Nonspecific down-regulation of CD8+ T-Cell responses in mice expressing human Papillomavirus Type 16 E7 oncoprotein from the keratin-14 promoter

The E7 oncoprotein of human papillomavirus 16 (HPV16) transforms basal and suprabasal cervical epithelial cells and is a tumor-specific antigen in cervical carcinoma, to which immunotherapeutic strategies aimed at cytotoxic T-lymphocyte (CTL) induction are currently directed. By quantifying major histocompatibility complex class I tetramer-binding T cells and CTL in mice expressing an HPV16 E7 transgene from the keratin-l l (K14) promoter in basal and suprabasal keratinocytes and in thymic cortical epithelium, we show that antigen responsiveness of both E7- and non-E7-specific CD8(+) cells is down-regulation compared to non-E7 transgenic control mice. We show that the effect is specific for E7, and not another transgene, expressed from the K14 promoter, Down-regulation did not involve deletion of CD8(+) T cells of high affinity or high avidity, and T-cell receptor (TCR) VP-chain usage and TCR receptor density were similar in antigen-responsive cells from E7 transgenic and non-E7 transgenic mice. These data indicate that E7 expressed chronically from the K14 promoter nonspecifically down-regulates CD8+ T-cell responses. The in vitro data correlated with the failure of immunized E7 transgenic mice to control the growth of an E7-expressing tumor challenge, We have previously shown that E7-directed CTL down-regulation correlates with E7 expression in peripheral but not thymic epithelium (T, Dean et al., J, Virol. 73:6166-6170, 1999), The findings have implications for the immunological consequences of E7-expressing tumor development and E7-directed immunization strategies. Generically, the findings illustrate a T-cell immunomodulatory function for a virally encoded human oncoprotein.

Thiopalmitoylation of myelin proteolipid protein epitopes enhances immunogenicity and encephalitogenicity

Proteolipid protein (PLP) is the most abundant protein of CNS myelin, and is posttranslationally acylated by covalent attachment of long chain fatty acids to cysteine residues via a thioester linkage. Two of the acylation sites are within epitopes of PLP that are encephalitogenic in SJL/J mice (PLP104-117 and PLP139-151) and against which increased immune responses have been detected in some multiple sclerosis patients. It is known that attachment of certain types of lipid side chains to peptides can result in their enhanced immunogenicity. The aim of this study was to determine whether thioacylated PLP peptides, as occur in the native protein, are more immunogenic than their nonacylated counterparts, and whether thioacylation influences the development of autoreactivity and experimental autoimmune encephalomyelitis. The results show that in comparison with nonacylated peptides, thioacylated PLP lipopeptides can induce greater T cell and Ab responses to both the acylated and nonacylated peptides. They also enhanced the development and chronicity of experimental autoimmune encephalomyelitis. Synthetic peptides in which the fatty acid was attached via an amide linkage at the N terminus were not encephalitogenic, and they induced greater proportions of CD8(+) cells in initial in vitro stimulation. Therefore, the lability and the site of the linkage between the peptide and fatty acid may be important for induction of encephalitogenic CD4(+) T cells. These results suggest that immune responses induced by endogenous thioacylated lipopeptides may contribute to the immunopathogenesis of chronic experimental demyelinating diseases and multiple sclerosis.

The gene encoding the immunoregulatory signaling molecule CMRF-35A localized to human chromosome 17 in close proximity to other members of the CMRF-35 family

The immunoregulatory signaling (IRS) family includes several molecules, which play major roles in the regulation of the immune response. The CMRF-35A and CMRF-35H molecules are two new members of the IRS family of molecules, that are found on a wide variety of haemopoietic lineages. The extracellular functional interactions of these molecules is presently unknown, although CMRF-35H on initiate an inhibitory signal and is internalized when cross-linked. In this paper, we described the gene structure for the CMRF-35A gene and its localization to human chromosome 17. The gene consists of four exons spanning approximately 4.5 kb. Exon 1 encodes the 5' untranslated region and leader sequence, exon 2 encodes the immunoglobulin (Ig)-like domain, exon 3 encodes the membrane proximal region and exon 4 encodes the transmembrane region, the cytoplasmic tail and the 3' untranslated region. A region in the 5' flanking sequence of the CMRF-35A gene, that promoted expression of a reporter gene was identified. The genes for the CMRF-35A and CMRF-35H molecules are closely linked on chromosome 17. Similarity between the Ig-like exons and the preceding intron of the two genes suggests exon duplication was involved in their evolution. We also identified a further member of the CMRF-35 family, the CMRF-35J pseudogene. This gene appears to have arisen by gene duplication of the CMRF-35A gene. These three loci-the CMRF-35A, CMRF-35J and CMRF-35H genes-form a new complex of IRS genes on chromosome 17.

