759 resultados para PRUEBA DE ELISA
Resumo:
In this paper, we present a decentralized dynamic load scheduling/balancing algorithm called ELISA (Estimated Load Information Scheduling Algorithm) for general purpose distributed computing systems. ELISA uses estimated state information based upon periodic exchange of exact state information between neighbouring nodes to perform load scheduling. The primary objective of the algorithm is to cut down on the communication and load transfer overheads by minimizing the frequency of status exchange and by restricting the load transfer and status exchange within the buddy set of a processor. It is shown that the resulting algorithm performs almost as well as a perfect information algorithm and is superior to other load balancing schemes based on the random sharing and Ni-Hwang algorithms. A sensitivity analysis to study the effect of various design parameters on the effectiveness of load balancing is also carried out. Finally, the algorithm's performance is tested on large dimensional hypercubes in the presence of time-varying load arrival process and is shown to perform well in comparison to other algorithms. This makes ELISA a viable and implementable load balancing algorithm for use in general purpose distributed computing systems.
Resumo:
A double antibody sandwich enzyme linked immunosorbent assay (ELISA) was developed to detect Echis carinatus venom in various organs (brain, heart, lungs, liver, spleen and kidneys) as well as tissue at the site of injection of mice, at various time intervals (1, 6, 12, 18, 24 h and 12 h intervals up to 72 h) after death. The assay could detect E. carinatus venom levels up to 2.5 ng/ml of tissue homogenate and the venom was detected up to 72 h after death. A highly sensitive and species-specific avidin-biotin microtitre ELISA was also developed to detect venoms of four medically important Indian snakes (Bungarus caeruleus, Naja naja, E. carinatus and Daboia russelli russelli) in autopsy specimens of human victims of snake bite. The assay could detect venom levels as low as 100 pg/ml of tissue homogenate. Venoms were detected in brain, heart, lungs, liver, spleen, kidneys, tissue at the bite area and postmortem blood. In all 12 human victim cadavers tested the culprit species were identified. As observed in mice, tissue at the site of bite area showed the highest concentration of venom and the brain showed the least. Moderate amounts of venoms were found in liver, spleen, kidneys, heart and lungs. Development of a simple, rapid and species-specific diagnostic kit based on this ELISA technique useful to clinicians is discussed.
Resumo:
The aim of this study was to develop and validate an ELISA for detecting chicken antibodies to Eimeria tenella. An initial comparison of merozoite and sporozoite antigen preparations revealed few differences in their ability to monitor the onset, kinetics and magnitude of the antibody response suggesting that both antigens would be equally useful for development of an ELISA. Furthermore the cross-reactivity of these antigens with sera from birds infected with chicken Eimeria species was similar. The merozoite antigen was selected for further evaluation because it was easier to prepare. Discrimination between sera from birds experimentally infected with E. tenella and birds maintained in an Eimeria-free isolation facility was excellent. In sera collected from free-range layers and commercial broilers there also appeared to be clear discrimination between infected and uninfected birds. The ELISA should prove useful for monitoring infectivity in vaccination programmes in layer and breeder flocks and for assessing the effectiveness of biosecurity measures in broiler flocks.
Resumo:
The ability of blocking ELISAs and haemagglutination-inhibition (HI) tests to detect antibodies in sera from chickens challenged with either Avibacterium (Haemophilus) paragallinarum isolate Hp8 (serovar A) or H668 (serovar C) was compared. Serum samples were examined weekly over the 9 weeks following infection. The results showed that the positive rate of serovar A specific antibody in the B-ELISA remained at 100% from the second week to the ninth week. In chickens given the serovar C challenge, the highest positive rate of serovar C specific antibody in the B-ELISA appeared at the seventh week (60% positive) and was then followed by a rapid decrease. The B-ELISA gave significantly more positives at weeks 2, 3, 7, 8 and 9 post-infection for serovar A and at week 7 post-infection for serovar C. In qualitative terms, for both serovar A and serovar C infections, the HI tests gave a lower percentage of positive sera at all time points except at 9 weeks post-infection with serovar C. The highest positive rate for serovar A HI antibodies was 70% of sera at the fourth and fifth weeks post-infection. The highest rate of serovar C HI antibodies was 20% at the fifth and sixth weeks post-infection. The results have provided further evidence of the suitability of the serovar A and C B-ELISAs for the diagnosis of infectious coryza.
