Plasminogen Acquisition and Activation at the Surface of Leptospira Species Lead to Fibronectin Degradation

Pathogenic Leptospira species are the etiological agents of leptospirosis, a widespread disease of human and veterinary concern. In this study, we report that Leptospira species are capable of binding plasminogen (PLG) in vitro. The binding to the leptospiral surface was demonstrated by indirect immunofluorescence confocal microscopy with living bacteria. The PLG binding to the bacteria seems to occur via lysine residues because the ligation is inhibited by addition of the lysine analog 6-aminocaproic acid. Exogenously provided urokinase-type PLG activator (uPA) converts surface-bound PLG into enzymatically active plasmin, as evaluated by the reaction with the chromogenic plasmin substrate D-Val-Leu-Lys 4-nitroanilide dihydrochloridein. The PLG activation system on the surface of Leptospira is PLG dose dependent and does not cause injury to the organism, as cellular growth in culture was not impaired. The generation of active plasmin within Leptospira was observed with several nonvirulent high-passage strains and with the nonpathogenic saprophytic organism Leptospira biflexa. Statistically significant higher activation of plasmin was detected with a low-passage infectious strain of Leptospira. Plasmin-coated virulent Leptospira interrogans bacteria were capable of degrading purified extracellular matrix fibronectin. The breakdown of fibronectin was not observed with untreated bacteria. Our data provide for the first time in vitro evidence for the generation of active plasmin on the surface of Leptospira, a step that may contribute to leptospiral invasiveness.

SEROLOGIC SURVEY FOR SELECTED INFECTIOUS DISEASES IN FREE-RANGING BRAZILIAN TAPIRS (TAPIRUS TERRESTRIS) IN THE CERRADO OF CENTRAL BRAZIL

From September 2000 to January 2002, a serologic survey was conducted in a population of free-ranging Brazilian tapirs (Tapirus terrestris) inhabiting Emas National Park and surrounding areas in Goias state. central Brazil, as part of an ecologic study. Ten tapirs were immobilized with a tiletamine-zolazepam combination. and blood samples were collected. All sera were negative for Leptospira spp.. Brucella abortus, and equine infectious anemia; and one of 10 animals was positive for Toxoplasma goudii. This report represents the first serologic survey for selected infectious diseases in a free-ranging population or Brazilians tapirs in central Brazil.

Evaluation of colostral immunity in swine with commercial anti-leptospira polyvalent whole-bacteria vaccine

The intensity and duration of passive immunity against swine leptospirosis were investigated by the microscopic agglutination test and in vitro leptospira growth inhibition. Twenty-one females at first parturition were divided into three groups: Group A (n = 08): received two doses with 30 days interval of the commercial anti-leptospira bacterin A. Group B (n = 06) received two doses with 30 days interval of the commercial anti-leptospira bacterin B and Group C (n = 07) was the control. In all groups the colostrums were collected. Blood collection of piglets was performed in four different ages. Agglutinin antibodies were equally detected in sera and colostrums for serovars Canicola, Grippotyphosa, Copenhageni, Icterohaemorrhagiae and Pomona (Group A) and Canicola, Copenhageni, Icterohaemorrhagiae, Pomona and Hardjo (Group 13). Mean neutralizing antibodies titers were low. Passive immunity was low duration. (C) 2007 Elsevier Ltd. All rights reserved.

Tooth Tissue Engineering: Optimal Dental Stem Cell Harvest Based on Tooth Development

Our long-term objective is to devise reliable methods to generate biological replacement teeth exhibiting the physical properties and functions of naturally formed human teeth. Previously, we demonstrated the successful use of tissue engineering approaches to generate small, bioengineered tooth crowns from harvested pig and rat postnatal dental stem cells (DSCs). To facilitate characterizations of human DSCs, we have developed a novel radiographic staging system to accurately correlate human third molar tooth developmental stage with anticipated harvested DSC yield. Our results demonstrated that DSC yields were higher in less developed teeth (Stages 1 and 2), and lower in more developed teeth (Stages 3, 4, and 5). The greatest cell yields and colony-forming units (CFUs) capability was obtained from Stages 1 and 2 tooth dental pulp. We conclude that radiographic developmental staging can be used to accurately assess the utility of harvested human teeth for future dental tissue engineering applications.