Alterations in Plasmodium falciparum genotypes during sequential infections suggest the presence of strain specific immunity

Many of the asexual stage Plasmodium falciparum proteins that are the targets of host protective responses are markedly polymorphic. The full repertoire of diversity is not defined for any antigen. Most studies have focused on the genes encoding merozoite surface proteins 1 and 2 (MSP1, MSP2). We explored the extent of diversity of some of the less studied merozoite surface antigens and analyzed the degree of complexity of malaria field isolates by deriving nucleotide sequences of several antigens. We have determined the genotype of apical membrane antigen 1 (AMA1) in a group of 30 field samples, collected over 29 months, from individuals living in an area of intense malaria transmission in Irian Jaya, identifying 14 different alleles. AMA1 genotyping was combined with previously determined MSP2 typing. AMA1 had the greatest power in distinguishing between isolates but methodological problems, especially when mixed infections are present, suggest it is not an ideal typing target. MSP1, MSP3, and glutamate-rich protein genotypes were also determined from a smaller group of samples, and all results were combined to derive an extended antigenic haplotype. Within this subset of 10 patients, nine different genotypes could be discerned; however, five patients were all infected with the same strain. This strain was present in individuals from two separate villages and was still present 12 months later. This strain was predominant at the first time point but had disappeared at the fourth time point. This significant change in malaria genotypes could be due to strain-specific immunity developing in this population.

Phase variation in meningococcal lipooligosaccharide biosynthesis genes

Neisseria meningitidis expresses a range of lipooligosaccharide (LOS) structures, comprising of at least 13 immunotypes (ITs). Meningococcal LOS is subject to phase variation of its terminal structures allowing switching between ITs, which is proposed to have functional significance in disease. The objectives of this study were to investigate the repertoire of structures that can be expressed in clinical isolates, and to examine the role of phase-variable expression of LOS genes during invasive disease. Southern blotting was used to detect the presence of LOS biosynthetic genes in two collections of meningococci, a global set of strains previously assigned to lineages of greater or lesser virulence, and a collection of local clinical isolates which included paired throat and blood isolates from individual patients. Where the phase-variable genes lgtA, lgtC or IgtG were identified, they were amplified by PCR and the homopolymeric tracts, responsible for their phase-variable expression, were sequenced. The results revealed great potential for variation between alternate LOS structures in the isolates studied, with most strains capable of expressing several alternative terminal structures. The structures predicted to be currently expressed by the genotype of the strains agreed well with conventional immunotyping. No correlation was observed between the structural repertoire and virulence of the isolate. Based on the potential for LOS phase variation in the clinical collection and observations with the paired patient isolates, our data suggest that phase variation of LOS structures is not required for translocation between distinct compartments in the host. (C) 2002 Published by Elsevier Science B.V. on behalf of the Federation of European Microbiological Societies.

Ex vivo profiling of CD8(+)-T-cell responses to human cytomegalovirus reveals broad and multispecific reactivities in healthy virus carriers

Human cytomegalovirus (HCMV) can establish both nonproductive (latent) and productive (lytic) infections. Many of the proteins expressed during these phases of infection could be expected to be targets of the immune response; however, much of our understanding of the CD8(+)-T-cell response to HCMV is mainly based on the pp65 antigen. Very little is known about T-cell control over other antigens expressed during the different stages of virus infection; this imbalance in our understanding undermines the importance of these antigens in several aspects of HCMV disease pathogenesis. In the present study, an efficient and rapid strategy based on predictive bioinformatics and ex vivo functional T-cell assays was adopted to profile CD8(+)-T-cell responses to a large panel of HCMV antigens expressed during different phases of replication. These studies revealed that CD8(+)-T-cell responses to HCMV often contained multiple antigen-specific reactivities, which were not just constrained to the previously identified pp65 or IE-1 antigens. Unexpectedly, a number of viral proteins including structural, early/late antigens and HCMV-encoded immunomodulators (pp28, pp50, gH, gB, US2, US3, US6, and UL18) were also identified as potential targets for HCMV-specific CD8(+)-T-cell immunity. Based on this extensive analysis, numerous novel HCMV peptide epitopes and their HLA-restricting determinants recognized by these T cells have been defined. These observations contrast with previous findings that viral interference with the antigen-processing pathway during lytic infection would render immediate-early and early/late proteins less immunogenic. This work strongly suggests that successful HCMV-specific immune control in healthy virus carriers is dependent on a strong T-cell response towards a broad repertoire of antigens.

