Identification of the regulatory subunit of Arabidopsis thaliana acetohydroxyacid synthase and reconstitution with its catalytic subunit

Acetohydroxyacid synthase (EC 4.1.3.18; AHAS) catalyzes the initial step in the formation of the branched-chain amino acids. The enzyme from most bacteria is composed of a catalytic subunit, and a smaller regulatory subunit that is required for full activity and for sensitivity to feedback regulation by valine. A similar arrangement was demonstrated recently for yeast AHAS, and a putative regulatory subunit of tobacco AHAS has also been reported. In this latter case, the enzyme reconstituted from its purified subunits remained insensitive to feedback inhibition, unlike the enzyme extracted from native plant sources. Here we have cloned, expressed in Escherichia coil, and purified the AHAS regulatory subunit of Ambidopsis thaliana. Combining the protein with the purified A. thaliana catalytic subunit results in an activity stimulation that is sensitive to inhibition by valine, leucine, and isoleucine. Moreover, there is a strong synergy between the effects of leucine and valine, which closely mimics the properties of the native enzyme. The regulatory subunit contains a sequence repeat of approximately 180 residues, and we suggest that one repeat binds leucine while the second binds valine or isoleucine. This proposal is supported by reconstitution studies of the individual repeats, which were also cloned, expressed, and purified. The structure and properties of the regulatory subunit are reminiscent of the regulatory domain of threonine deaminase (EC 4.2.1.16), and it is suggested that the two proteins are evolutionarily related.

A formal representation of assumptions in process modelling

In this work, we present a systematic approach to the representation of modelling assumptions. Modelling assumptions form the fundamental basis for the mathematical description of a process system. These assumptions can be translated into either additional mathematical relationships or constraints between model variables, equations, balance volumes or parameters. In order to analyse the effect of modelling assumptions in a formal, rigorous way, a syntax of modelling assumptions has been defined. The smallest indivisible syntactical element, the so called assumption atom has been identified as a triplet. With this syntax a modelling assumption can be described as an elementary assumption, i.e. an assumption consisting of only an assumption atom or a composite assumption consisting of a conjunction of elementary assumptions. The above syntax of modelling assumptions enables us to represent modelling assumptions as transformations acting on the set of model equations. The notion of syntactical correctness and semantical consistency of sets of modelling assumptions is defined and necessary conditions for checking them are given. These transformations can be used in several ways and their implications can be analysed by formal methods. The modelling assumptions define model hierarchies. That is, a series of model families each belonging to a particular equivalence class. These model equivalence classes can be related to primal assumptions regarding the definition of mass, energy and momentum balance volumes and to secondary and tiertinary assumptions regarding the presence or absence and the form of mechanisms within the system. Within equivalence classes, there are many model members, these being related to algebraic model transformations for the particular model. We show how these model hierarchies are driven by the underlying assumption structure and indicate some implications on system dynamics and complexity issues. (C) 2001 Elsevier Science Ltd. All rights reserved.

Incremental parsing in language-based editors: user needs and how to meet them

Incremental parsing has long been recognized as a technique of great utility in the construction of language-based editors, and correspondingly, the area currently enjoys a mature theory. Unfortunately, many practical considerations have been largely overlooked in previously published algorithms. Many user requirements for an editing system necessarily impact on the design of its incremental parser, but most approaches focus only on one: response time. This paper details an incremental parser based on LR parsing techniques and designed for use in a modeless syntax recognition editor. The nature of this editor places significant demands on the structure and quality of the document representation it uses, and hence, on the parser. The strategy presented here is novel in that both the parser and the representation it constructs are tolerant of the inevitable and frequent syntax errors that arise during editing. This is achieved by a method that differs from conventional error repair techniques, and that is more appropriate for use in an interactive context. Furthermore, the parser aims to minimize disturbance to this representation, not only to ensure other system components can operate incrementally, but also to avoid unfortunate consequences for certain user-oriented services. The algorithm is augmented with a limited form of predictive tree-building, and a technique is presented for the determination of valid symbols for menu-based insertion. Copyright (C) 2001 John Wiley & Sons, Ltd.

