Effect of specific FSH or LH deprivation on testicular function of the adult rat

While the need for FSH in initiating spermatogenesis in the immature rat is well accepted, its requirement for maintenance of spermatogenesis in adulthood is questioned. In the current study, using gonadotropin antisera to neutralize specifically either endogenous FSH or LH, we have investigated the effect of either FSH or LH deprivation for a 10-day period on (i) testicular macromolecular synthesis in vitro, (ii) the activities of testicular germ cell specific LDH-X and hyaluronidase enzymes, and finally (iii) on the concentration of sulphated glycoprotein (SGP-2), one of the Sertoli cell marker proteins. Both immature (35-day-old) and adult (100-day-old) rats have been used in this study. Since LH deprivation leads to a near total blockade of testosterone production, the ability of exogenous testosterone supplementation to override the effects of LH deficiency has also been evaluated. Deprivation of either of the gonadotropins significantly affected in vitro RNA and protein synthesis by both testicular minces as well as single cell preparations. Fractionation of dispersed testicular cells preincubated with labelled precursors of RNA and protein on Percoll density gradient revealed that FSH deprivation affected specifically the rate of RNA and protein synthesis of germ cell and not Leydig cell fraction. LH but not FSH deprivation inhibited [3H]thymidine incorporation into DNA. The inhibitory effect of LH could mostly be overriden by testosterone supplementation. LDH-X and hyaluronidase activities of testicular homogenates of adult rats showed significant reduction (50%; P less than .05) following either FSH or LH deprivation. Again testosterone supplementation was able to reverse the LH inhibitory effect.

Luteal-phase defect induced by deprivation of FSH at a specific period of the follicular phase prevents pregnancy in the bonnet monkey (Macaca radiata)

Female bonnet monkeys were injected i.v. with 25 µl antiserum to FSH on Days 5, 6 or 7 of the cycle: the length of the luteal phase was shortened but there was no alteration in cycle length. Proven fertile females (N = 6) were caged throughout the period of the experiment (6 cycles) with proven fertile males and treated with 25 µl FSH antiserum on Day 7 of each of 3 successive cycles. Out of 18 cycle exposures during the treatment phase, 17 were ovulatory, but no pregnancies occurred. In the post-treatment phase, 5 monkeys became pregnant within 3 cycle exposures. These results show that it is possible to render female monkeys infertile by creating luteal insufficiency and this can be achieved repeatedly in a reproducible manner by depriving the cyclic females of FSH support on Day 7 of consecutive cycles.

Comparative studies on the effects of specific immunoneutralization of endogenous FSH or LH on testicular germ cell transformations in the adult bonnet monkey (Macaca radiata)

PROBLEM: It is yet to be determined clearly whether the two hormones FSH and T act synergistically in the same cell type-the Sertoli cells-to control overall spermatogenesis or influence independently the transformation of specific germ cell types during spermatogenesis in the adult mammal. METHOD: Adult male bonnet monkeys specifically deprived of either FSH or LH using immunoneutralization techniques were monitored for changes in testicular germ cell transformation by DNA flow cytometry. RESULTS: FSH deprivation caused a significant reduction (>40%; P < 0.05) in [H-3] thymidine incorporation into DNA of proliferating 2C (spermatogonial) cells, a marked inhibition (>50%) in the transformation of 2C to primary spermatocytes (4C) and a concomitant, belated reduction (50%) in the formation of round spermatids (1C). In contrast, specific LH/T deprivation led to an immediate arrest in the meiotic transformation of 4C to 1C/HC leading to an effective and significant block (<90%; P < 0.01) in sperm production. CONCLUSION: Thus, LH rather than FSH deprivation has a more pronounced and immediate effect as the former primarily blocks meiosis (4C --> 1C/HC) which controls production of spermatids. These data provide evidence for LH/T and FSH regulating spermatogenic process in the adult primate by primarily acting at specific germ cell transformation steps.

