Increased expression of keratinase and other peptidases by Candida parapsilosis mutants

Keratinases are enzymes of great importance involved in pathogenic processes of some fungi. They also have a widespread ecological role since they are responsible for the degradation and recycling of keratin. On the one hand, studying them furthers our knowledge of pathogenicity mechanisms, which has important implications for human health, and on the other hand, understanding their ecological role in keratin recycling has biotechnological potential. Here, a wild-type keratinolytic Candida parapsilosis strain isolated from a poultry farm was treated with ethyl methanesulfonate in order to generate mutants with increased keratinase activity. Mutants were then cultured on media with keratin extracted from chicken feathers as the sole source of nitrogen and carbon. Approximately 500 mutants were screened and compared with the described keratinolytic wild type. Three strains, H36, I7 and J5, showed enhanced keratinase activity. The wild-type strain produced 80 U/mL of keratinolytic activity, strain H36 produced 110 U/mL, strain I7, 130 U/mL, and strain J5, 140 U/mL. A 70% increase in enzyme activity was recorded for strain J5. Enzymatic activity was evaluated by zymograms with proteic substrates. A peptidase migrating at 100 kDa was detected with keratin, bovine serum albumin and casein. In addition, a peptidase with a molecular mass of 50 kDa was observed with casein in the wild-type strain and in mutants H36 and J5. Gelatinase activity was detected at 60 kDa. A single band of 35 kDa was found in wild-type C. parapsilosis and in mutants with hemoglobin substrate.

Método inmunoenzimático para investigar antígenos de Candida albicans

Tesis (Maestría en Ciencias con Especialidad en Microbiología Médica) UANL

Efecto de hormonas esteroides sobre la micelización de Candida albicans.

Tesis (Maestría en Ciencias con Especialidad en Microbiología Médica) UANL

Efecto in vivo de diversas antracenonas diméricas sobre peroxisomas de Candida boidinii

Tesis (Maestría en Ciencias con Especialidad en Quimica Analítica Biomédica) UANL

Efecto de la radiación de las microondas de 2 450 MHz sobre la viabilidad, ultraestructura y actividad enzimática en Candida albicans

Tesis (Maestría en Ciencias con Especialidad en Microbiología Médica) UANL

Pruebas de susceptibilidad in vitro con antifúngicos en células planctónicas y en Biofilms de Candida parapsilosis

[Tesis] (Maestría en Ciencias con Especialidad en Microbiología Médica) U.A.N.L.

Presencia de candida spp en pacientes con xerostomía, antes y después del tratamiento con neuroelectroestimulación.

Tesis (Maestría en Ciencias con Especialidad en Periodoncia) UANL, 2012.

Caracterización taxonómica y molecular de candida spp. en aislados clínicos de origen bucal en pacientes sanos y diabéticos de Nuevo León.

Tesis (Maestría en Ciencias con Acentuación en Microbiología) UANL, 2012.

Inhibición del crecimiento y de la formación del tubo germinativo de candida albicans por antifungicos e insecticidas de uso agrícola

Tesis (Doctorado en Ciencias con Especialidad en Microbiología) UANL

Estudio del efecto de la peroxisomicina A1 sobre la proliferación de peroxisomas y el importe de proteínas de la matriz peroxisomal a tiempos de exposición breves en candida boidinii

Tesis (Doctorado en Ciencias con Especialidad en Morfología) UANL

Efecto de la peroxisomicina A1 sobre dos especies de levaduras : Candida boidinii y Saccharomyces cerevisiae

Tesis (Doctorado en Ciencias con Especialidad en Química Biomédica) UANL

Evaluación de la actividad antimicrobiana de compuestos de agaves y su acción sobre el tigmotropismo y dimorfismo de Candida albicans

Tesis (Doctorado en Ciencias con Especialidad en Microbiología) UANL

Annotation des ARN non codants du génome de Candida albicans par méthode bioinformatique

La bio-informatique est un champ pluridisciplinaire qui utilise la biologie, l’informatique, la physique et les mathématiques pour résoudre des problèmes posés par la biologie. L’une des thématiques de la bio-informatique est l’analyse des séquences génomiques et la prédiction de gènes d’ARN non codants. Les ARN non codants sont des molécules d’ARN qui sont transcrites mais pas traduites en protéine et qui ont une fonction dans la cellule. Trouver des gènes d’ARN non codants par des techniques de biochimie et de biologie moléculaire est assez difficile et relativement coûteux. Ainsi, la prédiction des gènes d’ARNnc par des méthodes bio-informatiques est un enjeu important. Cette recherche décrit un travail d’analyse informatique pour chercher des nouveaux ARNnc chez le pathogène Candida albicans et d’une validation expérimentale. Nous avons utilisé comme stratégie une analyse informatique combinant plusieurs logiciels d’identification d’ARNnc. Nous avons validé un sous-ensemble des prédictions informatiques avec une expérience de puces à ADN couvrant 1979 régions du génome. Grace à cette expérience nous avons identifié 62 nouveaux transcrits chez Candida albicans. Ce travail aussi permit le développement d’une méthode d’analyse pour des puces à ADN de type tiling array. Ce travail présente également une tentation d’améliorer de la prédiction d’ARNnc avec une méthode se basant sur la recherche de motifs d’ARN dans les séquences.

Rôle des macrophages contre Candida albicans chez la souris transgénique exprimant le génome du VIH-1

La candidose oropharyngée (COP) constitue l’infection fongique opportuniste la plus fréquente chez les patients infectés au VIH-1. Malgré la profonde immunosuppression causée par le VIH-1, l’infection à Candida albicans demeure confinée au niveau de la muqueuse buccale sans dissémination aux organes profonds. La souris transgénique (Tg) CD4C/HIVMut exprimant le génome tronqué du VIH-1 présente, suite à l’inoculation orale de C. albicans, une COP chronique reproduisant fidèlement l’infection chez les patients séropositifs. Cette souris Tg a donc été utilisée afin de déterminer si les macrophages contribuent au confinement de C. albicans à la muqueuse buccale. Cette étude a permis de démontrer que i) les macrophages sont recrutés aux muqueuses buccale et gastrique en réponse au champignon malgré l’expression du transgène, ii) les macrophages de ces souris Tg présentent une polarisation vers un phénotype d’activation alternative et iii) la production de monoxyde d’azote par les macrophages des souris Tg n’est pas requise pour limiter la prolifération de Candida à la muqueuse buccale et pour restreindre sa dissémination aux organes profonds. Les macrophages ne semblent donc pas directement responsables de l’établissement de l’infection chronique à Candida chez la souris Tg CD4C/HIVMut.