Xmds: eXtensible multi-dimensional simulator

A software package that efficiently solves a comprehensive range of problems based on coupled complex nonlinear stochastic ODEs and PDEs is outlined. Its input and output syntax is formulated as a subset of XML, thus making a step towards a standard for specifying numerical simulations.

Mobile digital technology: Emerging issues for marketing

The growth of direct marketing has been attributed to rapid advances in technology and the changing market context. The fundamental ability of direct marketers to communicate with consumers and to elicit a response, combined with the ubiquitous nature and power of mobile digital technology, provides a synergy that will increase the potential for the success of direct marketing. The aim of this paper is to provide an analytical framework identifying the developments in the digital environment from e-marketing to m-marketing, and to alert direct marketers to the enhanced capabilities available to them.

Regulatory interactions in Arabidopsis thaliana acetohydroxyacid synthase

Acetohydroxyacid synthase (AHAS; EC 4.1.3.18) contains catalytic and regulatory subunits, the latter being required for sensitivity to feedback regulation by leucine, valine and isoleucine. The regulatory subunit of Arabidopsis thaliana AHAS possesses a sequence repeat and we have suggested preciously that one repeat binds leucine while the second binds valine or isoleucine, with synergy between the two sites. We have mutated four residues in each repeat, based on a model of the regulatory subunit. The data confirm that there are separate leucine and valine/isoleucine sites, and suggest a complex pathway for regulatory signal transmission to the catalytic subunit. (C) 2002 Published by Elsevier Science B.V. on behalf of the Federation of European Biochemical Societies.

Combining nonthermal technologies to control foodborne microorganisms

Novel nonthermal processes, such as high hydrostatic pressure (HHP), pulsed electric fields (PEFs), ionizing radiation and ultrasonication, are able to inactivate microorganisms at ambient or sublethal temperatures. Many of these processes require very high treatment intensities, however, to achieve adequate microbial destruction in low-acid foods. Combining nonthermal processes with conventional preservation methods enhances their antimicrobial effect so that lower process intensities can be used. Combining two or more nonthermal processes can also enhance microbial inactivation and allow the use of lower individual treatment intensities. For conventional preservation treatments, optimal microbial control is achieved through the hurdle concept, with synergistic effects resulting from different components of the microbial cell being targeted simultaneously. The mechanisms of inactivation by nonthermal processes are still unclear; thus, the bases of synergistic combinations remain speculative. This paper reviews literature on the antimicrobial efficiencies of nonthermal processes combined with conventional and novel nonthermal technologies. Where possible, the proposed mechanisms of synergy is mentioned. (C) 2003 Elsevier Science B.V. All rights reserved.

'Localizing the national' - The rediscovery and reshaping of local campaigning in Australia

Pippa Norris provides a schematic account of the evolution of campaigning through premodern, modern and postmodern stages. In particular she points to an emerging postmodern phase of electioneering characterized by a renewed emphasis upon direct forms of engagement which resonate with an earlier period in which campaigns were locally fought and largely dependent upon the canvassing efforts of party workers and volunteers. Norris's analysis offers a useful prism with which to view recent developments in electioneering in Australia. In the past several elections the rival Labor and Liberal parties have attempted to achieve a synergy between their centrally conducted and constituency-level campaigns by ensuring that their national campaigns are locally relevant and address local concerns. Their efforts to 'localize the national' meld the use of sophisticated software with elements of a traditional 'meet and greet' politics and suggest that local campaigning may now have a new shape and importance.

O bebê surdo na educação infantil : um olhar sobre inclusão e práticas pedagógicas

Este estudo teve como objetivo analisar como ocorre a inclusão de dois bebês surdos (de 1 ano) na educação infantil de um Centro Municipal de Educação Infantil (CMEI) do município de Vitória/ES. Como aporte teórico foi utilizada a perspectiva Histórico-Cultural do desenvolvimento humano, sob a perspectiva que o sujeito se constitui nas relações sociais, como um ser ativo que transforma e é transformado nessas relações. Nesse contexto, o desenvolvimento implica a relação com o outro e a mediação da linguagem, meio de comunicação e de constituição do pensamento. Assim, no caso dos bebês surdos, destaca-se a LIBRAS como língua privilegiada que deve ser apropriada por eles e ensinada no cotidiano da educação infantil. Como opção metodológica, desenvolvemos um estudo de caso de inspiração etnográfica, por entendermos que essa metodologia permite atender apropriadamente ao objetivo do estudo. Para a coleta de dados, adotamos recursos como observação participante, registro em diário de campo, entrevistas semiestruturadas com os sujeitos participantes da pesquisa e análise documental. Na análise dos dados, tomamos como eixos de análise: as concepções dos profissionais a respeito da inclusão, surdez e do trabalho com os bebês surdos; o cuidado e a educação dos bebês surdos e as atividades lúdicas na sala dos bebês. As análises indicam que muitos profissionais têm dúvidas a respeito da inclusão e que a falta do conhecimento da LIBRAS por parte de muitos profissionais, leva à utilização de outros recursos de comunicação, como os gestos. A vivência e interação em LIBRAS entre as crianças e a maior parte dos profissionais da escola com os bebês surdos torna-se um desafio, sobressaindo a necessidade de mais profissionais com o conhecimento da LIBRAS para atender às crianças surdas em diferentes espaços no cotidiano da educação infantil, na perspectiva de potencializar o seu desenvolvimento e a constituição de sua identidade. Todavia, os profissionais da escola são movidos pela preocupação com a inclusão e o aprendizado da LIBRAS, esforçando-se no sentido de buscar novas formas de trabalho para/com as crianças surdas. Além disso, o empenho da equipe bilíngue na estruturação do cotidiano da educação infantil merece destaque, não só pelo trabalho que faz enquanto equipe bilíngue, mas pelo incentivo e auxílio aos outros profissionais.

Mecanismos de governança corporativa na pequena empresa familiar

Esta dissertação tem como objetivo descrever e analisar como o fenômeno da governança corporativa articula mecanismos de gestão e impacta na dinâmica de uma pequena organização familiar. Para isso, utilizou-se as perspectivas de Fan (2001) e Silva Junior (2006), que tratam da governança corporativa, e de Chandler (1994), para empresas familiares. Através de abordagem qualitativa com ênfase em um estudo de caso, uma triangulação de dados foi realizada, utilizando a entrevista semiestruturada, observação assistemática ou livre e pesquisa de documentos, e a análise dos dados foi realizada por análise de conteúdo. Verificou-se a presença do fenômeno da governança por intermédio da identificação dos fatores de diferenciação, resultando na implantação de mecanismos de governança ao longo do ciclo de vida da organização familiar, o que possibilitou mudanças em seu controle, no seu processo sucessório e na sua profissionalização. Quanto ao controle, foram verificados que os mecanismos de “manutenção do status quo”, “aconselhamento profissional”, “sinergia de interesses”, “regulamentação financeira da sociedade”, “atribuições e responsabilidades”, “alinhamento de interesses do negócio” e “proteção do empreendimento familiar” possibilitaram a modificação e manutenção do controle da empresa com os sócios. Quanto ao eixo da profissionalização, foi verificado que os mecanismos de “regulamentação financeira da sociedade”, “atribuições e responsabilidades”, “alinhamento de interesses do negócio”, “proteção do empreendimento familiar” e “atenção aos interesses dos stakeholders” foram responsáveis por prover as modificações neste quesito e indicar que a empresa caminha no sentido de se profissionalizar. Quanto ao processo sucessório, verificou-se que a terceira geração não tem interesse na empresa, o que podem resultar na contratação de um profissional externo para gerir a mesma, respeitando a questão dos valores familiares e a cultura organizacional ou conduzir à sucessão recursiva. Aparentemente, observou-se que a segunda questão foi mais evidente, visto que a saída do último irmão do negócio culmina com a venda da empresa familiar, gerando duas alternativas: a compra da empresa por um grupo de sócios ou outra empresa não familiar, o que resultaria na “morte” da empresa enquanto empresa familiar; ou a sua compra por outra família ou empresa familiar, preservando sua classificação inicial.

