Expressão da e-caderina e do fator de crescimento do endotélio vascular no carcinoma de células escamosas e no tumor de células basais de cães

Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES)

Células binucleadas trofoblásticas: efeito dos seus produtos de secreção na produção de Prostaglandina F2'alfa' e avaliação da expressão gênica relativa de lactogênio placentário e fator de crescimento endotélio vascular em placentas bovinas

Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo (FAPESP)

Endotélio da córnea e facoemulsificação em cães

This study aims, by a literature review, to evaluate the effects of the phacoemulsification surgery into the endothelial cells of the cornea, especially on dogs. The phacoemulsification is a surgical technique of cataract surgery, and presents a series of factors pre, trans and post operation that can affect the cornea endothelium. Knowing that the cornea transparency is essential to the preservation of the visual acuity, and that the endothelium cells do not demonstrate an adequate regeneration, it is important to the surgeon to be aware of these factors in order to avoid or to minimize them. Among then can be mentioned: previous diseases, surgical and chemical trauma, intra-ocular lens, uveitis etc. As consequence, a reduction on the number of endothelium cells and edema can be observed, which can lead to a loss of vision by definitive cornea opacity or to late visual recuperation

Fator de crescimento do endotélio vascular e do transportador de glicose 1 em cães com ceratose actínica e carcinoma de células escamosas

Pós-graduação em Medicina Veterinária - FCAV

Efeitos do ácido ascórbico intracameral sobre o endotélio corneal e sobre o fator de necrose tumoral alfa (TNF-a) em cães submetidos à facoemulsificação

Pós-graduação em Cirurgia Veterinária - FCAV

Investigação da ação da proteína anexina A1 sobre o processo de angiogênese induzido pelo fator de crescimento do endotélio vascular: modelos experimentais in vivo e in vitro

Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo (FAPESP)

Efeitos preventivos do exercício físico sobre as proteínas ciclooxigenase-2 (COX-2) e fator de crescimento de vasos derivado do endotélio (VEGF) no músculo cardíaco em ratos tratados com dexametasona

Dexamethasone (DEXA) is a synthetic glucocorticoid widely used in the handling of several drugs, for its proven benefits in fighting inflammation and allergies. Despite their benefits, their chronic use leads to several side effects that include changes in the body in the metabolism of carbohydrates, lipids and proteins. Moreover, being an anti-inflammatory, acts on the arachidonic acid pathway, reducing the expression of the enzyme cyclooxygenase (COX-2) and growth factor derived from the endothelium of blood vessels (VEGF) in various tissues. However, its effects on the myocardium are still uncertain. The physical training (PT), in turn, promotes effects contrary to those caused by chronic use of DEXA, however, little is known about the preventive effects of TF in the side effects of Dexa in the myocardium. Therefore, the aim of this study was to determine if the TF has the ability to prevent and/or mitigate the effects of Dexa in protein expression of COX-2 and VEGF in the myocardium. Forty animals were divided into 4 groups: sedentary control (SC), sedentary treated with Dexa (SD), trained control (TC) and Trained treated with Dexa (TD) and submitted to a protocol of physical training on the treadmill for 70 days (1 h/day-5 days per week, 60% of physical capacity) or kept sedentary. Over the past 10 days, rats were treated with Dexa (Decadron, 0.5 mg/kg per day, ip) or saline. During training the animals were weighed weekly and during treatment daily. At the end of treatment was made to measure fasting glucose levels of animals. The rats were killed with excess anesthesia and cardiac muscle was removed, weighed, homogenized, centrifuged and stored at -20° C for analysis of protein expression of VEGF and COX-2 by Western blotting technique. Treatment with dexamethasone caused a weight loss of 18% in sedentary animals and 13% in trained as well as elevated levels of fasting glucose in sedentary (88%). The TF was unable to mitigate the loss in...

Efeito da mitomicina c no endotélio corneano após cirurgia de pterígeo

Objectivo: O uso de Mitomicina C, na cirurgia de pterígeo, tem como objectivo diminuir a taxa de recidiva, contudo a sua aplicação não é isenta de complicações. O presente estudo pretende avaliar o efeito, a curto prazo, da aplicação intraoperatória de mitomicina C sobre o endotélio corneano, em doentes submetidos a excisão de pterígeo. Material e Métodos: Estudo prospectivo que incluiu 30 doentes submetidos a excisão de pterígeo primário. Em 15 doentes aplicou-se intraoperatoriamente mitomicina C a 0,02% durante 2 minutos, sobre a esclerótica com colocação posterior de auto-enxerto de conjuntiva. Nos restantes 15 doentes (grupo controlo) procedeu-se a excisão de pterigeo com auto-enxerto de conjuntiva, sem aplicação de mitomicina C. Realizou-se microscopia especular no pré-operatório e aos 2 meses de followup, avaliando-se a densidade de células endoteliais, coeficiente de variação, percentagem de células hexagonais e espessura central da córnea. Utilizou-se o Teste Paired Samples t-test para determinar a existência de diferença estatisticamente significativa entre o pré e pós-operatório, entre os 2 grupos, em relação aos parâmetros em estudo, adoptando-se um nível de significância de 5%. Resultados: Para todos os parâmetros analisados não se observaram diferenças estatisticamente significativas. A densidade de células endoteliais no grupo em que foi aplicada mitomicina C e no grupo controlo foi respectivamente de 2652,67±136,30; 2588,56±352,04 células/mm2 pré-operatoriamente e de 2714,57±204,04 ; 2279,89±875,71 células/mm2 pós-operatoriamente (p=0,185 ; p=0,32). O coeficiente de variação do tamanho celular no grupo em que foi aplicada mitomicina C e no grupo controlo foi respectivamente de 30,44±2,74; 34,22±3,27 células/mm2 pré-operatoriamente e de 30,11±2,71; 32,00±2,69 células/mm2 pós-operatoriamente (p=0,751 ; p=0,053). A percentagem de células hexagonais no grupo em que foi aplicada mitomicina C e no grupo controlo foi respectivamente de 44,11±2,85 ; 43,11±5,33 células/mm2 pré-operatoriamente e de 44,44±4,45 ; 48,22±4,41 células/mm2 pós-operatoriamente (p=0,824 ; p=0,056). A espessura central da córnea no grupo em que foi aplicada mitomicina C e no grupo controlo foi respectivamente de 534,33±49,80 ; 542,56±47,21 células/mm2 pré-operatoriamente e de 518±33,47 ; 536,11±43,24 células/mm2 pós-operatoriamente (p=0,072 ; p=0,183). Conclusão: O uso de mitomicina tópica a 0.02% não afectou de forma estatisticamente significativa o endótelio corneano.

Alterações morfométricas do endotélio corneano no glaucoma pseudoesfoliativo

Introdução: Com este trabalho pretende-se analisar a morfometria das células endoteliais corneanas e espessura central da córnea em doentes com glaucoma pseudoesfoliativo (GPX) e glaucoma primário de ângulo aberto (GPAA). Materiais e Métodos: Estudo retrospectivo com 40 doentes. Os parâmetros avaliados, através de microscopia especular, foram: densidade de células endoteliais, coeficiente de variação, percentagem de células hexagonais e espessura central da córnea. Resultados e Conclusões: Não se verificaram diferenças estatisticamente significativas no que diz respeito à densidade e coeficiente de variação das células endoteliais corneanas entre o grupo com GPX e GPAA. Contudo, a percentagem de células hexagonais foi significativamente inferior no GPX, o que poderá constituir um indício de alguma disfunção endotelial.Em relação à espessura central da córnea, verificou-se uma diminuição estatisticamente significativa no grupo GPX. Assim, no glaucoma pseudoesfolitaivo a presença de material fibrilhar na câmara anterior pode contribuir para alterações nas células endoteliais mais rápidas do que seria espectável e em alterações estruturais que se reflectem na menor espessura central da córnea.

Vascular Response Of Ruthenium Tetraamines In Aortic Ring From Normotensive Rats.

