Modulation of the pharmacological effects of enzymatically-active PLA 2 by BTL-2, an isolectin isolated from the Bryothamnion triquetrum red alga

Background. An interaction between lectins from marine algae and PLA 2 from rattlesnake was suggested some years ago. We, herein, studied the effects elicited by a small isolectin (BTL-2), isolated from Bryothamnion triquetrum, on the pharmacological and biological activities of a PLA 2 isolated from rattlesnake venom (Crotalus durissus cascavella), to better understand the enzymatic and pharmacological mechanisms of the PLA 2 and its complex. Results. This PLA2 consisted of 122 amino acids (approximate molecular mass of 14 kDa), its pI was estimated to be 8.3, and its amino acid sequence shared a high degree of similarity with that of other neurotoxic and enzymatically-active PLA2s. BTL-2 had a molecular mass estimated in approximately 9 kDa and was characterized as a basic protein. In addition, BTL-2 did not exhibit any enzymatic activity. The PLA2 and BTL-2 formed a stable heterodimer with a molecular mass of approximately 24-26 kDa, estimated by molecular exclusion HPLC. In the presence of BTL-2, we observed a significant increase in PLA2 activity, 23% higher than that of PLA2 alone. BTL-2 demonstrated an inhibition of 98% in the growth of the Gram-positive bacterial strain, Clavibacter michiganensis michiganensis (Cmm), but only 9.8% inhibition of the Gram-negative bacterial strain, Xanthomonas axonopodis pv passiflorae (Xap). PLA2 decreased bacterial growth by 27.3% and 98.5% for Xap and Cmm, respectively, while incubating these two proteins with PLA2-BTL-2 inhibited their growths by 36.2% for Xap and 98.5% for Cmm. PLA2 significantly induced platelet aggregation in washed platelets, whereas BTL-2 did not induce significant platelet aggregation in any assay. However, BTL-2 significantly inhibited platelet aggregation induced by PLA2. In addition, PLA 2 exhibited strong oedematogenic activity, which was decreased in the presence of BTL-2. BTL-2 alone did not induce oedema and did not decrease or abolish the oedema induced by the 48/80 compound. Conclusion. The unexpected results observed for the PLA2-BTL-2 complex strongly suggest that the pharmacological activity of this PLA2 is not solely dependent on the presence of enzymatic activity, and that other pharmacological regions may also be involved. In addition, we describe for the first time an interaction between two different molecules, which form a stable complex with significant changes in their original biological action. This opens new possibilities for understanding the function and action of crude venom, an extremely complex mixture of different molecules. © 2008 Oliveira et al; licensee BioMed Central Ltd.

Semi-selective culture medium for Xanthomonas axonopodis pv. malvacearum detection in cotton seeds (Gossypium hirsutum L.)

The cotton disease known as angular leaf spot, caused by Xanthomonas axonopodis pv. malvacearum (Xam) has been causing cotton losses in several producing regions around the world. Xam is transmitted by seeds, which may be infected both externally and internally. Infected seeds constitute the main long-distance dissemination mode of the pathogen. In view of this, the use of healthy seeds is a must. To accomplish that, detection methodologies for the bacteria must be developed be used in seed health analysis laboratories. This study aimed to develop a semi-selective medium for Xam detection in cotton seeds. The semi-selective culture medium was named MSSXAN and it was consisted of peptone (5.0 g), beef extract (3 g), sucrose (5 g), soluble starch (10 g), agar (15 g), CaCl 2 (0.25 g), Tween 80 (10 mL), distilled water (1,000 mL), crystal violet solution at 1% (150 μL), cephalexin (50 mg 1*), methyl thyophanate (10 mg*) and chlorothalonil (10 mg*) - *added after culture medium autoclaving. This MSSXAN medium shows low repressiveness to Xam and it be used for isolation of this bacteria in cotton seeds health analysis. © 2009 Academic Journals Inc.

