Revêtement anti-apoptotique à base de chondroïtine sulfate : vers un stent-graft bioactif

La réparation endovasculaire (EVAR) est une technique minimalement invasive permettant de traiter l’anévrisme de l’aorte abdominale (AAA) par l’entremise d’un stent- graft (SG). L’utilisation d’EVAR est actuellement limitée par de fréquentes complications liées à une guérison inadéquate autour de l’implant. Ce manque de guérison est principalement dû au type de recouvrement polymérique des SG, au milieu pro-apoptotique des AAA et à l’accès réduit aux nutriments et à l’oxygène après EVAR. L’objectif de cette thèse consistait à concevoir un revêtement bioactif permettant d’inhiber l’apoptose et stimuler la croissance des cellules musculaires lisses vasculaires (CMLV), pour ainsi favoriser la guérison des tissus vasculaires autour des SG. La chondroïtine-4-sulfate (CS) a d’abord été choisie, car elle a été identifiée comme un médiateur important de la réparation vasculaire. Il a été démontré que la CS en solution influence directement la résistance à l’apoptose des CMLV, en plus de favoriser la différenciation myofibroblastique chez les fibroblastes. Dans le cadre de ce projet, un premier revêtement à base de CS et de collagène a été créé. Bien que le revêtement permettait d’induire une résistance à l’apoptose chez les CMLV, il se désintégrait trop rapidement dans des conditions aqueuses. Une nouvelle méthodologie a donc été adaptée afin de greffer la CS directement sur des surfaces aminées, à l’aide d’un système utilisant un carbodiimide. Dans le but d’accroître la croissance des CMLV à la surface des revêtements, le facteur de croissance de l’épiderme (EGF) a ensuite été sélectionné. En plus de ses propriétés mitogéniques et chimiotactiques, l’EGF stimule la production d’éléments de la matrice extracellulaire, comme le collagène et la fibronectine. De plus, l’activation du récepteur de l’EGF inhibe également l’apoptose des CMLV. L’EGF a donc été greffé sur la CS. Le revêtement de CS+EGF a démontré une bonne uniformité et bioactivité sur des surfaces de verre aminé. iii iv Dans une 3ème étape, afin de permettre de transposer ce revêtement bioactif sur des implants, plusieurs méthodes permettant de créer des groupements d’amines primaires sur les biomatériaux polymériques comme le PET ou le ePTFE ont été étudiées. La polymérisation par plasma a été choisie pour créer le revêtement CS+EGF à la surface de PET. Une fois de plus, celui-ci a permis d’inhiber l’apoptose des CMLV, dans des conditions pro-apoptotiques, et de favoriser la croissance des cellules. Le revêtement de CS et d’EGF, déposé sur des surfaces aminées, possède des caractéristiques biologiques intéressantes et semble donc prometteur pour favoriser une meilleure guérison autour des SG.

Synthesis and characterization of hyperbranched polyesters incorporating the AB(2) monomer 3,5-bis(3-hydroxylprop-1-ynyl)benzoic acid

The AB, monomer, 3,5-bis(3-hydroxylprop-1-ynyl)benzoic acid 1, has been synthesized using a Sonogashira cross-coupling with a palladium catalyst system developed for use with deactivated aryl halides. Numerous condensation methods have then been assessed in the homopolymerization of the acid-diol monomer 1 to afford hyperbranched polyesters. However, as a result of the thermal instability of the monomer, direct thermal polymerizations could not be employed. Alternative approaches using carbodiimide-coupling reagents enabled the production of soluble polyesters possessing molecular weights and degrees of branching ranging from 2500 to 11,000 and 0.22 to 0.33, respectively. (C) 2003 Elsevier Ltd. All rights reserved.