Background: Ruthenium (Ru) tetraamines are being increasingly used as nitric oxide (NO) carriers. In this context, pharmacological studies have become highly relevant to better understand the mechanism of action involved. Objective: To evaluate the vascular response of the tetraamines trans-[RuII(NH3)4(Py)(NO)]3+, trans-[RuII(Cl)(NO) (cyclan)](PF6)2, and trans-[RuII(NH3)4(4-acPy)(NO)]3+. Methods: Aortic rings were contracted with noradrenaline (10-6 M). After voltage stabilization, a single concentration (10-6 M) of the compounds was added to the assay medium. The responses were recorded during 120 min. Vascular integrity was assessed functionally using acetylcholine at 10-6 M and sodium nitroprusside at 10-6 M as well as by histological examination. Results: Histological analysis confirmed the presence or absence of endothelial cells in those tissues. All tetraamine complexes altered the contractile response induced by norepinephrine, resulting in increased tone followed by relaxation. In rings with endothelium, the inhibition of endothelial NO caused a reduction of the contractile effect caused by pyridine NO. No significant responses were observed in rings with endothelium after treatment with cyclan NO. In contrast, in rings without endothelium, the inhibition of guanylate cyclase significantly reduced the contractile response caused by the pyridine NO and cyclan NO complexes, and both complexes caused a relaxing effect. Conclusion: The results indicate that the vascular effect of the evaluated complexes involved a decrease in the vascular tone induced by norepinephrine (10-6 M) at the end of the incubation period in aortic rings with and without endothelium, indicating the slow release of NO from these complexes and suggesting that the ligands promoted chemical stability to the molecule. Moreover, we demonstrated that the association of Ru with NO is more stable when the ligands pyridine and cyclan are used in the formulation of the compound.Fundamento: As tetra-aminas de rutênio cada vez mais se destacam como carreadoras da molécula de óxido nítrico. Desse modo, estudos farmacológicos tornam-se altamente relevantes, afim de melhor compreender o mecanismo de ação envolvido. Objetivo: Avaliar a resposta vascular das tetra-aminas trans-[RuII(NH3)4(Py)(NO)]3+, trans-[RuII(Cl)(NO)(Cyclan)](PF6)2 e trans-[RuII(NH3)4(4-acPy)(NO)]3+. Métodos: Anéis de aorta foram pré-contraídos com noradrenalina (10-6M). Após estabilização da tensão, concentração única (10-6M) dos compostos foi adicionada ao banho de incubação. As respostas foram registradas ao longo de 120 minutos. A integridade vascular foi avaliada funcionalmente (acetilcolina 10-6M; nitroprussiato de sódio 10-6M) e histologicamente Resultados: A análise histológica confirmou a presença ou não de células endoteliais nos tecidos analisados. Todos os complexos alteraram a resposta contrátil induzida pela noradrenalina, resultando em aumento de tônus seguido de efeito relaxante. Em anéis com endotélio, a inibição do óxido nítrico endotelial causou redução do efeito contrátil da piridina óxido nítrico. Não foram observadas respostas significativas em anéis com endotélio referente ao composto cyclan óxido nítrico. Por outro lado, em anéis sem endotélio, a inibição da guanilato ciclase reduziu significativamente a resposta contrátil dos complexos piridina óxido nítrico e cyclan óxido nítrico, levando ambos os compostos a um efeito relaxante. Conclusão: Os resultados obtidos demonstram que o efeito vascular dos complexos avaliados apresentaram diminuição no tônus vascular induzido pela noradrenalina (10-6M) ao final do tempo de incubação, em anéis com e sem endotélio, indicando liberação lenta da molécula de óxido nítrico do composto estudado e sugerindo que os ligantes causaram estabilidade química à molécula. Demonstramos que a ligação rutênio óxido nítrico é mais estável quando utilizamos os ligantes piridina e cyclan para a formulação do composto.

Scanning electron microscopy of the corneal endothelium of ostrich

The aim of this study was to examine the endothelial surface morphology and perform a morphometric analysis of the corneal endothelial cells of ostrich (Struthio camelus) using scanning electron microscopy. Polygonality, mean cell area, cell density and coefficient of variation of mean cell area were analyzed. The normal corneal endothelium consisted of polygonal cells of uniform size and shape with few interdigitations of the cell borders. Microvilli appeared as protusions on the cellular surface. The average cell area was 269±18µm² and the endothelial cell density was 3717±240cells mm-2. The coefficient of variation of the cell area was 0.06, and the percentage of hexagonal cells was 75%. The parameters evaluated did not differ significantly between the right and the left eye from the same ostrich. The results of this study showed that the ostrich corneal endothelial cells appear quite similar to those of the other vertebrates.

Modelo de suplementação nutricional com fatores hepatotróficos aumenta proliferação celular em fígado de ratos sadios

