Eficiência de nematoides entomopatogênicos e inseticidas químicos contra Sphenophorus levis e Leucothyreus sp. em cana-de-açúcar

Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo (FAPESP)

Patogenicidade de Steinernema carpocapsae (Rhabditida: Steinernematidae) ao Cupim de Montículo Cornitermes cumulans (Isoptera: Termitidae)

Cornitermes cumulans is a termite species often found in pastures of Brazil, mainly in the most degraded ones. Chemical control has been the most recommended method against this insect pest, but control measures are usually avoided by farmers. Biocontrol of termites with entomopathogenic fungi and possibly with entomopathogenic nematodes have been considered promising techniques, being recommended for use in several countries. This study aimed to evaluate the pathogenicity of Steinernema carpocapsae (an unidentified isolate) against C cumulans castes (workers and soldiers). Three experiments were done, one using Petri dishes, with daily evaluations, and two others in artificial colonies (with workers and soldiers). For one of the experiments in artificial colonies, nematode suspensions (167 and 333 infective juveniles (IJ) per insect) were applied over the food supplied to the termites. For the other experiment, nematode suspensions (133, 267 and 533 IJ per insect) were applied directly over the artificial termite colonies. In these two experiments evaluations were done 1, 5 and 9 days after nematode application. Each dead insect was dissected for nematode verification. S. carpocapsae was highly pathogenic to both castes of C cumulans in all experiments.

Application technology for the entomopathogenic nematodes Heterorhabditis indica and Steinernema sp. (Rhabditida: Heterorhabditidae and Steinernematidae) to control Spodoptera frugiperda (Smith) (Lepidoptera: Noctuidae) in corn

O efeito de diversas tecnologias de aplicação foi avaliado sobre a concentração, viabilidade e eficácia dos juvenis infectantes dos nematóides Heterorhabditis indica Poinar, Karunakar & David (IBCB-n5) e Steinernema sp. (IBCB-n6) no controle da lagarta-do-cartucho Spodoptera frugiperda Smith na cultura do milho. Para o controle da lagarta-do-cartucho no terceiro estádio em placas de Petri foram necessários 280 juvenis infectantes de Steinernema sp., enquanto que 400 juvenis infectantes de H. indica controlaram apenas 75% das lagartas. Podem-se pulverizar os entomopatógenos, sem que haja perda significativa na sua concentração e viabilidade, com equipamentos que forneçam carga elétrica à calda, ponta centrífuga e pontas hidráulicas. Entretanto, o emprego de pulverizadores com pontas que requerem elementos filtrantes com malha igual a 100 resultou em decréscimo na concentração de juvenis infectantes de H. indica e Steinernema sp., de 28% e 53%, respectivamente. Os tensoativos organosiliconado e etoxilados não afetaram a viabilidade dos juvenis infectantes de Steinernema sp. Nos experimentos de pulverização em plantas de milho (V6) com Steinernema sp., doses equivalentes a até 288 milhões de juvenis infectantes por hectare, diluídos em volume de calda de até 800 L ha-1 com 0,01 % do tensoativo etoxilado, ou nesse volume seguido de exposição a chuva artificial (lâmina de água de 6 mm), não foram suficientes para o controle de S. frugiperda em casa-de-vegetação.

Preservação do inóculo de Plasmodiophora brassicae utilizando o método de congelamento

A preservação das estruturas de resistência de Plasmodiophora brassicae, em condições laboratoriais, é dificultada pelo fato de se tratar de um parasita obrigatório. O método de congelamento, utilizando freezer, comum foi testado com o objetivo de viabilizar a sobrevivência e a preservação de suas características infectivas. Raízes de diferentes brássicas, naturalmente infectadas por P. brassicae, contendo sintomas típicos de hérnia, de uma mesma propriedade localizada no município de Pardinho, Estado de São Paulo, foram coletadas em diferentes épocas e imediatamente congeladas, em freezer, a aproximadamente -20ºC. Os tratamentos foram divididos da seguinte maneira: T1: hérnias congeladas por 389 dias (rúcula); T2: hérnias congeladas por 242 dias (brócolis); T3: hérnias congeladas por 21 dias (couve chinesa) e T4: testemunha (sem inóculo). Os testes de patogenicidade, após diferentes períodos de armazenamento, foram realizados em condições de casa de vegetação (25±2ºC). Cada planta de uma variedade suscetível de couve-chinesa (Pak choi) foi inoculada com 2mL da suspensão de esporos de cada tratamento, na concentração de 10(7) esporos.mL-1. Cada tratamento contou com seis repetições distribuídas em blocos ao acaso. Passadas cinco semanas após a inoculação, as raízes das plantas foram lavadas e avaliadas. Houve diferença significativa entre os tratamentos. Os materiais congelados, entre 21 a 242 dias preservaram suas características infectivas, mostrando que o método de congelamento em freezer, nesse período, pode ser uma boa opção para a preservação das estruturas de resistência deste patógeno.