The effect of malathion, an organophosphate, on the plasma FSH, 17 beta-estradiol and progesterone concentrations and acetylcholinesterase activity and conception in dairy cattle

The effect of malathion on jugular plasma concentrations of follicle-stimulating hormone (FSH), estradiol (E2), progesterone (P4) and acetylcholinesterase (AchE) on conception in dairy cattle during a cloprostenol (prostaglandin F2-alpha analogue, PG)-induced estrus was studied. Malathion (1 mg/kg, intraruminally) given at the onset of estrus (48 h after PG) did not alter the plasma FSH or E2 concentrations but significantly (P < 0.05) inhibited plasma P4 concentration. The mean P4 concentration in the malathion-treated group on days 8 and 12 were 0.8 +/- 0.4 and 1.0 +/- 0.5 ng/ml, as compared to 2.6 +/- 0.0 and 2.4 +/- 0.3 ng/ml in the control group. There was a nonsignificant (P > 0.05) inhibition of plasma AchE activity in malathion-treated cattle. Conception was 16.6% in malathion-treated cows and 50% in controls. Inhibition of progesterone secretion and poor conception occurred after the single intraruminal dose of malathion at the onset of estrus.

Susceptibility of sperm chromatin to acid denaturation in situ: A study in endogenous FSH-deprived adult male bonnet monkeys (Macaca radiata)

Acid denaturation of calf thymus DNA in vitro followed by acridine orange (AO) binding induced a 112% increase in the emission of red, a 58% decrease in green, and a consequential decrease in the ratio of green:red fluorescences from 1.7 to 0.9. This metachromatic property of AO on binding to DNA following acid denaturation was utilized to study the susceptibility of normal and ovine follicle-stimulating hormone (oFSH) actively immunized bonnet monkey spermatozoa voided throughout the year. For analyses, the scattergram generated by the emission of red and green fluorescences by 10,000 AO-bound sperm from each semen sample was divided into 4 quadrant zones representing percentage cells fluorescing high green-low red (Q1), high green-high red (Q2), low green-low red (Q3) and low green-high red. (Q4). Normal monkey sperm obtained during the months of July-December exhibited 76, 13, and 11% cells in Q2, Q3, and Q4 quadrants, respectively. However, during January-June, when the females of the species are markedly subfertile, noncycling, and amenorrhoeic, the spermatozoa ejaculated by the male monkeys exhibited 38, 39, and 23% sperm in Q2, Q3, and Q4, respectively, the differences being highly significant (p < .01-.001). FSH deprivation induced significant shifts in fluorescence emissions, from respective controls, with 39, 33, and 28% cells in Q2, Q3, and Q4, respectively, during July-December, and 15, 48, and 37% sperm in Q2, Q3, and Q4 quadrants, respectively, during January-June. It is postulated that the altered kinetics of germ cell transformations and the deficient spermiogenesis observed earlier following FSH deprivation in these monkeys may have induced the enhanced susceptibility to acid denaturation in sperm.

Respuesta al tratamiento super ovulatorio, con Folltropin-V (analogo sintetico de la hormona foliculoestimulante-FSH), en hembras bovinas donantes, de las razas Pardo Suizo y Reyna, en fincas de la Universidad Nacional Agraria, Managua

El presente trabajo investigativo fue realizado en las fincas Las Mercedes y Santa Rosa, ambas propiedad de la Universidad Nacional Agraria, ubicadas en el departamento de Managua-Nicaragua. El objetivo de la presente investigación fué conocer si hay influencia del factor raza en la respuesta súper ovulatoria una vez aplicado el tratamiento hormonal súper ovulatorio FOLLTROPIN-V (análogo sintético de la hormona foliculoestimulante-FSH) en hembras bovinas donantes de las razas Pardo Suizo y Reyna. El tamaño requerido de la muestra fue de 10 hembras donantes para cada raza en estudio; las cuales fueron previamente seleccionadas según la calidad genética de cada hembra, la edad comprendida entre 3-5 años y los resultados del examen clínico y ginecológico que se les realizó para saber si cumplían con los requisitos ó parámetros de salud estimados para esta técnica de mejoramiento productivo. Los datos se obtuvieron mediante el conteo de cuerpos lúteos y folículos a través de palpación rectal de los ovarios; el mismo día en que se realizó la recolecta de los embriones; los cuales fueron llevados al laboratorio para ser clasificados según su estado de desarrollo y calidad, posteriormente fueron transferidos ó congelados. Los resultados obtenidos a ravés del análisis de la respuesta superovulatoria, indican que no existe una diferencia significativa del factor raza, sin embargo se observó que la raza Reyna se comportó mejor que la raza Pardo Su izo al dar mayor cantidad de cuerpos lúteos (R: 14.75 - PS: 11.5) y embriones (R: 9.25 – PS: 5.6), pero sí se atribuye a la raza, la calidad y el estado de desarrollo embrionario que se obtuvieron, siendo la raza Reyna la que obtuvo mejor calidad de embriones aunque por ser la que más embriones dió, también fue la que brindó mayor cantidad de embriones degenerados y oocitos infértiles que son intransferibles.

Repuesta al tratamiento súper ovulatorio, con folltropin V (Análogo sintético de la FSH), en hembras bovinas donantes, de las razas Pardo Suizo y Holsteins de la finca las mercedes de la Universidad Nacional Agraria, Managua

El presente trabajo investigativo se llevo a cabo en la finca Las Mercedes, propiedad de la Universidad Nacional Agraria ubicada en el Departamento de Managua, Nicaragua, en el Km 12.5 Carretera Norte. El objetivo del estudio fue determinar si hay influencia del factor raza en la repuesta súper ovulatoria en las hembras bovinas donantes de la> razas Holsteins y Pardo Suizo sometidas al tratamiento hormonal mediante la aplicación del Folltropin V (Análogo Sintético de la Hormona Foliculoestimulante FSH).El tamallo requerido de la muestra fue d 1 O hembras donantes para cada raza en estudio ;las cuales fueron previamente seleccionados según la calidad genética de cada hembra , la edad comprendida para la selección fue de entre 3 y 5 años además se realizaron exámenes clínicos y ginecológicos para determinar si cumplían con los requisitos o parámetros de salud para realizar esta técnica de mejoramiento productivo, los datos se obtuvieron mediante el conteo de cuerpos lúteos y folículos atravez de la palpación rectal de los ovarios ;el mismo dla en que realizo la recolecta de los embriones; los cuales fueron llevados al laboratorio para ser clasificados según su estado de desarrollo y calidad posteriormente fueron transferidos y congelados . Los resultados obtenidos atravez del análisis de la respuesta súper ovulatoria, indican que hay diferencia signicativa en cuanto al numero de cuerpos híteos en la raza Pardo Suizo ya que obtuvo un promedio de 9.2 cuerpo lúteos y la raza Holsteins obtuvo un promedio de 6.9 cuerpos lúteos . Por otra parte no hubo diferencia significativa en lo que respecta al número de embriones que tuvo un promedio de 3.8 cultivados en comparación con los 3. 7 embriones de la Raza Holsteins.

A influência da presença de ferro endógeno de solos brasileiros na remediação de diesel via reagente de Fenton modificado

