Effects that bovine sperm cryopreservation using two different extenders has on sperm membranes and chromatin

The process of cryopreservation impairs sperm cell function, potentially leading to a reduction in fertility. The objectives of the present study were to evaluate the effects that cryopreservation using two different extenders has on sperm motility and mitochondrial function, as well as on the integrity of plasma membranes, acrosomal membranes and chromatin, using practical and objective techniques. The focus of the present study was to identify correlations between alterations in sperm membranes and sperm motility in cryopreserved bovine spermatozoa. Seven ejaculates were collected from eight Simmental bulls (n = 56). After collection, semen volume and concentration were assessed for purposes of dilution. Sperm motility was evaluated subjectively and by computer-assisted semen analysis, morphological characteristics were evaluated by differential interference microscopy, the integrity of plasma and acrosomal membranes, as well as mitochondrial function, were determined using a combination of fluorescent probes containing fluorescein isothiocyanate-Pisum sativum agglutinin, propidium iodide or 5,5`,6,6`-tetrachloro-1,1`,3,3`-tetraethylbenzimidazolearbocyanine iodide. Chromatin integrity was evaluated using the acridine orange technique. The semen was subsequently divided into two aliquots and diluted with one of two extenders (Bioxcell(R) or Botu-Bov(R)), after which both were packaged in 0.5 mL straws and frozen using an automated system. Two straws of semen from each treatment were thawed, and the semen parameters were evaluated as described above. Cryopreservation of sperm reduced motility, damaging plasma and acrosomal membranes, as well as decreasing mitochondrial function. The Botu-Bov(R) extender was more effective in preserving sperm motility and membrane integrity than was the Bioxcell(R) extender. (C) 2007 Elsevier B.V. All rights reserved.

Evaluation of Trypsin Treatment on the Inactivation of Bovine Herpesvirus Type 1 on In Vitro Produced Pre-implantation Embryos

The aim of this study was to evaluate the efficiency of trypsin treatment on the inactivation of bovine herpesvirus type 1 (BoHV-1) on in vitro produced by fertilization and artificially infected bovine embryos. Bovine embryos on day 7 were exposed with 10 mu l of BoHV-1, Los Angeles strain 10(7.5) TCID. These embryos and control embryos were divided in two groups: submitted to the sequential washes or to the trypsin treatment according to the International Embryo Transfer Society (IETS) guidelines. The embryos and the last washing drop of each group were used as inoculum to infect Madin Darby bovine kidney (MDBK) cells and submitted to nested PCR reaction using the primer that encodes the gene conserved region of virus glycoprotein gB. The data have shown that the control embryos and their last washing drop were negative. The exposed embryos that were treated with trypsin have shown positive results on the n-PCR and MDBK culture, and their last washing drop were negative. Our data have demonstrated that the trypsin treatment was not able to eliminate the BHV-1 of the embryos, suggesting an interaction between virus and embryo.

Effects of sperm concentration and straw volume on motion characteristics and plasma, acrosomal, and mitochondrial membranes of equine cryopreserved spermatozoa

The advantages of using cryopreserved semen in equine reproduction are well known. During cryopreservationl spermatozoa undergo many changes that lead to a decrease in fertility. There is no agreement on the ideal sperm dose and concentration to maximize fertility rates. Thus, the objectives of this experiment were to evaluate sperm motion by computer-assisted analysis (CASA), sperm membrane integrity and function with fluorescence probes of cryopreserved sperm at three concentrations: 100 (C100), 200 (C200) and 400 x 10(6) sperm/mL (C400), and two straw volumes (0.50 and 0.25 mL). There was no interaction between sperm concentration and storage volume (P > .05). Sperm motion characteristics were influenced by concentration (C100 > C200 > C400; P < .05). Curvilinear velocity (VCL) in 0.25-mL straws had higher average values (P < .05). Membrane integrity and function were not changed by straw volume (P > .05). However, sperm concentration changed the percentage of cells with intact plasma membrane (C100 > C200 > C400; P < .05) and the percentage of cells with high mitochondrial membrane potential (C100 = C200; P > .05 and C400 < C100 and C200; P < .05). According to this experiment, the best freeing method was that involving 100 x 10(6) sperm/mL, regardless of straw volume.

The rights to a deceased's body and body parts : in the matter of Gray (2000) QSC 390 (12/10/2000).

Decision In the Matter of Gray highlights complications that advancing medical technology causes to the law - case concerns the issue of removal of semen from a deceased man - how the courts deal with matters concerning medical technology in the absence of specific legislation or established case law - legal and moral questions raised by the case.

Unusual ovarian activity in a mare preceding the development of an ovarian granulosa cell tumour

An 8-year-old mare, with a foal at foot, was inseminated on foal heat with frozen semen, with the resultant pregnancy lost between days 34 and 41. The right ovary developed a large anovulatory follicle that was non-responsive to multiple doses of ovulating agents. The follicle eventually appeared to luteinise, although plasma progesterone concentrations did not reflect this. Another follicle developed, responded to GnRH and resulted in a pregnancy from frozen semen that went to term with a healthy foal. When the mare was examined after foaling, the structure on the right ovary appeared to be a granulosa cell tumour; the left ovary was smaller than normal and non-functional. Surgical removal of the right ovary before increasing photoperiod resulted in a return to function of the left ovary and a pregnancy to frozen semen on the second cycle following removal. Figures showing concentrations of inhibin, progesterone, androstenedione, oestradiol and testosterone are presented for this entire period. Unusual ovarian activity in the mare might be a prelude to the development of a granulosa cell tumour.

Birth of Koalas Phascolarctos cinereus at Lone Pine Koala Sanctuary following artificial insemination

This paper documents the successful development of an artificial insemination (AI) programme for the Koala Phascolurctos cinereus. The protocols for trials involving two methods to induce ovulation and two insemination techniques are described. In Trial 1, interrupted coitus using a 'teaser'♂ successfully induced ovulation in nine Koalas. Five ♀♀ were inseminated while conscious using a modified 'foley catheter' (Cook insemination catheter) resulting in the births of two offspring. The other four ♀♀ were anaesthetized and inseminated using a technique which allowed visualization of the most cranial portion of the urogenital sinus, where semen was deposited using a 3.5 Fr. 'Tom-cat catheter' (urogen-itoscopic insemination). Three of the four ♀♀ inseminated by this technique produced pouch young. Microsatellite analysis of DNA from the pouch young excluded the teaser ♀♀ as possible sires, confirming that all offspring were sired by donor sperm. In Trial 2, eight ♀♀ were induced to ovulate by injecting them with 250 International Units of human chorionic gonadotrophin (hCG). A luteal phase was confirmed in all eight ♀♀ but only one gave birth following urogenitoscopic insemination. The Koala pouch young in this study are the first of any marsupial to be conceived and born following A1 procedures. Details of the A1 procedures used are presented and the significance of A1 to the conservation biology of P. cinereus discussed.

Tumor odontogênico adenomatóide associado a cisto dentígero: relato de um caso incomum

O tumor odontogênico adenomatóide é uma lesão relativamente incomum, que acomete preferencialmente indivíduos do sexo feminino durante a segunda década de vida, exibindo como sítio de predileção a região anterior da maxila. A lesão geralmente está associada à coroa de um dente incluso, comumente o canino. Neste trabalho é relatado o caso de um tumor odontogênico adenomatóide associado a cisto dentígero ocorrendo na região maxilar esquerda, em paciente do sexo feminino com 13 anos de idade, discutindo-se, ainda, as características clínicas, radiográficas, histopatológicas e terapêuticas do caso.

Fístula oroantral e retalho mucoso geniano: revisão de 25 casos

A fístula oroantral é a comunicação patológica entre cavidade oral e seio maxilar, quase sempre decorrentes de traumatismos durante procedimentos dentários. OBJETIVO: Apresentar experiência de 25 casos. CASUÍSTICA E MÉTODOS: Realizado estudo retrospectivo de pacientes com FOA no período de 1996 a 2000. O diagnóstico incluiu exame otorrinolaringológico, endoscopia nasal ou da fístula, tomografia computadorizada das cavidades paranasais, pesquisa bacteriológica, fúngica e análise patológica. RESULTADOS: Encontrados 25 casos, sendo 10 de segundo molar, 8 de primeiro molar, 6 de segundo pré-molar e 1 de canino. Todos foram operados pela técnica de Caldwell-Luc, reavivamento das bordas da fístula, meatotomia média e rotação de retalho mucoso geniano. DISCUSSÃO: Nas fístulas de alto débito (n=14), colocou-se enxerto ósseo da própria parede anterior do seio. Todos, exceto um, tiveram resultado cirúrgico bom. A cultura bacteriológica (n=19) demonstrou estreptococos pneumoniae (13), haemophilus influenzae (6), moraxella catarrhalis (2), estafilococos aureus (2). Encontrado aspergilus niger em um caso que apresentava imagem radiológica de bola fúngica. CONCLUSÕES: Após 30 dias, os resultados foram bons em todos, exceto um dos casos. Este foi reoperado com colocação de enxerto ósseo, inicialmente não utilizado, tendo sucesso. Após 6 meses, todos os 23 pacientes localizados não apresentavam problemas.

Estimativa de populações canina e felina domiciliadas em zona urbana do Estado de São Paulo

OBJETIVO: Dada a importância do conhecimento acerca da população de cães e gatos domiciliados para o adequado planejamento e avaliação das ações de controle da raiva em áreas urbanas, propõe-se a utilização de um valor preciso de estimativa dessas populações com base em indicadores populacionais humanos. MÉTODOS: Foi calculada a razão entre as populações humana e animal (canina e felina) por meio de inspeções domiciliares, no Município de Taboão da Serra, SP. O município foi dividido em duas áreas homogêneas distintas socioeconomicamente, de acordo com o algoritmo da média k, de modo a permitir a comparação das razões homem:animal (cão e gato) das áreas homogêneas. RESULTADOS: A razão entre a população humana e a população canina foi 5,14 e a entre a humana e a felina foi 30,57. Não foi observada diferença significativa ao comparar-se as razões entre as populações humana e animal das áreas homogêneas. CONCLUSÕES: A adoção de uma metodologia de estimativa populacional canina e felina domiciliada, baseada em indicadores populacionais humanos, é a mais indicada e facilmente exeqüível quando comparada ao censo canino.

Identificação e análise de movimento humano com ultrassons

Faz-se nesta dissertação a análise do movimento humano utilizando sinais de ultrassons refletidos pelos diversos membros do corpo humano, designados por assinaturas de ultrassons. Estas assinaturas são confrontadas com os sinais gerados pelo contato dos membros inferiores do ser humano com o chão, recolhidos de forma passiva. O método seguido teve por base o estudo das assinaturas de Doppler e micro-Doppler. Estas assinaturas são obtidas através do processamento dos ecos de ultrassons recolhidos, com recurso à Short-Time Fourier Transform e apresentadas sobre a forma de espectrograma, onde se podem identificar os desvios de frequência causados pelo movimento das diferentes partes do corpo humano. É proposto um algoritmo inovador que, embora possua algumas limitações, é capaz de isolar e extrair de forma automática algumas das curvas e parâmetros característicos dos membros envolvidos no movimento humano. O algoritmo desenvolvido consegue analisar as assinaturas de micro-Doppler do movimento humano, estimando diversos parâmetros tais como o número de passadas realizadas, a cadência da passada, o comprimento da passada, a velocidade a que o ser humano se desloca e a distância percorrida. Por forma a desenvolver, no futuro, um classificador capaz de distinguir entre humanos e outros animais, são também recolhidas e analisadas assinaturas de ultrassons refletidas por dois animais quadrúpedes, um canino e um equídeo. São ainda estudadas as principais características que permitem classificar o tipo de animal que originou a assinatura de ultrassons. Com este estudo mostra-se ser possível a análise de movimento humano por ultrassons, havendo características nas assinaturas recolhidas que permitem a classificação do movimento como humano ou não humano. Do trabalho desenvolvido resultou ainda uma base de dados de assinaturas de ultrassons de humanos e animais que permitirá suportar trabalho de investigação e desenvolvimento futuro.

Opresión internalizada y prácticas sexuales de riesgo en varones homo-y bi-sexuales de México

OBJETIVO: Analizar la relación entre prácticas sexuales de riesgo para infección por VIH y la opresión que éstos han internalizado debido al prejuicio y discriminación que se enfrentan varones bisexuales y homosexuales. MÉTODOS: Estudio observacional, transversal, y analítico. Entre septiembre y noviembre del 2001 se aplicó un cuestionario a 318 hombres que acudieron a organizaciones e instituciones ubicadas en la Ciudad de México. Las variables indagadas fueron: homofobia internalizada, percepción del estigma, ocultamiento y prácticas sexuales en los seis meses previos a la encuesta. Mediante modelos de regresión logistica se estimó la relación (odds ratios) de las formas de opresión internalizada con las prácticas sexuales de riesgo, ajustando por variables confusoras. RESULTADOS: De los entrevistados, 256 habían tenido por lo menos una relación sexual en los últimos seis meses, 50 respondieron no haberlas tenido y 12 no contestaron esta pregunta. Más del 30% de los varones no había utilizado preservativo cuando habían tenido sexo insertivo o receptivo. La homofobia internalizada se asoció con mayor riesgo de consumo de drogas antes o durante las relaciones sexuales, sexo insertivo sin condón, sexo receptivo sin condón y el tragar semen de otros hombres. CONCLUSIONES: Sigue siendo frecuente la adopción de prácticas sexuales de riesgo entre los varones bi y homosexuales. De las tres formas de opresión internalizada que se investigaron, la que se asoció con mayor probabilidad de prácticas sexuales de riesgo fue la homofobia internalizada. Esta información puede ser incorporada en el diseño de programas de promoción de uso de condón entre varones bi y homosexuales.

Avaliação da criopreservação e posterior capacidade fecundante de sémen de touto da Raça Brava a partir da recolha post-mortem

Dissertação de Mestrado, Engenharia Zootécnica, 24 de Abril de 2015, Universidade dos Açores.

Efeito de diferentes concentrações de antioxidantes na proteção contra o stress oxidativo e na viabilidade espermática durante a criopreservação do Sémen Equino

Dissertação de Mestrado, Engenharia Zootécnica, 4 de Janeiro de 2016, Universidade dos Açores.

Estudo, ao microscópio óptico e eletrônico, do rim de caes natural e experimentalmente infectados com Leishmania (Leishmania) chagasi

Os autores estudam os rins de 4 cães infectados com Leishmania (Leishmania) chagasi. Dois animais (um macho e uma fêmea) naturalmente infectados foram sacrificados 18 meses após sua permanência no laboratório. Dois machos foram inoculados por via endovenosa, com lxlO6 promastigotas da cepa MHO/BR/70/BH46 e sacrificados após 18 meses e 2 anos, respectivamente. Em todos os animais os rins estavam lesados. As alterações encontradas foram: (1) glomerulonefrite mesangioproliferativa focal ou difusa, com pronunciada hipertrofia e hiperplasia das células mesangiais e com alargamento da matriz; (2) espessamento da membrana basal com depósitos eletrondensos; (3) nefrite intersticial intertubular crônica com exsudação plasmocitária intensa. (4) degeneração albuminosa dos túbulos renais. Baseados nos achados os autores discutem os prováveis mecanismos patogenéticos.

El ciclo evolutivo experimental de Diphyllobothrium erinaceieuropei en Paracyclops fimbriatus, larvas de Bufo arenarum y caninos

El objetivo del trabajo fue lograr la reproducción experimental del ciclo evolutivo de Diphyllobothrium erinaceieuropei Rudolphi 1819 (Cestoda, Pseudophyllidea) con la intervención de Paracyclops fimbriatus y larvas de Bufo arenarum como hospedadores intermediarios y caninos como hospedadores definitivos. Los huevos del parásito se obtuvieron de heces de caninos infectados naturalmente y se conservaron refrigerados en agua. Se incubaron 7 días a 25°C para que desarrollaran los coracidios y se pusieron en recipientes que contenían a los copépodos mencionados. Al cabo de 12 días a 22,6°C (promedio) se hallaron procercoides maduros en ellos y se agregaron 10 renacuajos de Bufo arenarum. Estos se examinaron por disección 22, 23, 61 y 107 días después, hallándose en todos 1 o más plerocercoides (Temperatura promedio: 24,9°C). El día 23, de 6 renacuajos se obtuvieron 49 plerocercoides, de los cuales se administraron 28, por vía oral, a una perra. El día 107, 3 de 11 plerocercoides obtenidos de un renacuajo se le dieron a otra perra por la misma vía. Se hallaron huevos del cestode en las heces del primer canino a partir del día 22 posterior a la infección (p.i.) y a los 30 días p.i., segmentos de estróbila. En el segundo canino se hallaron huevos a los 30 días p.i..