Estudo da actividade de lisinas codificadas por bacteriófagos que infectam Enterococcus sp

Dissertação apresentada para a obtenção do Grau de Mestre em Genética Molecular e Biomedicina, pela Universidade Nova de Lisboa, Faculdade de Ciências e Tecnologia

Estudo da biodiversidade em actinobactérias marinhas, provenientes de sedimentos oceânicos colhidos no Arquipélago da Madeira

Dissertação para obtenção do Grau de Mestre em Biotecnologia

Detecção do gene mecA em estafilococos coagulase negativa resistentes à oxacilina isolados da saliva de profissionais da enfermagem

Estafilococos coagulase negativa estão frequentemente associados às infecções nosocomiais e os profissionais da saúde podem ser reservatório e dissemina-los no hospital e comunidade. O objetivo desse estudo foi identificar espécies de estafilococos coagulase negativa isolados da saliva de profissionais da enfermagem, determinar o perfil de resistência e detectar o gene mecA. Foram selecionados 100 estafilococos coagulase negativa, sendo 41 identificados como Staphylococcus epidermidis, 25 Staphylococcus saprophyticus, 18 Staphylococcus haemolyticus, 8 Staphylococcus cohnii, 4 Staphylococcus lugdunenses, 3 Staphylococcus capitis, e 1 Staphylococcus Simulans. Desses, 32% apresentaram resistência à oxacilina, 84,4% à mupirocina, 32% à cefoxitina, e todos sensíveis a vancomicina. Dos estafilococos coagulase negativa resistentes à oxacilina, 93,7% desenvolveram-se no agar oxacilina (6µg/ml) e o gene mecA foi detectado em 75%. Os resultados sinalizam que maiores investimentos devem ser direcionados a identificação das espécies de estafilococos coagulase negativa nas instituições de saúde e na comunidade.

Bacteremias por Staphylococcus coagulase negativos oxacilina resistentes em um hospital escola na cidade de Santa Maria, Estado do Rio Grande do Sul

INTRODUÇÃO: Neste estudo, objetivou-se caracterizar a prevalência e o perfil de suscetibilidade de cepas de Staphylococcus coagulase negatives resistentes à oxacilina isoladas de culturas de sangue, em um hospital escola, localizado na Cidade de Santa Maria. Além disso, buscou-se comparar ao teste genotípico de referência, diferentes metodologias fenotípicas para a caracterização da resistência mediada pelo gene mecA. MÉTODOS: Após identificação (MicroScan® - Siemens), os isolados foram submetidos a testes de sensibilidade antimicrobiana a partir da difusão do disco e automação (MicroScan® - Siemens). A presença do gene mecA foi evidenciada através da técnica molecular de reação em cadeia da polimerase. RESULTADOS: A espécie prevalente foi Staphylococcus epidermidis (67%). O gene mecA foi detectado em 90% das cepas e conforme análise dos perfis de sensibilidade, observou-se um índice elevado de resistência a várias classes de antimicrobianos. Contudo, todos os isolados mostraram-se uniformemente sensíveis à vancomicina e tigeciclina. O disco de cefoxitina foi a metodologia fenotípica que melhor correlacionou-se com o padrão ouro. CONCLUSÕES: A análise da significância clínica de SCN isolados de hemoculturas e a detecção precisa da resistência à oxacilina representam fatores decisivos para a instituição correta da antibioticoterapia. Apesar da vancomicina constituir o tratamento usual na maioria dos hospitais brasileiros, tem a redução de seu emprego recomendada.

Resistência de Xanthomonas campestris com relação à tilosina e vancomicina

Foi estudada a resistência da bactéria fitopatogênica Xanthomonas campestris (Pammel) Dowson com relação a dois antibióticos: Tilosina e Vancomicina. Para a vancomicina, colônias resistentes apareceram até na mais alta concentração usada (256 mcg/ml.). Para a tilosina, em concentrações maiores que 128 mcg/ml não foram encontradas bactérias, resistentes. Tais resultados indicam que a X. campestris seguiu o modelo de "um só passo" para adquirir resistência a vancomicina e, o modelo de "múltiplos passos" com relação a resistência a tilosina.

