Bases experimentales para la identificacion de Leishmania spp. de America por morfometria de amastigotos

Estudios morfométricos sobre los amastigotos de dieciocho poblaciones de cuatro aislados pertenecientes a dos especies venezolanas de Leishmania (L. braziliensis y L. garnhami) indican que la posición del einetoplasto nose modifica en modo estadísticamente significativo cuando los parásitos son sometidos a pasajes por hamsteres y ratones,cultivos en medio NNN o por infección en un vector (Lu. townsendi). La posición del cinetoplasto, medido como la distancia entre el extremo posterior del amastigoto al cinetoplasto, dividido entre la distancia del organoide al extremo anterior de la célula, permite diferenciar a L. braziliensis de L. mexicana y L. garnhami. Los otros parámetros morfométricos no son tan confiables.

Ensayos metodologicos para la investigacion de reservorios de Leishmania spp en los Andes venezolanos

Se describen dos técnicas, presuntiva y confirmativa, para la investigación de mamíferos que pudieran ser reservorios de Leishmania que parasitan al hombre. Se investigan los cambios en los títulos de inmovilización y aglutinación de promastigotos de cultivo por los sueros de animales normales y expuestos una o varias veces a la inoculación intradérmica de pequeñas dosis de promastigotos vivos. Se registra una caída de los títulos de aglutinación en los sueros de hamsteres, de Holochilus venezuelae y de Didelphis marsupialis después de la inoculación con L. mexicana mexicana de Panamá y de L. gamhami de la región de los Andes venezolanos. Se discute la natureza de estos fenómenos. Se han hecho xenodiagnósticos con Lutzomyia townsendi en Holochilus venezuelae y Sigmodon hispidus infectados experimentalmente com L. mexicana mexicana, L. mexicana amazonensis, L. braziliensis y L. garnhami. Las pruebas fueron leidas mediante el examen microscópico de las gotitas de heces excretadas entre las 108 y 132 horas después de la ingesta infectante, tras colorearlas con Giemsa. Se obtuvieron resultados positivos en 23% de los experimentos usando mamíferos con lesiones localizadas, dejando a los flebótomos ingurgitarse libremente sobre animales anestesiados que poseian una hasta varias lesiones localizadas.

Study of an outbreak of cutaneous leishmaniasis in Venezuela: the role of domestic animals

During an outbreak of cutaneous leishmaniasis in a locality (Las Rosas, Cojedes State, venezuela) previously non-endemic, 12.9% of humans, 7% of dogs and 21.4% of donkeys (Equus asinus) had lesions with paraites. The agent in the three hosts was identified as Leishmania braziliensis, subspecies braziliensis at least in man and donkey. The probable vector was Lutzomyia panamensis. No infection was found in a small sample of wild mammals examined. The outbreak was apparently linked with the importation of donkeys with ulcers, from endemic areas. The Authors call attention to the fact that not only in the foci of "uta", but also in areas of the other forms of American cutaneous leishmaniasis, dogs are frequently found infected. They emphasize the necessity of searching for the infection in donkeys and of performing hemocultures and xenodiagnosis with sandflies in human, canine and equine cases, to verify their possible role as sources of infection, and not merely as dead ends in the epidemiological chain of the disease.

Infecção natural de Lutzomyia intermedia Lutz & Neiva, 1912, em área endêmica de leishmaniose tegumentar no Estado do Rio de Janeiro

Num foco de leishmaniose tegumentar, em Jacarepaguá, Rio de Janeiro, foi encontrado um exemplar de Lutzomyia intermedia naturalmente infectado com Leishmania braziliensis.

A surgery for American cuteneous and visceral leishmaniasis among 1,342 dogs from areas in Rio de Janeiro (Brazil) where the human diseases occur

There are areas in the periphery of Rio de Janeiro city where human cases of Visceral and/or Cutaneous Leishmaniasis occur. The parasites have been identified as Leishmania donovani and Leishmania braziliensis braziliensis respectively. A survey for Leishmaniasis was done among 1,342 dogs from those areas using an indirect immunofluorescent test. From the dogs, 616 came from areas where only human cases of Visceral Leishmaniasis occurred, 373 from an area where all human cases were of Cutaneous Leishmaniasis and 353 from a third area (Campo Grande) where both visceral and cutaneous human cases were detected. The prevalence of parasite antibody titers among dogs from areas of Cutaneous Leishmaniasis was significantly higher than that of Visceral Leishmaniasis (8.6% vs. 4.3%, p < 0.02). The highest prevalence was observed among dogs from the area where both diseases are present (12.7%).

A pilot study to control Lutzomyia umbratilis (Diptera: Psychodidae), the major vector of Leishmania brazileiensis guyanensis, in a peri-urban rainforest of Manaus, Amazonas State, Brazil

In the second half of 1980, 112 (or ca. 16%) of the inhabitants of the new settlement of São José, city of Manaus, contracted cutaneous leishmaniasis whilst clearing their properties of terra firme rainforest. With the aid of SUCAM, the authors carried out a pilot study to investigate the feasibility of reducing populations of Lutzomyia umbratilis, the local silvatic vector of Leishmania braziliensis guyanensis, by spraying insecticide on its favoured diurnal resting sites, the bases of the larger forest trees. Most manvector contact is at these resting sites and, therefore, it was encouraging to record a marked reduction of the tree-base populations of L. umbratilis for 21 days following just one application of D.D.T. emulsion in an area 200m square. Most of the treated trunks were not occupied by L. umbratilis for at least eleven months. Suggestions for extending the pilot study are made, and the need for collaboration with a clinical team is emphasized. Leishmania b. guyanensis is the aetiological agent of [quot ]pain bois[quot ], which is hyperendemic from French Guiana to central Amazônia. In the absence of proven vaccines or methods of vector control, some simple methods for limiting transmission of Le. b. guyanensis to man are listed.