Hist??ria das reformas administrativas no Brasil: narrativas, teoriza????es e representa????es

O trabalho se prop??e a oferecer uma modesta contribui????o ao estudo da hist??ria das reformas administrativas realizadas no Brasil a partir da primeira metade do s??culo XX. Mais do que apresentar uma cronologia de fatos e um repert??rio de projetos, recupera as narrativas e an??lises dos estudiosos do tema para identificar as diferentes explica????es para os sucessos e insucessos do passado e estabelecer um sistema de categorias que seja ??til ?? compreens??o da din??mica hist??rica. Relatos, narrativas, teoriza????es, interpreta????es e ideologias se confundem. Em qualquer um dos casos, constituem representa????es do mundo administrativo brasileiro, quer dizer, apresentam-se como formas simb??licas de um Estado em transforma????o.

Aprendizagem por imitação através de mapeamento Visuomotor baseado em imagens omnidirecionais

Este trabalho propõe uma metodologia de aprendizagem que permite a um robô aprender uma tarefa adaptando-a e representando-a de acordo com a sua capacidade motora e sensorial. Primeiramente, um mapeamento sensoriomotor é criado e converte informação sensorial em informação motora. Depois, através de imitação, o robô aprende um conjunto de ações elementares formando um vocabulário motor. A imitação é baseada nas representações motoras obtidas com o mapeamento sensoriomotor. O vocabulário motor criado é então utilizado para aprender e realizar tarefas mais sofisticadas, compostas por seqüências ou combinações de ações elementares. Esta metodologia é ilustrada através de uma aplicação de mapeamento e navegação topológica com um robô móvel. O automovimento é utilizado como mapeamento visuomotor, convertendo o fluxo óptico em imagens omnidirecionais em informação motora (translação e rotação), a qual é usada para a criação de um vocabulário motor. A seguir, o vocabulário é utilizado para mapeamento e navegação topológica. Os resultados obtidos são interessantes e a abordagem proposta pode ser estendida a diferentes robôs e aplicações.

Fatores intervenientes na implementação de ações estratégicas para a promoção do selo de indicação geográfica das panelas de barro de goiabeiras

Visando a proteção da propriedade industrial advinda de uma região demarcada, surgiu a Indicação Geográfica (IG). O registro da IG é conferido aos produtos ou serviços característicos de seu local de origem, apresentando qualidades únicas em função dos recursos naturais. Além disso, a IG é responsável por distinguir estes produtos em relação aos disponíveis no mercado. Neste contexto, entidades como Sebrae, MAPA e INPI, têm promovido ações estratégicas com o objetivo de apoiar a proteção do saber fazer e consequentemente, os produtos tradicionais das regiões. Tais entidades são responsáveis por promover a sustentabilidade do processo juntos aos produtores, assim como disseminar o selo para os consumidores. Assim, iniciativas como esta precisam ser apoiadas a fim de entregar resultados significativos para o desenvolvimento das regiões e seus respectivos produtos com o selo de IG. O Plano de Apoio à Gestão da Indicação Geográfica desenvolvido pelo Sebrae/ES tem três pilares: melhoria do processo de produção, promoção do produto e a sustentabilidade do processo. A presente pesquisa, baseando-se nas teorias sobre estratégia e implementação de estratégias, analisa os fatores intervenientes que contribuem para o sucesso da implementação do Plano de Apoio à Gestão da indicação geográfica das Panelas de Barro de Goiabeiras, bairro do município de Vitória, capital do Espírito Santo. A pesquisa é um estudo de caso de natureza qualitativa, exploratória e descritiva ex-post-facto. Os dados foram coletados nos documentos (plano de ação do Sebrae/ES, Livro dos Saberes e relatórios desenvolvidos por consultores especializados) e por meio de entrevistas com seis agentes de políticas públicas e cinco paneleiras, envolvidos na elaboração e implementação do plano de ação. Para a análise dos dados, adotou-se a metodologia de análise de conteúdo com index definido a posteriori. Do Plano de Apoio à Gestão da IG das Paneleiras de Goiabeiras, foram agrupadas três ações estratégicas buscando identificar em que medida os fatores intervenientes afetaram a implementação de cada ação estudada: Ação1: fortalecimento dos aspectos culturais do produto, Ação 2: fortalecimento dos aspectos sociais do produto e Ação 3: fortalecimento dos aspectos econômicos associados à diferenciação por IG. Os resultados mostraram que na Ação 1 o fator interveniente liderança superou as expectativas na implementação das estratégias. Já os aspectos políticos, o acompanhamento de resultados e a estrutura organizacional desenvolveram as ações conforme o planejado, enquanto os fatores intervenientes cultura e clareza nas estratégias apresentaram oportunidades de melhorias. Na Ação 2 somente os fatores intervenientes recursos, cultura e clareza nas estratégias apresentaram-se de acordo com o proposto, enquanto a liderança e a estrutura organizacional mostraram-se como pontos de oportunidades de melhoria. Por fim, na Ação 3 nenhum fator interveniente foi destaque como uma oportunidade de melhoria. A estrutura organizacional e os aspectos políticos apresentaram-se de acordo, enquanto os recursos e a liderança superaram as expectativas.