Educação corporativa : uma análise sobre sua contribuição no desenvolvimento de competências no trabalho em uma empresa de mineração

O presente trabalho tem como objetivo descrever um Programa de Desenvolvimento oferecido pela Universidade Corporativa de empresa mineradora, com atuação em Vitória/ES, e compreender as possíveis relações deste Programa com o desenvolvimento das competências profissionais esperadas pela Organização. A Empresa Gama, que assim será identificada durante todo o trabalho, teve o início de sua Universidade Corporativa no ano de 2003, sob o propósito de transformar vidas desenvolvendo pessoas, e é vista pela Empresa Gama como fator importante para a geração de competitividade, para evolução nos negócios e aumento da sinergia organizacional. Dentre todos os Programas ofertados, opta-se pelo estudo do Programa “Trilha de Gestão e Liderança”, lançado em 2004, e voltado para a formação de gestores da Empresa Gama. Para a realização desta pesquisa qualitativa, foram entrevistados quatro Supervisores da Empresa Gama, que tiveram a oportunidade de participar da “Trilha de Gestão e Liderança”. Foram realizadas entrevistas semi-estruturadas e pesquisa documental para obtenção de dados. Opta-se pela Analise de Conteúdo como método de análise. Compreende-se que, para a Empresa Gama, o Programa “Trilha de Gestão e Liderança” é uma importante ferramenta para o desenvolvimento das competências esperadas pela organização. Contudo, não se trata da principal ferramenta, estando nítido que este desenvolvimento vai muito além dos Programas oferecidos por sua Universidade Corporativa.

Minha filha aprende a falar: percurso de aquisição da linguagem de uma criança brasileira nos tempos actuais

RESUMO: A linguagem é o traço distintivo do ser humano. É por meio dela que nos comunicamos, formamos todos os nossos conceitos, temos uma estória e cultura. A capacidade humana para adquirir um sistema de regras tão complexo como é a linguagem verbal, em um espaço de tempo relativamente curto, tem despertado o interesse de estudiosos ao longo do tempo. Conforme a literatura consultada, a linguagem, de caráter inato, é adquirida em um meio de falantes, seguindo etapas universais de desenvolvimento. Interrogamo-nos então se, nos tempos atuais, marcados pela globalização, esse processo mantem-se igual ou pode sofrer modificações. Esta dissertação resulta de um estudo feito durante os anos 2007/2009, com uma criança brasileira, e teve como objetivo principal descrever o percurso de aquisição da linguagem nos tempos atuais, utilizando a metodologia do estudo de caso. Os dados coletados foram analisados sob os cinco componentes da linguagem: Fonologia, Morfologia, Sintaxe, Semântica e Pragmática, e comparados ao referencial teórico, no intuito de identificar semelhanças e/ou diferenças entre ambos. ABSTRACT: The language is the human‟s differential trace. It is whereby that we communicate, we form all our concepts, we have a story and culture. The human capacity to acquire a rules system such complex as the verbal language, in a relatively short time space, has been awaking the interest of studious along time. According to the consulted literature, the languae, of innate character, is acquired in a way of speakers, following universal stages of development. So, we asked us if, in the current times, marked by globalization, this process keep equal or can suffer modifications. This dissertation results from a study reayized during years 2007/2008, with a Brazilian child, and it had as main goal to describe the language acquisition route in the current times, using the case study as methodology. The collected data were analyzed under the five language components: Phonology, Morphology, Syntax, Semantic and Pragmatic, and compared to theory, intending identifying similarities and/or differences between both.

XAdES4J: a java library for XAdES signature services

As comunicações electrónicas são cada vez mais o meio de eleição para negócios entre entidades e para as relações entre os cidadãos e o Estado (e-government). Esta diversidade de transacções envolve, muitas vezes, informação sensível e com possível valor legal. Neste contexto, as assinaturas electrónicas são uma importante base de confiança, fornecendo garantias de integridade e autenticação entre os intervenientes. A produção de uma assinatura digital resulta não só no valor da assinatura propriamente dita, mas também num conjunto de informação adicional acerca da mesma, como o algoritmo de assinatura, o certificado de validação ou a hora e local de produção. Num cenário heterogéneo como o descrito anteriormente, torna-se necessária uma forma flexível e interoperável de descrever esse tipo de informação. A linguagem XML é uma forma adequada de representar uma assinatura neste contexto, não só pela sua natureza estruturada, mas principalmente por ser baseada em texto e ter suporte generalizado. A recomendação XML Signature Syntax and Processing (ou apenas XML Signature) foi o primeiro passo na representação de assinaturas em XML. Nela são definidas sintaxe e regras de processamento para criar, representar e validar assinaturas digitais. As assinaturas XML podem ser aplicadas a qualquer tipo de conteúdos digitais identificáveis por um URI, tanto no mesmo documento XML que a assinatura, como noutra qualquer localização. Além disso, a mesma assinatura XML pode englobar vários recursos, mesmo de tipos diferentes (texto livre, imagens, XML, etc.). À medida que as assinaturas electrónicas foram ganhando relevância tornou-se evidente que a especificação XML Signature não era suficiente, nomeadamente por não dar garantias de validade a longo prazo nem de não repudiação. Esta situação foi agravada pelo facto da especificação não cumprir os requisitos da directiva 1999/93/EC da União Europeia, onde é estabelecido um quadro legal para as assinaturas electrónicas a nível comunitário. No seguimento desta directiva da União Europeia foi desenvolvida a especificação XML Advanced Electronic Signatures que define formatos XML e regras de processamento para assinaturas electrónicas não repudiáveis e com validade verificável durante períodos de tempo extensos, em conformidade com a directiva. Esta especificação estende a recomendação XML Signature, definindo novos elementos que contêm informação adicional acerca da assinatura e dos recursos assinados (propriedades qualificadoras). A plataforma Java inclui, desde a versão 1.6, uma API de alto nível para serviços de assinaturas digitais em XML, de acordo com a recomendação XML Signature. Contudo, não existe suporte para assinaturas avançadas. Com este projecto pretende-se desenvolver uma biblioteca Java para a criação e validação de assinaturas XAdES, preenchendo assim a lacuna existente na plataforma. A biblioteca desenvolvida disponibiliza uma interface com alto nível de abstracção, não tendo o programador que lidar directamente com a estrutura XML da assinatura nem com os detalhes do conteúdo das propriedades qualificadoras. São definidos tipos que representam os principais conceitos da assinatura, nomeadamente as propriedades qualificadoras e os recursos assinados, sendo os aspectos estruturais resolvidos internamente. Neste trabalho, a informação que compõe uma assinatura XAdES é dividia em dois grupos: o primeiro é formado por características do signatário e da assinatura, tais como a chave e as propriedades qualificadoras da assinatura. O segundo grupo é composto pelos recursos assinados e as correspondentes propriedades qualificadoras. Quando um signatário produz várias assinaturas em determinado contexto, o primeiro grupo de características será semelhante entre elas. Definiu-se o conjunto invariante de características da assinatura e do signatário como perfil de assinatura. O conceito é estendido à verificação de assinaturas englobando, neste caso, a informação a usar nesse processo, como por exemplo os certificados raiz em que o verificador confia. Numa outra perspectiva, um perfil constitui uma configuração do serviço de assinatura correspondente. O desenho e implementação da biblioteca estão também baseados no conceito de fornecedor de serviços. Um fornecedor de serviços é uma entidade que disponibiliza determinada informação ou serviço necessários à produção e verificação de assinaturas, nomeadamente: selecção de chave/certificado de assinatura, validação de certificados, interacção com servidores de time-stamp e geração de XML. Em vez de depender directamente da informação em causa, um perfil — e, consequentemente, a operação correspondente — é configurado com fornecedores de serviços que são invocados quando necessário. Para cada tipo de fornecedor de serviços é definida um interface, podendo as correspondentes implementações ser configuradas de forma independente. A biblioteca inclui implementações de todos os fornecedores de serviços, sendo algumas delas usadas for omissão na produção e verificação de assinaturas. Uma vez que o foco do projecto é a especificação XAdES, o processamento e estrutura relativos ao formato básico são delegados internamente na biblioteca Apache XML Security, que disponibiliza uma implementação da recomendação XML Signature. Para validar o funcionamento da biblioteca, nomeadamente em termos de interoperabilidade, procede-se, entre outros, à verificação de um conjunto de assinaturas produzidas por Estados Membros da União Europeia, bem como por outra implementação da especificação XAdES.

