Proyecto constructivo de la variante de la carretera M-302 a su paso por Morata de Tajuña (Madrid)

El presente proyecto se enmarca dentro de un encargo promovido por la Comunidad de Madrid para facilitar el tránsito y la movilidad de los usuarios de la carretera M-302 en las proximidades del casco urbano de Morata de Tajuña. Con la construcción de la variante M-302 a su paso por Morata de Tajuña, se consigue eliminar el tráfico del interior del municipio que afecta a la circulación interior y reduce la calidad de vida de los habitantes de Morata de Tajuña. Además se mejora la seguridad puesto que se reduce el número de intersecciones, y éstas se realizan de forma mucho más legible y sencilla. También se reducen los tiempos de viaje para todos los usuarios que no tengan en su origen o destino el casco urbano de Morata de Tajuña. Todo ello manteniendo unos estándares de calidad, seguridad, medioambiente, salud, tiempo y dinero, propios para una infraestructura de este tipo. El factor ambiental más influyente en el presente proyecto es la presencia del Lugar de Interés Comunitario “Vegas, Cuestas y Páramos del sureste de Madrid”. Debido a que el proyecto constructivo se encuentra en la Vega del Tajuña, el proceso de erosión que ha sufrido la zona ha producido zonas de grandes pendientes, siendo la media del 15% pudiendo llegar a extremos del 50%.

Acondicionamiento de la M-302 desde el cruce con la M-311 a Perales de Tajuña. Variante de Morata de Tajuña

En el presente documento se estudia el acondicionamiento de la M-302 entre la M-311 y Perales de Tajuña así como la variante de población de Morata de Tajuña. El termino municipal de Morata de Tajuña se encuentra al sureste de la Comunidad de Madrid, limitando al oeste con San Martín de la Vega, al este con Perales de Tajuña, al norte con Arganda del Rey y al sur con Chichón y Valdelaguna, en el valle del rió Tajuña, segundo rió de mayor longitud de la Cuenca del Tajo. Este proyecto se enmarcaba dentro de la última fase de un Plan de Variantes de la Comunidad de Madrid, que comprendía la construcción de 12 circunvalaciones en distintas localidades, con el objetivo de mejorar la seguridad vial y la calidad de vida de los vecinos de las mismas. Este proyecto se desarrolla a partir de la petición por parte del Ayuntamiento de Morata de Tajuña a la Dirección General de Carreteras del inicio de los trámites para la construcción de una variante por el norte del pueblo. El objeto del presente Proyecto es la definición completa con el nivel de detalle suficiente de las obras conducentes al acondicionamiento de la M-302 entre la M-311 y Perales de Tajuña para mejorar principalmente las condiciones de seguridad en la vía, así como la construcción de la variante de la M-302 a su paso por Morata de Tajuña, para desviar el trafico de paso por el pueblo.

Arg-302 facilitates deprotonation of Glu-325 in the transport mechanism of the lactose permease from Escherichia coli

A mechanistic model for lactose/H+ symport via the lactose permease of Escherichia coli proposed recently indicates that the permease must be protonated to bind ligand with high affinity. Moreover, in the ground state, the symported H+ is shared between His-322 (helix X) and Glu-269 (helix VIII), whereas Glu-325 (helix X) is charge-paired with Arg-302 (helix IX). Substrate binding at the outer surface induces a conformational change that leads to transfer of the H+ to Glu-325 and reorientation of the binding site to the inner surface. After release of the substrate, Glu-325 is deprotonated on the inside because of rejuxtapositioning with Arg-302. To test the role of Arg-302 in the mechanism, the catalytic properties of mutants Arg-302→Ala and Arg-302→Ser were studied. Both mutants are severely defective in active lactose transport, as well as in efflux or influx down a concentration gradient, translocation modes that involve net H+ movement. In marked contrast, the mutants catalyze equilibrium exchange of lactose and bind ligand with high affinity. These characteristics are remarkably analogous to those of permease mutants with neutral replacements for Glu-325, a residue that plays a direct role in H+ translocation. These observations lend strong support for the argument that Arg-302 interacts with Glu-325 to facilitate deprotonation of the carboxylic acid during turnover.

Peroxo-iron and oxenoid-iron species as alternative oxygenating agents in cytochrome P450-catalyzed reactions: switching by threonine-302 to alanine mutagenesis of cytochrome P450 2B4.

Among biological catalysts, cytochrome P450 is unmatched in its multiplicity of isoforms, inducers, substrates, and types of chemical reactions catalyzed. In the present study, evidence is given that this versatility extends to the nature of the active oxidant. Although mechanistic evidence from several laboratories points to a hypervalent iron-oxenoid species in P450-catalyzed oxygenation reactions, Akhtar and colleagues [Akhtar, M., Calder, M. R., Corina, D. L. & Wright, J. N. (1982) Biochem. J. 201, 569-580] proposed that in steroid deformylation effected by P450 aromatase an iron-peroxo species is involved. We have shown more recently that purified liver microsomal P450 cytochromes, including phenobarbital-induced P450 2B4, catalyze the analogous deformylation of a series of xenobiotic aldehydes with olefin formation. The investigation presented here on the effect of site-directed mutagenesis of threonine-302 to alanine on the activities of recombinant P450 2B4 with N-terminal amino acids 2-27 deleted [2B4 (delta2-27)] makes use of evidence from other laboratories that the corresponding mutation in bacterial P450s interferes with the activation of dioxygen to the oxenoid species by blocking proton delivery to the active site. The rates of NADPH oxidation, hydrogen peroxide production, and product formation from four substrates, including formaldehyde from benzphetamine N-demethylation, acetophenone from 1-phenylethanol oxidation, cyclohexanol from cyclohexane hydroxylation, and cyclohexene from cyclohexane carboxaldehyde deformylation, were determined with P450s 2B4, 2B4 (delta2-27), and 2B4 (delta2-27) T302A. Replacement of the threonine residue in the truncated cytochrome gave a 1.6- to 2.5-fold increase in peroxide formation in the presence of a substrate, but resulted in decreased product formation from benzphetamine (9-fold), cyclohexane (4-fold), and 1-phenylethanol (2-fold). In sharp contrast, the deformylation of cyclohexane carboxaldehyde by the T302A mutant was increased about 10-fold. On the basis of these findings and our previous evidence that aldehyde deformylation is supported by added H202, but not by artificial oxidants, we conclude that the iron-peroxy species is the direct oxygen donor. It remains to be established which of the many other oxidative reactions involving P450 utilize this species and the extent to which peroxo-iron and oxenoid-iron function as alternative oxygenating agents with the numerous isoforms of this versatile catalyst.