Resistência antimicrobiana em Enterococcus faecalis e Enterococcus faecium isolados de carcaças de frango

O objetivo deste trabalho foi realizar o isolamento e analisar o perfil de resistência antimicrobiana de Enterococcus de carcaças de frango resfriadas e congeladas comercializadas no Distrito Federal, detectando genes de resistência antimicrobiana e identificando as espécies Enterococcus faecalis e Enterococcus faecium por reação polimerase em cadeia. Foram analisadas 100 carcaças de frangos, das quais foram isoladas 50 cepas de Enterococcus spp., sendo 42% de E. faecalis e 2% de E. faecium. O teste de susceptibilidade antimicrobiana demonstrou que todas as cepas isoladas apresentaram resistência a pelo menos um antimicrobiano, dos quais 90,47% das cepas de E. faecalis, 100% das cepas de E. Faecium e 82,14% dos Enterococcus spp. apresentaram resistência à Tetraciclina; 80,95% das cepas de E. faecalis e 35,71% das cepas de Enterococcus spp. foram resistentes à Eritromicina; 39,28% dos Enterococcus spp. e 23,80% dos E. faecalis à Ciprofloxacina e 28,57% dos E. faecalis apresentaram resistência ao Cloranfenicol. Foram detectados os genes de resistência antimicrobiana erm(B), vanC-1, aph(3')-llla, ant(6)-la, vanB, vanA, aac(6')-le-aph(2'')-la, erm(A) e tet(M) - este último mais frequente. Estes resultados sugerem sérios problemas para a Saúde Pública, uma vez que esses microrganismos podem possuir a capacidade de transmitir genes de resistência antimicrobiana para outros microrganismos presentes na microbiota intestinal de humanos e animais, podendo inviabilizar o uso destas drogas para tratamentos clínicos.

A Vancomicina na prática clínica : artigo de revisão

A vancomicina é um antibiótico glicopeptídico activo contra bactérias Gram-positivos. É usada ao nível hospitalar, prinicipalmente para combater infecções por Staphylococcus aureus resistentes à meticilina (SARM). QUando se administra vancomicina, são várias as situações que requerem a monitorização dos seus seus níveis séricos e o ajuste posológico das dores administradas. O presente artigo tem como objectivo rever os principais conceitos farmacodiâmicos e farmacocinéticos relacionados com este fármaco, realçando-se a importância da sua monitorização na prática clínica.

Isolamento e perfil de suscetibilidade a antimicrobianos de cepas de estafilococcus resistentes à meticilina em um hosapital veterinário de ensino no Brasil

Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES)

Estudo de staphylococcus aureus resistentes à meticilina (MRSA) por técnicas genotípicas e fenotípicas

Pós-graduação em Biociências e Biotecnologia Aplicadas à Farmácia - FCFAR

Prevalência, Virulência e sensibilidade às terapias antimicrobianas das cepas de enterecoccus faecalis e enterococcus faecium isoladas de infecções endodônticas

Pós-graduação em Biopatologia Bucal - ICT

Multirresistência microbiana e opções terapêuticas disponíveis

Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico (CNPq)

Evaluation Of Photodynamic Therapy Using A Diode Laser And Different Photosensitizers Against Enterococcus Faecalis.

Photodynamic therapy (PDT) has been proven to be effective in disinfecting root canals. The aim of this present study was to evaluate the effects of PDT on the viability of Enterococcus faecalis using methylene blue (MB) and malachite green (MG) as photosensitizers. Solutions containing E. faecalis (ATCC 29212) were prepared and harvested by centrifugation to obtain cell suspensions, which were mixed with MB and MG. Samples were individually irradiated by the diode laser at a distance of 1mm for 30, 60, or 120 seconds. Colonyforming units (CFU) were determined for each treatment. PDT for 60 and 120 seconds with MG reduced E. faecalis viability significantly. Similar results were obtained when MB was used as photosensitizer. PDT using MB and MG have antibacterial effect against E. faecalis, showing potential to be used as an adjunctive antimicrobial procedure in endodontic therapy.