Catalytic properties of thioredoxin immobilized on superparamagnetic nanoparticles

Thioredoxin (Trx1), a very important protein for regulating intracellular redox reactions, was immobilized on iron oxide superparamagnetic nanoparticles previously coated with 3-aminopropyltriethoxysilane (APTS) via covalent coupling using the EDC (1-ethyl-3-{3-dimethylaminopropyl}carbodiimide) method. The system was extensively characterized by atomic force microscopy, vibrational and magnetic techniques. In addition, gold nanoparticles were also employed to probe the exposed groups in the immobilized enzyme based on the SERS (surface enhanced Raman scattering) effect, confirming the accessibility of the cysteines residues at the catalytic site. For the single coated superparamagnetic nanoparticle, by monitoring the enzyme activity with the Ellman reagent, DTNB=5,5`-dithio-bis(2-15 nitrobenzoic acid), an inhibitory effect was observed after the first catalytic cycle. The inhibiting effect disappeared after the application of an additional silicate coating before the AFTS treatment, reflecting a possible influence of unprotected iron-oxide sites in the redox kinetics. In contrast, the doubly coated system exhibited a normal in-vitro kinetic activity, allowing a good enzyme recovery and recyclability. (C) 2011 Elsevier Inc. All rights reserved.

Bacterial cellulose-collagen nanocomposite for bone tissue engineering

Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo (FAPESP)

Estudo da equivalência entre a lectina artin M obtida a partir da semente da jaca e a sua forma recombinante na afinidade por glicanas

Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico (CNPq)

Estudo da afinidade das proteínas rTgMIC1 e rTgMIC4 da Toxoplasma gondii com fetuína e asialofetuína utilizando técnica piezelétrica

Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES)

Desenvolvimento de um biossensor para a detecção de antibióticos β-lactâmicos no leite crú

Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES)

Materiais compósitos orgânicos-inorgânicos a base de celulose bacteriana com peptídeos regulatórios de fatores de crescimento, OGP e OGP [10-14], para regeneração óssea

Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo (FAPESP)

Imobilização multipontual das peroxidases da casca da soja e chuchu em suportes alternativos de pó de sabugo de milho e celulose bacteriana

Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES)

Citotoxicidade transdentinária e efeito da carbodiimida (EDC) na biomodificação do colágeno dentinário e na degradação da interface adesiva

Pós-graduação em Ciências Odontológicas - FOAR

Atividade antimicrobiana da carbodiimida (EDC) sobre microorganismos presentes em lesões cariosas

Pós-graduação em Ciências Odontológicas - FOAR

Inactivation of Matrix-bound Matrix Metalloproteinases by Cross-linking Agents in Acid-etched Dentin

Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico (CNPq)

Síntese e caracterização de copolímeros de polietilenoglicol monometil éter em quitosana cationizada para futuras aplicações em biotecnologia

Pós-graduação em Química - IQ

Bromofhenol blue discoloration using peroxidase immobilized on highly activated corncob powder

The aim of the present study was to evaluate the efficacy of peroxidase immobilized on corncob powder for the discoloration of dye. Peroxidase was extracted from soybean seed coat, followed by amination of the surface of the tertiary structure. The aminated peroxidase was immobilized on highly activated corncob powder and employed for the discoloration of bromophenol blue. Amination was performed with 10 or 50 mmol.L-1 carbodiimide and 1 mol.L-1 ethylenediamine. The amount of protein in the extract was 0.235 ± 0.011 mg.mL-1 and specific peroxidase activity was 86.06 ± 1.52 µmol min-1 . mg-1, using 1 mmol.L-1 ABTS as substrate. Ten mmol.L-1 and 50 mmol.L-1 aminated peroxidase retained 88 and 100% of the initial activity. Following covalent immobilization on a corncob powder-glyoxyl support, 10 and 50 mmol.L-1 aminated peroxidase retained 74 and 86% of activity, respectively. Derivatives were used for the discoloration of 0.02 mmol.L-1 bromophenol blue solution. After 30 min, 93 and 89% discoloration was achieved with the 10 mmol.L-1 and 50 mmol.L-1 derivatives, respectively. Moreover, these derivatives retained 60% of the catalytic properties when used three times. Peroxidase extracted from soybean seed coat immobilized on a low-cost corncob powder support exhibited improved thermal stability.

Increased durability of resin-dentin bonds following cross-linking treatment

Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo (FAPESP)