1.° Vita Caroli Magni : authore Eginhardo ; praemittitur alia ejusdem Caroli vita : authore anonymo. — 2.° Fragmentum chronici Turpini, Rhemensis Archiepiscopi. — 3.° Vita Ludovici Pii, Imperatoris : authore anonymo. — 4.° Chronicon Regum Francorum à morte Ludovici Pii, ad annum 1109.

Colbertinus, antea Jacobi Augusti Thuani

Aeneae Sylvii, postea Pii Papae II. historiographica geographia.

DD. de Bethune

The influence of water on the glucose affinity of hexokinase

In the present thesis, the role of hydration during the glucose induced conformational change of hexokinase is investigated. This is accomplished by applying the osmotic stress technique. The osmotic stress technique is founded on varying of the activity of water in a system in order to determine ifs effects. This is accomplished by adding inert solute molecules that are excluded from the system under study. The solute molecules used within the present investigation are Polyethylene glycols (PEGs). PEGs aid in the removal of water from hexokinase by exerting osmotic pressure. The osmotic pressures of the PEG solutions are also measured with both vapour pressure osmometry and secondary osmometry with phospholipids. An interesting discovery is made in that the osmotic pressures of PEG and co-solute solutions are non-additive. This indicates that PEG concentrates co-solutes in solution by making a certain proportion of the water inaccessible. Glucose binding was measured fluorometrically and the glucose equilibrium dissociation constant (GEDC) of hexokinase is measured in solutions containing the different MW PEGs. Changes in the sensitivity of the glucose affinity with osmotic pressure allows the calculation of the change in the numbers of polymer-inaccessible water molecules upon the binding of glucose to hexokinase ~Nw. It was determined the ~Nw decreases with increases in osmotic pressure in the presence of all MW PEGs. ~Nw decreases from values between 45-290 water molecules at low pressure to approximately 15 at high pressure. There is also a molecular weight dependence observed. There are large decreases in ~Nw with osmotic pressure in the presence of PEGs above MW 1000. However, below MW 1500 changes in ~Nw with osmotic pressure are relatively small. These findings are interpreted with respect to two possible mechanisms involving changes in the conformation of hexokinase u~der osmotic pressure and the access of the PEG molecules to water surrounding hexokinase.

Catechismus ad parochos ex decreto Sacr. Concilii Tridentni Jussu PII. Pontif. Maximi editus, adjetis variantibus.

UANL

Breviarium romanum exdecreto sacrosancti concilii tridentini restitutum S. PII V. Pontificis maximi jussu editum x Clementis VIII primum, nunc denuo Urbani PP. VIII auctoritate recognitum.

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Officium novissimun in festo immaculate conceptions beatae Maríae Virginis PII IX Pontificis maximi Jussu a venerabili clero seculari et regulari in toto orbe unice recitandum.

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Erectio canonica sanctae ecclesiae cathedralis Leonensis Juxta bullam Sanctissimi domni nostri pii papae noni, ynfra transcriptam.

UANL

Catechismus ex decreto Concilii Tridentini ad Parochos, S. Pii V. Pontificis Maximi et deinde Clementis XIII. jussu editus nunc ad fidem Manutiani textus juxta editionem quae anno M. DCCC. LXXI. prodiit ex typis S. Congr. de Propag. Fide neconon alia complura authentica exemplariaiteratis curis castigate impressus

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Catechismos Concilii Tridentini PII V, Pontificis Maxi Jessu promulgatus... approbatores et usus declarantur.

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Breviarium romanum ex decreto SS. concilii tridentini restitutum , S. Pii V. Pontif. Max jussu editum, Clementis VIII, Urbani VIII. et Leonis XIII.

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Vademecum pii sacerdotis sive preces ante et post missam allaeque selectae Sacris Idulgentiis ditatae.

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Breviarium romanum ex decreto ss. concilii tridentini restitutum, s.PII V. Pontificis Maximi Jussu editum, Clementis VIII. et Urbani VIIIauctoritate restitutum, cum officiis sanctorum novissime per summos pontifices usque ad hanc diem concessis.