Os Processos Oxidativos Avançados (POA) surgem como uma tecnologia eficiente para a remediação de áreas contaminadas com óleos, permitindo em muitos casos a completa degradação de uma grande variedade de compostos orgânicos recalcitrantes. Dentre os POA, o reagente de Fenton se destaca por sua simplicidade operacional e tecnologia eficiente para grande carga orgânica, assim como, envolve tempo e custo de processos reduzidos. A literatura reporta uma variedade de trabalhos envolvendo remediação de solos arenosos por POA. Estes resultados não devem ser aplicados diretamente para remediar solos brasileiros devido à variedade dos tipos de petróleo e à grande extensão do território brasileiro rico em diferentes tipos de solos predominantemente argilosos. Dessa forma, é de extrema importância o profundo conhecimento de avaliação e indicação de uma forma de se remediar o solo com condições menos agressivas evitando assim a sua desertificação. Dessa forma, este trabalho tem como objetivo avaliar a eficiência do teor e da forma do ferro endógeno na remediação do tipo Fenton em diferentes amostras de solos brasileiros contaminados com óleo diesel. Dez diferentes tipos de solos brasileiros: argissolo (Arg), chernossolo (Che), latossolo vermelho (LV), latossolo amarelo (LA), latossolo vermelho e amarelo (LVA), latossolo férrico (LE), neossolo (NeQ), organossolo (Org), solonchak (Soc), vertissolo (Ver). Os teores das diferentes formas de ferro endógenos (amorfo, cristalino, biodisponível e total) foram determinados pela extração por ditionito-citrato-bicarbonato de sódio (Fe-CDB), extração com oxalato ácido de amônio (Fe-oxalato), extração com ácido sulfúrico (Fe2O3-AS) e extração com solução de ácido dietileno triamino pentacético (Fe-DTPA), respectivamente. A avaliação da eficiência de oxidação pela dosagem de H2O2 e a forma de ferro disponível, assim como a sua quantidade, foi avaliada segundo correlação de Pearson. Verificou-se que a maioria dos solos argilosos tropicais (LV, LE, LA), mesmo apresentando uma grande quantidade de óxido de ferro cristalino (Fe-DCB) comparados aos solos tipo arenosos (NeQ, Org, Soc), apresentaram resultados de remediação semelhantes aos solos arenosos. Além disso, não foi observada uma correlação linear entre a quantidade de óxido de ferro cristalino e a eficiência da remediação, porém sugere-se que a elevada quantidade de óxido de ferro cristalino (Fe-DCB) adsorva os íons ferro da solução. O LVA foi o solo que apresentou a maior eficiência de remediação, independente da adição ou não de ferro. Este resultado foi atribuído à sua maior quantidade de ferro amorfo (Fe-oxalato). A tentativa de se correlacionar a remediação com algumas propriedades dos solos demonstrou que a correlação com pH, sem considerar o solonchack (Soc) é a que apresenta maior significância, ou seja, é o pH do solo que parece influenciar o grau de diferenciação das remediações com ou sem adição de ferro. Em solos mais arenosos, a eficiência da remediação com a adição de ferro exógeno foi mais significativa do que a observada para os solos argilosos.

Comparação interlaboratorial entre metodologias e estabilidade da amostra na dosagem do perfil lipídico e PCR-US

Segundo O`Kane et al, em 2008, foi demonstrado que 88,9% dos erros laboratoriais são realizados na fase pré-analítica. No laboratório de análises clínicas, o sistema de controle da qualidade pode ser definido como toda a ação sistemática necessária para dar confiança e segurança em todos os exames e prevenir a ocorrência de erros. O tempo de armazenamento pode variar de dias a meses ou mesmo anos, influenciando na definição da temperatura de estocagem. O armazenamento de longo prazo pode resultar na criopreservação inadequada para determinados analitos e pode desnaturar as lipoproteínas. Objetivos: Este trabalho teve como objetivo avaliar a fase pré-analítica, controle da qualidade interno e também avaliar o efeito do congelamento (- 80C) quanto ao tempo de armazenamento do soro e plasma de sangue colhido com ácido etilenodiamino tetra-acético (EDTA). As dosagens foram realizadas no Laboratório de Lípides LabLip, e estocadas em - 80 C por três anos, as mesmas foram redosadas no Serviço de Patologia Clínica da Policlínica Piquet Carneiro da UERJ com metodologias iguais e realizada a comparabilidade dos resultados. Foram analisados o perfil lipídico (CT, HDLc e TG) e PCR-US de 103 amostras, 73 no soro e 30 no plasma em dois laboratórios altamente qualificados. Discussão: Após redosagem foram encontrados nas dosagens de HDLc e CT resultados diminuídos respectivamente (correlação coeficiente no soro 0,48 e 0,62) teste t pareado no soro (CT p 0,0012 e HDLc p 0,0001). Conclusões: Os dados obtidos nas avaliações dos resultados de diferentes laboratórios e tempo de estocagem revelaram que as amostras quando armazenadas por um longo período após redosagem no soro, apresentaram diferenças em certos analitos, tais como CT e HDLc, no qual obteve-se resultados significativamente diminuídos, diferentemente no plasma, que após três anos de estocagem a -80C foram redosados e aplicados no teste t pareado, os analitos CT e PCR-US mantiveram a estabilidade.