Efeito de produtos químicos sobre a mancha bacteriana (xanthomonas perforans) e na ativação de proteínas relacionadas à patogênese em tomateiro

The present study aims to evaluate the effect of fungicides and antibiotics to control bacterial spot (Xanthomonas perforans) in tomato, and the activation of pathogenesis-related proteins. Hybrid tomato AP 529 was used to assess the severity of disease. The treatments consisted of spraying with acibenzolar-S-methyl, fluazinam, pyraclostrobin, pyraclostrobin + methiran, copper oxychloride, copper oxychloride and mancozeb + oxytetracycline, and inoculated and non-inoculated controls. After three days of treatment, all plants were inoculated with X. perforans (10 6 CFU / mL). Leaf discs were collected for assessment of peroxidase, polyphenol oxidase, β-1,3 glucanase, phenylalanine ammonia lyase and protease. The area under the disease progress curve (AUDPC) was calculated with the data of severity. All treatments had reduced AUDPC compared to the inoculated control. Fungicides acibenzolar-S-methyl, pyraclostrobin, and pyraclostrobin + methiran had more satisfactory results in reducing the severity of bacterial spot on tomato. The products based on pyraclostrobin together with acibenzolar-S-methyl induced enzymatic activities of peroxidase, polyphenoloxidase and β-1,3 glucanase, indicating that these products may be related to the induction of resistance to bacterial spot on tomato plants.

Polymerase chain reaction assay based on ratA gene allows differentiation between Salmonella enterica subsp. enterica serovar Gallinarum biovars Gallinarum and Pullorum

Salmonella Pullorum and Salmonella Gallinarum are classified as biovars of Salmonella enterica subsp. enterica serovar Gallinarum. These salmonellae are the causative agents of Pullorum disease and fowl typhoid, respectively, and are widely distributed throughout the world. Although many developed countries have eradicated these diseases from commercial poultry, they are still the cause of significant economic loss in developing countries. When serovar Gallinarum is isolated, it is difficult to immediately differentiate between biovars because they are antigenically identical by serotyping. However, they cause distinct diseases with different epidemiology, and therefore it is important to differentiate them. This may be done biochemically but takes 2 to 3 days. In the present study, S. Pullorum and S. Gallinarum whole genomes were compared, and 1 genomic region of difference, which is part of the ratA gene, was chosen as a molecular marker for a polymerase chain reaction assay to differentiate rapidly between these organisms. In all, 26 strains of S. Gallinarum and 17 S. Pullorum strains were tested and successfully differentiated by the assay. © 2013 The Author(s).

Caracterização da variabilidade genética em isolados de Xanthomonas albilineans oriundos de diferentes regiões do Brasil

Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico (CNPq)

Irradiação UV em Xanthomonas campestris pv. campestris visando a produção da goma xantana

Pós-graduação em Microbiologia - IBILCE

Diferentes parâmetros de produção de goma xantana pela fermentação de Xanthomonas campestris pv campestris

Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES)

Infecção experimental por Salmonella enterica subsp enterica sorovar Kottbus em pintos de corte de um dia e em ovos férteis SPF

Pós-graduação em Medicina Veterinária - FCAV

Avaliação de pulverizador tratorizado em volume ultra baixo (UBV) para controle de insetos de brotações novas, na cultura dos citros

Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES)

Identificação e caracterização de Xanthomonas euvesicatoria de pimentão no Brasil

Pós-graduação em Agronomia (Proteção de Plantas) - FCA

Análise comparativa dos genomas de Salmonella enterica subsp. enterica sorovar Gallinarum biovares Gallinarum 287/91 e Pullorum 449/87 para identificação de regiões de diferenças (RODs)

Pós-graduação em Microbiologia Agropecuária - FCAV

Métodos para a avaliação da qualidade fisiológica de sementes de ervilha forrageira (Pisum sativum subsp. arvense)

Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES)

Sinais clínicos, lesões e alterações produtivas e reprodutivas em caprinos intoxicados por Ipomoea carnea subsp. fistulosa (Convolvulaceae) que deixaram de ingerir a planta

O objetivo deste trabalho foi acompanhar a evolução clínica, o desempenho produtivo e reprodutivo e descrever as lesões de caprinos intoxicados por Ipomoea carnea subsp. fistulosa após a retirada dos locais onde ocorre a planta. Para isso foram utilizados 37 caprinos, divididos em 4 grupos. O Grupo 1 era composto por 14 caprinos adquiridos em uma propriedade onde ocorria a planta e que apresentavam condição corporal ruim e sinais clínicos nervosos da intoxicação, que variavam de discretos a acentuados. O Grupo 2 era composto por 10 cabras adquiridas em uma propriedade onde não ocorria a planta e também apresentavam condição corporal ruim. O Grupo 3 era composto por dois caprinos com sinais clínicos da intoxicação, que foram abatidos na fazendo onde tinham se intoxicado. O Grupo 4 era composto por 11 caprinos que serviram como controle para o estudo das lesões macroscópicas e histológicas. Os animais dos Grupos 1 e 2 foram avaliados por um período de 12 meses em uma propriedade localizada no município de Castanhal, onde não ocorre a planta. Durante esse período os animais recebiam o mesmo manejo. Seis meses após, os animais do Grupo 1 continuavam com condição corporal ruim, pelo áspero, maior susceptibilidade à infestações por parasitas gastrintestinais e permaneciam com sinais nervosos. Nos animais que apresentavam sinais nervosos discretos houve diminuição desses sinais, principalmente do tremor de intenção, que passou a ser menos perceptível. Nesse mesmo período os caprinos do Grupo 2 ganharam, em média, 13 kg. Das 8 cabras do Grupo 1 que permaneceram na propriedade experimental somente 4 emprenharam e pariram, sendo que 3 cabritos morreram logo após o nascimento, enquanto que todas as cabras do Grupo 2 emprenharam e pariram cabritos sadios. Nos encéfalos dos caprinos do Grupo 1, 3 e 4 foram realizados estudos histológico, morfológico e morfométrico. Macroscopicamente dois animais apresentaram atrofia cerebelar. No estudo morfométrico, as principais alterações histológicas observadas nos animais dos Grupos 1 e 3 foram diminuição dos neurônios de Purkinje do cerebelo. Conclui-se que caprinos cronicamente intoxicados por I. carnea que deixam de ingerir a planta apresentam sinais permanentes, mesmo que diminuídos de intensidade, fraco desempenho produtivo e reprodutivo e alta susceptibilidade aos parasitas gastrintestinais. Sugere-se que os produtores ao iniciar um plano de controle da intoxicação eliminem todos os animais que em um prazo de até 15 dias não apresentam regressão total dos sinais. O sinal permanente mais frequente é o tremor de intenção, associado à perda de neurônios de Purkinje, que poderia ser o principal responsável pela desnutrição dos animais e as conseqüentes falhas reprodutivas e maior susceptibilidade às parasitoses gastrintestinais.

Intoxicação por Ipomoea carnea subsp. fistulosa (Convolvulaceae) em caprinos na Ilha do Marajó, Pará

Ipomoea carnea subsp. fistulosa é uma planta que contém swainsonina causando doença de depósito lisossomal em ruminantes, principalmente em caprinos na região Nordeste do Brasil. Para o estudo das plantas tóxicas da Ilha de Marajó, foram visitadas sete propriedades rurais na Ilha de Marajó, seis localizadas no município de Cachoeira do Arari e uma no município de Soure. Em todas as propriedades visitadas as pastagens eram constituídas de campo nativo, tinham pouca disponibilidade de forragem e I. carnea subsp. fistulosa encontrava-se em grande quantidade. Nas três propriedades onde eram criados caprinos foram observados animais com sinais nervosos, incluindo tremores de intenção, aumento da base de sustentação quando em estação, ataxia, hipermetria, nistagmo, paresia espástica ou debilidade, alterações posturais, perda de equilíbrio e quedas. Em duas fazendas a prevalência foi de 32% (23/71) e 100% (32/32) e em outra havia um animal com sinais acentuados e o resto do rebanho, de 19 caprinos, não foi examinado clinicamente. Bovinos, ovinos e bubalinos não foram afetados. Foram eutanasiados e necropsiados seis caprinos que apresentavam sinais clínicos acentuados. Macroscopicamente não foram observadas alterações. Na histologia observou-se vacuolização do pericário de neurônios e do citoplasma de células epiteliais da tireóide, rim, fígado, pâncreas e macrófagos de diversos órgãos. No sistema nervoso central a vacuolização era mais grave nos neurônios de Purkinje do cerebelo e nos neurônios dos núcleos cerebelares e do tronco encefálico. Observaram-se também degeneração walleriana dos axônios e gliose. A alta freqüência da intoxicação nas três fazendas que criavam caprinos sugere que a intoxicação por I. carnea subsp. fistulosa é muito importante para caprinos na Ilha de Marajó, onde há abundante quantidade da planta, que permanece verde durante todo o período seco.

Perfil de expressão gênica de cana-de-açúcar submetida a estresse biótico com Xanthomonas albilineans

Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES)