NO cycle cells in a dose dependent fashion In view of that, astroglial cells function as L arginine pool for NO production in neighboring neurons, we suggest a regulatory function for Bj PRO-10c on the metabolism of this gaseous neurotransmitter in the CNS Moreover, proliferation of astroglial cells was reduced in the presence of Bj PRO 10c however, cell death was not induced Since NO donors have been studied for the treatment of solid cancers Bj PRO 10c may serve as structural model for developing drugs to improve the effects of cancer therapy based on the peptide`s ability to augment NO production (C) 2010 Elsevier B V All rights reserved

Replacement of the arginine biosynthesis operon in Xanthomonadales by ateral gene transfer

The role of lateral gene transfer (LGT) in prokaryotes has been shown to rapidly change the genome content, providing new gene tools for environmental adaptation. Features related to pathogenesis and resistance to strong selective conditions have been widely shown to be products of gene transfer between bacteria. The genomes of the gamma-proteobacteria from the genus Xanthomonas, composed mainly of phytopathogens, have potential genomic islands that may represent imprints of such evolutionary processes. In this work, the evolution of genes involved in the pathway responsible for arginine biosynthesis in Xanthomonadales was investigated, and several lines of evidence point to the foreign origin of the arg genes clustered within a potential operon. Their presence inside a potential genomic island, bordered by a tRNA gene, the unusual ranking of sequence similarity, and the atypical phylogenies indicate that the metabolic pathway for arginine biosynthesis was acquired through LGT in the Xanthomonadales group. Moreover, although homologues were also found in Bacteroidetes (Flavobacteria group), for many of the genes analyzed close homologues are detected in different life domains (Eukarya and Archaea), indicating that the source of these arg genes may have been outside the Bacteria clade. The possibility of replacement of a complete primary metabolic pathway by LGT events supports the selfish operon hypothesis and may occur only under very special environmental conditions. Such rare events reveal part of the history of these interesting mosaic Xanthomonadales genomes, disclosing the importance of gene transfer modifying primary metabolism pathways and extending the scenario for bacterial genome evolution.

EFFECT OF EXERCISE ON GLUTAMINE SYNTHESIS AND TRANSPORT IN SKELETAL MUSCLE FROM RATS

P>Reductions in plasma glutamine are observed after prolonged exercise. Three hypotheses can explain such a decrease: (i) high demand by the liver and kidney; (ii) impaired release from muscles; and (iii) decreased synthesis in skeletal muscle. The present study investigated the effects of exercise on glutamine synthesis and transport in rat skeletal muscle. Rats were divided into three groups: (i) sedentary (SED; n = 12); (ii) rats killed 1 h after the last exercise bout (EX-1; n = 15); and (iii) rats killed 24 h after the last exercise bout (EX-24; n = 15). Rats in the trained groups swam 1 h/day, 5 days/week for 6 weeks with a load equivalent to 5.5% of their bodyweight. Plasma glutamine and insulin were lower and corticosterone was higher in EX-1 compared with SED rats (P < 0.05 and P < 0.01, respectively). Twenty-four hours after exercise (EX-24), plasma glutamine was restored to levels seen in SED rats, whereas insulin levels were higher (P < 0.001) and costicosterone levels were lower (P < 0.01) than in EX-1. In the soleus, ammonia levels were lower in EX-1 than in SED rats (P < 0.001). After 24 h, glutamine, glutamate and ammonia levels were lower in EX-24 than in SED and EX-1 rats (P < 0.001). Soleus glutamine synthetase (GS) activity was increased in EX-1 and was decreased in EX-24 compared with SED rats (both P < 0.001). The decrease in plasma glutamine concentration in EX-1 is not mediated by GS or glutamine transport in skeletal muscle. However, 24 h after exercise, lower GS may contribute to the decrease in glutamine concentration in muscle.

Oxidative stress protection of Trypanosomes requires selenophosphate synthase

Selenoproteins are characterized by the incorporation of at least one amino acid selenocysteine (Sec-U) encoded by in-frame UGA stop codons. These proteins, as well as the components of the Sec synthesis pathway, are present in members of the bacteria, archaea and eukaryote domains. Although not a ubiquitous pathway in all organisms, it was also identified in several protozoa, including the Kinetoplastida. Genetic evidence has indicated that the pathway is non-essential to the survival of Trypanosoma growing in non-stressed conditions. By analyzing the effects of RNA interference of the Trypanosoma brucei selenophosphate synthetase SPS2, we found a requirement under sub-optimal growth conditions. The present work shows that SPS2 is involved in oxidative stress protection of the parasite and its absence severely hampers the parasite survival in the presence of an oxidizing environment that results in an apoptotic-like phenotype and cell death. (C) 2011 Elsevier B.V. All rights reserved.