Resumo:
Trichinella surveillance in wildlife relies on muscle digestion of large samples which are logistically difficult to store and transport in remote and tropical regions as well as labour-intensive to process. Serological methods such as enzyme-linked immunosorbent assays (ELISAs) offer rapid, cost-effective alternatives for surveillance but should be paired with additional tests because of the high false-positive rates encountered in wildlife. We investigated the utility of ELISAs coupled with Western blot (WB) in providing evidence of Trichinella exposure or infection in wild boar. Serum samples were collected from 673 wild boar from a high- and low-risk region for Trichinella introduction within mainland Australia, which is considered Trichinella-free. Sera were examined using both an 'in-house' and a commercially available indirect-ELISA that used excretory secretory (E/S) antigens. Cut-off values for positive results were determined using sera from the low-risk population. All wild boar from the high-risk region (352) and 139/321 (43.3%) of the wild boar from the low-risk region were tested by artificial digestion. Testing by Western blot using E/S antigens, and a Trichinella-specific real-time PCR was also carried out on all ELISA-positive samples. The two ELISAs correctly classified all positive controls as well as one naturally infected wild boar from Gabba Island in the Torres Strait. In both the high- and low-risk populations, the ELISA results showed substantial agreement (k-value = 0.66) that increased to very good (k-value = 0.82) when WB-positive only samples were compared. The results of testing sera collected from the Australian mainland showed the Trichinella seroprevalence was 3.5% (95% C.I. 0.0-8.0) and 2.3% (95% C.I. 0.0-5.6) using the in-house and commercial ELISA coupled with WB respectively. These estimates were significantly higher (P < 0.05) than the artificial digestion estimate of 0.0% (95% C.I. 0.0-1.1). Real-time PCR testing of muscle from seropositive animals did not detect Trichinella DNA in any mainland animals, but did reveal the presence of a second larvae-positive wild boar on Gabba Island, supporting its utility as an alternative, highly sensitive method in muscle examination. The serology results suggest Australian wildlife may have been exposed to Trichinella parasites. However, because of the possibility of non-specific reactions with other parasitic infections, more work using well-defined cohorts of positive and negative samples is required. Even if the specificity of the ELISAs is proven to be low, their ability to correctly classify the small number of true positive sera in this study indicates utility in screening wild boar populations for reactive sera which can be followed up with additional testing. (C) 2013 Elsevier B.V. All rights reserved.
Resumo:
A highly sensitive and specific reverse transcription polymerase chain reaction enzyme linked immunosorbent assay (RT-PCR-ELISA) was developed for the objective detection of nucleoprotein (N) gene of peste des petits ruminants (PPR) virus from field outbreaks or experimentally infected sheep. Two primers (IndF and Np4) and one probe (Sp3) available or designed for the amplification/probing of the 'N' gene of PPR virus, were chosen for labeling and use in RT-PCR-ELISA based on highest analytical sensitivity of detection of infective virus or N-gene containing recombinant plasmid, higher nucleotide homology at the primer binding sites of the 'N' gene sequences available and the ability to amplify PPR viral genome from different sources of samples. RT-PCR was performed with unlabeled IndF and Np4 digoxigenin labeled primers followed by a microplate hybridization probe reaction with biotin labeled Sp3 probe. RT-PCR-ELISA was found to be 10-fold more sensitive than the conventional RT-PCR followed by agarose gel based detection of PCR product. Based on the Mean (mean +/- 3S.D.) optical density (OD) values of 47 RT-PCR negative samples, OD values above 0.306 were considered positive in RT-PCR-ELISA. A total of 82 oculo-nasal swabs and tissue samples from suspected PPR cases were analyzed by RT-PCR and RT-PCR-ELISA, which revealed 54.87 and 58.54% positivity, respectively. From an experimentally infected sheep, both RT-PCR and RT-PCR-ELISA could detect the virus from 6 days post-infection up to 9 days in oculo-nasal swabs. On post-mortem, PPR viral genome was detected in spleen, lymph node, lung, heart and liver. The correlation co-efficient between RT-PCR-ELISA OD values and either TCID50 of virus or molecules of DNA was 0.622 and 0.657, respectively. The advantages of RT-PCR-ELISA over the conventional agarose gel based detection of RT-PCR products are discussed. (c) 2006 Elsevier B.V. All rights reserved.