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Veni-mecum pii sacerdotis: quod ex variis devotis libris excerptum, ex sui exilii loco, tamquam amoris pignus, suo clero, omnibusque hispaniae sacerdotibus, ac piis laicis

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Carbon metabolism in transgenic roots with altered levels of hexokinase and triosephosphate isomerase and growing under different nitrogen status

Ce projet a pour but d’évaluer la capacité de la voie des pentoses phosphates (VPP) dans les racines transgéniques de pomme de terre (Solanum tuberosum) modifiées pour exprimer différents niveaux de l'hexokinase (HK) et de la triosephosphate isomérase cytosolique (cTPI). Dans les racines, la VPP alimente la voie de l’assimilation de l’azote en equivalents réducteurs et permet donc la biosynthèse des acides aminés. Le glucose-6-phosphate produit par l’HK est consommé par la partie oxydative de la VPP catalysée par la glucose-6-phosphate déshydrogénase (G6PDH) et la 6-phosphogluconate déshydrogénase (6PGDH). Les changements dans l'expression de HK et cTPI peuvent affecter le fonctionnement de la VPP et les mécanismes qui sont liés à l’utilisation des équivalents réducteurs produits par la VPP, comme l'assimilation de l’azote et la synthèse des acides aminés. Afin d’évaluer l’effet des manipulations génétiques de l’HK et de la cTPI sur l’assimilation de l’azote, nous avons cultivé les racines transgéniques sur des milieux contenant des concentrations élevées (7 mM) ou basses (0,7 mM) de nitrate d’ammonium comme source d’azote. Les résultats montrent que la culture sur un milieu riche en azote induit les activités G6PDH et 6PGDH. Les données montrent que la capacité de la VPP est plus grande avec des niveaux élevés en HK ou en cTPI. Nous avons aussi pu démontrer une plus grande activité spécifique de l’HK dans les conditions pauvres en azote. Ces données ont été complémentées par des mesures des pools d’acides aminés dans les racines transgéniques cultivées sur différents niveaux d’azote. Aucune tendance notable des pools d’acides aminés n’a été remarquée dans les racines modifiées pour leur contenu en HK suggèrant que la manipulation de HK n’affecte pas l'assimilation de l’azote. Dans les racines transgéniques modifiées pour la cTPI, les ratios Gln/Glu et Asn/Asp sont plus élevés chez les clones antisens, indiquant une assimilation de l’azote plus élevée. Ces résultats ont démontré l'activation de l'assimilation de l’azote chez les clones antisens cTPI dans les conditions élevées et basses d’azote alors que la manipulation de l’HK n’affecte pas l’assimilation de l’azote.

Relationship Between Expression of Voltage-Dependent Anion Channel (VDAC) Isoforms and Type of Hexokinase Binding Sites on Brain Mitochondria

Voltage-dependent anion channels (VDAC) are pore-forming proteins found in the outer mitochondrial membrane of eukaryotes. VDACs are known to play an essential role in cellular metabolism and in early stages of apoptosis. In mammals, three VDAC isoforms have been identified. A proteomic approach was exploited to study the expression of VDAC isoforms in rat, bovine, and chicken brain mitochondria. Given the importance of mitochondrially bound hexokinase in regulation of aerobic glycolysis in brain, we studied the possibility that differences in the relative expression of VDAC isoforms may be a factor in determining the species-dependent ratio of type A/type B hexokinase binding sites on brain mitochondria. The spots were characterized, and the signal intensities among spots were compared. VDAC1 was the most abundantly expressed of the three isoforms. Moreover the expression of VDAC1 plus VDAC2 was significantly higher in bovine than in rat brain. Chicken brain mitochondria showed the highest VDAC1 expression and the lowest of VDAC2. Bovine brain mitochondria had the highest VDAC2 levels. We concluded that the nature of hexokinase binding site is not determined by the expression of a single VDAC isoform.