Efficient in vivo induction of CTL by cell-associated covalent H-2Kd-peptide complexes.

A novel procedure is presented describing the induction of antigen-specific cytolytic T lymphocytes (CTL) in vivo, that uses as immunogen syngeneic Concanavalin A stimulated spleen cells expressing H-2Kd (Kd) molecules photocrosslinked with a photoreactive peptide derivative. The Kd restricted Plasmodium berghei circumsporozoite (PbCS) peptide 253-260 (YIPSAEKI) was conjugated with photoreactive iodo-4-azidosalicylic acid (IASA) at the NH2-terminus and with 4-azidobenzoic acid (ABA) at the TCR contact residue Lys259 to make IASA-YIPSAEK(ABA)I. Selective photoactivation of the IASA group allowed specific photoaffinity labeling of cell-associated Kd molecules. Optimal peptide derivative binding to Kd molecules of concanavalin A stimulated spleen cells was obtained upon 4-6 h incubation at 26 degrees C in the presence of human beta 2 microglobulin. Photocrosslinking prevented the rapid dissociation of cell-associated Kd-peptide derivative complexes at 37 degrees C. The photoaffinity labeled cells were injected i.p. into syngeneic recipients. After 10 days, the peritoneal exudate lymphocytes were harvested and in vitro stimulated with peptide derivative pulsed P815 mastocytoma cells. The resulting bulk cultures displayed high cytolytic activity that was specific for IASA-YIPSAEK(ABA)I and YIPSAEK(ABA)I. In contrast, peritoneal exudate lymphocytes from mice inoculated with concanavalin A blasts that were pulsed, but not photocrosslinked, with IASA-YIPSAEK(ABA)I expressed only marginal levels of IASA-YIPSAEK(ABA)I-specific cytolytic activity. This immunization strategy, using neither adjuvants nor potentially hazardous transfected/transformed cells, is safe and should be universally applicable.

O direito à informação e a manifestação da autonomia de idosos hospitalizados

Partindo-se do pressuposto que a avaliação da qualidade para a organização e o funcionamento dos serviços de saúde não deva estar restrita a variáveis tecnicistas e financeiras, mas que contemple o respeito dos direitos do paciente, procurou-se conhecer e analisar a manifestação da autonomia de idosos hospitalizados, baseada nas informações que possuem sobre seu estado de saúde, através da pesquisa de suas expectativas, compreensão sobre o direito à informação e a utilização deste para a deliberação e o consentimento esclarecido às propostas diagnósticas e terapêuticas envolvidas na assistência à sua saúde. Os resultados evidenciaram carência da informação fornecida ao idoso, manifestação de insatisfação quanto ao padrão de informação revelada, o papel da família como intermediária da informação na relação do idoso com a equipe de saúde e o comprometimento do processo decisório autonômico do paciente bem como comprometimento da manifestação do consentimento esclarecido.

Programa de Pós-Graduação em Enfermagem na Saúde do Adulto da Escola de Enfermagem da USP

O Programa de Pós-Graduação em Enfermagem na Saúde do Adulto da Escola de Enfermagem da USP (PROESA) nasceu da fusão das Áreas de Concentração "Fundamentos de Enfermagem" e "Enfermagem na Saúde do Adulto Institucionalizado", anteriormente pertencentes ao Programa de Pós-Graduação da referida Escola. Há carência de descrição de programas de pós-graduação em enfermagem no Brasil, o que dificulta a organização de novas propostas e o aperfeiçoamento dos existentes. O objetivo deste artigo é apresentar a missão, o foco, as linhas de pesquisa, os eixos norteadores e o conjunto de disciplinas do PROESA.

Significados e fatores influenciadores da pesquisa em enfermagem no Hospital Universitário Walter Cantídio

Este trabalho procurou analisar os fatores que interferem na pesquisa em Enfermagem, na visão dos enfermeiros de um hospital público universitário na cidade de Fortaleza-CE. Estudo de natureza quanti-qualitativa, realizado com 22 enfermeiros, cujos dados foram colhidos no período de 04/03 a 30/04 de 2005. Os resultados destacam o gosto pela pesquisa e sua importância na melhora da práxis, crescimento pessoal e profissional, significando atividade que produz saber, que traz soluções para o cotidiano, mas que pressupõe um investimento pessoal muito grande, ensejado pela carência de recursos humanos, físicos, materiais e por lacunas na formação acadêmica, alertando para a necessidade de mudança curricular na graduação. Portanto, os enfermeiros consideram a realização de pesquisa um ganho pessoal e institucional, mas que depende apenas de investimento e esforço próprios, tornando-se uma atividade laboriosa, desmotivadora, que necessita de uma política organizacional neste aspecto.