A role for COX2-derived PGE2 and PGE2-receptor subtypes in head and neck squamous carcinoma cell proliferation

The overexpression of cyclooxygenase (COX)-2 is a frequent event in squamous cell carcinomas of the head and neck (HNSCC), and non-steroidal anti-inflammatory drugs, which are potent inhibitors of COX-1 and COX-2, exert chemopreventive effects on HNSCC cancer development. COX-2 promotes the release of the pro-inflammatory mediator prostaglandin E2 (PGE2), which acts on its cell surface G protein-coupled receptors EP1, EP2, EP3, and EP4. Here, we investigated the role of PGE2 and its receptors in cellular proliferation in HNSCC. The expression of COX-2 and EP1-4 was examined in immortalized oral epithelial cells and in a representative panel of HNSCC cell lines, and based on these data EP1-EP3 and COX-2 expression were evaluated by immunohistochemistry in a large clinical sample collection using HNSCC tissue microarrays. The ability of selective COX-2 inhibition to block PGE2 secretion was measured by ELISA specific assays. The effects of PGE2 on cell proliferation were evaluated using PGE2, its stable analog, and EP2 and EP3-specific synthetic agonists. The results presented here show that HNSCC tumoral lesions and their derived cell lines constitutively express COX-2 and the EP1, EP2 and EP3 receptors for PGE2. HNSCC cells secrete PGE2, which can be suppressed by low concentrations of COX-2 selective inhibitors, without inhibiting cell proliferation. Exogenously added stable PGE2 and EP3-specific agonists induce DNA synthesis in all HNSCC cell lines tested. Overall, our study supports the emerging notion that PGE2 produced in the tumor microenvironment by the overexpression of COX-2 in tumoral and inflammatory cells may promote the growth of HNSCC cells in an autocrine and paracrine fashion by acting on PGE2 receptors that are widely expressed in most HNSCC cancer cells. In particular, our findings suggest that EP3 receptor may play a more prominent role in HNSCC cell growth promotion, thus providing a rationale for the future evaluation of this PGE2 receptor as a target for HNSCC prevention strategies. Published by Elsevier Ltd.

Microshear Bond Strength of Self-etching Systems Associated with a Hydrophobic Resin Layer

Purpose: To evaluate in vitro the microshear bond strength of adhesive systems applied to dentin according to manufacturers` instructions, associated or not with a hydrophobic layer of unfilled resin. Materials and Methods: Six self-etching adhesives (Clearfil SE Bond, Kuraray Medical; AdheSE, lvoclar Vivadent; Xeno III, Dentsply; I Bond, Heraeus-Kulzer; Bond Force, Tokuyama; Futurabond DC, Voco) were tested. The labial dentin of sixty bovine incisors was exposed, and the teeth were divided into two groups according to the application or not of an extra hydrophobic resin layer (Scotchbond Multi Purpose Plus, bottle 3). Six composite cylinders (Filtek Z250, 3M ESPE) were built up on each treated surface. Specimens were stored in distilled water at 37 C for 24 h and then subjected to the microshear bond strength test in a universal testing machine at a crosshead speed of 0.5 mm/min. Microshear bond strength values were analyzed by 2-way ANOVA and Tukey`s post-hoc test. Failure mode was determined using a stereomicroscope under 20X magnification. Results: The application of the hydrophobic resin layer did not affect bond strength, except for AdheSE. However, the bond strengths with the hydrophobic layer were similar among the six tested systems (Clearfil: 17.1 +/- 7.9; AdheSE: 14.5 +/- 7.1; Xeno III: 12.8 +/- 7.7; I Bond: 9.5 +/- 5.8; Bond Force: 17.5 +/- 4.1; Futurabond: 7.7 +/- 2.3). When used as recommended by the manufacturers, Bond Force presented statistically higher bond strength than AdheSE and I Bond (p < 0.05) (Clearfil 10.4 +/- 4.9; AdheSE 1.6 +/- 1.6; Xeno III: 9.0 +/- 3.8; I Bond: 3.0 +/- 1.5; Bond Force: 14 +/- 3.9; Futurabond: 8.8 +/- 3.8). Failure mode was predominantly adhesive. Conclusion: The bond strength of the self-etching systems tested was not significantly affected by the application of a hydrophobic layer, but a significant improvement was observed in AdheSE.

Morphological Alterations of Radicular Dentine Pretreated With Different Irrigating Solutions and Irradiated With 980-nm Diode Laser

Background: The topographical features of intraradicular dentine pretreated with sodium hypochlorite (NaOCl) or ethylenediamine tetraacetic acid (EDTA) followed by diode laser irradiation have not yet been determined. Purpose: To evaluate the alterations of dentine irradiated with 980-nm diode laser at different parameters after the surface treatment with NaOCl and EDTA. Study design: Roots of 60 canines were biomechanically prepared and irrigated with NaOCl or EDTA. Groups were divided according to the laser parameters: 1.5 W/CW; 1.5 W/100 Hz; 3.0 W/CW; 3.0 W/100 Hz and no irradiation (control). The roots were splited longitudinally and analyzed by scanning electron microscopy (SEM) in a quali-quatitative way. The scores were submitted to two-way Kruskal-Wallis and Dunn`s tests. Results: The statistical analysis demonstrated that the specimens treated only with NaOCl or EDTA (control groups) were statistically different (P < 0.05) from the laser-irradiated specimens, regardless of the parameter setting. The specimens treated with NaOCl showed a laser-modified surface with smear layer, fissures, and no visible tubules. Those treated with EDTA and irradiated by laser presented absence of smear layer, tubules partially exposed and melting areas. Conclusions: The tested parameters of 980-nm diode laser promoted similar alterations on dentine morphology, dependent to the type of surface pretreatment. Microsc. Res. Tech. 72:22-27, 2009. (C) 2008 Wiley-Liss, Inc.

As tessituras cotidianas que compõem as práticas de cuidado nas relações entre trabalhadores da saúde mental e usuários

Para pesquisar sobre as produções de cuidado pelos trabalhadores da saúde mental na relação cotidiana do trabalho e com os usuários, utilizou-se como ferramentas metodológicas: a cartografia - por considerar os processos descritivos de ‘uma vida’ e as multiplicidades que atravessam os sujeitos - e as narrativas propostas por Walter Benjamin, como forma de contar histórias sobre estes processos que se compõem na produção de cuidado. A Reforma Psiquiátrica no Brasil foi marcada pela crítica aos modos asilares, que eram/são adoecedores e negam os desejos e os direitos das pessoas que passam pela experiência da loucura, internadas ou não. Com o olhar crítico a esse modelo hospitalocêntrico, vários atores antimanicomiais protagonizaram a criação de dispositivos que transversalizam essa forma de cuidado. O cuidado em saúde mental passou por diversas transformações como mostra Foucault (1982), principalmente com a entrada do saber científico que se apropriou do conhecimento e do controle dos corpos para lidar com a loucura, o que proporcionou o isolamento dos loucos. E, hoje, com a Reforma Psiquiátrica, temos o desafio de continuar o movimento de desinstitucionalização das práticas, dos saberes e dos manicômios mentais, que perpassam as relações de trabalho de cuidado por meio de capturas, sensíveis ou não, e que se presentificam nos corpos, nas falas e nas ações. Dessa forma, faz-se necessário que esses processos de rupturas ao modo manicomial se iniciem em nós, para que a produção de subjetividades e novos modos de existência do outro se expandam em suas (re)invenções. Por isso, o trabalho se cria a todo instante, não tendo um modelo único de cuidar na saúde mental. No entanto, é importante salientar que a intervenção seja pautada numa ética estética-política e na produção de autonomia dos sujeitos, para que o trabalho não seja tutelador, mas que permita as afirmações dos desejos dos usuários. As equipes multiprofissionais e transdisciplinares fazem toda a diferença no acolhimento, no acompanhamento e nas intervenções com os usuários, os familiares e os próprios trabalhadores da saúde mental. Como uma forma de dispositivo de trabalho para produzir cuidado, a arte e a cultura são vistas como transformadores dos modos de existência, bem como o lazer e a ocupação dos territórios e da comunidade em que os usuários estão inseridos

Achados otomicroscópicos e histológicos da miringoesclerose induzida em ratos: estudo crítico de um modelo experimental

A miringoesclerose é caracterizada por hialinização da lâmina própria da membrana timpânica. Trabalhos experimentais têm utilizado a otomicroscopia ou a histologia para estudar a miringoesclerose em animais, porém sem correlacionar precisamente estes dois métodos de avaliação. OBJETIVO: Este estudo procura avaliar a acurácia da otomicroscopia no diagnóstico de miringoesclerose em modelo experimental com ratos. FORMA DE ESTUDO: experimental. MATERIAL E MÉTODO: Foi induzida miringoesclerose por inoculação transtimpânica de Streptococcus pneumoniae em 25 ratos Wistar, que foram examinados quinzenalmente por otomicroscopia e sacrificados após oito semanas, tendo suas membranas timpânicas examinadas por histologia. RESULTADOS: Da confrontação das alterações otomicroscópicas com os achados histológicos, houve uma sensibilidade de 80% e especificidade de 75%. CONCLUSÃO: Pelos resultados obtidos neste estudo, a otomicroscopia não representou um bom método para avaliar a miringoesclerose neste modelo experimental.

Perfil de internamento por morbidade otorrinolaringológica com tratamento cirúrgico. Brasil, 2003

OBJETIVO: Analisar o perfil dos procedimentos cirúrgicos relacionados à otorrinolaringologia no Brasil no ano de 2003. FORMA DE ESTUDO: Trata-se de um estudo observacional, descritivo, transversal do tipo seccional. MÉTODOS: Analisamos 80.030 procedimentos cirúrgicos nos 27 estados do Brasil no período compreendido entre janeiro e dezembro de 2003. Os dados foram obtidos do Sistema de Informação Hospitalar do Ministério da Saúde. O fator de inclusão se deu pela variável procedimento cirúrgico em otorrinolaringologia. Todos os arquivos foram processados pelo software TABWIN. RESULTADOS: No ano 2003, no Brasil, foram realizados 80.030 procedimentos cirúrgicos relacionados à ORL. A Região Sudeste é a região com maior número de procedimentos (53,08%), seguida pela Região Sul e Nordeste com 19,6% e 15,6% respectivamente. Quanto ao grupo de procedimento as cirurgias da faringe representam 45% dos procedimentos em ORL. Os procedimentos de alta complexidade foram realizados em maior número no grupo de cirurgia de ouvido. Quanto à distribuição segundo tipo de prestador, observamos que existe uma maior concentração dos procedimentos cirúrgicos realizados nos hospitais filantrópicos, seguido dos públicos estaduais e universitários. A Tabela adotada pelo SUS para pagamento de procedimentos cirúrgicos em ORL não se encontra atualizada para os procedimentos hoje realizados, repercutindo na notificação inapropriada de alguns tipos de cirurgias. CONCLUSÃO: Com o conhecimento do perfil dos internamentos cirúrgicos em ORL no Brasil, podem ser identificadas particularidades na distribuição quanto às diferentes regiões que podem auxiliar gestores de saúde à tomada de decisões no sentido de garantir os princípios preconizados pelo SUS no acesso aos serviços de saúde.

Comparação entre os bioenxertos de hidroxiapatita de cálcio e submucosa de intestino delgado porcino no preenchimento de defeitos ósseos criados em mandíbula de ratos

OBJETIVO: O objetivo do presente estudo consiste em avaliar a regeneração óssea em defeito criado na mandíbula de ratos utilizando dois bioenxertos: hidroxiapatita de cálcio sintética e submucosa de intestino delgado porcina. FORMA DE ESTUDO: Experimental randomizado. MATERIAL E MÉTODO: Foram utilizados 24 ratos da linhagem Wisthar-Furth. Um defeito ósseo de 0,75cm x 1,5cm no corpo de cada hemimandíbula foi realizado em todos os animais com broca esférica de baixa rotação. Padronizou-se à esquerda o preenchimento do defeito ósseo, no grupo I com 15 microgramas de hidroxiapatita e no grupo II com preenchimento de submucosa de intestino delgado porcina (SID), e à direita o não-preenchimento serviu como controle. A eutanásia foi realizada no 40° dia de pós-operatório, após a qual se procederam as análises macroscópicas e histológicas das peças. RESULTADOS: O comprimento médio em milímetros das hemimandíbulas do grupo hidroxiapatita foi de 3,75, e o do grupo SID 3,03 e o do grupo controle foi de 2,63 (p: 0,0022). No grupo hidroxiapatita a neoformação óssea perfez uma área correspondente à 76,64% do total já no grupo SID 63,64% do total. CONCLUSÃO: Os resultados macroscópios e microscópicos foram superiores com a utilização do enxerto de hidroxiapatita quando comparado ao grupo submucosa de intestino delgado porcino. Entretanto os dois bioenxertos mostraram-se osteoindutores quando comparados ao controle.

Microbiologia dos seios maxilar e etmoidal em pacientes com rinossinusite crônica submetidos à cirurgia funcional endoscópica dos seios paranasais

Estudos da microbiologia da rinossinusite crônica mostram a presença de microorganismos aeróbicos, anaeróbicos, fungos e vírus e sua incidência varia de acordo com cada estudo. Estes estudos nos guiam para a escolha do antimicrobiano mais adequado para eliminar o processo infeccioso, ajudando a restaurar a mucosa nasossinusal. FORMA DE ESTUDO: Clínico prospectivo. OBJETIVO: O objetivo deste trabalho foi estudar a microbiologia dos seios maxilar e/ou etmoidal de pacientes com rinossinusite crônica e com indicação de cirurgia funcional endoscópica dos seios paranasais. MATERIAIS E MÉTODOS: Durante a cirurgia coletamos, em 41 pacientes, secreção e/ou fragmento de mucosa dos seios maxilar e/ou etmoidal para realização de bacterioscopia, pesquisa direta de fungos, cultura para microorganismos aeróbios, anaeróbios e fungos. RESULTADOS: Identificou-se a presença de microorganismos aeróbios em 21 pacientes (51,2%), anaeróbios em 16 (39%) e fungos em 1 (2,4%). Na população estudada, apenas em 12 (29,2%) o microorganismo isolado foi considerado patogênico quando analisado junto à contagem semiquantitativa de leucócitos. O Staphylococcus coagulase-negativo e o Staphylococcus aureus foram os microorganismos mais freqüentes, em 5 (12,1%) e em 4 pacientes (9,75%) respectivamente. CONCLUSÃO: Este estudo revela que o Staphylococcus coagulase-negative e o Staphylococcus aureus foram os microorganismos mais freqüentes isolados nos pacientes com rinossinusite crônica.

Eficácia da cirurgia endoscópica nasal nos sintomas da rinossinusite crônica associada ou não à polipose

A cirurgia endoscópica nasal atualmente é o tratamento preconizado na rinossinusite crônica. O sucesso no alívio dos sintomas e a melhora da qualidade de vida dos pacientes são os objetivos principais desse estudo. FORMA DE ESTUDO: Estudo de coorte histórico longitudinal. METODOLOGIA: Os pacientes encaminhados ao Hospital das Clínicas-UFPE para tratamento cirúrgico endoscópico de rinossinusite crônica (RSC) responderam questionários durante o ano de 2003-2004. Os sintomas pré e pós-operatórios foram graduados e comparados utilizando uma escala de 5 pontos. RESULTADOS: Foram 24 questionários respondidos. Onze pacientes apresentavam RSC e 13 RSC associada a polipose nasossinusal. A qualidade de vida estava prejudicada em todos os entrevistados, e melhorou consideravelmente em 54,2% dos casos. Todos recomendariam a cirurgia a outras pessoas com problemas nasais semelhantes e apenas 3 pacientes não operariam novamente. Os sintomas com maiores índices de melhora foram: obstrução nasal (83,3%), cacosmia (80%), hiposmia/anosmia (63,15%), e cefaléia (62%). Os pacientes com polipose associada apresentaram mais queixas no pré-operatório e no pós-operatório e revelaram uma tendência a um maior grau de melhora nos principais sintomas referidos em comparação àqueles com RSC. CONCLUSÃO: Os principais sintomas avaliados melhoraram após a cirurgia endoscópica, mas a magnitude da melhora foi inferior ao esperado. A presença de rinite alérgica, o não-uso do spray nasal e o controle ambiental precário podem ter influenciado esse resultado em nosso meio. Os pacientes com polipose nasal obtiveram melhora sintomática e da qualidade de vida, na maioria dos sintomas, superior aos pacientes com RSC.