Behavior Of Listeria Monocytogenes In A Multi-species Biofilm With Enterococcus Faecalis And Enterococcus Faecium And Control Through Sanitation Procedures.

The formation of mono-species biofilm (Listeria monocytogenes) and multi-species biofilms (Enterococcus faecium, Enterococcus faecalis, and L. monocytogenes) was evaluated. In addition, the effectiveness of sanitation procedures for the control of the multi-species biofilm also was evaluated. The biofilms were grown on stainless steel coupons at various incubation temperatures (7, 25 and 39°C) and contact times (0, 1, 2, 4, 6 and 8days). In all tests, at 7°C, the microbial counts were below 0.4 log CFU/cm(2) and not characteristic of biofilms. In mono-species biofilm, the counts of L. monocytogenes after 8days of contact were 4.1 and 2.8 log CFU/cm(2) at 25 and 39°C, respectively. In the multi-species biofilms, Enterococcus spp. were present at counts of 8 log CFU/cm(2) at 25 and 39°C after 8days of contact. However, the L. monocytogenes in multi-species biofilms was significantly affected by the presence of Enterococcus spp. and by temperature. At 25°C, the growth of L. monocytogenes biofilms was favored in multi-species cultures, with counts above 6 log CFU/cm(2) after 8days of contact. In contrast, at 39°C, a negative effect was observed for L. monocytogenes biofilm growth in mixed cultures, with a significant reduction in counts over time and values below 0.4 log CFU/cm(2) starting at day 4. Anionic tensioactive cleaning complemented with another procedure (acid cleaning, disinfection or acid cleaning+disinfection) eliminated the multi-species biofilms under all conditions tested (counts of all micro-organisms<0.4 log CFU/cm(2)). Peracetic acid was the most effective disinfectant, eliminating the multi-species biofilms under all tested conditions (counts of the all microorganisms <0.4 log CFU/cm(2)). In contrast, biguanide was the least effective disinfectant, failing to eliminate biofilms under all the test conditions.

Biofilms Of Enterococcus Faecalis And Enterococcus Faecium Isolated From The Processing Of Ricotta And The Control Of These Pathogens Through Cleaning And Sanitization Procedures.

The biofilm formation of Enterococcus faecalis and Enterococcus faecium isolated from the processing of ricotta on stainless steel coupons was evaluated, and the effect of cleaning and sanitization procedures in the control of these biofilms was determined. The formation of biofilms was observed while varying the incubation temperature (7, 25 and 39°C) and time (0, 1, 2, 4, 6 and 8days). At 7°C, the counts of E. faecalis and E. faecium were below 2log10CFU/cm(2). For the temperatures of 25 and 39°C, after 1day, the counts of E. faecalis and E. faecium were 5.75 and 6.07log10CFU/cm(2), respectively, which is characteristic of biofilm formation. The tested sanitation procedures a) acid-anionic tensioactive cleaning, b) anionic tensioactive cleaning+sanitizer and c) acid-anionic tensioactive cleaning+sanitizer were effective in removing the biofilms, reducing the counts to levels below 0.4log10CFU/cm(2). The sanitizer biguanide was the least effective, and peracetic acid was the most effective. These studies revealed the ability of enterococci to form biofilms and the importance of the cleaning step and the type of sanitizer used in sanitation processes for the effective removal of biofilms.

Ocorrência de fungos filamentosos termo-resistentes em polpa de tomate envasada assepticamente

This work aimed at determining the occurrence of heat resistant molds during the aseptic processing of tomato pulp (8° BRIX). During tomato harvest, 9 lots were sampled (3 at the beginning, 3 at the apex and 3 at the end of harvest) and other 5 lots were sampled between harvest. For each lot, the enumeration of heat resistant molds was carried out in samples collected during the aseptic process. The mean count of heat resistant molds was relatively low, ranging from <1 to 8CFU/100mL of sample. The higher counts were observed in the raw material and the pre-wash and transportation water. Fifty strains of heat resistant molds detected in the enumeration procedure were isolated, codified and stocked. One-month-old spores of each isolate were submitted to different heat shocks to select the most heat resistant mold. The most heat resistant isolated strain (survived 100° C/25 minutes) was identified as Neosartorya fischeri.