Estudo Comparativo da Biologia de Meloidogyne enterolobii (= M. mayaguensis) e Meloidogyne javanica em tomateiros com gene Mi

Visando conhecer a relação parasito hospedeiro de M. enterolobii em plantas com resistência a nematoides das galhas, estudos comparativos da biologia de M. enterolobii e M. javanica em tomateiros com o gene Mi foram conduzidos. O experimento foi conduzido em esquema fatorial 2x2, composto de dois porta-enxertos de tomateiro ('Magnet' e 'Helper M') e duas espécies de nematoides das galhas (M. enterolobii e M. javanica) com cinco repetições. As plantas foram inoculadas com 500 juvenis infectantes (J2) de M. enterolobii ou M. javanica. As raízes foram coletadas aos 3, 10, 17, 24 e 31 dias após a inoculação, coloridas com fucsina ácida, e dissecadas sob microscópio estereoscópico para a localização e contagem dos diferentes estádios de desenvolvimento dos nematoides. Os dados foram submetidos à análise de variância e as médias comparadas pelo teste de Tukey a 5% de probabilidade. Os resultados obtidos mostraram que, embora ambas as espécies tenham sido capazes de penetrar as raízes dos porta-enxertos de tomateiro, somente M. enterolobii conseguiu desenvolver-se normalmente, com as fêmeas maduras realizando suas posturas, a partir de 24 dias após a inoculação.

Behavior of Leishmania major metacyclic promastigotes during the course of infection and immune response development in resistant versus susceptible hosts

Pouco se conhece sobre os epítopos derivados de promastigotas metacíclicos de Leishmania que são importantes para a regulação ou destruição do parasita, como alvos de ação imunológica no hospedeiro vertebrado. Neste estudo, nós investigamos um método alternativo para obter promastigotas metacíclicos de Leishmania major, pela avaliação do curso da infecção e reação de hipersensibilidade do tipo retardado (HTR) em hospedeiros resistentes e susceptíveis. Promastigotas não-infectantes (procíclicos) de L. major, recentemente isolados de amastigotas, foram selecionados pela adesão a colunas de lã de vidro negativamente carregadas, enquanto que promastigotas metacíclicos não se aderem à coluna e podem ser recuperados com facilidade. Condições ótimas de cromatografia foram validadas por análise estatística. O rendimento médio de parasitas obtidos após separação em colunas de lã de vidro e a viabilidade dos promastigotas foram estimados por microscopia óptica. Os promastigotas metacíclicos tiveram um rendimento médio de 43,5% a 57,5%. Camundongos BALB/c (susceptíveis) e camundongos C57BL/6 (resistentes) apresentaram padrões distintos de lesões cutâneas, os primeiros com lesões mais agressivas, induzidas por promastigotas metacíclicos. As respostas à reação de HTR foram maiores nos grupos de camundongos C57BL/6, submetidos à infecção com promastigotas metacíclicos. Estes resultados indicam que o novo método poderia ser integrado aos protocolos existentes para estudar a metaciclogênese de parasitas do gênero Leishmania in vivo.

Controlled transscleral drug delivery formulations to the eye: establishing new concepts and paradigms in ocular anti-inflammatory therapeutics and antibacterial prophylaxis

Importance of the field: The use of topical agents poses unique and challenging hurdles for drug delivery. Topical steroids effectively control ocular inflammation, but are associated with the well-recognized dilemma of patient compliance. Although administration of topical antimicrobials as prophylaxis is acceptable among ophthalmologists, this common practice has no sound evidence base Developing a new antimicrobial agent or delivery strategy with enhanced penetration by considering the anatomical and physiological constraints exerted by the barriers of the eye is not a commonly perceived strategy. Exploiting the permeability of the sclera, subconjunctival routes may offer a promising alternative for enhanced drug delivery and tissue targeting.Area covered in this review: Ocular drug delivery strategies were reviewed for ocular inflammation and infections clinically adopted for newer class of antimicrobials, which use a multipronged approach to limit risks of endophthalmitis.What the reader will gain: The analysis substantiates a new transscleral drug delivery therapeutic approach for cataract surgery.Take home message: A new anti-inflammatory and anti-infective paradigm that frees the patient from the nuisance of topical therapeutics is introduced, opening a large investigative avenue for future improved therapies.