Sinergia extensora do membro superior no movimento de alcance. Capacidade de placing do polegar

Objetivo: avaliar as modificações ocorridas no âmbito da sequência de ativação o da sinergia extensora do MS e na sua influência sobre a capacidade de placing do polegar face à aplicação de um programa de intervenção em fisioterapia. Pretendeu-se também verificar as repercussões ao nível da participação dos indivíduos nas AVD`s. Metodologia: esta série de estudos de casos foi constituída por dois indivíduos com modificações nas componentes neuromotoras de movimento após AVE predominantes no MS. A avaliação dois indivíduos foi realizada em dois momentos PRE e POST separados por um período de intervenção de cerca de quinze semanas. Em cada momento de avaliação foi aplicada a F-MAMR, foi recolhido sinal electromiográfico dos músculos GD, DP, TLONG, TLAT e ABDPOL durante o movimento de alcance e usaram-se seis itens da CIF selecionadas de acordo com as necessidades sentidas. No momento PRE aplicou-se a MMSE para detetar défices cognitivos que interferissem com o processo de avaliação e de intervenção. O programa de intervenção foi individualizado e devidamente ajustado aos indivíduos, procurando que estes mantivessem um papel ativo durante a reabilitação. Esta foi realizada com a frequência de três vezes por semana e cada sessão teve cerca de quarenta e cinco minutos de trabalho ativo. Resultados: encontraram-se modificações na sequência de ativação muscular nos dois indivíduos e entre os indivíduos nos dois momentos de avaliação, nomeadamente no tempo de ativação muscular. O ABDPOL modificou o tempo em que iniciou atividade muscular e passou a recrutar atividade quase simultaneamente ao início do movimento da mão, verificando-se uma influência positiva da sinergia extensora do MS na capacidade de placing do polegar. Verificaram-se resultados positivos no estado sensório-motor do MS e na capacidade do indivíduo em participar em diversas AVD`s selecionadas de acordo com as necessidades. Conclusão: este estudo parece apontar para uma influência positiva nas modificações do nível de atividade da sinergia extensora do MS e na influência desta sobre a capacidade de placing do polegar durante o movimento de alcance, face a um programa de intervenção. Este estudo parece apontar também para uma influência positiva sobre a capacidade do indivíduo em participar em AVD`s selecionadas para a avaliação de acordo com necessidades sentidas.