"Det är mycket man inte vill minnas" : Upplevelse av kognitiv rehabilitering och livskvalitet samt innebörd av livskvalitet vid stroke

Syftet med denna kvalitativa studie var att beskriva upplevelse och innebörd av begreppen kognitiv rehabilitering och livskvalitet för personer som hade haft stroke. Studien genomfördes med hjälp av personliga intervjuer. Fem personer ingick i studien, tre män och två kvinnor, alla födda på 30-talet utom en man som föddes på 20-talet. Samtliga var gifta. Personerna rekryterades till studien via en sjuksköterska som hade kännedom om lämpliga personer som blivit utskrivna en kort tid före studiens början. Informanterna intervjuades med hjälp av en intervjuguide med utgångspunkt från två frågeområden som berörde upplevelse av kognitiv rehabilitering och upplevelse och innebörd av livskvalitet efter stroke. Analysen gjordes med hjälp av innehållsanalys. Analysen av de fem intervjuerna gav sex teman; Upplevelse av att inte någon kognitiv rehabilitering har utförts, Upplevelse av att informanten själv förväntades träna upp sina kognitiva funktioner, Strävan efter att leva som vanligt, Förändrad livskvalité, Förändrad livssyn, Betydelsen av det sociala stödet. Det framkom att ingen av informanterna upplevde att det hade genomförts någon kognitiv rehabilitering. Alla upplevde sig däremot ha fått en fullständig fysisk rehabilitering på avdelningen. Informanterna hade som mål med sin rehabilitering att klara av de vardagliga funktionerna i hemmet såsom innan stroken. En av deltagarna upplevde att det förväntades att självständigt träna upp sina kognitiva funktioner. Livskvaliteten idag var att kunna fortsätta leva som förut, vilket förhindrades av vissa inskränkningar motoriskt och kognitivt. Alla värdesatte livet högre idag och accepterade sin situation som den var. Vänskapen med andra var också en viktig del i livskvaliteten.

Lärares syn på elevers grupparbete som en del i skolutveckling

Syftet med detta examensarbete är att belysa på vilket eller vilka sätt lärare i gymnasieskolan förknippar elevers grupparbete med skolutveckling. Vilka pedagogiska tankar ligger bakom lärares användande av grupparbete som arbetsmetod, hur ser de på att träna elever i grupparbete och hur ser de på förhållandet mellan grupparbete och skolutveckling? Undersökningen är av kvalitativ karaktär där metoden för insamling av data består av enskilda intervjuer med sju gymnasielärare som arbetar på både yrkesinriktade och studieförberedande program. Resultatet visar att lärarna som arbetar på rent yrkesinriktade program framförallt ser elevers grupparbete som en förberedelse för deras framtida yrkesliv, medan lärare på studieförberedande program tenderar att tala mer om vilken nytta grupparbete har för eleverna i skolsituationen. Vid en analys av hur lärarna ser på att träna elever i grupparbete ser man att vissa av lärarna är mer konkreta i sitt resonemang kring om och hur de arbetar med att träna eleverna i grupparbete, medan vissa är mer abstrakta i sitt resonemang. Resultatet visar slutligen att lärarna har relativt olika syn på vad skolutveckling är samt att det är inte någon självklarhet att de direkt kopplar ihop elevers grupparbete med skolutveckling.

Fysisk aktivitet för patienter med Kroniskt Obstruktiv Lungsjukdom : en systematisk litteraturstudie

Syfte: Att beskriva hur olika former av fysisk aktivitet kunde påverka patienter med sjukdomen KOL och vilka faktorer som inverkade på dessa patienters möjligheter att vara fysiskt aktiva, samt att beskriva hur sjuksköterskan genom patientutbildning kunde hjälpa patienter till ökad fysisk aktivitet. Metod: Studien har genomförts i form av en systematisk litteraturstudie. Till resultatet har använts 16 kvantitativa och en kvalitativ artikel. Resultat: Resultatet visade att träning både i grupp och individuellt förbättrade livskvalitet, fysisk förmåga och andnöd. Träning motverkade också kakexi och minskade risken för depression. Både konditionsträning och styrketräning var värdefulla träningsformer. Efter en intensivare träningsperiod var det viktigt att bibehålla resultatet, detta kunde ske genom fortsatt träning på hemorten efter rehabilitering och genom att träna regelbundet men inte lika ofta. Faktorer som kunde påverka träning positivt var tillgång till syrgas, även för patienter med saturation över 88 procent, samt ett adekvat näringsintag som var viktigt för att orka träna. Det var värdefullt för sjuksköterskan att notera graden av fysisk aktivitet i omvårdnadsplanen för varje patient, eftersom detta gav information om hur patienten mådde. Det var också viktigt att lyssna till patientens tankar, eftersom fysisk aktivitet hade olika betydelse för olika individer. Genom undervisning kunde sjuksköterskan hjälpa patienten att bli mer fysiskt aktiv. Dels genom att förklara hur den nedåtgående aktivitetsspiralen påverkar, men också genom att stärka patientens självtillit, för att våga vara fysiskt aktiv. En kombination av träning, undervisning och andningsteknik tycktes vara särskilt värdefullt för personer med diagnosen KOL

Förebygga, identifiera och åtgärda : Om elevers läs- och skrivproblematik i årskurs 1-3

Syftet med detta arbete var att belysa faktorer som förebygger svårigheter i läs- och skrivinlärning samt metoder som används för att identifiera vari svårigheterna består och åtgärder som tillämpas för att stödja elever med läs- och skrivproblematik. Den metod som tillämpats har varit en litteraturstudie samt en mindre empirisk undersökning i form av åtta intervjuer med verksamma lärare i årskurs 1-3. Resultatet visar att faktorer som förebygger läs- och skrivproblem är en riklig tal- och skriftspråklig stimulans i hem- och närmiljö samt en medvetet förebyggande metodik i skolan, med fokus på att systematiskt följa varje elevs läsutveckling. Vidare visar resultatet att de metoder som används för att upptäcka och identifiera läs- och skrivsvårigheter både består i olika former av kartläggningsmaterial och lärares kunskaps- och erfarenhetsbaserade förmåga att på daglig basis avläsa var eleverna befinner sig i inlärningsprocessen. Resultatet visar också att de åtgärder som tillämpas sker i såväl mindre elevgrupper som i enskild undervisning, så kallad en-en-pedagogik, med syfte att träna det som eleverna specifikt behöver. Den sistnämnda formen av undervisning, en-en, har i resultatet framkommit som särskilt effektiv. Det framkommer även att lärares möjligheter till kollegialitet är en essentiell fråga för en effektiv undervisning. Sammanfattningsvis konstateras att skolans primära behov är en fråga om huruvida skolan tillförs ökade resurser.  

GIH:s rullskidprojekt : Lärarstudenter GIH 2008 delrapport 2: 2009

Gymnastik – och idrottshögskolan, GIH, har en lång tradition av utbildning inom skidåkning. Redan 1924 genomfördes den första fjällfärden för civila studenter i Jämtland och sedan 1926 har obligatorisk utbildning i turteknik, förlagd till fjällterräng, genomförts (Schantz & Halldén, 1988). Utförsåkning och längdåkning har också länge funnits med som inslag i vinterutbildningen. För närvarande har samtliga program vid GIH (lärarprogrammet, tränarprogrammet och hälsopedagogprogrammet) en obligatorisk vinterutbildning i fjällmiljö, omfattande omkring tre högskolepoäng (cirka två veckors heltidsstudier). Under senare år har en ökande andel av de antagna studenterna uppvisat brister vad gäller grundläggande skidfärdighet, vilket försvårat möjligheterna till breddning och fördjupning, såväl teoretiskt som praktiskt, under vinterutbildningen. De stora skillnaderna i färdighet hos studenterna innebär, förutom svårigheterna att tekniskt och didaktiskt arbeta med olika aspekter av skidåkning med heterogena grupper under en så begränsad tid, även att säkerheten under turåkningsmomentet får större fokus än vad som tidigare varit fallet. Den bristande skidåkningsfärdigheten hos vissa studenter kan bland annat få till följd att de får svårt att genomföra turåkningen. Den vanligtvis otillräckliga snötillgången i Mellansverige gör att träning på "hemmaplan" blir svår att genomföra. I syfte att söka komma till rätta med denna problematik genomfördes ett delprojekt inom ramen för det så kallade "GIH 2008-projektet". Studenter som själva ansåg sig ha en bristande skidteknik, eller betraktade sig som nybörjare i skidåkning, erbjöds delta i projektet. Utöver möjligheten att stödja studenter som saknade eller hade liten tidigare erfarenhet av skidåkning, fanns här möjlighet att prova olika metodiker för didaktiska studier. Denna åtgärd från GIH:s sida att bistå studenter som av geografiska, klimatologiska eller av andra orsaker inte haft möjlighet att tidigare skaffa sig skiderfarenhet kommer sannolikt att bli än mer betydelsefull i framtiden. Nedan presenteras data för stakmomentet och diagonalåkningen i projektet. Ett antal utrustningar, bestående av skidskor, stavar och rullskidor införskaffades och studenterna fick en möjlighet att under några veckor träna rullskidåkning Såväl kvalitativa som kvantitativa metoder användes för utvärdering av träningsprocesser. Denna utvärdering baserades på videofilmning och datorbaserad videoanalys.

Gymnasieelevers uppfattningar om algebra och problemlösning : En undersökning med utgångspunkt i elevernas kön, slutbetyg i grundskolan och val av gymnasieprogram

Syftet med den här uppsatsen är att undersöka elevers uppfattningar om algebra och problemlösning samt granska hur dessa uppfattningar påverkas beroende på elevernas val av gymnasieprogram, kön och slutbetyg i grundskolan. Syftet är vidare att ta reda på vilka eventuella hinder och svårigheter eleverna själva uppfattar då de använder algebra för att lösa matematiska problem. Som metod för att söka svar på syfte och frågeställningar har valts att genomföra en enkätundersökning med elever som går första året på gymnasiet och som läser antingen naturvetenskapsprogrammet eller bygg- och anläggningsprogrammet. Enkätundersökningen består av två delar, en del som undersöker elevers uppfattningar om matematik i allmänhet och algebra och problemlösning i synnerhet, samt en del som försöker reda ut vilka svårigheter eleverna uppfattar då de ska lösa matematiska problem med algebra. Svaren sammanställs genom en analys av vilka eventuella skillnader och likheter som finns beroende på elevernas val av gymnasieprogram, kön och betyg i grundskolan. Resultatet visar på att elever på naturvetenskapsprogrammet som hade MVG i betyg i grundskolan har en mer positiv inställning till algebra och problemlösning i jämförelse med elever från bygg- och anläggningsprogrammet som fått G i betyg. Vad gäller elevernas kön finns det inte några indikationer på att denna faktor har någon större påverkan på deras uppfattningar. Resultatet kan vara en indikation på att elevernas uppfattningar främst påverkas av deras förståelse för det algebraiska tankesättet. Det eleverna upplever som svårast när de ska lösa problem med hjälp av algebra är att översätta den skrivna texten till en algebraisk framställning. När eleverna löser matematiska problem indikerar även resultatet att de till stor del styrs av sina förväntningar och förutfattade föreställningar om uppgiften. Resultatet ger en indikation om att eleverna behöver arbeta mer med problemlösning i olika former för att genom det kunna träna upp sin resonemangsförmåga och sin förmåga att behärska alla de tre faserna, översättning, omskrivning och tolkning, i den algebraiska cykeln.

Coachande ledarskap : En utvärdering av genomförd ledarutveckling inom Borlängekommun

This is a thesis in Personal- och Arbetslivsprogrammet at Dalarna University with thepurpose of evaluating an education initiative in Borlänge kommun. The educationCoaching Leadership is an initiative for the managers in the organization to exercisegood leadership and the education also serves as an incentive for managers. Eightbusiness managers and one from the HR staff have completed the training. Out of thetotal 9 participants in the training, six of them took part in this evaluation. Based on thethesis aim and questions we wanted to explore participants' attitudes to the education,and what skills and abilities they have acquired on the basis of educational goals andcontent. To obtain results, a semi-structured interview methodology was used, this inorder to get answers to predefined questions while the participants would have theopportunity to give an as broad picture as possible.The result of this evaluation demonstrates that the participants are in favor of trainingand they've got the tools, knowledge and ability to apply coaching in their job role,which was included in the educational goals. For the CL-education to promote theorganization's development potential, the participants mentions that it takes time totrain and that employees must have the knowledge of the organization's educationaldirection.