D2-4放线菌的筛选及其抗生物质研究

利用有益微生物及其代谢产物来防治植物病害，已成为一个十分活跃并具有巨大应用前景的领域。本论文采用土壤预处理等特殊方法，从长白山不同高度的土壤中筛选出1068株放线菌。通过对峙培养法和杯碟法，筛选出D1-1等10株对蔬菜病害菌具有抑制作用的菌株。离体叶片实验中发现D2-4发酵液对黄瓜、辣椒、番茄等蔬菜真菌病害具有一定的防治效果。以水和常用化学农药作为空白和药物对照，对D2-4发酵液进行了盆栽实验，结果对番茄灰霉、辣椒根腐和黄瓜枯萎病的防治效果分别为70.65％、63.27％、65.04％，初步显示出良好的防治效果。通过单因素和均匀设计实验，优化了DZ-4菌发酵培养基的组成，考察了培养时间、接种量、菌龄等对抑菌活性的影响。确定了最佳发酵培养基成分：黄豆饼粉1.10％、葡萄糖2.71％、蔗糖1.00％、NaCl0.10％、酵母膏0.10％、发酵培养基初始pH为6.61。最佳发酵时间为96h左右，培养20～24h的种子液以7％的接种量转接有利于提高抑菌活性。经发酵培养基和发酵条件的优化，发酵液抑菌活性达到了6588 u／ml，比原始发酵培养基（3678 u／ml）活性提高了79.12％。经发酵液的预处理、离子交换层析、吸附柱层析、高效液相色谱纯化等步骤，对D2-4抗生素进行了分离纯化研究。通过纸层析、纸电泳等试验最后确定该农用抗生素为弱碱性水溶性抗生素。对D2-4抗生素纯品进行了红外吸收光谱、紫外吸收光谱等理化性质的研究。

D2-4放线菌抗真菌病害活性成分研究

从长白山森林土壤中分离的放线菌D2 4产生的抗生素对蕃茄灰霉病等蔬菜及经济作物的某些真菌病害有很好的防治效果。通过离子交换和吸附层析对抗生素进行了分离纯化。此抗生素为一种弱碱性水溶性抗生素 ,在酸性和中性条件下稳定 ,在碱性条件下不稳定 ,温度耐受性较强 ,在适宜pH条件下 ,1 0 0℃处理0 .5h ,其活性基本不变。

番茄灰霉病菌拮抗菌D2-4发酵条件的研究

对拮抗番茄灰霉病菌的 D2 - 4菌株培养基成分和发酵条件进行研究。结果表明 ,在 2 8℃ ,180 r· min- 1 振荡培养条件下 ,最佳发酵时间为 96 h左右 ,培养 2 0～ 2 4 h的种子液以 7%的接种量转接有利于提高抑菌活性 ,装液量为6 0 m L· 2 5 0 m L- 1 三角瓶 ,均匀设计试验得出 ,最佳培养基配方为 (10 0 m L发酵培养基中含 ) :黄豆饼粉 1.10 g、葡萄糖 2 .71g、蔗糖 1.0 0 g、Na Cl0 .10 g、酵母膏 0 .10 g、p H6 .6 1。

抗番茄灰霉病菌农用抗生素D2-4发酵条件的研究

对拮抗番茄灰霉病菌的D2 -4菌株培养基成分和发酵条件进行了研究。经研究发现在28℃ ,180r·min -1条件下 ,最佳发酵时间为96h左右 ,培养20～24h的种子液以7 %的接种量转接有利于提高抑菌活性 ,装液量为60mL/250mL三角瓶 ,均匀设计试验得出,最佳培养基配方为:黄豆饼粉1.10 %、葡萄糖2.71 %、蔗糖1.00 %、NaCl0.10 %、酵母膏0.10 %、pH值6.61。