Surtos de enfermidades transmitidas por alimentos causados por Salmonella Enteritidis

OBJETIVO: São descritos surtos de salmonelose notificados no período de julho de 1993 a junho de 1997 na região Noroeste do Estado de São Paulo, Brasil, tendo em vista os vários surtos de veiculação alimentar ocasionados por Salmonella nessa região. MÉTODO: Foram obtidos 19 inquéritos epidemiológicos para análise de dados, 87 amostras de fezes e 38 amostras de alimentos, incluindo 12 de ovos para análise microbiológica. Cepas de Salmonella foram submetidas a sorotipagem, fagotipagem e teste de sensibilidade a 13 agentes antimicrobianos. RESULTADOS: Foram acometidas 906 pessoas com 295 hospitalizações. Cepas de Salmonella Enteritidis Fagotipo 4 foram isoladas de 80,5% das coproculturas, de todas amostras de alimentose de 41,7% dos ovos. Em 22 (95,7%) surtos os a salmonela foi veiculada por alimentos contendo ovos crus ou semicrus. Os testes de sensibilidade a antimicrobianos revelaram sensibilidade à maioria das cepas. CONCLUSÕES: Considerando os resultados obtidos, torna-se necessária a implantação e intensificação de medidas de controle na produção e armazenamento dos ovos, além da orientação à população quanto aos riscos no consumo inadequado desse alimento.

Leishmaniose cutânea na Amazônia: registro do primeiro caso humano de infecção mista, determinado por duas espécies distintas de Leishmnias: Leishmania brasiliensis e Leishmania mexicana amazonensis

Fez-se o registro, na Amazônia, do primeiro caso humano de infecção cutânea mista determinada por duas espécies distintas de Leishmania: a Leishmania braziliensis braziliensis e a Leishmania mexicana amazonensis. As duas amostras, em questão, foram isoladas de lesões distintas de um mesmo paciente, e a caracterização das espécies foi feita com base em observações de infecção experimental em hamsters, comportamento em meios artificiais de cultura, desenvolvimento de infecção experimental em Lutzomyia longipalpis, e eletroforese de isoenzimas em gel de amido. Conclui-se ser de interesse o achado que, combinado com o fato já conhecido de ausência de imunidade cruzada entre a maioria das leishmânias, sugere a necessidade do emprego de uma vacina polivalente para a região.

Ecological aspects of American cutaneous leishmaniasis: 6. Man-biting sandfly fauna of a patch of residual forest in the middle and north-eastern region of the São Paulo State, Brazil

This report shows the phlebotomine vectorial role in the endemic cutaneous leishmaniasis situated in the middle and north-eastern region of the São Paulo, Brazil. Analysis of information encloses a sandfly man-biting fauna of four different patches of residual forest. So, using the human-bait and Shannon trap for a period of one year we have caught 16,869 sandflies. The predominance of Lutzomyia intermedia (85,6%) was clear. Moreover, the low density of Lutzomyia whitmani and Lutzomyia pessoai and their epidemiological implications at present and in the past are discussed. Information about the daily activity of some species is given and we emphasize for the first time, the diurnal activity of Lutzomyia firmatoi in the São Paulo State.

Aspectos ecológicos da leishmaniose tegumentar americana: 8. avaliação da atividade enzoótica de Leishmania (Viannia) braziliensis, em ambiente florestal e peridomiciliar, região do Vale do Ribeira, Estado de São Paulo, Brasil

A evidência da transmissão extraflorestal da leishmaniose cutâneo-mucosa na região do Vale do Ribeira ensejou o presente estudo epidemiológico prospectivo, visando avaliar a atividade enzoótica de L. (V.) braziliensis. A pesquisa paratisológica da infecção natural em pequenos mamíferos e população canina foi complementada com o teste de imunofluorescência indireta (IFI) para cães e captura de flebotomíneos em ambiente florestal e peridomiciliar. A positividade para o teste sorológico e exame parasitológico somente foi observada para cães residentes e com taxas de 5,6 e 2,4%, respectivamente. Entre animais silvestres e sinantrópicos capturados, destacam-se os pertencentes a Oryzomys (Oligoryzomys) e Rattus rattus, ambos assinalados em proporções equivalentes (29,3%), em ambiente peridomiciliar. Foram capturados apenas 166 exemplares femininos de Lutzomyia intermedia, fato atribuído à borrifação das habitações humanas e anexos com DDT. No contexto epidemiológico mais amplo, discute-se a fragilidade do ciclo extraflorestal da L. (V.) braziliensis; o papel do cão e de pequenos mamíferos, como fonte de infecção domiciliar, além de analisar o potencial deles na dispersão do parasita na área estudada.

Interacção Parasita-Hospedeiro e susceptibilidade de Leishmania infantum a fármacos

RESUMO As leishmanioses são doenças causadas por um protozoário intracelular pertencente à ordem Kinetoplastida, da família Trypanosomatidae, do género Leishmania. Os parasitas são transmitidos aos hospedeiros vertebrados por dípteros pertencentes à sub-família Phlebotominae. Devido à inexistência de vacinas a quimioterapêutica continua a representar o único mecanismo de prevenção e controlo. Os fármacos de primeira linha para o tratamento da leishmaniose visceral continuam a ser os antimoniais pentavalentes e a anfotericina B (AMB). A AMB lipossómica está a ser cada vez mais utilizada como 1ª linha. O conhecimento do(s) mecanismo(s) utilizados pelos parasitas, responsáveis pela resistência, é fundamental de modo a permitir o desenvolvimento de novos fármacos anti-Leishmania que possam substituir e/ou complementar os fármacos existentes, de uma forma eficaz assim como contribuir para o desenvolvimento de metodologias para avaliar e monitorizar a resistência. Espera-se do modelo animal a reprodução da infecção na Natureza. Os modelos canino e murino têm ajudado na compreensão dos mecanismos responsáveis pela patogénese e pela resposta imunitária à infecção por Leishmania. Sendo o cão o principal hospedeiro da infecção por L. infantum e o principal reservatório doméstico da leishmaniose visceral humana, procedeu-se à caracterização da evolução da infecção experimental em canídeos de raça Beagle através da análise clínica, hematológica, histopatológica, parasitária, assim com através da resposta imunitária desenvolvida. As alterações hematológicas observadas foram as associadas à leishmaniose visceral: anemia, leucopenia, trombocitopenia com aumento das proteínas totais e da fracção gama-globulina, e diminuição da albumina. Histologicamente observou-se nos órgãos viscerais uma reacção inflamatória crónica, acompanhada por vezes da formação de granulomas ricos em macrófagos. Apesar de todos os animais terem ficado infectados (confirmado pela presença do parasita nos vários tecidos e órgãos recolhidos na necrópsia), os únicos sinais clínicos observados transitoriamente foram adenopatia e alopécia. As técnicas moleculares foram significativamente mais eficazes na detecção do parasita do que os métodos parasitológicos convencionais. As amostras não invasivas (sangue periférico e conjuntiva) mostraram ser significativamente menos eficazes na detecção de leishmanias. No nosso modelo experimental não se observou a supressão da resposta celular ao antigénio parasitário e confirmou-se que, apesar de não protectora, a resposta humoral específica é pronunciada e precoce. A bipolarização da resposta imunitária Th1 ou Th2, amplamente descrita nas infecções experimentais por L. major no modelo murino, não foram observadas neste estudo. O facto dos animais não evidenciarem doença apesar do elevado parasitismo nos órgãos viscerais poderá estar relacionado com a expressão simultânea de citocinas de ambos os tipos Th1 e Treg, no baço, fígado, gânglio, medula óssea e sangue periférico. Neste estudo também se caracterizou o efeito da saliva do vector Phlebotomus perniciosus na infecção experimental de murganhos BALB/c com estirpes de L. infantum selvagem e tratada com AMB, inoculadas por via intradérmica. A visceralização da infecção ocorreu após a utilização da via de administração do inóculo que mais se assemelha ao que ocorre na Natureza. Apesar da disseminação dos parasitas nos animais co-inoculados com extracto de uma glândula salivar ter sido anterior à do grupo inoculado apenas com parasitas, não se detectaram diferenças significativas na carga parasitária, entre os três grupos, ao longo do período de observação pelo que, embora a saliva do vector esteja descrita como responsável pela exacerbação da infecção, tal não foi observado no nosso estudo. O aumento de expressão de citocinas esteve relacionado com o aumento do parasitismo mas, tal como no modelo canino, não se observou bipolarização da resposta imunitária. Os animais dos três grupos infectados parecem ter desenvolvido nos diferentes órgãos uma resposta mista dos tipos Th1 e Th2/Treg. Contudo, verificou-se a predominância da expressão Th1 (TNF-α), no fim do período de observação, o que pode estar relacionado com a resolução da infecção. Por outro lado, a presença de parasitas na pele dos animais inoculados com a estirpe L. infantum tratada com AMB permite colocar a hipótese da existência de parasitas resistentes na Natureza e destes poderem ser transmitidos. Após se ter verificado que a estirpe de L. infantum tratada com AMB tinha a capacidade de infectar e visceralizar no modelo murino, analisou-se o seu comportamento em dois dos principais vectores de L. infantum, Lutzomyia longipalpis e P. perniciosus. Os parasitas tratados com AMB apresentaram uma menor capacidade de permanecerem no interior do vector assim como um desenvolvimento mais lento apontando para uma menor capacidade de transmissão das estirpes resistentes a este fármaco, pelo que o tratamento com AMB poderá ser favorável à prevenção e controlo através da interrupção do ciclo de vida do parasita. De modo a determinar in vitro a susceptibilidade de Leishmania aos diferentes fármacos utilizados na terapêutica da leishmaniose humana e canina (Glucantime®, Fungizone®, miltefosine e alopurinol) comparou-se o sistema de promastigotas axénicos com o sistema amatigota-macrófago. Verificou-se que, para as estirpes estudadas, os resultados de ambos os sistemas não apresentavam diferenças significativas sendo a utilização do primeiro mais vantajosa ao ser menos moroso e de mais fácil execução. Seleccionaram-se estirpes quimio-resistentes in vitro, por exposição prolongada a doses crescentes de AMB, tendo-se verificado que os parasitas tratados, apresentaram uma menor susceptibilidade do que os não tratados à acção dos fármacos estudados, com excepção do alopurinol. A diminuição da susceptibilidade das estirpes aos fármacos utilizados poderá facilitar a dispersão de parasitas multiresistentes. Sendo a apoptose um dos mecanismos utilizados pelos parasitas para evitar a indução de uma resposta imune por acção de compostos anti- Leishmania, determinou-se o número de amastigotas apoptóticos assim como a produção de TNF-α e IL-10 pelos macrófagos tratados. Concluiu-se que os compostos conseguiram suprimir a produção de IL-10, inibidora da activação dos macrófagos, contudo nem a produção da citocina pro-inflamatória TNF- α nem a apoptose pareceram ser os principais mecanismos responsáveis à sobrevivência dos parasitas ao contacto com os fármacos.

Study of a cutaneous leishmaniasis outbreak in General Vedia, Province of Chaco, 1996

Between March and July 1996, a focalized epidemic outbreak of cutaneous leishmaniasis in General Vedia, province of Chaco, associated to the gallery forest of the Oro river was verified. The incidence rate in the area, which was 0-2/000 cases in preceding years, reached 8/000 cases in 1996. The risk of symptomatic infection was similar between sexes, but was different when analizing the different age groups by sex, suggesting a greater relative importance of the peridomestic transmission for the females and of the transmission in the subtropical forest for the males. Specimens of Lutzomyia intermedia, a species already incriminated as a vector of Leishmaniasis in other provinces of northern Argentina, were captured and identified in the focus locality in May 1996. The possible causes of the outbreak related to the climatic variables and the vector abundance are analyzed and the results in the framework of possible preventive and control activities are discussed.

American cutaneous leishmaniasis outbreak, Tartagal city, province of Salta, Argentina, 1993

An American cutaneous leishmaniasis outbreak, with cases clustering during 1993 in Tartagal city, Salta, was reported. The outbreak involved 102 individuals, 43.1% of them with multiple ulcers. Age (mean: 33 years old) and sex distribution of cases (74.5% males), as well as working activity (70 forest-related), support the hypothesis of classical forest transmission leishmaniasis, despite the fact that the place of permanent residence was in periurban Tartagal. Moreover, during July, sandflies were only collected from one of the 'deforestation areas'. Lutzomyia intermedia was the single species of the 491 phlebotomines captured, reinforcing the vector incrimination of this species. Most infections must have been acquired during the fall (April to June), a pattern consistent with previous sandfly population dynamics data. Based on the epidemiological and entomological results, it was advised not to do any vector-targeted periurban control measures during July. Further studies should be done to assess if the high rate of multiple lesions was due to parasite factors or to infective vector density factors.

Phlebotominae fauna in the Province of Tucumán, Argentina

American Tegumentary Leishmaniasis is endemic in the province of Tucumán since 1916 where the first Argentinian case of leishmaniasis was reported. An epidemic outbreak took place in the province during 1986-1988, after that the number of cases increased gradually again between 1991-1996. Since October of 1999 sand flies captures were performed at different places associated with current and past transmission or sites identified as risky ones. The collections were carried out with CDC mini light trap and modified Shannon trap. In this study 2338 Phlebotominae were captured being prevalent Lutzomyia neivai (Lu intermedia complex) (97.7%), followed by Lu. migonei. We report Lu. shannoni for the first time in the province. Phlebotominae was abundant in the warm and humid months and showed a peak before the summer rains. Lutzomyia neivai showed a pattern (peridomestic prevalence, anthropophilia, abundance in secondary forest) consistent with other outbreak studies. Thus, the results reinforce this species incrimination as vector of leishmaniasis in the area. Domestic animals close to houses increase its abundance, and so the probable associated risk of human-Phlebotominae contact. Further studies should be done to understand the role of each Phlebotominae species in the transmission of leishmaniasis in Tucumán in order to design entomological surveillance strategies.

Assessment of PCR in the detection of Leishmania spp in experimentally infected individual phlebotomine sandflies (Diptera: Psychodidae: Phlebotominae)

DNA amplification by the polymerase chain reaction (PCR) was applied in the investigation of the presence of Leishmania (Kinetoplastida: Trypanosomatidae) parasites in single phlebotomine sandflies. Three phlebotomine/parasite pairs were used: Lutzomyia longipalpis/Leishmania chagasi, Lutzomyia migonei/Leishmania amazonensis and Lutzomyia migonei/Leishmania braziliensis, all of them incriminated in the transmission of visceral or cutaneous leishmaniasis. DNA extraction was performed with whole insects, with no need of previous digestive tract dissection or pooling specimens. The presence of either mouse blood in the digestive tract of the sandflies or the digestive tract itself did not interfere in the PCR. Infection by as few as 10 Leishmania sp. per individual were sufficient for DNA amplification with genus-specific primers. Using primers for L. braziliensis and L. mexicana complexes, respectively, it was possible to discriminate between L. braziliensis and L. amazonensis in experimentally infected vectors (L. migonei).

Canine visceral leishmaniasis in Barra de Guaratiba, Rio de Janeiro, Brazil: assessment of risk factors

Barra de Guaratiba is a coastal area of the city of Rio de Janeiro where American visceral leishmaniasis (AVL) is endemic. Although control measures including killing of dogs and use of insecticides have been applied at this locality, the canine seroprevalence remains at 25% and during 1995 and 1997 eight autochthonous human cases were notified. In order to evaluate factors related to the increase of the risk for Leishmania (Leishmania) chagasi infection in dogs we have screened 365 dogs by anti-Leishmania immunofluorescent antibody test (IFAT) and captured sandflies in the domestic and peridomestic environment. Some variables related to the infection were assessed by uni- and multivariate analysis. The distance of the residence from the forest border, its altitude and the presence of the opossum Didelphis marsupialis in the backyard, were found predictor factors for L. (L.) chagasi infection in dogs in Barra de Guaratiba. The presence of Lutzomyia longipalpis in the peridomestic environment indicates the possibility of appearence of new human cases. Our data also suggest the presence of a sylvatic enzootic cycle at this locality.

Natural infection of phlebotomines (Diptera: Psychodidae) in a visceral-leishmaniasis focus in Mato Grosso do Sul, Brazil

The main purpose of this study was to investigate natural infection by Leishmania in phlebotomine females in a visceral-leishmaniasis focus in Antonio João county in Mato Grosso do Sul State, Brazil. Between June and October 2003, the digestive tracts of 81 females captured in Aldeia Campestre, Aldeia Marangatu and Povoado Campestre were dissected. The females were separated by species, location, area and date of capture into 13 groups and kept in ethanol 70%. To identify the Leishmania species using the PCR technique, amplifications of the ribosomal-DNA (rDNA) and mini-exon genes were analyzed. Of the 81 specimens, 77 (95%) were Lutzomyia longipalpis, making this the most common species; only one specimen of each of the species Brumptomyia avellari, Evandromyia cortelezzii, Evandromyia lenti and Nyssomyia whitmani was found. Trypanosomatids were identified in eight of the nine groups of Lutzomyia longipalpis (10.39%) one group from Aldeia Campestre, one from Aldeia Marangatu and six from Povoado Campestre; of the eight groups, one from Aldeia Marangatu and another, with promastigotes forms also confirmed by dissection (1.23%) from Povoado Campestre, were identified by PCR as Leishmania chagasi (2.6%). The other groups gave negative results. These findings indicate that there is a high risk of leishmaniasis transmission in this area.

Distribution of phlebotomine sandflies (Diptera: Psychodidae) of medical importance in Mato Grosso State, Brazil

Intense environmental impacts, causing alterations of the natural habitats of fauna, including those of sandfly disease vectors are observed in Mato Grosso State, Central Brazil. Entomologic survey of phlebotomines was based on light trap and was carried out by entomological nucleus of the FUNASA and SES in the period between 1996 and 2001. Eighty eight species were identified, including the following sandflies with medical importance to leishmaniasis: Lutzomyia amazonensis, L. anduzei, L. antunesi, L. ayrozai, L. carrerai carrerai, L. complexa, L. cruzi, L. flaviscutellata, L. intermedia, L. longipalpis, L. migonei, L. paraensis, L. ubiquitalis, L. whitmani and L. yuilli yuilli. Most sandflies of medical importance occurred in the Amazon forest and savannah. L. longipalpis and L. cruzi had high densities in the savannah region. L. flaviscutellata is predominating in both the Amazon forest and the savannah region. L. whitmani and L. antunesi were sampled in the Amazon forest, savannah and marsh land.

Canine visceral leishmaniasis due to Leishmania (L.) infantum chagasi in Amazonian Brazil: comparison of the parasite density from the skin, lymph node and visceral tissues between symptomatic and asymptomatic, seropositive dogs

Canine visceral leishmaniasis (CVL) is recognizable by characteristic signs of disease and is highly lethal. The infection, however, may be quite inapparent in some seropositive dogs, and this has raised the polemic question as to whether or not such animals can be a source of infection for Lutzomyia longipalpis, the vector of American visceral leishmaniasis (AVL). In this study we have examined 51 dogs with acute CVL from an AVL area in Pará State, northern Brazil, and compared the parasite density, amastigotes of Leishmania (L.) infantum chagasi, in the skin, lymph node and viscera of symptomatic with that of nine asymptomatic but seropositive dogs (IFAT-IgG). Post-mortem biopsy fragments of these tissues were processed by immunohistochemistry, using a polyclonal antibody against Leishmania sp. The X² and Mann Whitney tests were used to evaluate the means of infected macrophage density (p < 0.05). There was no difference (p > 0.05) in the skin (10.7/mm² x 15.5/mm²) and lymph node (6.3/mm² x 8.3/mm²), between asymptomatic and symptomatic dogs, respectively. It was higher (p < 0.05), however, in the viscera of symptomatic (5.3/mm²) than it was in asymptomatic (1.4/mm²) dogs. These results strongly suggest that asymptomatic or symptomatic L. (L.) i. chagasi-infected dogs can serve as a source of infection, principally considering the highest (p < 0.05) parasite density from skin (10.7/mm² x 15.5/mm²), the place where the vetor L. longipalpis takes its blood meal, compared with those from lymph node (6.3/mm² x 8.3/mm²) and viscera (1.4/mm²x 5.3/mm²).

Sandfly fauna (Diptera: Psychodidae) in Parque do Sabiá complex, Uberlândia, Minas Gerais, Brazil

Between April 2003 and May 2009 phlebotomine sandflies were collected in Parque do Sabiá complex, Uberlândia municipality, Minas Gerais State, Brazil, using CDC and Shannon traps. The objective was to associate the sandfly species captured to the risk of the transmission of leishmaniasis in the municipality. The 126 captured specimens belonging to six species of phlebotomine, among which Lutzomyia (Psychodopygus) davisi (Root, 1934) predominated with 113 specimens (89.7%). The remaining captured species were Lutzomyia (Pintomyia) mamedei Oliveira, Afonso, Dias & Brazil, 1994 - five specimens (3.9%); Lutzomyia (Nyssomyia) flaviscutellata (Mangabeira, 1942) - four specimens (3.2%); Lutzomyia lenti (Mangabeira, 1938) - two specimens (1.6%); Brumptomyia avellari (Costa Lima, 1932) - one specimen (0.8%); and Lutzomyia (Nyssomyia) whitmani (Antunes & Coutinho, 1939) - one specimen (0.8%). The collection of species that may be involved in the transmission of Leishmania reveals the need for continuous entomological surveillance.

SURVEY OF SANDFLY FAUNA (DIPTERA: PSYCHODIDAE) IN UBERLÂNDIA, MINAS GERAIS STATE, BRAZIL, 2003-2004

We analyzed the sandflies around houses and domestic animal shelters located in residences close to forests in localities on the banks of the Araguari River, Uberlândia, MG, from February 2003 to November 2004. The phlebotomines were captured in the peridomiciliary area, where Shannon traps were utilized in the peridomicile and CDC traps in animal shelters. 2,783 specimens of sandflies were captured, 2,140 females (76.9%) and 643 males (23.1%), distributed between 17 species. The most abundant species was Nyssomyia neivai (88.1%), followed by Nyssomyia whitmani (3.1%). The presence of Lutzomyia longipalpis was also confirmed, it is the main vector of Leishmania (L.) infantum chagasi which causes visceral leishmaniasis. The presence of species involved in the transmission of leishmaniases in the municipality of Uberlândia is cause for concern. The presence of L. longipalpis indicates that its urbanization may not have been aleatory and instead occurred through the destruction of wild ecotopes. More studies of their occupation in anthropic environments need to be made.