Prospective study for the development of emulsion systems containing natural oil products

Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES)

Metronidazole release using natural rubber latex as matrix

Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo (FAPESP)

Trypanocidal action of eupomatenoid-5 is related to mitochondrion dysfunction and oxidative damage in Trypanosoma cruzi

Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico (CNPq)

Parâmetros parasitológicos e desempenho produtivo de ovinos naturalmente infectados com nematoides gastrintestinais mantidos em diferentes pastagens tropicais

The control of gastrointestinal nematodes of small ruminants is usually done with anthelmintics. However, due to the emergence of ever-increasing parasite resistance to these drugs, looking up an alternative control parasites. One of this is sought in pasture management, as these are the sources of animals` infection by L3 infective larvae of helminths. The aim of this study was to evaluate the performance of sheep to natural infections by gastrointestinal nematodes grazing Panicum maximum cv. Massai and cv. Aruana, and Brachiaria brizantha cv. Piatã and cv. Marandu. The work was conducted from May to August-2011 with 48 male sheeps SRD versus Santa Inês breed. The animals were naturally infected with gastrointestinal nematodes, and maintained in four different cultivars of tropical forage grasses, naturally contaminated with eggs and larvae of gastrointestinal nematodes. Each week the animals were phenotypically characterized by parasitological examinations (eggs per gram of feces - EPG, and feces culture), hematological (packed cell volume PCV, and blood eosinophil count) method to evaluate the Famacha© colorof ocular mucosa, and the measures of body condition score and weight. In pastures was made the recovery of infective larvae in order to determine the quantity of L3 present in the pasture. The experimental design was a randomized completed block with two replications and before the entry of animals in the paddocks, they have been wormed. The experiment was ended when the animals reached 32.0 kg liveweight, and then were slaughtered and autopsies performed for the recovery and identify parasites of the abomasum, small intestine and large intestine. Results were subjected to analysis of variance, t test and Tukey`s test. The animals kept on pastures of Marandu grass had lower EPG counts, higher percentage of packed cell volume and higher average weight; those who remained in the Piatã pasture had lower eosinophil counts per microliter of blood. About the Famacha©, the highest prevalence was Famacha 2, and the body condition score ranged between 2 and 3. The results of feces cultures and recovery of larvae on pastures showed the presence of larvae of Trichostrongylus sp., and at the necropsy too. This way, it was concluded that the grass cultivars influences the sheep parasite load; the Famacha, together with EPG and packed cell volume are important indicators for use in controlling gastrointestinal nematode infections. The Trichostrongylus sp. was the most prevalent parasite in sheep during the rainy season

Interleukin-15 increases Paracoccidioides brasiliensis killing by human neutrophils

Interleukin-15 is a pro-inflammatory cytokine produced by a wide range of different cell types, especially monocytes and macrophages, in response to infective agents, playing a crucial and modulatory role in innate and adaptive immune response. Infections by intracellular microorganisms such as some bacteria, protozoa and fungi point out the role of IL-15 in the activation of monocytes/macrophages and neutrophils, a process that represents an important defense mechanism in early periods of infection during the development of innate immune response. The aims of the present study were to evaluate the effects of IL-15 on human neutrophil fungicidal activity against a high virulent Paracoccidioides brasiliensis strain ( Pb18) and to verify whether this activity was mediated by oxidative metabolism such as the production of superoxide anion and H2O2 and if it was associated with an alteration of cytokine ( IL-8 and TNF-alpha) levels. Neutrophils from peripheral blood of healthy individuals were incubated in the presence and absence of IL-15 ( 12.5 - 250ng/ml) for 18h, at 37 degrees C, under tension of 5% CO2, then infected with Pb18 for 4h and evaluated for fungicidal activity, production of superoxide anion and H2O2, and quantification of cytokines IL-8 and TNF-a in the supernatant. Preincubation of neutrophils with IL-15 induced a significant increase in the fungicidal activity of such cells in a dose-dependent manner. After activation, there was an increase in the production of superoxide anion and H2O2 by these cells, suggesting participation of such metabolites in fungicidal activity. Catalase inhibits fungicidal activity, confirming the role of H2O2 in fungus killing. However, the levels of TNF-alpha and IL-8 were not modified after incubation with IL-15, which suggests that its role is not mediated by those cytokines. Taken together, results showed that IL-15 had a modulatory effect on human neutrophils infected in vitro with a high virulent strain of P. brasiliensis, which was characterized by an increased fungicidal activity mediated by a dependent mechanism of oxidative metabolism.

Recuperação de larvas de Trichostrongylus colubriformis em diferentes estratos de Brachiaria decumbens E Panicum maximum

The purpose of the experiment was to evaluate infective Trichostrongylus colubriformis larvae vertical migration in two forage grass species. Experimental modules formed by eight plots, established with Brachiaria decumbens cv. Australian and Panicum maximum cv. Aruana, were used in the study, totaling four plots for each grass species. Each plot was divided into six 30 x 30 cm subplots. Larval migration was evaluated in the four seasons of the year, in different plant strata (0-7, 7-14, 14-21, 21-28 and above 28 cm). Four feces deposits were made, one in each season of the year, in the middle of 30-cm tall forage. The feces were collected from the forage ten days after each feces deposit in the experimental subplots. Grass height was measured in each of the strata immediately before the collections. The forage of the different strata was cut from an area measuring 10-cm in radius. The feces were collected manually from the subplots. There was a grass species and grass stratum interaction in the deposit made in autumn (P < 0.05). During that season, most of the larvae were recovered from the Brachiaria grass base; meanwhile, at the forage apex, the biggest average was registered in the aruana grass. Infective larvae (U) recovery was similar among the different strata during spring. In springtime, the biggest L3 recovery occurred at the 21-28 cm stratum from both forage species. No L3 was recovered from any of the No L3 was recovered from any of the grass strata during winter and summer. Study results show that migration of T colubriformis larvae was more influenced by weather conditions Than by forage species.

Recuperação de larvas infectantes de Trichostrongylus colubriformis em três espécies de gramíneas contaminadas no verão

O experimento teve como objetivo avaliar a recuperação de larvas infectantes (L3) de Trichostrongylus colubriformis em Brachiaria decumbens cv. Australiana, Cynodon dactilon cv. Coast-cross e Panicum maximum cv. Aruana. Foram utilizados módulos experimentais constituídos por seis canteiros de 32,4 m² cada, perfazendo dois canteiros por espécie forrageira. Cada canteiro foi dividido em 36 parcelas, de 30 x 30 cm, de forma a permitir seis repetições por espécie e por altura da forragem em cada semana de colheita de material. A sobrevivência larval foi avaliada do meio do verão e até meados do outono, sob o efeito de duas alturas de poda das forragens: baixa, 5 cm e alta, 30 cm. A poda foi realizada imediatamente antes da deposição das fezes contaminadas com ovos de T. colubriformis, obtidos de ovinos, que ocorreu no dia 05/02/ 2004. A colheita das fezes e da forragem foi realizada uma, duas, quatro, oito, 12 e 16 semanas após a deposição das fezes nos canteiros experimentais. A altura da forragem foi medida em cada uma das subdivisões imediatamente antes da colheita. A forragem foi cortada rente ao solo, de uma área delimitada com o auxílio de um círculo de 10 cm de raio. As fezes foram recolhidas manualmente dos canteiros. O número de larvas infectantes recuperado foi muito pequeno em comparação com a quantidade de larvas produzidas nas culturas controle, mantidas no laboratório (máximo de 6,7% no capim Aruana com 30 cm de altura). Arecuperação de L3 das amostras fecais foi maior quando as fezes foram depositadas em meio ao capim alto (com 30 cm - P<0,05). Porém, a recuperação de L3 das forragens foi similar em ambos os cortes. em relação à concentração de L3 (número de L3/kg de matéria seca), não houve diferença entre o corte baixo e alto (P>0,05) em nenhuma das semanas experimentais. Dentre as espécies forrageiras, o capim aruana foi o que, no geral, apresentou maiores concentrações de L3 de T. colubriformis.

Effect of incorporation of 2-tert-butylaminoethyl methacrylate on flexural strength of a denture base acrylic resin

Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo (FAPESP)