Report on ticks collected in the Southeast and Mid-West regions of Brazil: analyzing the potential transmission of tick-borne pathogens to man

Foram coletados espécimes de carrapatos em 1993, 1996, 1997, e 1998, principalmente de animais selvagens e domésticos, nas Regiões Sudeste e Centro-oeste do Brasil. Nove espécies de Amblyommidae foram identificadas: Anocentor Nitens, Amblyomma cajennense, Amblyomma ovale, Amblyomma fulvum, Amblyomma striatum, Amblyomma rotundatum, Boophilus microplus, Boophilus annulatus e Rhipicephalus sanguineus. Analisou-se o potencial destas nove espécies de carrapatos como transmissores de patógenos para o homem. Um Flaviviridade Flavivirus foi isolado de espécimes de Amblyomma cajennense coletados de um capivara doente (Hydrochaeris hydrochaeris). Amblyomma cajennense é o transmissor principal da Rickettsia rickettsii (=R. rickettsi), o agente causador da febre maculosa no Brasil. Os mamíferos selvagens, principalmente capivaras e veados infestados por carrapatos vivem em próximo contato com gado, cavalos e cachorros, com quem compartilham os mesmos carrapatos, oferecendo risco de transmissão destas zoonoses silvestres aos animais domésticos e ao homem.

Developmental lead exposure: behavioral alterations in the short and long term

Wistar dams were exposed to 500 ppm of Pb, as Ph acetate, or 660 ppm Na acetate in drinking water during pregnancy and lactation. Male pups at 23 (weaned) or 70 days (adult) of age were submitted to behavioral evaluation and Pb determination. The behaviors evaluated were: locomotor activity (open-field test), motor coordination (rotarod test), exploratory behavior (holeboard test), anxiety (elevated plus maze and social interaction tests), and learning and memory (shuttle box). Ph levels were measured in the blood and cerebral regions (hippocampus and striatum) of dams and pups. The results of the present report demonstrated that exposure to Ph during pregnancy and lactation induces in weaned pups hyperactivity, decreased exploratory behavior, and impairment of learning and memory. These alterations were observed at blood Ph levels in the range that may be attained in children chronically exposed to low levels of Pb (21 +/- 3 mug/dl). Regarding adults, the results demonstrated that the regimen of exposure adopted induces anxiety in these animals at nondetectable blood Ph levels. (C) 2001 Elsevier B.V. All rights reserved.

Effects of maternal exposure to an aromatase inhibitor on sexual behaviour and neurochemical and endocrine aspects of adult male rat

The present study examined the effects of letrozole exposure during brain sexual differentiation on endocrine, behavioural and neurochemical parameters in male rat descendants. Pregnant female rats received 1 mg kg(-1) day(-1) letrozole or vehicle by oral gavage on gestational Days 21 and 22. Exposure to letrozole reduced anogenital distance in males on postnatal Day (PND) 22. At adulthood (PND 75), plasma testosterone levels and hypothalamic dopaminergic activity were increased, but sexual competence was impaired, because fewer successful sexual behaviours (mount, intromission and principally ejaculation) were observed. The impairment of reproductive function by prenatal exposure to an aromatase inhibitor reinforces the importance of adequate oestrogenic activity during perinatal sexual differentiation for complete masculinisation of the hypothalamus.

Hypoactivity of the central dopaminergic system and autistic-like behavior induced by a single early prenatal exposure to lipopolysaccharide

Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo (FAPESP)

Circadian time-dependent effects of fencamfamine on inhibition of dopamine uptake and release in rat striatal slices

Fencamfamine (FCF) is a central stimulant that facilitates central dopaminergic transmission through inhibition of dopamine uptake and enhanced release of the transmitter. We evaluated the changes in the inhibition of uptake and the release of striatal [ 3H]-dopamine at 9:00 and 21:00 h, times corresponding to maximal and minimal behavioral responses to FCF, respectively. Adult male Wistar rats (200-250 g) maintained on a 12-h light/12-h dark cycle (lights on at 7:00 h) were used. In the behavioral experiments the rats (N = 8 for each group) received FCF (3.5 mg/kg, ip) or saline at 9:00 or 21:00 h. Fifteen minutes after treatment the duration of activity (sniffing, rearing and locomotion) was recorded for 120 min. The basal motor activity was higher (28.6 ± 4.2 vs 8.4 ± 3.5 s) after saline administration at 21:00 h than at 9:00 h. FCF at a single dose significantly enhanced the basal motor activity (38.3 ± 4.5 vs 8.4 ± 3.5 s) and increased the duration of exploratory activity (38.3 ± 4.5 vs 32.1 ± 4.6 s) during the light, but not the dark phase. Two other groups of rats (N = 6 for each group) were decapitated at 9:00 and 21:00 h and striata were dissected for dopamine uptake and relase assays. The inhibition of uptake and release of [ 3H]-dopamine were higher at 9:00 than at 21:00 h, suggesting that uptake inhibition and the release properties of FCF undergo daily variation. These data suggest that the circadian time-dependent effects of FCF might be related to a higher susceptibility of dopamine presynaptic terminals to the action of FCF during the light phase which corresponds to the rats' resting period.

The anatomical connections of the macaque monkey orbitofrontal cortex. A review

The orbitofrontal cortex (OfC) is a heterogeneous prefrontal sector selectively connected with a wide constellation of other prefrontal, limbic, sensory and premotor areas. Among the limbic cortical connections, the ones with the bippocampus and parabippocampal cortex are particularly salient. Sensory cortices connected with the OfC include areas involved in olfactory, gustatory, somatosensory, auditory and visual processing. Subcortical structures with prominent OfC connections include the amygdala, numerous thalamic nuclei, the striatum, hypothalamus, periaqueductal gray matter, and biochemically specific cell groups in the basal forebrain and brainstem. Architectonic and connectional evidence supports parcellation of the OfC. The rostrally placed isocortical sector is mainly connected with isocortical areas, including sensory areas of the auditory, somatic and visual modalities, whereas the caudal non-isocortical sector is principally connected with non-isocortical areas, and, in the sensory domain, with olfactory and gustatory areas. The connections of the isocortical and non- isocortical orbital sectors with the amygdala, thalamus, striatum, hypotbalamus and periaqueductal gray matter are also specific. The medial sector of the OfC is selectively connected with the bippocampus, posterior parabippocampal cortex, posterior cingulate and retrosplenial areas, and area prostriata, while the lateral orbitofrontal sector is the most heavily connected with sensory areas of the gustatory, somatic and visual modalities, with premotor regions, and with the amygdala.

Screening for pectinolytic activity of wood-rotting basidiomycetes and characterization of the enzymes

Seventy-five fungal strains from different groups of basidiomycetes, newly isolated from rotten wood, were screened for pectinolytic activity. Despite the fact that basidiomycetes are scarcely referred to as pectinase producers, the polygalacturonase (PG) activity was detected in 76 % of the strains; 16 % with activity higher than 40 nkat/g, 40 % between 13.3 and 40 nkat/g, and 44 % with activity lower than 13.3 nkat/g. The highest productions were obtained among the fungi from order Aphyllophorales, family Polyporaceae. The characterization of the enzymes from the highest PG producers (Lentinus sp., Gloeophyllum striatum, Pycnoporus sanguineus, Schizophyllum commune) showed optimum temperature for catalytic activity at 60-70°C and two peaks of pH optimum (3.5-4.5 and 8.5-9.5). The enzymes exhibited high pH stability (3.0-11.0) but after incubation at 40°C for 1 h their activity dropped by 18-73 %.

Citrus aurantium L. essential oil exhibits anxiolytic-like activity mediated by 5-HT1A-receptors and reduces cholesterol after repeated oral treatment

Background: The current treatments for anxiety disorders and depression have multiple adverse effects in addition to a delayed onset of action, which has prompted efforts to find new substances with potential activity in these disorders. Citrus aurantium was chosen based on ethnopharmacological data because traditional medicine refers to the Citrus genus as useful in diminishing the symptoms of anxiety or insomnia, and C. aurantium has more recently been proposed as an adjuvant for antidepressants. In the present work, we investigated the biological activity underlying the anxiolytic and antidepressant effects of C. aurantium essential oil (EO), the putative mechanism of the anxiolytic-like effect, and the neurochemical changes in specific brain structures of mice after acute treatment. We also monitored the mice for possible signs of toxicity after a 14-day treatment.Methods: The anxiolytic-like activity of the EO was investigated in a light/dark box, and the antidepressant activity was investigated in a forced swim test. Flumazenil, a competitive antagonist of benzodiazepine binding, and the selective 5-HT1A receptor antagonist WAY100635 were used in the experimental procedures to determine the mechanism of action of the EO. To exclude false positive results due to motor impairment, the mice were submitted to the rotarod test.Results: The data suggest that the anxiolytic-like activity observed in the light/dark box procedure after acute (5 mg/kg) or 14-day repeated (1 mg/kg/day) dosing was mediated by the serotonergic system (5-HT1A receptors). Acute treatment with the EO showed no activity in the forced swim test, which is sensitive to antidepressants. A neurochemical evaluation showed no alterations in neurotransmitter levels in the cortex, the striatum, the pons, and the hypothalamus. Furthermore, no locomotor impairment or signs of toxicity or biochemical changes, except a reduction in cholesterol levels, were observed after treatment with the EO.Conclusion: This work contributes to a better understanding of the biological activity of C. aurantium EO by characterizing the mechanism of action underlying its anxiolytic-like activity. © 2013 Costa et al; licensee BioMed Central Ltd.

Produção de ligninases por basidiomicetos através de fermentação em estado sólido, caracterização e aplicação das enzimas

Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico (CNPq)

Estudo farmacológico e neuroquímico dos óleos essenciais de Cymbopogon citratus (D.C) Stapf e Citrus ayrantium L

Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo (FAPESP)

Avaliação in vitro do efeito genotóxico e neurotóxico da rotenona em populações neuronais de encéfalo de ratos

A doença de Parkinson (DP) é uma doença neurodegenerativa, que afeta principalmente neurônios dopaminérgicos da substância negra que projetam para o estriado. A rotenona, um composto amplamente usado como pesticida, pode estar relacionada a influências ambientais que aumentam o risco do aparecimento da DP. Estudo com análise de danos no DNA, como o ensaio em eletroforese do cometa foi introduzido neste trabalho para uma melhor compreensão de efeitos neurotóxicos da rotenona em modelo experimental da DP. O teste do cometa foi aplicado em neurônios provenientes de culturas mesencefálicas mistas de ratos expostas a diferentes concentrações em dois tempos de exposição, 24 e 48 horas. A média do índice de dano dos cometas mostrou-se, segundo análise estatística, significativamente diferente em relação ao grupo controle em todas as concentrações de rotenona testadas e nas duas durações analisadas. No entanto, na análise comparativa do índice de dano considerando o tempo de exposição para concentrações equivalentes, somente 20 e 30 nano molares demonstraram diferença significativa entre 24 e 48 horas de exposição. Este trabalho demonstrou que, nas condições empregadas, o teste do cometa detectou danos no material genético sem alteração detectável no teste de viabilidade celular pelo MTT (5 nM de rotenona por 24h), sugerindo que alterações genotóxicas podem anteceder alterações de viabilidade celular em neurônios expostos à rotenona. Entretanto, não é possível afirmar se tais alterações possuem caráter irreversível ou não.

Análise comportamental e histológica de um modelo animal da doença de Parkinson em camundongos suíços

A Doença de Parkinson (DP) é uma das doenças neurodegenerativas mais comuns relacionadas com a idade, e apresenta sintomatologia com alterações motoras clássicas que estão relacionadas com a degeneração dos neurônios dopaminérgicos da SNpc e a diminuição de dopamina no estriado. Modelos animais da DP são instrumentos importantes utilizados por pesquisadores para uma maior compreensão de mecanismos patológicos envolvidos na doença e para a avaliação de possíveis intervenções terapêuticas. Tais modelos devem mimetizar algum aspecto da doença, como a degeneração dos neurônios dopaminérgicos nigrais. Neste contexto, o modelo da DP induzido pela injeção da neurotoxina 6- hidroxidopamina (6-OHDA) já se encontra bem estabelecido em ratos, mas necessita ainda de melhor caracterização das alterações comportamentais e lesões no sistema nigro-estriatal em camundongos de diferentes linhagens a fim de que haja interpretações confiáveis quando o modelo for usado em testes terapêuticos. O presente estudo teve como objetivo melhorar a caracterização do modelo unilateral da DP com 6-OHDA em camundongos suíços, avaliando alterações comportamentais e o efeito sobre os neurônios dopaminérgicos da SNpc. Nesta investigação utilizou-se uma única injeção intraestriatal unilateral de 6-OHDA, em duas diferentes concentrações da toxina: 5µg/µl e 10µg/µl. Os nossos resultados mostraram que ambas as concentrações utilizadas causaram perda severa de neurônios dopaminérgicos na SNpc, com uma média de 74,5% e 89,5% de per da, respectivamente. Esta perda apresentou uma correlação alta com o comportamento rotatório induzido por apomorfina e uma correlação baixa com a ambulação no teste do campo aberto. Desta forma, injeções intraestriatais de 5µg/µl ou 10µg/µl de 6-OHDA, em camundongos suíços, reproduzem de forma efetiva o modelo animal unilateral da DP com 6-OHDA, podendo ser utilizadas de forma confiável em experimentos que visem a investigação de terapias farmacológicas, celulares e/ou de neuroproteção para a DP.

Ativação microglial, lesão da substância branca e expressão de Nogo-A em ratos submetidos à isquemia estriatal

O objetivo desta investigação foi avaliar o padrão degenerativo de diversos tratos de substância branca após lesão isquêmica estriatal, correlacionando o processo degenerativo com os padrões de ativação microglial e expressão de Nogo-A. Para isso, foi induzida isquemia focal com injeção estereotáxica de endotelina no estriado de ratos adultos, e nos animais controle apenas injetou-se solução salina estéril. Os animais foram perfundidos 3, 7, 14 e 30 dias após isquemia. O cérebro removido, pós-fixado, crioprotegido, cortado em criostato e os cortes obtidos submetidos à investigação imunoistoquímica com os seguintes anticorpos: Anti-GFAP (1:2000,Dako), Anti-Tau-1 (1:500,Chemicon), Anti-MBP (1:100,Chemicon International), Anti-Nogo A (1:100,Invitrogen), Anti-Iba1 (1:1000, WAKO), Anti-ED1 (1:500, Serotec) e Anti-MHC-II (1:100 Abcam), além da visualização do padrão lesivo com violeta de cresila. As lâminas marcadas pelos diferentes métodos foram avaliadas qualitativamente e algumas também quantitativamente (Anti-Nogo A, Anti-ED1, Anti-MHC-II e Anti-Tau-1), com contagens realizadas no estriado e no corpo caloso. Os dados foram tabulados, submetidos à análise estatística pelo teste de Tukey (p<0,05) e capturadas micrografias dos achados mais representativos. As lâminas coradas com violeta de cresila revelaram um aumento da densidade celular pela infiltração de células inflamatórias à área isquêmica, com aumento expressivo ao 7º dia. Nas lâminas imunomarcadas para GFAP foi encontrado aumento progressivo da população de astrócitos, assim como um aumento do volume celular em 7 e 14 dias. Oligondendrócitos patológicos marcados com Tau-1 tiveram pico de marcação ao 3º dia no estriado e ao 7º dia no corpo caloso, e a perda de compactação de mielina identificada pelo MBP foi melhor observada ao 14º dia, nos diferentes tratos. A ativação microglial identificada pelas diferentes imunomarcações apresentou seu pico ao 7º dia, tanto em estriado como em corpo caloso, porém no corpo caloso com um número muito menor quando comparado com o estriado. A morfologia microglial sofreu variações, sendo encontrado o fenótipo ramificado nos animais controles, assim como nos tempos precoces e tardios pós isquemia e o padrão amebóide/fagocítico ao 7º dia, coincidente com o maior número de células ativadas. A contagem de células Nogo-A + teve seu pico observado ao 3º dia no estriado, não sendo observadas no corpo caloso diferenças de expressão de Nogo-A entre 3 a 14 dias, apenas uma diminuição quando comparado a 30 dias. Sendo assim, microinjeções de ET-1 no estriado induziram conspícua perda tecidual, concomitante com ativação microglial progressiva, astrocitose, perda da imunoreatividade para proteína básica de mielina e lesão de oligodendrócitos em diversos tempos de sobrevida após isquemia focal. Estes eventos acometem alguns tratos de SB, como o corpo caloso. O estabelecimento da evolução temporal destes eventos neuropatológico é a base para estudos futuros, nos quais se deverá manipular a resposta inflamatória com intuito de minimizar estas alterações teciduais.

Tratamento com minociclina e transplante intraestriatal de células mononucleares da medula óssea após acidente vascular experimental encefálico

Diversos estudos sugerem que a tetraciciclina semi-sintética minociciclina e o transplante de células mononucleares da medula óssea (CMMOs) induzem neuroproteção em modelos experimentais de acidente vascular encefálico (AVENC). No entanto, poucos investigaram, comparativamente, os efeitos destas duas abordagens terapêuticas após AVENC induzido por microinjeções de endotelina – 1 (ET -1). Nesta dissertação, objetivou-se comparar os efeitos do bloqueio microglial com minociclina com os obtidos pelo transplante intraestriatal de CMMOs na fase aguda após acidente vascular encefálico experimental, sobre a área de lesão, neuroproteção, apoptose de recuperação funcional. Ratos machos adultos, da raça Wistar, pesando entre 250 e 350g, foram distribuídos em quatro grupos experimentais: controle (chamado de Salina) - isquêmico tratado com salina (N=4), isquêmico tratado com minociclina (N=4), isquêmico tratado com CMMOs (N=3) e doador de CMMOs (N=2). Testes comportamentais foram realizados em 1, 3 e 7 dias pós-isquemia para avaliar a recuperação funcional entre os grupos. Animais tratados com minociclina receberam 2 doses diárias de 50mg/kg nos 2 primeiros dias, e 5 aplicações únicas de 25mg/kg (i.p) nos dias subsequentes até o sexto dia após a indução isquêmica. 1x106 de CMMOs foram obtidas de ratos da mesma linhagem e transplantadas diretamente no estriato, 24h após a lesão isquêmica. Todos os animais foram perfundidos 7 dias após a indução isquêmica. Secções coronais foram coradas por violeta de cresila para análise histopatológica geral, e por imunohistoquímica para a identificação de corpos neuronais (neuN), microglia/macrófagos ativados (ED1) e células apoptóticas (Caspase-3). A análise histopatológica geral mostrou grande palor, perda tecidual e intensa ativação microglial/ macrofágica no estriato de animais tratados com solução salina estéril. O tratamento com CMMO foi mais eficaz do que a minociclina (P<0,05, ANOVA-Tukey) na redução do número de microglia/macrófagos ativados (salina 276,3 ± 9,3); CMMOs 133,8 ± 6,8) e minociclina 244,6 ± 7,1). CMMOs e minociclina reduziram a área de lesão, em 67,75% e 69,1%, respectivamente. Os dois tratamentos promoveram o mesmo nível de preservação neuronal (p< 0,05) em relação ao controle, 61,3 ± 1,5); 86,8 ± 3,4) e 81 ± 3,4). As CMMOs reduziram de forma mais eficaz (p<0,01) o número de células apoptóticas em relação à minociclina e grupo controle (26,5 ± 1,6); 13,1 ± 0,7) e 19,7 ± 1,1). Ambas as abordagens terapêuticas promoveram recuperação funcional dos animais isquêmicos. Os resultados sugerem que o tratamento com CMMOs é mais eficaz na modulação da resposta microglial e na diminuição da apoptose do que o tratamento com minociclina, apesar de ambos serem igualmente eficazes para indução da neuroproteção. Estudos futuros devem investigar se o tratamento com minociclina associado ao transplante de CMMOs produzem efeitos sinérgicos, o que poderia amplificar os níveis de neuroproteção observados.

Avaliação neuropatológica da lesão estriatal em ratos machos e fêmeas da linhagem lister hooded induzida experimentalmente por microinjeções de endotelina-1

A resposta inflamatória pode exacerbar o processo lesivo após desordens neurais agudas. O dimorfismo sexual gerado pelas diferentes presenças hormonais existentes entre macho e fêmea têm demonstrado habilidades neuroprotetoras endógenas opostas, apresentando uma melhor preservação da integridade do tecido nervoso na fêmea, putativamente, devido à presença dos hormônios ginógenos. Não existem investigações comparando como essa diferença pode afetar a resposta inflamatória durante o AVE. No presente estudo, investigaram-se as diferenças nos processos inflamatórios agudos do dimorfismo sexual de ratos adultos, de ambos os sexos, submetidos à lesão isquêmica aguda induzida por Endotelina (ET1) no corpo estriado. Seis grupos experimentais foram delineados: Animais machos de 24 horas de sobrevida (n= 8); machos de 72 horas de sobrevida de (n=8); machos de 7 dias de sobrevida (n=8); e fêmeas de 24 horas de sobrevida (n= 8); fêmeas de 72 horas de sobrevida de(n=8); fêmeas de 7 dias de sobrevida. A análise histopatológica geral foi realizada em secções coradas pela violeta de cresila. Macrófagos, astrócitos e neurônios foram identificados por imuno-histoquímica com anticorpos específicos para estas células inflamatórias (ED1, anti-GFAP e Anti-NeuN, respectivamente). Realizou-se contagem de micróglia/macrófagos ativados e corpos neuronais nos grupos experimentais mencionados. Não se notou diferença quantitativa entre os diferentes sexos, contudo houve uma aparente queda na quantidade de macrófagos/micróglia em 3 dias, tanto para os machos quanto para as fêmeas, apresentando alguma diferença na ativação astrocitária mais forte em machos. Os resultados sugerem que as diferenças sexuais na linhagem Lister Hooded, não são suficientes para causar diferenças significativas na preservação do tecido nervoso e em alguns aspectos da resposta inflamatória após a indução de isquemia cerebral por meio de ET1.