Interaction of antigenic peptides with MHC class I molecules on living cells studied by photoaffinity labeling.

Using a direct binding assay based on photoaffinity labeling, we have studied the interaction of antigenic peptides with murine MHC class I molecules on living cells. Photoreactive derivatives were prepared by N-terminal amidation with iodo, 4-azido salicylic acid of the Kd restricted Plasmodium berghei circumsporozoite (P.b. CS) peptide 253-260 (YIPSAEKI) and the Db-restricted Adenovirus 5 early region 1A (Ad5 E1A) peptide 234-243 (SGPSNTPPEI). As assessed in functional competition experiments, both peptide derivatives retained the specific binding activity of the parental peptides for Kd or Dd, respectively. The P.b. CS photoprobe specifically labeled Kd molecules on P815 (H-2d) cells, but failed to label RMA (H-2b) cells. Conversely, the Ad5 E1A photoprobe specifically labeled Db molecules on RMA cells, but failed to label P815 cells. When the two photoprobes were tested on a panel of Con A-activated spleen cells expressing 10 different H-2 haplotypes, significant photoaffinity labeling was observed only on H-2d cells with the P.b. CS photoprobe and on H-2b cells with the Ad5 E1A photoprobe. Labeling of cell-associated Kd or Db molecules with the photoprobes was specifically inhibited by antigenic peptides known to be presented by the same class I molecule. Photoaffinity labeling of Kd with the P.b. CS photoprobe was used to study the dynamics of peptide binding on living P815 cells. Binding increased steadily with the incubation period (up to 8 h) at 37 degrees C and at ambient temperature, but was greatly reduced (greater than 95%) at 0 to 4 degrees C or in the presence of ATP synthesis inhibitors. The magnitude of the labeling was twofold higher at room temperature than at 37 degrees C. In contrast, binding to isolated Kd molecules in solution rapidly reached maximal binding, particularly at 37 degrees C. Dissociation of the photoprobe from either cell-associated or soluble Kd molecules was similar, with a half time of approximately 1 h at 37 degrees C, whereas the complexes were long-lived at 4 degrees C in both instances.

Differential T cell receptor photoaffinity labeling among H-2Kd restricted cytotoxic T lymphocyte clones specific for a photoreactive peptide derivative. Labeling of the alpha-chain correlates with J alpha segment usage.

Using a direct binding assay based on photoaffinity labeling, we studied the interaction of T cell receptor (TCR) with a Kd-bound photoreactive peptide derivative on living cells. The Kd-restricted Plasmodium berghei circumsporozoite (PbCS) peptide 253-260 (YIPSAEKI) was reacted NH2-terminally with biotin and at the TCR contact residue Lys259 with photoreactive iodo, 4-azido salicylic acid (IASA) to make biotin-YIPSAEK(IASA)I. Cytotoxic T lymphocyte (CTL) clones derived from mice immunized with this derivative recognized this conjugate, but not a related one lacking the IASA group nor the parental PbCS peptide. The clones were Kd restricted. Recognition experiments with variant conjugates, lacking substituents from IASA, revealed a diverse fine specificity pattern and indicated that this group interacted directly with the TCR. The TCR of four clones could be photoaffinity labeled by biotin-YIPSAEK(125IASA)I. This labeling was dependent on the conjugates binding to the Kd molecule and was selective for the TCR alpha (2 clones) or beta chain (1 clone), or was common for both chains (1 clone). TCR sequence analysis showed a preferential usage of J alpha TA28 containing alpha chains that were paired with V beta 1 expressing beta chains. The TCR that were photoaffinity labeled at the alpha chain expressed these J alpha and V beta segments. The tryptophan encoded by the J alpha TA28 segment is rarely found in other J alpha segments. Moreover, we show that the IASA group interacts preferentially with tryptophan in aqueous solution. We thus propose that for these CTL clones, labeling of the alpha chain occurs via the J alpha-encoded tryptophan residue.

Photoaffinity labeling of the T cell receptor on cloned cytotoxic T lymphocytes by covalent photoreactive ligand.

The interaction of the T cell antigen receptor with a photoreactive antigenic peptide derivative bound covalently to the H-2Kd (Kd) molecule was studied by photoaffinity labeling on cloned, CD8 positive cytotoxic T lymphocytes. The Kd-restricted Plasmodium berghei circumsporozoite peptide 253-260 (YIPS-AEKI) was conjugated with iodo-4-azidosalicylic acid at the N terminus and with 4-azidobenzoic acid at the T cell receptor residue Lys-259. Cell-associated or soluble Kd molecules were photoaffinity-labeled with the peptide derivative by selective photoactivation of the N-terminal photoreactive group. Incubation of cell-associated or soluble covalent Kd-peptide derivative complexes (ligands) with cytotoxic T lymphocytes that recognized this peptide derivative and activation of the orthogonal photoreactive group resulted in specific photoaffinity labeling of the T cell receptor. The labeling was inhibitable by an anti-Kd antibody and was absent on Kd-restricted cytotoxic T lymphocytes of different specificity. The binding of the soluble ligand reached a maximum after 2-4 min at 37 degrees C, after 30 min at 18 degrees C, and after 3 h at 4 degrees C. In contrast, binding of the cell-associated ligand reached a transient maxima after 50 and 110 min at 37 and 18 degrees C, respectively. The degree of binding at 37 degrees C was approximately 30% lower than that at 18 degrees C. No binding took place at 4 degrees C. Inhibition studies with antibodies and drugs indicated that the binding of the cell-associated, but not the soluble ligand, was highly dependent on T cell-target cell conjugate formation, whereas the binding of the soluble ligand was greatly dependent on CD8.

Descrição de oferta e consumo dos psicofármacos em Centros de Atenção Psicossocial na Região Sul brasileira

A descrição do consumo e da oferta de psicofármacos nos Centros de Atenção Psicossocial (CAPS) é relevante para a efetividade da assistência dos serviços de saúde mental. Objetivou-se descrever o consumo e a oferta destes em CAPS dos tipos I e II na Região Sul do Brasil. Trata-se de um estudo de delineamento transversal, no qual foram pesquisados, em maio e junho de 2006, aspectos estruturais desse serviço, através dos prontuários de 1.162 usuários e de questionários respondidos por 30 coordenadores dos CAPS em que esses usuários encontram-se em acompanhamento. Identificaram-se usuários predominantemente do sexo feminino, adultos de meia-idade, de baixa condição econômica, majoritariamente com o diagnóstico de depressão maior e o consumo de antidepressivos. Constatou-se também que pode haver carência de distribuição e fornecimento de psicofármacos na rede do SUS, o que prejudica a terapia medicamentosa desse serviço especializado de saúde mental, diante das condições socioeconômicas dos usuários.

Increase of [(18)F]FLT tumor uptake in vivo mediated by FdUrd: toward improving cell proliferation positron emission tomography.

PURPOSE: 3'-deoxy-3'-[(18)F]fluorothymidine ([(18)F]FLT), a cell proliferation positron emission tomography (PET) tracer, has been shown in numerous tumors to be more specific than 2-deoxy-2-[(18)F]fluoro-D-glucose ([(18)F]FDG) but less sensitive. We studied the capacity of a nontoxic concentration of 5-fluoro-2'-deoxyuridine (FdUrd), a thymidine synthesis inhibitor, to increase uptake of [(18)F]FLT in tumor xenografts. METHODS: The duration of the FdUrd effect in vivo on tumor cell cycling and thymidine analogue uptake was studied by varying FdUrd pretreatment timing and holding constant the timing of subsequent flow cytometry and 5-[(125)I]iodo-2'-deoxyuridine biodistribution measurements. In [(18)F]FLT studies, FdUrd pretreatment was generally performed 1 h before radiotracer injection. [(18)F]FLT biodistributions were measured 1 to 3 h after radiotracer injection of mice grafted with five different human tumors and pretreated or not with FdUrd and compared with [(18)F]FDG tumor uptake. Using microPET, the dynamic distribution of [(18)F]FLT was followed for 1.5 h in FdUrd pretreated mice. High-field T2-weighted magnetic resonance imaging (MRI) and histology were used comparatively in assessing tumor viability and proliferation. RESULTS: FdUrd induced an immediate increase in tumor uptake of 5-[(125)I]iodo-2'-deoxyuridine, that vanished after 6 h, as also confirmed by flow cytometry. Biodistribution measurements showed that FdUrd pretreatment increased [(18)F]FLT uptake in all tumors by factors of 3.2 to 7.8 compared with controls, while [(18)F]FDG tumor uptake was about fourfold and sixfold lower in breast cancers and lymphoma. Dynamic PET in FdUrd pretreated mice showed that [(18)F]FLT uptake in all tumors increased steadily up to 1.5 h. MRI showed a well-vascularized homogenous lymphoma with high [(18)F]FLT uptake, while in breast cancer, a central necrosis shown by MRI was inactive in PET, consistent with the histomorphological analysis. CONCLUSION: We showed a reliable and significant uptake increase of [(18)F]FLT in different tumor xenografts after low-dose FdUrd pretreatment. These results show promise for a clinical application of FdUrd aimed at increasing the sensitivity of [(18)F]FLT PET.

Monarquia vs. República : què costa més?

“El coneixement condueix a la unitat, com la ignorància a la diversitat” Ramakrishna.Fins a quin punt les nostres opinions estan realment ben fonamentades? És la diversitat d’opinió, fruit de la ignorància col·lectiva?Tants punts a tractar sobre la Monarquia o la República, i tan difícils cada un d’ells. En aquest cas, pretenem saber si hi ha o no grans diferències econòmiques entre un sistema i altre, donant un repàs als conceptes i magnituds importants per entendre bé el significat de les dades resultants.Si bé pensàvem que seria difícil arribar a una conclusió clara, i ens sorprèn haver-ho aconseguit, més ens sorprèn el fet d’haver-nos adonat, durant la realització de la investigació, de la carència d’informació que tenim. I no només els ciutadans, sinó els propis governs sobre les seves pròpies dades i sobre el que reflecteixen les mateixes. Conceptes entremesclats, dades poc clares, diferències en les informacions dins llocs oficials d’un mateix país... La República és més cara. Ho sabien? Però...ara que ho saben...és aquest un resultat que podria variar les seves preferències? O necessiten saber més?Tots tenim dret a opinar sobre aquest tema, a triar el que ens agrada més,però, com bé diu Ramakrishna, el resultat de la diversitat d’opinions sobre eltema és, probablement, conseqüència de la poca informació que tenim sobre laglobalitat de factors que influencien en la execució d’una d’aquestes formes d’estat.

Criança dependente de tecnologia: a experiência do cuidado materno

Este estudo tem como objetivo compreender a experiência materna no cuidado ao filho dependente de tecnologia. Utilizamos a abordagem do estudo de caso etnográfico tendo como instrumentos de coleta de dados os genograma e ecomapa, entrevista aberta e observação. Os dados foram organizados em três unidades de significados: a busca pelas causas e por culpados; a alta hospitalar e as demandas para o cuidado e as redes de apoio. O estudo permitiu conhecer a experiência materna em busca por explicações, bem como os sentimentos de desconfiança, insegurança e insatisfação relacionados ao serviço de saúde. Ainda a apropriação da mãe em relação aos cuidados à criança e no que se refere à organização do ambiente domiciliar para recebê-la, a utilização das redes de apoio, destacando a carência de vínculos com familiares e vizinhos e a busca formal e informal para garantir a subsistência da criança doente e dos demais filhos.

O efeito protetor do bicarbonato de sódio na nefropatia induzida por contraste radiológico em ratos

Contrastes radiológicos iodados - CI são causa de lesão renal aguda - LRA. Avaliar o efeito renoprotetor do bicarbonato de sódio (Bic) sobre a função renal (clearance de creatinina, Jaffé, Clcr-ml/min/100g) e o perfil oxidativo (excreção de peróxidos, PU e de malondealdeído urinários, FOX-2 e TBARs, nmol/mgCr ) em ratos com CI. Ratos machos adultos Wistar, 250-300g, tratados 1x/dia, por 5 dias, foram divididos nos grupos: Salina (solução salina 0,9%, 3ml/kg/dia, intraperitoneal-i.p.); CI (ioxitalamato de meglumina e sódio, 3ml/kg, i.p); Bic+Salina (Bic 3ml/kg, i.p, 1 hora antes e 1 hora depois da Salina); Bic+CI (Bic 3ml/kg, i.p, 1 hora antes e 1 hora depois do CI). CI induziu LRA e o Bic confirmou seu efeito renoprotetor antioxidante (Clcr/TBARs/PU Salina: 0,59±0,03/0,11±0,02/1,29±0,24 vs Bic+Salina 0,58±0,03/0,13±0,02/1,32±0,64 vs CI 0,22±0,02A/0,19±0,02A/4,77±0, 24A vs Bic+CI 0,51±0,04B/0,13±0,3B/1,80± 0,04B, A/B p<0,05). O Bic confirmou efeito protetor na LRA por CI, podendo ser considerado como possibilidade terapêutica para pacientes submetidos a CI.

O Turismo e a percepção dos seus impactos pela Comunidade Local – O Caso da Ilha do Sal, Cabo Verde

Resumo A análise tradicional do turismo visando apenas a sua dimensão económica tem-se mostrado redutora e insuficiente para explicar as inúmeras e versáteis alterações que pode provocar a nível social, cultural, político e ambiental. A complexidade da actividade turística e a carência de instrumentos ajustados para avaliar e tornar mensuráveis os seus impactes constituem terreno fértil à emergência de mitos e de juízos de valor em torno dos efeitos por ele causado nos países receptores. A linha orientadora da investigação parte do pressuposto que a actividade turística só faz sentido e se torna viável se proporcionar uma experiência qualitativa aos principais agentes envolvidos: os turistas e os residentes. A tentativa de compreender a forma como os impactes do turismo são percepcionados pela comunidade receptora da ilha do Sal em Cabo Verde está intimamente associado à convicção que um turismo de qualidade e sustentável só é possível auscultando a população e envolvendo-a no planeamento, gestão e monitorização da actividade. A análise da percepção dos impactes da actividade turística por parte da comunidade desemboca indirectamente no conhecimento dos níveis de satisfação da comunidade em relação à forma como se tem realizado o desenvolvimento turístico na ilha. No âmbito do trabalho de investigação foram realizados duzentos e trinta e um questionários cujos resultados da investigação levam a acreditar que a comunidade local salense possui uma clara consciência dos impactes do turismo no seu quotidiano. Verifica-se que a percepção dos impactes económicos e sociais negativos reúnem maior consenso que os impactes positivos. Os impactes culturais e ambientais são ainda pouco perceptíveis por parte dos inquiridos. Por outro lado, os inquiridos na sua generalidade não se sentem envolvidos no planeamento da actividade turística, embora haja elevadas expectativas em relação à actividade como forma de melhoria das condições de vida da população. A inexistência de um comportamento linear dos impactes da actividade turística no destino e de um modelo de desenvolvimento turístico perfeito e ajustável a todas as realidades obriga a que sejam delineados por parte dos países receptores políticas de planeamento visando a sustentabilidade e condições para a monitorização e mitigação dos seus impactes.

Estudo da Biodegrabilidade de um Efluente Industrial

O presente trabalho foi desenvolvido numa indústria de produtos de limpeza doméstica (LD) e higiene pessoal (HP), onde está implementada uma estação de tratamento de águas residuais industriais (ETARI). Durante o estudo foi monitorizada e avaliada a biodegradabilidade de algumas substâncias base dos detergentes (tensoactivos aniónicos), nomeadamente o LAS e o SLES, bem como o efluente da indústria nas diferentes fases de tratamento implementado na ETARI. Ao longo do processo de tratamento dos fluxos que compõem as águas residuais industriais, procurou-se estabelecer relações entre parâmetros chave de avaliação do conteúdo em matéria orgânica (Carência Química Oxigénio – CQO e Carência Bioquímica Oxigénio – CBO) com os tensoactivos anteriormente referidos. Os resultados obtidos na caracterização do efluente industrial nas diferentes fases do tratamento implementado mostram eficiências de remoção de CQO na ordem dos 20% no processo de bioxidação, de 78% no processo físico-químico de coagulação/floculação, sendo a eficiência global do processo de tratamento integrado da ordem dos 82%. No que se refere ao teor de tensoactivos aniónicos foram alcançadas eficiências de remoção na ordem dos 16 e 94% respectivamente, para os processos de oxidação e físico-químico, e de 95% quando considerado todo o processo de tratamento implementado.

PORTELA um modelo na difusão da periferia: estudo do desenvolvimento da urbanização da Portela da autoria do arquitecto Fernando Silva

A Urbanização da Portela (1960-1979) da autoria do arquitecto Fernando Silva (1914- 1983) tornou-se um paradigma no contexto da criação urbanística das periferias dos anos 60, do século XX, em Portugal. A carência habitacional que existia na época proporcionou a dinamização de um plano apoiado na interpretação da Carta de Atenas (1933) e numa Cultura Arquitectónica Moderna. Possibilitou através de uma resposta rápida e eficaz dar solução às urgências habitacionais existentes devido ao êxodo rural - sinal do progresso de uma expansão industrial - ao fim da Guerra Colonial (1961-1974) e à chegada das comunidades que viviam nas ex-colónias. O modelo adoptado na Portela, com base essencialmente racionalista, tomou como base a criação de uma zona central definida por um parque urbano e uma zona comercial e de serviços. Os edifícios destinados a habitação foram colocados segundo as directrizes da Carta de Atenas, seguindo também o paradigma de reprodução socialista, como se praticava nos países da Europa Oriental. A unidade do conjunto foi sempre um princípio fundamental para a concretização do projecto e levou o arquitecto a seguir o seu desenvolvimento com enorme cuidado. Foi criado um Regulamento da Urbanização que pretendia garantir que os diversos construtores seguissem as qualidades funcionais, técnicas e estéticas do conjunto, garantindo assim a continuidade de uma linguagem arquitectónica.