Marcadores de superfície de Células-tronco: estudo de reação cruzada inter-espécies

Mesenchymal stem cells (MSCs) are adult multipotent cells with fibroblastoid morphology and adherent to plastic. Furthermore, they can be obtained from different sources. Besides bone marrow, these cells are taken from umbilical cord blood, umbilical vein, saphenous vein, peripheral blood, arteries, liver and fetal pancreas, placenta, dental pulp and adipose tissue. MSCs derived from adipose tissue are important because of the abundant number of cells that can be obtained from this tissue, easy access and little discomfort to the patient. This study compared two techniques for obtaining MSCs from adipose tissue: mechanical dissociation (MD) and enzymatic digestion (ED). We also analyzed the inter-species cross-reactions using commercial monoclonal antibodies directed against surface antigens of stem cells from different species: mouse, horse, rabbit, monkey and human. We found that MD technique is favorable in relation to ED within 15 days of culture, and ED is more efficient in the first days of culture. The data also showed that MD causes less damage to cellular DNA. About inter-species cross-reactions, the monoclonal antibody A69 directed against stem cells from rabbits, which can be used in veterinary medicine, particularly in research involving horses

Falência renal aguda em pequenos animais

The pets, mostly dogs and cats are susceptible to a variety of situations that can lead to acute kidney failure, such as infection and intoxication, besides other common causes such as dehydration or other pre-existing diseases. The abrupt decrease in renal function in these animals characterizes a severe clinical condition and requires specialized veterinary medical care since it increases the death. Early diagnosis is an important factor for the survival of these animals and so is the appropriate treatment. New technologies on diagnosis and treatment of serious diseases in veterinary medicine have made acute renal failure successfully reversed by hemodialysis in cases where conventional therapy may not be effective. In cases like that, hemodialysis treatment may be the only chance of survival for the animals, which makes this therapy more and more important and necessary, especially in referral centers of veterinary assistance

Estudo experimental da indução magnética

This work will discuss how magnetic fields can be produced, either generated by magnets, natural, artificial, or even by an electric current going through a wire, as discovered by Oersted. Besides the theoretical content, experimental studies on magnetic induction and on the Laws of Faraday and Lenz will be performed. In the Magnetic Induction experiment, the electromotive force generated by varying the flow of the field B in a solenoid, depending on the variation of the current intensity and frequency associated with it will be measured; the experiment on the Laws of Faraday and Lenz the electromotive force produced by the relative movement of the magnet in relation to a coil. Thus, this study experimental verification of magnetic induction using solenoids and magnets; analysis of magnetic induction by Faraday's Law and Lenz's Law

Expressão do mRNA do gene Capn 2 e índice de apoptose de ilhotas pancreáticas de rato tratadas com fibrilas de amilina e com oligômeros de amilina de tamanho intermediário

O depósito de amilina é um achado histopatológico freqüente em pacientes portadores de diabetes melito tipo 2 (DM 2) e parece estar relacionado à disfunção da célula beta pancreática característica desta doença. Apenas as moléculas de amilina que sofrem agregação in vivo, tal como a amilina humana, são citotóxicas para as células beta, enquanto as variedades não agregantes, como a amilina de rato, não apresentam efeito deletério. Com o objetivo de compreender melhor os mecanismos de toxicidade associados à forma agregante da amilina, um projeto em andamento em nosso laboratório estudou, por micro-arranjos de cDNA, o perfil de genes modulados pela amilina humana em ilhotas pancreáticas murídeas, comparando duas situações específicas: ilhotas tratadas com fibrilas de amilina (“amilina madura”) e ilhotas tratadas com oligômeros de tamanho intermediário (“amilina fresca”), já que evidências recentes apontam para um efeito deletério apenas de oligômeros de amilina. As ilhotas foram isoladas a partir de ratos Wistar, mantidas em cultura por 24 horas e a seguir tratadas com 10

Associação do hormônio tireoidiano ao estrógeno em células de rato ROS 17/2.8 (modelo experimental de células osteoblásticas)

Os mecanismos pelos quais o hiper e hipotireoidismo afetam o osso durante a menopausa são pouco conhecidos. O objetivo deste estudo foi verificar a ação do hormônio triiodotironina (T3), em diferentes concentrações associado ao estrógeno (E2) em concentração infra-fisiológica (condição de menopausa), sobre a proliferação de células de rato ROS 17/2.8, através de uma curva de crescimento para obtenção do tempo de dobramento (TD). As células ROS 17/2.8 são consideradas modelo de células osteoblásticas e foram cultivadas em meio HAM F-12, e submetidas ao tratamento hormonal com as combinações das concentrações fisiológica, infrafisiológica e suprafisiológica de T3 e infra-fisiológica de E2. Utilizamos como grupo controle aquele tratado com as concentrações fisiológicas dos dois hormônios. Para cada concentração hormonal foram realizadas 5 repetições, e as células contadas manualmente nos dias 1, 3, 5 e 7, após o início da adição hormonal. A análise estatística utilizada foi a técnica da análise de variância não paramétrica, complementada com teste de comparações múltiplas. Baseando-se nos resultados obtidos, pode-se concluir que o crescimento das células ROS 17/2.8 é afetado pelos tratamentos hormonais, em especial quando a concentração infrafisiológica de E2 está associada à concentração suprafisiológica de T3, aumentando o tempo de dobramento celular. Este efeito poderia tornar o metabolismo do osso mais lento, prejudicando a neoformação óssea em pacientes menopausadas e hipertireoidéas

Efeito do diabetes sobre o crescimento puberal da próstata de rato: avaliação hormonal, imunocitoquímica e bioquímica

Adequate testosterone levels are necessary for the development, growth and maintenance of the male reproductive system. Testosterone deficiency is common in men with diabetes in whom it may contribute to impaired performance, with consequent reduction of the activity of the androgen regulated organs, such as the prostate. However, little attention has been given to the plasma dihydrotestosterone (DHT) level, the most potent androgen, nor to the expression of the androgen receptor (AR), insulin-like growth factor type I (IGF-1) and receptor (IGF-1R) in target tissues. Here, we investigated the effect of type I diabetes mellitus on DHT plasma levels and on prostate AR, IGF-1 and IGF-1R expression during rat pubertal growth. Diabetes was induced in prepubertal male rats through administration of streptozotocin (STZ; 40 mg/kg). Diabetic, diabetic treated with insulin, and age-matched control animals were killed by overdoses of pentobarbital. The ventral prostatic lobe (VP) was dissected, weighed and processed for immunohistochemistry for AR, IGF-1 e IGF-1R; plasma T and DHT levels were also determined. Hyperglycemia at puberty reduced VP weight gain to about 50% and plasma T level to about 80% of the control levels. In contrast there were no changes in plasma DHT levels. Insulin replacement restored the VP weight gain, but not the plasma T levels, which remained 90% below the ones of controls. Immunohistochemistry showed that AR, IGF-1 and IGF-1R expression in the prostate epithelial cells did not change with hyperglycemia or insulin replacement. Thus, the AR expression in the prostate epithelial cells appears to be regulated by DHT, and to a minor extent it also controls glandular growth

Avaliação da atividade do tipo ansiolítica e antidepressiva do óleo essencial de Cananga odorata por meio de procedimento sequencial em camundongos

Os distúrbios do sistema nervoso central mais comuns relatados no mundo são a ansiedade e a depressão, com grande incidência de casos nos quais aparecem juntos. Os tratamentos utilizados na clínica além de não serem efetivos na totalidade dos casos podem, por vezes, apresentar diversos efeitos não desejados. Assim, na busca novas drogas mais efetivas e com menor incidência de efeitos adversos, a Cananga odorata (Lam.) Hook. f. & Thomson aparece como uma alternativa. Esta espécie vegetal é utilizada na aromaterapia como na prevenção do estresse, ansiedade e depressão (BIRD, 2003). A busca de novas ferramentas terapêuticas depende do uso de animais de experimentação, e com as discussões na sociedade científica sobre o uso de animais, há uma maior preocupação em se desenvolver novas técnicas experimentais onde se possa aplicar os conceitos dos 3Rs objetivando a redução (Replacement) do número de animais, sua substituição (Reduction) e o refinamento (Refinement) das técnicas experimentais. Neste trabalho avaliou-se a atividade ansiolítica e antidepressiva do óleo essencial (OE) de Cananga odorata, em animais que foram sucessivamente submetidos a testes para avaliar a atividade motora, ansiolítica e antidepressiva. Camundongos machos foram tratados por via oral com OE nas doses de 0,1; 1, 10 e 100 mg/kg, e após 30 minutos foram submetidos ao teste do Campo Aberto, da Caixa Claro-Escuro e Suspensão pela Cauda, nesta ordem, com um intervalo de 30 minutos entre eles. Os resultados indicaram que a seqüência de testes é adequada para a avaliação destas atividades com economia de tempo, animais e drogas

Diabete moderado induzido em diferentes fases da vida de ratas Wistar: repercussões na reprodução materna e na freqüência de anomalias fetais

Experimental models are necessary to elucidate pathophysiological mechanisms not yet understood in humans. To evaluate the repercussions of the diabetes, considering two methodologies, on the pregnancy of Wistar rats and on the development of their offspring. In the 1st induction, female offspring were distributed into two experimental groups: Group streptozotocin (STZ, n=67): received the β-cytotoxic agent (100mg STZ/kg body weight - sc) on the 1st day of the life; and Non-diabetic Group (ND, n=14): received the vehicle in a similar time period. In the adult life, the animals were mated. After a positive diagnosis of pregnancy (0), female rats from group STZ presenting with lower glycemia than 120 mg/dL received more 20 mg STZ/kg (ip) at day 7 of pregnancy (2nd induction). The female rats with glycemia higher than 120mg/dL were discarded because they reproduced results already found in the literature. In the mornings of days 0, 7, 14 and 21 of the pregnancy glycemia was determined. At day 21 of pregnancy (at term), the female rats were anesthetized and killed for maternal reproductive performance and fetal development analysis. The data were analyzed using Student-Newman-Keuls, Chi-square and Zero-inflated Poisson (ZIP) Tests (p<0.05). STZ rats presented with increased rates of pre (STZ=22.0%; ND=5.1%) and post-implantation losses (STZ=26.1%; ND=5.7%), reduced rates of fetuses with appropriate weight for gestational age (STZ=66%; ND=93%) and reduced degree of development (ossification sites). Conclusion: Mild diabetes led a negative impact on maternal reproductive performance and caused intrauterine growth restriction and impaired fetal development

Avaliação do efeito terapêutico da associação proteoglicano /vitamina D3 na artrite experimental

A artrite reumatóide (AR) é uma doença inflamatória crônica de caráter autoimune que compromete as articulações. A maioria das terapias aprovadas para o tratamento desta e outras patologias autoimunes é baseada na inibição global da resposta imune, o que aumenta a susceptibilidade aos agentes infeciosos. O objetivo geral deste projeto foi definir se a associação de vitamina D (VitD3) com o antígeno proteoglicano (PG) é tolerogênica e serve como medida terapêutica. Para isso, utilizamos o modelo de artrite experimental obtido pela imunização de camundongos BALB/c com PG. Inicialmente, os animais foram imunizados com diferentes doses do antígeno específico (PG) na presença de VitD3 para determinação da dose tolerogênica. O potencial terapêutico da estratégia mais tolerogênica foi testado no período pré-clínico da doença, isto é, no período após o aparecimento do nível máximo de anticorpos anti-PG, mas antes das manifestações clínicas da artrite (eritema e edema articular). A eficácia terapêutica foi avaliada através da incidência de artrite e do escore clínico da doença. O possível mecanismo imunológico envolvido no efeito terapêutico foi estudado por avaliação dos níveis de citocinas (IL-6, TNF-α, IFN-γ, IL-10 e IL-17) produzidas por células esplênicas estimuladas in vitro com PG. Analisados em conjunto, os resultados obtidos mostraram que os três procedimentos (PG, VitD3 e PG+VitD3) determinaram efeito terapêutico. Entretanto, a análise mais detalhada, incluindo número de animais com escore clínico maior que oito (escore > 8), início dos sintomas clínicos e escore máximo atingido, sugere que o uso de PG50 (50μg de PG) associado à VitD3 ou o uso isolado de VitD3 foram os procedimentos terapêuticos mais eficazes. A produção mais elevada de IL-10 nestes dois grupos sugere contribuição desta citocina neste efeito terapêutico

Efeitos da interação entre o uso de doses suprafarmacológicas de decanoato de nandrolona e do exercício físico sobre a próstata de ratos adultos

Os hormônios esteróides anabólico-androgênicos (EAA) compreendem a testosterona e seus derivados. Atletas e não atletas interessados em aumentar o desempenho esportivo, a força, a aparência física e a massa muscular têm utilizado esteróides anabólico-androgênicos sintéticos (EAAs) sem indicação médica. O uso de EAAs pode causar câncer de próstata, doença coronariana e esterilidade. No presente trabalho, avaliou-se os efeitos de altas doses de decanoato de nandrolona, do exercício físico resistido e da interação desses fatores sobre os lobos prostáticos de ratos machos adultos. Vinte ratos foram divididos aleatoriamente em quatro grupos experimentais e tratados e pesados por oito semanas: Esteróide + Exercício (EE), Sedentário + Esteróide (ES), Veículo + Exercício (VE) e Veículo + Sedentário (VS). Eles receberam injeção i.m de decanoato de nandrolona (5mg/Kg) e veículo (propilenoglicol) (0,2 mL/Kg). O peso absoluto corpóreo e do lobo ventral da próstata foi aferido. Os lobos prostáticos foram coletados, dissecados e processados, empregando-se técnicas microscópicas (histológicas, histoquímicas e imunohistoquímicas) e morfométricas. Os dados foram analisados por ANOVA bifatorial e Tukey (p<0,05). Alterações estatisticamente significativas nas massas corpórea, do lobo ventral, no índice de proliferação celular, na população de células basais e na análise dos volumes relativos dos componentes prostáticos (epitélio, estroma e lúmen) foram observadas. O decanoato de nandrolona determinou o aumento da proliferação celular, sugerindo o desenvolvimento da hiperplasia hormonal. De modo geral, as respostas não foram homogêneas para os parâmetros analisados, visto que os tecidos apresentam níveis de expressão de receptores de andrógenos, afinidade de ligação e vias metabólicas de conversão... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo)

Os efeitos do lupus eritematoso sistêmico no sistema urinário de pequenos animais

Systhemic lupus erythematous is a imunomediated disorder witch affects primarly dogs between two and nine years. Clinical manifestations are very diverse, including renal signs, that may lead to chronic renal disease, and dermatologic and joint sings. Systhemic lupus erythematous diagnostic is a challange to the clinician, due to its diverse list of differecial diagnoses and its low availability of specific tests. The treatment consists of corticosteroids and imunomodulators, and supportive therapy that inhibits the progression of the disease. Monitoring the animal with systhemic lupus erythematous is important, due to its recurrent caracteristic

Determinação de genes potencialmente responsivos à radiação ionizante através de aprendizado de máquina

A predição da resposta do tumor a radioterapia e a questão mais importante durante o tratamento de pacientes com câncer. Como consequência, a predição de genes que sejam responsivos a radiação ionizante e uma possibilidade para a melhoria dos resultados clínicos e a otimização das doses as quais os pacientes são submetidos ao longo do tratamento. Juntamente com esses dados, é possível obter respostas sobre os mecanismos de resistência a radiação dos tumores e até mesmo a identificação de biomarcadores responsáveis pela resistência a radiação ionizante que podem ser potenciais para o desenvolvimento de novas drogas visando a proteção de tecidos saudáveis. A determinação experimental dos genes que sejam responsivos à radiação ionizante é algo caro e que demanda muito tempo e trabalho; porém, se utilizarmos uma forma computacional de direcionar os estudos experimentais diretamente aos genes que têm mais potencial para serem responsivos à radiação ionizante, as pesquisas podem ser mais direcionadas e específicas. Para determinar essa característica, construímos, analisamos e determinamos os dados da topologia da rede integrada de interações moleculares entre genes humanos, contendo interações físicas entre proteínas, interações metabólicas e interações de regulação transcricional. Os dados topológicos foram utilizados como atributos de treinamento para o aprendizado de máquina, no qual os genes conhecidamente responsivos à radiação ionizante foram apresentados a um algoritmo de árvore de decisão que gerou modelos de predição com índices de sensibilidade e precisão de 5% e 72%, respectivamente. Os índices de acerto obtidos para os conjuntos de teste foram satisfatórios, retornando 91% dos genes conhecidos como responsiveis à radiação ionizante utilizados para o treinamento da árvore de decisão. Nós aplicamos o modelo de predição na rede integrada e atribuímos probabilidades ...

Estudo da influência alimentar na etiologia da urolitíase em cordeiros

Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo (FAPESP)

Avaliação do balanço nitrogenado e aparecimento de nitrogênio uréico como marcadores de catabolismo, infecção e mortalidade em pacientes com lesão renal aguda em diálise

Pós-graduação em Fisiopatologia em Clínica Médica - FMB

Aspectos histopatológicos e expressão de receptores hormonais (AR e ERα) na próstata de ratos expostos ao Di-n-Butil-Ftalato (DBP) desde o período fetal, iniciados pela N-Metil-N-Nitrosuréia (MNU)

Tendo em vista a problemática mundial com relação à degradação dos materiais plásticos e sua dispersão no meio ambiente, e diante de estudo realizado anteriormente onde se observou alterações histopatológicas e bioquímicas na próstata de animais expostos ao DBP (Di-N-Butil-ftalato) no período perinatal, este estudo teve por objetivo avaliar o potencial carcinogênico do DBP administrado desde o período fetal e após iniciação pelo MNU em um modelo de carcinogênese prostática. Ratas prenhes foram divididas em 4 grupos experimentais: 2 tratados: n=16/grupo (TDBP100 e TDBP500) e 2 controles: n=8/grupo (CN e CMNU). O grupo TDBP100 foi exposto ao DBP (100 mg/kg) e o TDBP500 a 500 mg/kg do 15º. dia de gestação (DG15) até a 21º. dia pósnatal (DPN21), enquanto que os animais controle receberam o veículo. Após o desmame, os machos foram separados e os grupos tratados e CMNU receberam dose única de MNU (50 mg/Kg, i.p.) na 6ª. semana pós-natal. Metade dos animais tratados (n=8/grupo) continuaram recebendo o DBP (DBP100+ e DBP500+) após o desmame em doses semanais até o dia do sacrifício (DPN180), enquanto os demais foram mantidos pelo mesmo período sem tratamento (DBP100- e DBP500-).Após a aplicação do MNU, os animais foram submetidos a injeções semanais de Cipionato de Testosterona (promotor) 2mg/aplicação. No dia do sacrifício, o sangue foi coletado, os órgãos reprodutores foram pesados e fragmentos do lobo ventral da próstata foram processados para inclusão em resina e Paraplast para as análises estruturais; e imunocitoquímicas para a detecção de AR e ER. Fragmentos de próstata ventral foram congelados e estocados a -80ºC e após extração das proteínas, estas foram destinadas à reação de Western Blot para avaliar a expressão das mesmas proteínas. Houve diminuição na distância anogenital nos animais DBP500 no DPN1 quando comparado com o grupo controle apontando para o efeito efetivo do DBP ...