A novel alpha-galactosidase from I'ifidobacterium bifidum with transgalactosylating properties: gene molecular cloning and heterologous expression

A genomic library of Bifidobacterium bifidum (NCIMB 41171) DNA was constructed in Escherichia coli RA11r (melA(-)B(+)) and one alpha-galactosidase encoding gene was isolated. Conceptual translation combined with insertional mutagenesis analysis indicated an open reading frame (ORF) of 759 amino acid (aa) residues encoding an alpha-galactosidase (named as MelA) of 82.8 kDa. Partial purification and characterisation showed that the enzyme had an apparent native molecular mass of a parts per thousand 243 kDa and a subunit size of a parts per thousand 85 kDa. The enzyme belongs to glycosyl hydrolases 36 family with high aa sequence similarities (a parts per thousand 73%) to other known alpha-galactosidases of bifidobacterial origin. Under optimum pH conditions for activity (pH 6.0) and high melibiose concentration (40% w/v), the enzyme was able to form oligosaccharides with degree of polymerisation (DP) a parts per thousand yen3 at higher concentration than DP = 2, with a total yield of 20.5% (w/w).

Solar cycle 24: what is the sun up to?

March 2012 brought the first solar and geomagnetic disturbances of any note during solar cycle 24. But perhaps what was most remarkable about these events was how unremarkable they were compared to others during the space-age, attracting attention only because solar activity had been so quiet. This follows an exceptionally low and long-lived solar cycle minimum, and so the current cycle looks likely to extend a long-term decline in solar activity that started around 1985 and that could even lead to conditions similar to the Maunder minimum within 40 years from now, with implications for solar-terrestrial science and the mitigation of space weather hazards and maybe even for climate in certain regions and seasons.

Differentiating core and co-opted mechanisms in calculation: The neuroimaging of calculation in aphasia

The role of language in exact calculation is the subject of debate. Some behavioral and functional neuroimaging investigations of healthy participants suggest that calculation requires language resources. However, there are also reports of individuals with severe aphasic language impairment who retain calculation ability. One possibility in resolving these discordant findings is that the neural basis of calculation has undergone significant reorganization in aphasic calculators. Using fMRI, we examined brain activations associated with exact addition and subtraction in two patients with severe agrammatic aphasia and retained calculation ability. Behavior and brain activations during two-digit addition and subtraction were compared to those of a group of 11 healthy, age-matched controls. Behavioral results confirmed that both patients retained calculation ability. Imaging findings revealed individual differences in processing, but also a similar activation pattern across patients and controls in bilateral parietal cortices. Patients differed from controls in small areas of increased activation in peri-lesional regions, a shift from left fronto-temporal activation to the contralateral region, and increased activations in bilateral superior parietal regions. Our results suggest that bilateral parietal cortex represents the core of the calculation network and, while healthy controls may recruit language resources to support calculation, these mechanisms are not mandatory in adult cognition.

Validation of a priori CME arrival predictions made using real-time heliospheric imager observations

Between December 2010 and March 2013, volunteers for the Solar Stormwatch (SSW) Citizen Science project have identified and analyzed coronal mass ejections (CMEs) in the near real-time Solar Terrestrial Relations Observatory Heliospheric Imager observations, in order to make “Fearless Forecasts” of CME arrival times and speeds at Earth. Of the 60 predictions of Earth-directed CMEs, 20 resulted in an identifiable Interplanetary CME (ICME) at Earth within 1.5–6 days, with an average error in predicted transit time of 22 h, and average transit time of 82.3 h. The average error in predicting arrival speed is 151 km s−1, with an average arrival speed of 425km s−1. In the same time period, there were 44 CMEs for which there are no corresponding SSW predictions, and there were 600 days on which there was neither a CME predicted nor observed. A number of metrics show that the SSW predictions do have useful forecast skill; however, there is still much room for improvement. We investigate potential improvements by using SSW inputs in three models of ICME propagation: two of constant acceleration and one of aerodynamic drag. We find that taking account of interplanetary acceleration can improve the average errors of transit time to 19 h and arrival speed to 77 km s−1.

Condensed tannins in extracts from European medicinal plants and herbal products

Medicinal plant materials are not usually analysed for condensed tannins (CT). Thirty commercially available European medicinal plants and herbal products were screened for CT and fourteen CT samples were analysed in detail. This is also the first comprehensive CT analysis of pine buds, walnut leaves, heather flowers and great water dock roots. Acetone/water extracts contained between 3.2 and 25.9 g CT/100 g of extract, had CT with mean degrees of polymerisation of 2.9 to 13.3, procyanidin/prodelphinidin ratios of 1.6/98.4 to 100/0 and cis/trans flavan-3-ol ratios of 17.7/82.3 to 97.3/2.7. The majority of samples contained procyanidins, four contained A-type linkages (blackthorn flowers, heather flowers, bilberry leaves and cowberry leaves) and one sample also had galloylated procyanidins (great water dock roots).

Low CD4(+) T-Cell Levels and B-Cell Apoptosis in Vertically HIV-exposed Noninfected Children and Adolescents

Lymphocyte subsets, activation markers and apoptosis were assessed in 20 HIV-exposed noninfected (ENI) children born to HIV-infected women who were or not exposed to antiretroviral (ARV) drugs during pregnancy and early infancy. ENI children and adolescents were aged 6-18 years and they were compared to 25 age-matched healthy non-HIV-exposed children and adolescents (Control). ENI individuals presented lower CD4(+) T cells/mm(3) than Control group (control: 1120.3 vs. ENI: 876.3; t-test, p=0.030). ENI individuals had higher B-cell apoptosis than Control group (Control: 36.6%, ARV exposed: 82.3%, ARV nonexposed: 68.5%; Kruskal-Wallis, p < 0.05), but no statistical difference was noticed between those exposed and not exposed to ARV. Immune activation in CD4(+) T, CD8(+) T and in B cells was comparable in ENI and in Control children and adolescents. Subtle long-term immune alterations might persist among ENI individuals, but the clinical consequences if any are unknown, and these children require continued monitoring.

Light and scanning electron microscopy of Henneguya arapaima n. sp (Myxozoa: Myxobolidae) and histology of infected sites in pirarucu (Arapaima gigas: Pisces: Arapaimidae) from the Araguaia River, Brazil

In this report, we describe Henneguya arapaima n. sp., a parasite of the gill arch and gall bladder of Arapaima gigas (pirarucu) collected in the Araguaia River, in the municipality of Nova Crixas, Goias State, central Brazil. The plasmodia were white, round or ellipsoidal and measured 200-600 mu m. Parasite development was asynchronous and the mature spores were fusifonn and had smooth wall. The spores measurements were (range, with means +/- S.D. in parentheses): total length-48.4-53.1 mu m (51.6 +/- 3.4 mu m), body length-13.5-15.2 mu m (14.2 +/- 0.8 mu m), body width-5.1-6.1 mu m (5.7 +/- 0.5 mu m), body thickness-4.7-5.3 mu m (4.9 +/- 0.2 mu m) and caudal process length-38.0-41.2 mu m (38.3 +/- 2.9 mu m). The polar capsules were elongated and of unequal size, with lengths of 6.3-6.8 mu m (6.5 +/- 0.2) and 6.2-6.6 mu m (6.3 +/- 0.1) for the longest and shortest axes, respectively. Capsule width was 1.4-1.6 mu m (1.5 +/- 0.1). Histological analysis showed that the plasmodia occurred in the tunica adventitia of the gall bladder and were delimited by a thin capsule of connective tissue. In the gill arch, the plasmodia were also surrounded by connective tissue similar to the endomesium, of striated skeletal muscle cells. Sixty-five juvenile specimens of A. gigas weighing 1.0-25.0 kg were examined, 17 (26.1%) of which were infected. Of these, 14 (82.3%) had cysts in the gall bladder, two (11.7%) had cysts in the gill arch and only one (5.9%) had cysts in both organs. When the fish were grouped by weight, the prevalence of infection in fish weighing up to 10.0 kg (20.7%) was significantly lower than in fish weighing 10.1-25.0 kg (50%) (G = 3.93; d.f. = 1; p < 0.05). (C) 2008 Elsevier B.V. All rights reserved.

Contribution of excitatory amino acid receptors of the retrotrapezoid nucleus to the sympathetic chemoreflex in rats

In the present study, we evaluated the role of glutamatergic mechanisms in the retrotrapezoid nucleus (RTN) in changes of splanchnic sympathetic nerve discharge (sSND) and phrenic nerve discharge (PND) elicited by central and peripheral chemoreceptor activation. Mean arterial pressure (MAP), sSND and PND were recorded in urethane-anaesthetized, vagotomized, sino-aortic denervated and artificially ventilated male Wistar rats. Hypercapnia (10% CO(2)) increased MAP by 32 +/- 4 mmHg, sSND by 104 +/- 4% and PND amplitude by 101 +/- 5%. Responses to hypercapnia were reduced after bilateral injection of the NMDA receptor antagonist D,L-2-amino-5-phosphonovalerate (AP-5; 100mm in 50 nl) in the RTN (MAP increased by 16 +/- 3 mmHg, sSNDby 82 +/- 3% and PND amplitudeby 63 +/- 7%). Bilateral injection of the non-NMDA receptor antagonist 6,7-dinitro-quinoxaline-2,3-dione(DNQX; 100 mm in 50 nl) and the metabotropic receptor antagonist (+/-)-alpha-methyl-4-carboxyphenylglycine (MCPG; 100mm in 50 nl) in the RTN did not affect sympathoexcitatory responses induced by hypercapnia. Injection of DNQX reduced hypercapnia-induced phrenic activation, whereas MCPG did not. In animals with intact carotid chemoreceptors, bilateral injections of AP-5 and DNQX in the RTN reduced increases in MAP, sSND and PND amplitude produced by intravenous injection of NaCN (50 mu g kg(-1)). Injection of MCPG in the RTN did not change responses produced by NaCN. These data indicate that RTN ionotropic glutamatergic receptors are involved in the sympathetic and respiratory responses produced by central and peripheral chemoreceptor activation.

Reações de oxidação de álcoois e olefinas promovidas por complexos de metais de transição imobilizados em líquidos iônicos fluorados

Neste trabalho foi estudada a viabilidade da transposição direta de reações de oxidação efetuadas em meio homogêneo ou meio bifásico aquoso para meio bifásico onde líquidos iônicos são empregados como agentes imobilizadores dos catalisadores utilizados. A oxidação de álcoois secundários (ciclopentanol) e de álcoois primários ativados (álcool benzílico) mostrou-se mais efetiva quando 1 mol% de RuCl3 imobilizados no líquido iônico tetrafluoroborato de 1-n-butil-3-metilimidazólio (BMI.BF4), 100 °C de temperatura, 7 atm de oxigênio e 24 horas de reação foram empregados, levando a 61% de conversão, 100% de seletividade em ciclopentanona e freqüência de rotação 2,54 h-1 (com peneira molecular no solvente) e 86% de conversão, 95% de seletividade em benzaldeído e freqüência de rotação 3,58 h-1. Estes resultados são superiores aos obtidos em condições homogêneas. Quando o líquido iônico BMI.BF4 foi substituído por líquidos iônicos fluorados, tais como BMI.OOCCF3 e o novo líquido iônico BMI.OOC(CF2)6CF3 a conversão dobrou e a seletividade se manteve em 100%, nas condições estudadas. A oxidação de olefinas (1-deceno) catalisada por PdCl2/CuCl2/O2 apresentou melhores resultados quando 2 mol% de PdCl2 e 4 mol% de CuCl2 foram imobilizados no líquido iônico BMI.BF4 a 80 °C de temperatura, 6 atm de oxigênio e 16 horas de reação foram empregados, levando a 99% de conversão, 53% de seletividade em 2-decanona e freqüência de rotação 3,09 h-1. Quando o sistema catalítico foi reutilizado a conversão foi de 88% e a seletividade 60%.

Estudo das condições de trabalho e fatores de risco dos dentistas de Porto Alegre

Nos dias de hoje, questões ligadas às necessidades de adaptar o trabalho aos seus atores são constantes. Sendo a odontologia uma profissão que impõe ao seus praticantes uma séria de fatores predisponentes a alterações sócio-psico-fisiológicas e organizacionais, este estudo tem como objetivo contribuir para o entendimento das questões relacionadas ao trabalho de cirurgiões-dentistas e suas repercussões sobre sua cida laboral. Este trabalho foi realizado através de entrevistas dirigidas, nas quais foi aplicado um questionário e realizado um exame físico-funcional em uma população de cem dentistas (51 mulheres e 49 homens) da cidade de porto Alegre. Os achados indicam que os dentistas homens apresentam maior consumo de bebidas alcoólicas e contraturas no ombro direito, enquanto as mulheres fazem maior uso de medicamentos e referem dor espontânea no ombro direito durante o trabalho, entre outros. Além disso, os dados com maior prevalência apontam os seguintes valores: 86% da amostra trabalha em sedestração, sendo entre 90,2% de mulheres e 81,6% de homens; 41% da amostra referiam dores de cabeça; 25% das mulheres referem depressão; 53,1% dos homens sofrem de lombalgia; 82,3% das mulheres apresentam contratura muscular ca cintura escapular; 15% da população referida apresenta contraturas musculares na cervical, com as mulheres representando uma taxa de 21,6%de prevalência na amostra; 15,7% das mulheres apresentam dores no punho direito e déficit de manuseio na mão direita e 85% da amostra acha seu trabalho cansativo. Apesar de diferenças no método de coleta de dados, os resultados deste estudo são compatíveis com a literatura, onde os dentistas homens referem menos dores e desconforto do que as mulheres.

Adenosina deaminase no diagnóstico de rejeição aguda após o transplante renal Ana Lúcia Livi

O transplante renal representa atualmente a melhor opção terapêutica e de reabilitação para o paciente com insuficiência renal crônica terminal. As rejeições são as principais causas de perda dos rins transplantados e, entre essas, as rejeições agudas são as que apresentam maior relevância clínica. Desta maneira, a monitorização do transplante renal com vistas ao diagnóstico precoce da rejeição e seu rápido tratamento é de grande relevância no manejo adequado desses pacientes. Como a rejeição celular aguda é mediada predominantemente por linfócitos T e, visto que, a enzima adenosina deaminase (ADA) é encontrada principalmente, a nível de sangue periférico, em linfócitos, objetivou-se com esse estudo, verificar a possível associação entre atividade sérica da ADA e a rejeição aguda do enxerto renal. Buscou-se, também, determinar a sua utilidade como método diagnóstico de rejeição celular aguda. Foram acompanhados até 1 mês de internação 35 pacientes transplantados renais. Dosagens da atividade de ADA sérica foram feitas cinco vezes por semana e sempre que houvesse suspeita clínica de rejeição aguda. O diagnóstico de rejeição aguda foi estabelecido por 2 nefrologistas, aos quais foram omitidos os resultados dos níveis séricos ADA. Estes médicos tinham todas informações clínicas e laboratoriais, incluindo valores séricos de creatinina e ciclosporina, cintilografias, ecografias, citologia aspirativa, punção biópsia renal quando esta era realizada e resposta aos diferentes tratamentos imunossupressores usados. A análise estatística foi feita utilizando-se testes de Mann-Whitney e Qui-quadrado. O nível p menor do que 0,05 foi considerado como significativo. A mediana dos episódios de rejeição celular aguda ficou entre o sexto e sétimo dia pós-transplante, havendo diferença estatisticamente significativa nos valores de ADA no sexto dia de seguimento entre os pacientes com rejeição (60.16), em relação aos que não tiveram rejeição celular aguda (24,55) (p=0,021 MW). Para se avaliar a eficácia da atividade sérica de ADA com método diagnóstico de rejeição aguda, empregou-se pontos de corte de valores de ADA>35,>40,>45, >50 e > que 30% dos valores do período pré-rejeição. Houve associação estatisticamente significativa entre ADA>30% e rejeição celular aguda (p=0.035 MW). Verificou-se, também, aumento significativos da atividade sérica de ADA em pacientes anti-HCV positivos e com necrose tubular aguda, sem interferência sobre os resultados dos episódios de rejeição celular aguda. Usando esses pontos de corte como parâmetros de diagnóstico para rejeição aguda observou-se: sensibilidade = 55,5%, especificidade = 82,3%, valor preditivo positivo = 76,9%, valor preditivo negativo = 63,6% e acurácia = 69,0%. Conclui-se que há um aumento significativo da atividade sérica da ADA durante os episódios de rejeição aguda de enxertos renais humanos, encontrando-se associação significativa entre o aumento de 30% dos valores de ADA pré-rejeição e o diagnóstico de rejeição celular aguda.

Desempenho produtivo de Pseudoplatystoma corruscans estocados em sistemas de criação: semi-intensivo (viveiro escavado) e intensivo (tanque-rede)

Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES)

Modo de aplicação e eficiência de inseticidas granulados sistêmicos para o controle de cigarras (Hemiptera: Cicadidae) do cafeeiro

Avaliou-se a eficiência de métodos de aplicação de inseticidas granulados sistêmicos para o controle das cigarras Quesada gigas (Olivier) e Dorisiana drewseni (Stål) do cafeeiro (Coffea arabica). O ensaio foi conduzido em cafezal cv. Mundo Novo com idade de seis anos, espaçamento de 3,5 X 1,5 m, com uma planta/cova, no ano agrícola 1992/1993. Utilizou-se um delineamento em blocos casualizados, com 21 tratamentos e 4 repetições, cada uma contendo parcelas de cinco plantas. Os tratamentos consistiram nas aplicações dos produtos triadimenol + disulfoton 1,5% + 7,5% (26 g/cova), aldicarb 150G (10,00 g/cova), ethoprophos 100G (30,00 g/cova), phorate 5G (80,00 g/cova) e terbufos 5G (40,00 g/cova) em quatro modalidades de aplicação: aplicador costal manual Mebuki TF8; canequinha, lançando o produto para o ápice da planta; aplicador tratorizado Kamaq CK2-AG; e sulcos em meia lua, abertos manualmente, na projeção da copa. As avaliações foram realizadas aos 70, 105 e 140 dias após aplicação dos produtos, onde foram efetuadas aberturas de trincheiras de 50 X 50 X 50cm por cova, procedendo-se a contagem do número de ninfas vivas. Concluiu-se que o aplicador costal manual e canequinha revelaram-se os mais eficientes (86,0 - 93,5% e 76,8 - 86,7%, respectivamente); aplicação tratorizada e sulcos na projeção de copa tiveram sua eficiência variável com o produto utilizado; terbufos apresentou maior redução da população (98,2 - 100%) e phorate (79,6 - 99,1%) e a mistura triadimenol + disulfoton (82,3 - 97,3%) apresentaram alta eficiência, não diferindo do terbufos. Aldicarb apresentou desempenho satisfatório (68,1 - 85,0%) conforme o modo de aplicação e ethoprophos não foi eficaz quando aplicado com o aplicador costal manual (58,4%), canequinha (45,1%) e sulco (31,9%).

Perfil eletroforético de proteínas séricas do sangue do cordão umbilical de cães

A importância do estudo do sangue do cordão umbilical (SCU) tem sido verificada pela presença de células-tronco hematopoéticas no SCU humano. O modelo experimental em cão tem propiciado informações importantes nos transplantes em humanos. Entretanto, apesar da importância do SCU e do modelo experimental em cães, não existem estudos sobre a eletroforese de proteínas séricas do cordão umbilical canino. No presente protocolo experimental, foi feita a colheita de SCU de 20 neonatos caninos, o qual foi utilizado para o fracionamento eletroforético de suas proteínas. Os valores médios absolutos obtidos para proteínas séricas totais, albumina, alfa, beta e gamaglobulinas no sangue do cordão umbilical de cães ao nascimento foram 3,09±0,59; 1,51±0,38; 0,87±0,17; 0,68±0,12 e 0,03±0,01, respectivamente. Todos os resultados apresentaram-se abaixo dos níveis reportados para animais adultos, devido à passagem das proteínas e suas frações ocorrerem principalmente através do colostro e pela imaturidade hepática. em todos os traçados eletroforéticos do SCU de cães, foi observada uma pequena curva entre alfaglobulina 2 e betaglobulina 1, não relatada no soro de cães adultos. Portanto, neste experimento, foram observadas diferenças quantitativas no traçado eletroforético das proteínas séricas do SCU de cães, ao nascimento, diferindo-os, neste particular, de cães em diferentes fases da vida pós-colostral.