A recepção da obra de Paulo Coelho pela crítica literária e pelo leitor

Propõe-se um estudo acerca da recepção da obra de Paulo Coelho pela crítica literária e pelo leitor, envolvendo a indústria cultural, sob a perspectiva da Sociologia da Literatura. A pesquisa justifica-se pela grande proporção de leitores que a obra atinge: traduzida para 81 idiomas e lida em 168 países, tendo boa aceitação por diferentes perfis de leitores e por muitos críticos literários de outros países. No Brasil, a produção do escritor é recebida com uma certa reserva pela crítica literária. As intervenções da indústria cultural são discutidas por meio de um diálogo estabelecido entre Theodor W. Adorno, Max Horkheimer, Pierre Bourdieu, Umberto Eco, Luiz Costa Lima e Muniz Sodré. Em seguida, estabelece-se uma discussão sobre valor estético em relação à literatura contemporânea. Posteriormente, são mostradosos elementos temáticos recorrentes e a proximidade da narrativa coelhana com a oralidade, a partir da influência das canções compostas em parceria com Raul Seixas e da operação dos gêneros parábola e fábula.A recepção da crítica é analisada, baseando-se em estudos de Mário Maestri, Eloésio Paulo, teses e dissertações, artigos, entre outros. A recepção do leitor tem como aporte teórico Antonio Candido e Roger Chartier, dentre outros, apoiando-se na Estética da Recepção, especificamente nos estudos de Hans Robert Jauss e Regina Zilberman. É analisada a recepção da obra de Paulo Coelho pelos leitores da rede social Skoob, a fim de verificar o gênero, a idade,o nível de escolaridade, a condição socioeconômica e cultural e as impressões de leitura destes. Compreendendo esses sujeitos-leitores, historicamente, e valendo-se de outros aspectos (em vez dos estéticos) apontados pela Sociologia da Literatura, é possível estabelecer diálogos entre as preferências desses leitores com obras já legitimadas pela teoria e crítica literárias, ampliando o repertório destes e contribuindo para a mediação e a promoção da leitura, no Brasil.

Ansiedade materna manifestada durante o tratamento odontológico de seus filhos

A ansiedade manifestada pela criança durante o atendimento odontológico constitui um elemento potencialmente prejudicial à realização do tratamento bucal. O objetivo deste trabalho foi descrever e analisar os comportamentos de dez mães durante sessões seqüenciais de atendimento odontológico de seus filhos. Todas as sessões foram filmadas em videoteipe com marcas sonoras a cada 15 segundos, indicando os momentos em que foram efetuados os registros dos comportamentos. Um mapeamento geral do repertório de comportamentos permitiu apontar padrões comuns a todas as participantes e padrões específicos, indicadores de maior ansiedade de algumas participantes. Proporcionalmente, o procedimento de anestesia injetável evocou maior freqüência de comportamentos indicadores de respostas de ansiedade das mães. O cirurgião-dentista, atento aos comportamentos de pais e acompanhantes de crianças, pode adotar estratégias que reduzam a ansiedade dos pais, aumentando a freqüência de comportamentos colaborativos da criança com o tratamento. _______________________________________________________________________________ ABSTRACT

Ordenação de populações em amplas classes de nível de saúde, segundo um indicador abrangente definido por uma função discriminante linear