Resumo:
Antigen specific monoclonal antibodies present in crude hybridoma supernatants are normally screened by ELISA on plates coated with the relevant antigen. Screening for inhibitory monoclonals to enzymes would require the evaluation of purified antibodies or antibody containing supernatants for their inhibition of enzyme activity in a separate assay. However, screening for inhibitory antibodies against DNA transacting enzymes such as topoisomerase I (topo I) cannot be done using hybridoma supernatants due to the presence of nucleases in tissue culture media containing foetal calf serum which degrade the DNA substrates upon addition. We have developed a simple and rapid screening procedure for the identification of clones that secrete inhibitory antibodies against mycobacterial topo I using 96 well ELISA microtiter plates. The principle of the method is the selective capture of monoclonal antibodies from crude hybridoma supernatants by topo I that is tethered to the plate through the use of plate-bound polyclonal anti-topo I antibodies. This step allows the nucleases present in the medium to be washed off leaving the inhibitor bound to the tethered enzyme. The inhibitory activity of the captured antibody is assessed by performing an in situ DNA relaxation assay by the addition of supercoiled DNA substrate directly to the microtiter well followed by the analysis of the reaction products by agarose gel electrophoresis. The validity of this method was confirmed by purification of the identified inhibitory antibody and its evaluation in a DNA relaxation assay. Elimination of all enzyme-inhibitory constituents of the culture medium from the well in which the inhibitory antibody is bound to the tethered enzyme may make this method broadly applicable to enzymes such as DNA gyrases, restriction enzymes and other DNA transaction enzymes. Further, the method is simple and avoids the need of prior antibody purification for testing its inhibitory activity. (C) 2010 Elsevier B.V. All rights reserved.
Resumo:
An assay was developed for quantitation of the antigenic relationship between viruses, by modification of the indirect ELISA. The principle of this method is to estimate the epitopes not shared between the related viruses, after titration of the antibodies specific to the common epitopes as in a blocking ELISA. In practice, varying concentrations of purified virus are preincubated with a fixed dilution of heterologous or homologous antiserum and the unbound antibodies present in the mixture are back titrated with virus particles bound to microtitre plates. The antigenic relationship is described in terms of differentiation index (DI) and total antigenic reactivity (TAR). This method has been used to quantitate cross-reactivity between two geographically different isolates of Oryctes baculovirus.
Resumo:
A single step solid phase radioimmunoassay (SS-SPRIA) has been developed for human chorionic,gonadotropin (hCG) using monoclonal antibodies (MAb) from culture media adsorbed immunochemically on plastic tubes. The assays have been found to be very simple in terms of operation and do not demand purification of MAbs. Several MAbs which do not show any displacement in liquid phase RIA and ELISA provide a satisfactory SS-SPRIA. Our investigations revealed that the assumption regarding the stability of the primary Mab-Ag complex during incubation and washing steps in ELISAs is not strictly valid for dissociable MAbs. A comparison of different assay systems suggests that the single step SPRIA offers additional advantages over conventionally used multistep ELISA procedures and provides a quantitative probe for the analysis of epitope-paratope interactions.
Resumo:
La leptospirosis es considerada una de las zoonosis más difundidas en el mundo entero. El perro actúa como un potencial diseminador de esta enfermedad ya que mantiene una estrecha relación con el hombre, y al mismo tiempo con otros animales tanto domésticos como salvajes. Con el objetivo de conocer la presencia de leptospirosis canina, se realizó estudio en ocho barrios del distrito dos de la cuidad de Managua entre 8 de septiembre al 9 de diciembre 2007. Se realizó un muestreo de 76 canes, correspondiente al 5% del total de canes en los ocho barrios. Se extrajo 3ml de sangre de la vena safena externa, luego de procesarlas para separar el suero sanguíneo del plasma mediante centrifugación, fueron trasladadas al laboratorio del Centro Veterinario de Diagnóstico e Investigación CEVEDI, UNAN-León, para su análisis mediante los métodos ELISA y MAT. De acuerdo con los resultados obtenidos mediante la prueba ELISA un 93.4%, 71 canes, son negativos y un 6.6%, o bien 5 especímenes, son seropositivos a Leptospira spp. Según los resultados de la prueba de micro aglutinación MAT, el 96.1% de la población muestreada es negativa y el 3.9% es positiva a leptospirosis encontrándose los siguientes serovares canico/a, icterohemorragiae, pyrogenes.
Resumo:
Al evaluar la presencia de residuos de antibióticos en leche cruda en acopios de Matiguás, Matagalpa, durante el periodo de noviembre 2010 – abril 2011, se determinó la presencia de residuos de antibióticos betalactámicos y tetraciclinas, estableciendo la familia de antibiótico con mayor presencia ,el mes con mayor positividad, estimando además la cantidad de leche con residuos de antibióticos. Se tomaron muestras de leche fresca de los acopios: San Martin, La patriota, San José de Paiwas y Lácteos Matiguas. Las muestras se sometieron a una prueba rápida para detección de residuos de antibióticos con el dispositivo Beta Star Combo. Para el análisis de los datos se usó el programa estadístico SPSS, aplicando la prueba de Chi2, resultando un 24 % de presencia de residuos de antibióticos del total de muestras, derivándose en 73.9% correspondiente a Tetraciclinas y 26.1 % correspondiente a Betalactámicos; correspondiendo al acopio San Martin y La patriota un 29% con 5 muestras positivas cada uno, Lácteos Matiguás con 6 % con una muestra positiva y San José de Paiwas con 35% con 6 muestras positivas a tetraciclinas. Para Betalactámicos: La patriota presentó 3 muestras positivas para un 50%, Lácteos Matiguás 17% (1 muestra positiva), San Jose de Paiwas 33% (2 muestras positivas), en la época lluviosa se presentaron 13 muestras positivas y en la época seca 10 muestras, concluyendo con la presencia de residuos de antibióticos en los acopios de Matiguás, siendo la familia de las Tetraciclinas la de mayor presencia. Los acopios con mayor cantidad de muestras positivas con residuos de antibióticos fueron San José de Paiwas y La Patriota, el mes con mayor presencia de antibióticos fue noviembre (6 muestras positivas), se estimó que la cantidad de leche contaminada por residuos de antibióticos fue de 138 000 L.
Circovirus Porcino (PCV2) en la granja porcina San José Aganorsa durante el periodo del 2011 al 2013
Resumo:
En el presente trabajo se evaluó la importancia sanitaria y económica que presenta la enfermedad Circovirus en la producción porcina de animales de 1 día de nacidos hasta las 12 semanas de vida, mediante tres evaluaciones en la granja porcina San José, AGANORSA en el municipio de Mateare, la prueba diagnóstica utilizada fue ELISA con captura de anticuerpo especifico para circovirus porcino tipo 2 (PCV2), realizada en el laboratorio nacional de diagnóstico veterinario MAGFOR en julio del 2011. En la primera evaluación se determinaron los indicadores epidemiológicos prevalencia, mortalidad y virulencia; utilizando datos de la empresa (diciembre 2011- julio 2012). Se registraron 15 lotes de animales vacunados y 15 no vacunados. Las variables evaluadas fueron: animales eliminados, animales muertos y total de enfermos. Mediante la prueba de comparación de medias (Duncan) se encontraron diferencias significativas (0.05>P) para las variables, prevalencia con el 19% en lotes no vacunados y 15% en lotes vacunados; para mortalidad el 14% y 9% en los lotes respectivos. La virulencia en lotes no vacunados y vacunados mostró diferencia significativa (0.05>P por Tukey), obteniendo valores del 76.82% y 63.82% para lotes no vacunados y vacunados, respectivamente. Mediante la estimación del coeficiente de correlación (Pearson), se encontró la existencia de relación entre el tratamiento y las variables prevalencia, mortalidad y virulencia. Las pérdidas económicas estimadas en los lotes sin vacunar fueron del 18.47% y en los vacunados del 14.90%, equivalentes a 5,893.545 y 5,544.840 Córdobas, respectivamente; con la vacunación se logró una reducción de un 3.57% de pérdidas económicas, que equivalen a 348,705.00 Córdobas. En la segunda y tercera evaluación las pérdidas económicas fueron del 4.47% y del 6%, lo que se traduce en 184,404.00 y 303,105.00 Córdobas, respectivamente. Para evaluar la efectividad de la aplicación de la vacuna sobre la mortalidad, se utilizó una prueba t-Student, con resultado estadístico altamente significativo (0.001>P). En la primera evaluación se encontraron resultados positivos frente a la vacunación, reduciendo en gran medida los indicadores epidemiológicos; en la segunda y tercera evaluación se determinaron porcentajes altos de mortalidad debido a factores de manejo y otros agentes etiológicos presentes en la granja (Staphylococcus sp. y Haemophilus Parasuis). La implementación de la vacuna para el control y prevención de Circovirus porcino PCV2, fue todo un éxito en la granja, mejorando los pesos obtenidos a las 23 semanas de vida, de 205 a 242 libras, reduciendo el porcentaje de animales pequeños (colitas) y la mortalidad causada por PCV2.
Resumo:
El presente trabajo se realizó en la Cooperativa Agropecuaria "Humberto Tapia Barquero" finca CHELOL, ubicada a 1.5 Km. al suroeste de Jinotepe-Carazo. El experimento se estableció en el periodo comprendido de Abril a Julio de 1995, en condiciones de vivero predominando los suelos franco arcillosos, profundos, bien drenados, pH: 6.5-6.7. Los 7 tratamientos fueron arreglados en un diseño completamente azarizado (D.C.A), con 20 repeticiones (plantas), para su análisis estadístico se utilizó la prueba de rangos múltiples de Tukey al 5 % de significancia como método de comparación. Se probaron 4 insecticidas químicos (Filitox, Decís, Thiodan y Diazinon), un insecticida biológico (Dipel) y un insecticida botánico (Neern), y un tratamiento sin aplicación (Testigo) evaluados para el control de Phyllocnislis citrella Stainton a nivel de vivero en plantas de lima tabití. Las variables evaluadas fueron: altura de plantas, diámetro de ramas principales, número de brotes nuevos y afectados por plantas, número de hojas dañadas por planta, número de larvas vivas y muertas por planta y número de minas por hojas. El tratamiento que presentó mayor mortalidad en todo el periodo de estudio fue el Filitox=67.32%, mientras que el Testigo=l.49"/o presentó el menor valor de los tratamientos en estudio. Todos los tratamientos a excepción del testigo probaron ser eficaces para el control del minador de la hoja de los cítricos, sin afectar de ninguna manera el normal crecimiento y desarrollo de las plantas de lima tahití.
Resumo:
El objetivo principal de la investigación fue estudiar el rendimiento de variedades Catuai amarillo y Catuai rojo utilizando beneticiado vía húmeda, ambas variedades pertenecientes a Coffea arabica L. Esta prueba consistió en la conversión de 0.197 m3 ( una fanega ), de café uva maduro a oro para ambas variedades. El café utilizado en dicha investigación se obtuvo de la hacienda Santa Gertrudis, ubicada en Jinotepe, tomando de aquí la muestra del Catuai amarillo. Y la otra muestra del Catuai rojo fue obtenida de la hacienda Australia, Situada en San Marcos. El proceso de beneficiado fue realizado en el beneficio San francisco localizado entre las Ciudades de San Marcos y la Concepción, la primera perteneciente al departamento de Carazo y la segunda al departamento de Masaya. Las dos variedades de de café fueron sometida al proceso de beneficiado obteniéndose del Catuai amarillo los mejores rendimientos en todas las variables evaluadas durante todo el proceso en comparación al Catuai rojo. A pesar del manejo agronómico que realizan los caficultores en estas zonas y la época del año en que fue realizada esta prueba, al final ambas, la variedad amarilla pesó 21.40 kg (46.50 libras), con 17.61 por ciento de rendimiento y con 11 por ciento de humedad, todo esto en café oro bruto. Mientras que la variedad roja pesó 20.20 kg (44.50 libras), con un rendimiento del 17.05 por ciento y con un porcentaje de humedad del 11.60 por ciento. Utilizando la criba número 15 para hacer la clasificación del grano por tamaño para la posterior selección para exportación, el mejor resultado en esta prueba lo tuvo el Catuai rojo con un 90 por ciento de grano de primera, ligeramente mayor que el 83.3 por ciento presentado por el Catuai amarillo.
Resumo:
El Programa Nacional Postcosecha de Nicaragua, adscrita al Instituto Nicaragüense de Tecnología Agropecuaria (INTA), con apoyo técnico y financiero de la Agencia Suiza para la Cooperación y el Desarrollo (COSUDE), con el fin de reducir las pérdidas Postcosecha en granos básicos y garantizar la disponibilidad de estos a pequeños y medianos agricultores/as, se realizó un estudio en los departamentos de Matagalpa y Jinotega, el cual se denominó "Prueba de Concepto". Este estudio consistió en conocer el grado de aceptación que puedan tener las estructuras mejoradas de almacenamiento que promociona el Programa Nacional Postcosecha por parte de la población meta (pequeños y medianos productores). En base a estos resultados obtenidos en este estudio, el Programa Nacional de Postcosecha implementó estrategias que conllevaron a la reducción de pérdidas de maíz y frijol durante la época de almacenamiento. El estudio se realizó de febrero a junio de 1994 en doce comunidades representativas de la producción de granos básicos en los departamentos de Matagalpa y Jinotega, con la participación de 220 agricultores/as en 12 Grupos Focales. Grupos que son llevados acabo a través de discusiones con los agricultores/as entrevistados en donde se le presentan las características generales de las estructuras de almacenamiento a través de fotografías y de una guía elaborada para tal fin. En el estudio realizado se reportó que el maíz y el frijol son los granos básicos más importantes que se producen en la zona. La Troja es la estructura tradicional de almacenamiento más utilizada para guardar maíz, en el 83% de las comunidades visitadas. Los barriles y los sacos a su vez son los más utilizados para almacenar frijol. La pérdida en el almacenamiento de maíz tiene su principal causa en: insectos, roedores y hongos, para el caso de el frijol son insectos, hongos y roedores. Los productos químicos mas utilizados para proteger los granos de maíz y frijol son Phostoxin (fosfuro de aluminio), Lorsban (Chlorpyrifos) y DDT (dichlorodiphenyltrichlorethane). El 100% de las comunidades visitadas mencionaron el Silo Metálico como la estructura de almacenamiento que presenta mayor aceptación y el segundo lugar de aceptación lo ocupa la Caseta de Secado. El crédito es el mecanismo necesario que los productores/as necesitan para adquirir estructuras de almacenamiento especialmente el Silo Metálico. La capacitación en materia de almacenamiento de granos fue solicitada por los agricultores/as de marzo a julio, octubre y noviembre.