1000 resultados para Teste de MTT


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Pós-graduação em Ciências Biológicas (Biologia Celular e Molecular) - IBRC

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A leishmaniose é considerada um problema de saúde pública, principalmente devido à presença de diferentes espécies enzoóticas de Leishmania, envolvendo muitos hospedeiros e diferentes insetos vetores. Os antimoniais pentavalentes permanecem como as drogas de primeira escolha para o tratamento das leishmanioses há mais de 50 anos, no entanto, sua utilização vem sendo comprometida devido, principalmente, a resistência desenvolvida pelo parasita ao medicamento. Assim, a escolha de drogas derivadas de plantas baseada no estudo e utilização de práticas da medicina tradicional devem aparecer como nova estratégia para o controle da leishmaniose. No entanto, é importante verificar que algumas destas drogas podem ser tóxicas ao organismo, podendo inclusive apresentar propriedades genotóxicas, causando alterações no DNA com conseqüente aumento no risco de carcinogênese. A Julocrotina (2-[N-(2-methylbutanolyl)]- N-phenylethylglutarimide) é um alcalóide glutarimida isolado da espécie Croton pullei var. glabrior Lanj. Euphorbiaceae), encontrada amplamente na Floresta Amazônica e conhecido por possuir potente efeito leishmanicida. Desta forma, no presente estudo avaliamos o efeito citotóxico e genotóxico da Julocrotinaa partir do Ensaio do MTT e Ensaio do Cometa (versão alcalina) em cultura de linfócitos humanos. Como resultado, o alcalóide não demonstrou citotoxicidade em linfócitos humanos nas concentrações testadas. No entanto, a julocrotina mostrou-se genotóxica para linfócitos humanos tratados com a maior concentração (632μM) da substância. Apesar dos resultados de citotoxicidade parecem promissores no que diz respeito ao uso da julocrotina no tratamento da leishmaniose, o efeito genotóxico observado reforça a necessidade de se obter as devidas precauções quanto ao seu uso como fitoterápico leishmanicida.

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A tirosinase é uma enzima chave para a biossíntese de melanina. É uma enzima “cobre-dependente” que pode existir em três estados intermediários: desoxi (Cu1+ -Cu1+), oxi (Cu 2+ - O2 -Cu2+) e met (Cu2+) - Cu2+). Apresenta atividade bifuncional, pois oxida fenóis ou catecóis em seus o-difenóis correspondentes, sendo que o processo de oxidação de fenóis pode ser descrito por cinética de Michaelis-Menten. Distúrbios na tirosinase estão associados com hiperpigmentação e escurecimento enzimático de frutas e fungos. Assim a busca por substâncias de origem natural ou sintética capazes de regular o comportamento desta enzima é fator chave para o tratamento de tais desordens. Nesta perspectiva, no presente trabalho buscou-se analisar bioquimicamente a atividade anti-tirosinase de análogos do ácido kójico derivados de 4H- pironas (S-01, S-02, S-03 e S-04) e derivados de diidropirano [3, 2-b] cromenodionas (S-05, S-06, S-07 e S-08), quimicamente planejadas por modelagem molecular no LPDF, do ICEN da UFPA. A cinética das substâncias S-02, S-04, S-06, S-07 e S-08 apresentaram inibição do tipo competitiva, semelhante ao padrão de inibição do ácido kójico, com valores de Ki de 145,0 ± 20,0 μM; 64,0 ± 10,0 μM; 4,0 ± 0,0 μM; 6,0 ± 0,0 μM; 9,0 ± 0,0 μM, respectivamente, e de 5,0 ± 0,0 μM para o ácido kójico, enquanto a substância S-01 apresentou uma inibição do tipo mista (Ki = 999,0 ± 150,0 μM). Já as substâncias S-03 e S-05 não apresentaram atividade inibitória. As substâncias testadas demonstraram alto grau de segurança tanto na integridade de membrana de eritrócitos em teste de hemólise, quanto na viabilidade em teste com MTT em culturas de fibroblasto MRC5, em cultura de células nervosas de retina de embrião de galinha e em melanoma B16F10. Assim, demonstrou-se que as substâncias S-02, S-04, S-06, S-07 e S-08 apresentam atividade como potentes inibidores de tirosinase, podendo ser candidatos no tratamento de desordens de pigmentação.

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Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo (FAPESP)

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Pós-graduação em Biopatologia Bucal - ICT

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Pós-graduação em Microbiologia - IBILCE

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Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo (FAPESP)

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O Brasil apresenta regiões com grande diversidade geográfica proporcionando o desenvolvimento de diferentes espécies vegetais, favorecendo a busca por bioativos com fins terapêuticos. Nos últimos anos, fungos endofíticos vêm sendo considerados fontes importantes de produtos naturais, demonstrando atividades biológicas de interesses terapêuticos. Pesquisas apontam que extratos brutos oriundos de fungos endofíticos da Eugenia jambolana demonstram atividades antineoplásicas e antimicrobianas. No presente estudo verificou-se a atividade citotóxica e genotóxica de extratos brutos provenientes do metabolismo secundários dos fungos endofíticos isolados de partes da planta da Eugenia jambolana, como caule (Ej- c), folhas (Ej-f), fruto verde (Ej-fv) e fruto maduro (Ej-fm) por meio de experimentos in vitro, utilizando células de hepatocarcinoma murino selvagem (Hepa-1c1c7). Para avaliar a citotoxicidade dos extratos brutos foi realizado o teste do MTT, podendo ser observados diferentes perfis citotóxicos de acordo com a parte da planta e o tempo de exposição de 24 e 48 horas. No tempo de exposição de 24 horas as amostras de Ej-fv(1) e Ej-fv(3) apresentaram CI50 de 65,57 μg/ml e 85,75 μg/ml, respectivamente. Já para amostra Ej-fm(1) houve CI50= 46,53 μg/ml . Nas análises que correspondem o tempo de exposição de 48 horas os extratos brutos do caule Ej-c ( Ej-c(3) e Ej-c(5)) apresentaram CI50 nas concentrações de 84,65 μg/ml e 95,35 μg/ml, respectivamente. O composto Ej-c(1) também foi observado uma menor citotoxicidade na concentração de 100,0 μg/ml. A atividade citotóxica também foi observada nas amostras da folha Ej-f (Ej-f(1), Ej-f(2), Ej-f(3)) atingindo o CI50 nas concentrações de 95,54 μg/ml, 90,8, μg/ml e 26,91 μg/ml, respectivamente. O composto Ej-f(3) também apresentou atividade citotóxica de menor na concentração de 33,3 μg/ml. As amostras do fruto verde Ej-fv(1), Ej-fv(2), Ej-fv(3), Ej-fv(4) e ...

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Combining the characteristics of good adhesion and sealing of the AH Plus sealer the biological properties of the MTA, zinc oxide and calcium hydroxide, the purpose of this study was to evaluate the cytotoxicity of these associations. The specimens of the sealers and their associations were mixed and exposure to culture medium (82.4 mm2surface/mL) after the manipulation and incubated in a humidified incubator (37°C and 100% humidity) for 24 h. Chinese hamster lung fibroblasts (V79) were exposed to different dilutions of this extracts for 24 h and cell viability was measured by MTT test. The differences between the cell survival rates were statistically analyzed for Kruskal-Wallis and Dunn (p≤0.05). All sealers showed a significant difference with the group control, except the MTA. Cytotoxicity with the control group increased in the following order: AH Plus < AH Plus + Ca(OH) 2 < AH Plus + OxZn< AH Plus + MTA < MTA (p≤ 0,05). It was concluded that the addition of biological materials in order to improve the consistency of AH Plus for use in retro cavities its toxicity has not decreased significantly

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Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES)

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Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES)

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The aim of this in vitro study was to evaluate the trans-enamel and transdentinal cytotoxic effects of two in-office tooth bleaching techniques that employ bleaching gels containing 20% and 38% of H2 O2 on cultured odontoblast-like cell line (MDPC-23). Sixty enamel/dentin discs were obtained from bovine central incisors and placed individually in artificial pulp chambers. Six groups were formed according to the following enamel treatments: G1- 20% H2 O2 (1 application); G2- 20% H2 O2 (2 applications); G3- 38% H2 O2 (1 application); G4- 38% H2 O2 (2 applications); G5- 38% H2 O2 (3 applications); and G6- control (no treatment). In G1 and G2, the bleaching gel was left in contact with the enamel surface for 45 min in each application. However, in G3, G4, and G5 the bleaching gel was applied for only 10 min per application. After the last application, the extracts were collected and applied on previously cultured cells (30.000 cells/cm2 ) for 24 h. Cell metabolism was evaluated by the MTT assay and cell morphology was analysed by scanning electron microscopy. Cell metabolism decreased by 96.29%; 96.11%; 96.42%; 95.62%; and 97.18% in G1, G2, G3, G4, and G5, respectively. All treated groups differed significantly from non-treated control group (G6) (p < 0.05). However, the difference in cell metabolism among treated groups was not significant statistically. In addition, significant morphological cell alterations were observed in all treated groups. Under the tested experimental conditions, the extracts collected after both tooth bleaching techniques evaluated in this study caused severe toxic effects on cultured odontoblast-like cell MDPC-23.