Utilizando a função discriminante linear, propõe-se um indicador de nível de saúde abrangente de vários indicadores usuais, a saber: o coeficiente de mortalidade geral (CMG), indicador quantificado de Guedes (IG), esperança de vida ao nascer (EV), coeficiente de natalidade (CN), coeficiente de mortalidade infantil (CMI) e coeficiente de mortalidade por doenças transmissíveis (CMDT). Para a padronização dos dois últimos, foi proposta e utilizada uma população padrão mediana; para sua formação, cada grupo etário concorre com a mediana das percentagens de participação desse grupo na composição da população de cada um dos 44 países estudados. A análise crítica das equações de funções discriminantes obtidas com a técnica passo a 2895 2060 1000 passo ascendente (stepwise), mostrou que o valor: Z = 2895/CMI + 2060/CN + 1000/CMDTp, pode ser utilizado como indicador abrangente, permitindo a ordenação de países em amplas classes de nível de saúde.

Período de infectividade de animais inoculados experimentalmente com Yersinia sp

Lotes de camundongos suiços convencionais foram inoculados tanto por via intragástrica (IG) quanto por via intravenosa (IV) com Yersinia enterocolitica dos sorotipos 0:3, 0:8 e 0:9 e com amostras de yersinias atípicas. Foi mantido um lote de animais não inoculados como controle. Verificou-se qual o período de permanência dessas bactérias no intestino dos animais inoculados. Yersinia enterocolitica dos sorotipos 0:3, 0:8 e 0:9, considerados adaptados ao homem, permaneceram no intestino dos animais inoculados por um período muito maior do que as amostras de Yersinia não adaptadas, quer inoculadas por via intragástrica, quer por via intravenosa.

Estado de salud bucodental de escolares residentes en localidades abastecidas con agua de consumo humano de muy alto y muy bajo contenido de fluoruros

Se describen y analizan los resultados de una investigación epidemiológica de corte transversal destinada a evaluar el estado de salud bucodental en escolares de 6-7 y 12-13 años residentes en Sampacho y Porteña, dos localidades de la Provincia de Córdoba (Argentina), abastecidas con agua de bebida que poseen cantidades deF- muy diferentes. En Sampacho, el nivel de F- es de 9,05 mg/l, en tanto que en Porteña la concentración es de 0,19 mg/l. La proporción de escolares (6-7 y 12-13 años) que no tuvo experiencia de caries fue significativamente mayor en Sampacho que en Porteña, mientras que los índices ceo-d, ceo-s, CPO-D y CPO-S resultaron considerablemente más altos en esta última localidad. La severidad de la enfermedad de caries en los niños de 12-13 años de Sampacho estuvo comprendida entre baja y moderada (CPO-D= 2,53), en tanto que en sus similares de Porteña alcanzó el grado de moderada a alta (CPO-D= 4,41). No se registró ningún caso de fluorosis dental en Porteña, mientras que en Sampacho hubo una alta proporción de niños que presentó fluorosis leve (6-7 años) y leve o intensa (12-13 años). Los niveles salivales de calcio, fosfatos, tiocianato, proteínas totales e Ig A secretoria fueron muy similares en los escolares de ambas localidades, y también entre niños con diferente experiencia de caries y distintos grados de fluorosis dental. Se concluye que son necesarias urgentes medidas sanitarias (preventivas y/o curativas) para reducir o controlar la enfermedad de caries en Porteña y la fluorosis dental en Sampacho.

Valor preditivo do "Clinical Risk Index for Babies" para o risco de mortalidade neonatal

OBJETIVO: Comparar o valor preditivo do CRIB (Clinical Risk Index for Babies) para o risco de mortalidade neonatal ao peso de nascimento (PN) e idade gestacional (IG). MÉTODO: Numa coorte prospectiva foram estudados, durante o ano de 1996, 71 recém-nascidos admitidos na unidade de terapia intensiva, com PN < 1.500 g e/ou IG < 31 semanas. RESULTADOS: A taxa de mortalidade foi de 29,6%; para PN < 1.000 g ou IG < 29 semanas foi de 60%, enquanto que para o escore de CRIB > 10 foi de 100%. CONCLUSÕES: O escore de CRIB > 10 correspondeu a maiores especificidade e valor preditivo positivo em relação aos demais parâmetros. A área determinada pela "receiver operating characteristic" relativa ao CRIB também foi superior. O CRIB mostrou-se um marcador mais acurado na previsão de risco de mortalidade quando comparado ao PN ou IG isoladamente.