Foram avaliados dois protocolos de administração, em ratos sadios, de uma solução de fatores hepatotróficos (FH), composta por aminoácidos, vitaminas, sais minerais, glicose, insulina, glucagon e triiodotironina (T3). A solução foi administrada durante 10 dias, 40mg/kg/dia, i.p., em duas, grupo 2xFH (n=15), ou três doses, grupo 3xFH (n=15), diárias. Foram observados os efeitos na proliferação celular dos hepatócitos, na angiogênese e na matriz extracelular hepática, assim como as possíveis reações adversas. Os animais dos grupos 2xFH e 3xFH apresentaram aumento da massa hepática de 30,1% e 22,5%, respectivamente, em relação ao grupo-controle (CT; n=15). O índice de proliferação hepatocelular foi maior nos grupos 2xFH (1,4%) e 3xFH (1,2%) em relação ao grupo CT (0,53%), e a densitometria relativa do fator de crescimento do endotélio vascular pelo imunoblot não revelou diferença estatística entre os três grupos. Nos grupos 2xFH e 3xFH, houve redução do colágeno intersticial em relação ao grupo CT. A solução de FH estimulou o crescimento hepático e reduziu o volume de colágeno perissinusoidal. A administração em três doses diárias resultou em mortalidade de 26,7%, possivelmente pelo excessivo estresse da manipulação e pela menor adaptação fisiológica dos ratos, o que não ocorreu nos grupos 2xFH e CT. Para esse tipo de abordagem em ratos, o procedimento experimental mais apropriado, seguro, com melhor chance de adaptação dos animais e com resultados significativos é a aplicação dos FH em duas doses diárias.

Acute lead-induced vasoconstriction in the vascular beds of isolated perfused rat tails is endothelium-dependent

Chronic lead exposure induces hypertension in humans and animals, affecting endothelial function. However, studies concerning acute cardiovascular effects are lacking. We investigated the effects of acute administration of a high concentration of lead acetate (100 µΜ) on the pressor response to phenylephrine (PHE) in the tail vascular bed of male Wistar rats. Animals were anesthetized with sodium pentobarbital and heparinized. The tail artery was dissected and cannulated for drug infusion and mean perfusion pressure measurements. Endothelium and vascular smooth muscle relaxation were tested with acetylcholine (5 µg/100 µL) and sodium nitroprusside (0.1 µg/100 µL), respectively, in arteries precontracted with 0.1 µM PHE. Concentration-response curves to PHE (0.001-300 µg/100 µL) were constructed before and after perfusion for 1 h with 100 µΜ lead acetate. In the presence of endothelium (E+), lead acetate increased maximal response (Emax) (control: 364.4 ± 36, Pb2+: 480.0 ± 27 mmHg; P < 0.05) and the sensitivity (pD2; control: 1.98 ± 0.07, 2.38 ± 0.14 log mM) to PHE. In the absence of endothelium (E-) lead had no effect but increased baseline perfusion pressure (E+: 79.5 ± 2.4, E-: 118 ± 2.2 mmHg; P < 0.05). To investigate the underlying mechanisms, this protocol was repeated after treatment with 100 µM L-NAME, 10 µM indomethacin and 1 µM tempol in the presence of lead. Lead actions on Emax and pD2 were abolished in the presence of indomethacin, and partially abolished with L-NAME and tempol. Results suggest that acute lead administration affects the endothelium, releasing cyclooxygenase-derived vasoconstrictors and involving reactive oxygen species.

Reactivity of the isolated perfused rat tail vascular bed

Isolated segments of the perfused rat tail artery display a high basal tone when compared to other isolated arteries such as the mesenteric and are suitable for the assay of vasopressor agents. However, the perfusion of this artery in the entire tail has not yet been used for functional studies. The main purpose of the present study was to identify some aspects of the vascular reactivity of the rat tail vascular bed and validate this method to measure vascular reactivity. The tail severed from the body was perfused with Krebs solution containing different Ca2+ concentrations at different flow rates. Rats were anesthetized with sodium pentobarbital (65 mg/kg) and heparinized (500 U). The tail artery was dissected near the tail insertion, cannulated and perfused with Krebs solution plus 30 µM EDTA at 36oC and 2.5 ml/min and the procedures were started after equilibration of the perfusion pressure. In the first group a dose-response curve to phenylephrine (PE) (0.5, 1, 2 and 5 µg, bolus injection) was obtained at different flow rates (1.5, 2.5 and 3.5 ml/min). The mean perfusion pressure increased with flow as well as PE vasopressor responses. In a second group the flow was changed (1.5, 2, 2.5, 3 and 3.5 ml/min) at different Ca2+ concentrations (0.62, 1.25, 2.5 and 3.75 mM) in the Krebs solution. Increasing Ca2+ concentrations did not alter the flow-pressure relationship. In the third group a similar protocol was performed but the rat tail vascular bed was perfused with Krebs solution containing PE (0.1 µg/ml). There was an enhancement of the effect of PE with increasing external Ca2+ and flow. PE vasopressor responses increased after endothelial damage with air and CHAPS, suggesting an endothelial modulation of the tone of the rat tail vascular bed. These experiments validate the perfusion of the rat tail vascular bed as a method to investigate vascular reactivity.

O papel da angiogênese e da hemólise na úlcera de perna de pessoas com anemia falciforme

Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES)