Envolvimento do inflamassoma e citocinas na resposta imunológica em infecção induzida pelo fungo Sporothrix schenckii

Pós-graduação em Biociências e Biotecnologia Aplicadas à Farmácia - FCFAR

Modulação da resposta imune por antígenos da parede celular de Sporothrix schenckii em modelo murino de esporotricose

Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico (CNPq)

Influência do receptor Toll-like 2 na defesa do hospedeiro contra o fungo Sporothrix schenckii

Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo (FAPESP)

Análise dos macrófagos M1 e M2 durante a infecção por Sporothrix schenckii em modelo murino

Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo (FAPESP)

Sporothrix schenckii sensu stricto Isolated from Soil in an Armadillo's Burrow

Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo (FAPESP)

Influência do receptor TLR-2 no processo de fagocitose do fungo Sporothrix schenckii

A esporotricose é uma micose provocada pelo fungo Sporothrix schenckii, resultante da inoculação direta de conídios e hifas do fungo. A doença se desenvolve habitualmente na pele, no tecido subcutâneo, podendo através dos vasos linfáticos, comprometer órgãos internos. Nos últimos anos tem-se voltado à atenção à participação do receptor Toll Like-2 no reconhecimento e fagocitose de diversos antígenos fungicos. A partir disto, o objetivo deste estudo foi estudar a influência do receptor Toll Like-2 no processo de fagocitose do Sporothrix schenckii em camundongos C57BL/6. Este estudo avaliou o processo de internalização do Sporothrix schenckii por macrófagos murinos obtidos de camundongos C57BL/6 WT e C57BL/6 TLR-2 KO. Os experimentos foram realizados através da utilização de lâminas de cultura celular e microscopia ótica. Além de analisar a viabilidade de células fúngicas internalizadas através de ensaios de sobrevivência. Como resultados pudemos observar a significativa importância do TLR-2 no processo de internalização deste microrganismo, uma vez que o estudo evidenciou uma eficácia de internalização acima de 85% dos macrófagos obtidos de animas selvagens em relação aos obtidos de animais TLR-2 KO. Além disso, através de ensaios de sobrevivência foram obtidos resultados que sugerem a ausência de viabilidade das células fúngicas depois de fagocitadas

Involvement of major components from sporothrix schenckii cell wall in the caspase-1 activation, nitric oxide and cytokines production during experimental sporotrichosis

Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo (FAPESP)

Optimal clearance of Sporothrix schenckii requires an intact Th17 response in a mouse model of systemic infection

Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo (FAPESP)

Sporothrix schenckii complex biology: environment and fungal pathogenicity

Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES)

Antibodies Against Sporothrix schenckii Enhance TNF-a Production and Killing by Macrophages

Sporotrichosis is a chronic granulomatous mycosis caused by the dimorphic fungus Sporothrix schenckii. The immunological mechanisms involved in the prevention and control of sporotrichosis suggest that cell-mediated immunity plays an important role in protecting the host against S. schenckii. Nonetheless, recent data strongly support the existence of protective Abs against this pathogenic fungus. In a previous study, we showed that passive Ab therapy led to a significant reduction in the number of colony forming unit in the organs of mice when the MAb was injected before and during S. schenckii infection. The ability of opsonization to enhance macrophage damage to S. schenckii and subsequent cytokine production was investigated in this work. Here we show that the fungicidal characteristics of macrophages are increased when the fungus is phagocytosed in the presence of inactivated serum from mice infected with S. schenckii or mAb anti-gp70. Additionally, we show an increase in the levels of pro-inflammatory cytokines such as TNF-a and IL-1 beta. This study provides additional support for the importance of antibodies in protecting against S. schenckii and concludes that opsonization is an important process to increase TNF-a production and fungus killing by macrophages in experimental sporotrichosis.

Isolation of Sporothrix schenckii from the claws of domestic cats (indoor and outdoor) and in captivity in São Paulo (Brazil)

Sporotrichosis is a subcutaneous mycosis and is also a zoonosis (sapro- and anthropozoonosis). The objective of the present study was to determine the occurrence of sporotrichosis in domestic cats and in wild or exotic felines in captivity through the isolation of Sporothrix spp. from claw impressions in a culture medium. The samples included 132 felines, of which 120 (91.0 %) were domestic cats, 11 (8.3 %) were wild felines, and one (0.7 %) was an exotic felid. Twenty-one (17.5 %) were outdoor cats. Of the total, 89 (67.4 %) had contact with other animals of the same species. It was possible to isolate Sporothrix schenckii from the claws of one (0.7 %) of the felids probed; this animal exhibited generalised sporotrichosis and had infected a female veterinarian. The potential pathogenic agents Microsporum canis and Malassezia pachydermatis were isolated in 12.1 and 5.3 % of the animals, respectively. The following anemophilous fungi, which were considered to be contaminants, were also isolated: Penicillium sp. (28 or 21.2 %), Aspergillus sp. (13 or 9.8 %), Rhodotorula sp. (5 or 3.8 %), Candida sp. (5 or 3.8 %), Trichoderma sp. (1 or 0.7 %), and Acremonium sp. (1 or 0.7 %). Due to the low magnitude of occurrence (0.7 %) of Sporothrix in feline claws, the potential of the cats evaluated in this study to be sources of infection in the city of São Paulo is considerably low.

Phytogeny of the Quambalariaceae fam. nov., including important Eucalyptus pathogens in South Africa and Australia

The genus Quambalaria consists of plant-pathogenic fungi causing disease on leaves and shoots of species of Eucalyptus and its close relative, Corymbia. The phylogenetic relationship of Quambalaria spp., previously classified in genera such as Sporothrix and Ramularia, has never been addressed. It has, however, been suggested that they belong to the basidiomycete orders Exobasidiales or Ustilaginales. The aim of this study was thus to consider the ordinal relationships of Q. eucalypti and Q. pitereka using ribosomal LSU sequences. Sequence data from the ITS nrDNA were used to determine the phylogenetic relationship of the two Quambalaria species together with Fugomyces (= Cerinosterus) cyanescens. In addition to sequence data, the ultrastructure of the septal pores of the species in question was compared. From the LSU sequence data it was concluded that Quambalaria spp. and F. cyanescens form a monophyletic clade in the Microstromatales, an order of the Ustilaginomycetes. Sequences from the ITS region confirmed that Q. pitereka and Q. eucalypti are distinct species. The ex-type isolate of F. cyanescens, together with another isolate from Eucalyptus in Australia, constitute a third species of Quambalaria, Q. cyanescens (de Hoog & G.A. de Vries) Z.W. de Beer, Begerow & R. Bauer comb. nov. Transmission electron-microscopic studies of the septal pores confirm that all three Quambalaria spp. have dolipores with swollen lips, which differ from other members of the Microstromatales (i.e. the Microstromataceae and Volvocisporiaceae) that have simple pores with more or less rounded pore lips. Based on their unique ultrastructural features and the monophyly of the three Quambalaria spp. in the Microstromatales, a new family, Quambalariaceae Z.W. de Beer, Begerow & R. Bauer fam. nov., is described.

Estudo da efetividade e segurança de um novo esquema posológico da solução saturada de iodeto de potássio no tratamento da esporotricose linfocutânea e cutânea fixa

Fundamentos: A primeira escolha para o tratamento da esporotricose cutânea é o itraconazol oral, contudo o aumento de casos ocorridos numa epidemia de transmissão zoonótica fez com que se buscassem alternativas efetivas e seguras de tratamento. Objetivo: Avaliar uma nova posologia do iodeto de potássio (KI) como alternativa para o tratamento das formas cutâneas limitadas da esporotricose. Métodos: Foram incluídos 102 pacientes com esporotricose, diagnosticados através do isolamento do Sporothrix sp. e divididos em dois grupos que receberam doses diferentes de KI: grupo A recebeu a dose anterior (média 4,83g/dia) e grupo B, a dose reduzida (média 2,52g/dia). Os critérios de cura se basearam em dados clínicos e sorológicos. Resultados: Setenta e nove pacientes (77,4%) obtiveram cura clínica, 70,6 e 84,3% respectivamente nos grupos A e B. Dezesseis pacientes (15,6%) perderam o seguimento e sete trocaram de medicamento: cinco no grupo A e dois no grupo B. A incidência de eventos adversos foi a mesma nos dois grupos (64,7%) com predomínio do gosto metálico (44%), seguido por intolerância gastrointestinal leve e erupção acneiforme (10,7% cada). Nenhum evento adverso grave ocorreu e não houve recidivas. A análise dos desfechos não demonstrou diferença estatisticamente significativa entre os grupos (p=0,9255). A melhora dos títulos sorológicos foi significativa em ambos grupos. Conclusões: O iodeto de potássio, sob a forma de solução saturada, administrado em dose e frequência reduzidas, pode ser usado como alternativa efetiva e segura para o tratamento da esporotricose cutânea. Através de análises estatísticas, a posologia habitual não demonstrou ser superior à proposta por este estudo. A sorologia para esporotricose pode ser utilizada como ferramenta valiosa para acompanhamento clínico destes pacientes.

Controle biologico do percevejo-de-renda (Leptopharsa heveae Drake & Poor) em seringais de cultivo.

A mosca-de-renda ou percevejo-de-renda (Leptopharsa heveae - Hemiptera: Tingidae) e o mais importante inseto-praga da seringueira no Brasil. Essa praga de origem amazonica invadiu os seringais do Estado de Mato Grosso por volta de 1985 e, de 1992 a 1998, chegou aos seringais do Estado Sao Paulo e de Goias. Acredita-se que breve chegara aos Estados da Bahia, Espirito Santo e Minas Gerais. O principal agente disseminador desse inseto-praga entre estados e seringais tem sido os veiculos transportadores de coagulos e latex semiprocessado (GEB). O controle quimico dessa praga, alem de muito caro, coloca em risco os aplicadores e o meio ambiente. Em 1986, no Amazonas, o fungo Sporothrix insectorum foi constatado parasitando individuos do percevejo-de-renda. Com base nessa constatacao foram feitos alguns estudos em campo e laboratorio onde se determinaram a eficiencia biologica (capacidade do inimigo natural para infectar e destruir a praga) e a eficiencia tecnica (capacidade do inimigo natural para reduzir os danos causados na planta pela acao da praga). Os resultados desses testes evidenciaram o elevado potencial do S. insectorum para o controle do percevejode-renda. Imediatamente apos os testes, esse fungo foi enviado para os Estados de Mato Grosso, Acre, Rondonia, e mais recentemente para Sao Paulo e Goias onde vem sendo utilizado com o fungo Hirsutella verticillioides por diversos produtores e empresas. O fungo H. verticillioides, outro inimigo natural do percevejo-de-renda, isolado em 1990, na Guiana Francesa, vem sendo bem mais agressivo nos seringais da regiao Centro-Oeste e de Sao Paulo que o S. insectorum. Os resultados obtidos de avaliacoes efetuadas em alguns seringais de Goias, Mato Grosso e Sao Paulo indicam eficiencia biologica (porcentagem de insetos colonizados e fixados na folha por ambos os fungos em fevereiro), variando de 53% a 100%. Por outro lado, a eficiencia tecnica, medida pelo nivel de descoloracao da folha ou % de danos causados pela praga em fevereiro, tendo como referencia folhas nao atacadas, variou de 16% a 63%.

Melanin as a virulence factor of Paracoccidioides brasiliensis and other dimorphic pathogenic fungi: a minireview

Melanin pigments are substances produced by a broad variety of pathogenic microorganisms, including bacteria, fungi, and helminths. Microbes predominantly produce melanin pigment via tyrosinases, laccases, catecholases, and the polyketide synthase pathway. In fungi, melanin is deposited in the cell wall and cytoplasm, and melanin particles (""ghosts"") can be isolated from these fungi that have the same size and shape of the original cells. Melanin has been reported in several human pathogenic dimorphic fungi including Paracoccidioides brasiliensis, Sporothrix schenckii, Histoplasma capsulatum, Blastomyces dermatitidis, and Coccidioides posadasii. Melanization appears to contribute to virulence by reducing the susceptibility of melanized fungi to host defense mechanisms and antifungal drugs.