El "Status" taxonomico de leishmania garnhami, indicado por su patron de desarrollo en el Vector

Bajo condiciones experimentales, se estabelece el de desarrollo primario de Leishmania garnhami em su vector Lutzomyia townsendi, siguiendo disecciones diarias entre el Iro y 12mo dia post-imnfección. Se demuestra que L. garnhami puede lograr el estabelecimiento inicial de la infección en cualquiera de las regiones del intestino y en los túbulos de Malpighi del insecto vector. Un comportamiento similar fue observado en ejemplares de Lu. longipalpis. Se discute la susceptibilidad de Lu. townsendi a las infecciones por L. mexicana, L. braziliensis y L. garnhami. Se concluye que L. garnhami, a juzgar por su comportamiento en el vector, debe considerarse distinta a las especies del complejo L.mexicana y que su patrón de desarrollo difiere del de las especies de la Sección Suprapylaria, ya que invaden el triângulo pilórico, y del de la Peripylaria por su invasión a los túbulos de Malpighi.

Canine Visceral Leishmaniasis in Rio de Janeiro, Brazil: clinical, parasitological, therapeutical and epidemiological findings (1977-1983)

Forty dogs from the periphery of the city of Rio de Janeiro were studied. All dogs where diagnosed as positive for leishmaniasis either parasitologically and/or serologically. Among them, 19 came from areas where only Visceral Leishmaniasis (VL) occurs (Realengo, Bangu, Senador Camará). Clinical signs of the disease were seen in 36.8% of the cases, including emaciation - 100%, lymphadenopathy and depilation - 85.7%. The other 21 dogs came from an area (Campo Grande) where both diseases (VL, and American Cutaneous Leishmaniasis - ACL) occur. Clinical signs of the disease, mainly cutaneous or mucocutaneous ulcers were seen in 76.2% of the cases. Leishmania parasites were found in 39 cases: 22% in viscera, 42.5% in viscera and normal skin and 35% in cutaneous or mucocutaneous ulcers. All the Leishmania stocks isolated from dogs which came from Realengo, Bangu, Senador Camará (VL area), and from Campo Grande (VL + ACL area) were characterized as L. donovani (except in one case) according to their schizodeme, zymodeme and serodeme. The only stock characterized as L. b. braziliensis, was isolated from the lymph node of a dog from Campo Grande with visceral disease and without skin lesions. Antimony therapy attempted in eight Leishmania donovani positive dogs was unsuccessful.

Bolivian phlebotomines. II Psychodopygus Yucumensis n.sp., a new man-biting phlebotomine sandfly from subandean region (Diptera, Psychodidae)

Psychodopygus yucumensis n.sp., a new species of Phlebotomine sandfly belonging in genus Psychodopygus mang., is described from specimens collected from human bait, in Beni dept., Bolivia. The male is characteristic of the series panamensis, but the female, closely related to P. carrerai carrerai, can be confused with this species ("cryptic species"). Isozyme characterization can determine any specimen of either species, while morphometric analysis shows statistical differences between the two species. P. yucumensis is strongly anthropophilic. A Leishmania braziliensis braziliensis stock was isolated from this new species, indicating that it is one of the vectors of mucocutaneous Leishmaniasis in the lowland subandean area.

Participação do cão no ciclo de transmissão da Leishmaniose tegumentar no município de Viana, Estado do Espírito Santo, Brasil

Em área endêmica de leishmaniose tegumentar no município de Viana, Estado do Espírito Santo, investigou-se a ocorrência de infecção natural por Leishmania em animais domésticos, procurando-se relacionar a presença dos animais infectados com a ocorrência da doença humana. No período de três semanas foram examinados 186 cães, dos quais 32 (17,2%) estavam parasitados. Durante um ano surgiram, entre os moradores da área, 11 casos novos de leishmaniose tegumentar. Três amostras humanas de Leishmania e 27 amostras isoladas de cães foram identificadas como L. braziliensis braziliensis. Observou-se nítida relação entre a presença de cães infectados e a ocorrência de novos casos humanos da doença. Supõe-se que a moléstia esteja se comportando na área como uma zoonose mantida pelos cães domésticos.

Características epidemiológicas da leishmaniose tegumentar americana em uma região endêmica do Estado da Bahia: III. Fauna flebotomínica

A fauna flebotomínica da região de Três Braços, uma área endêmica de leishmaniose cutânea-mucosa localizada no sudeste do Estado da Bahia, na região cacaueira, é muito variada. Foram identificadas 30 espécies de Lutzomyia em 13.535 exemplares coletados entre os anos de 1976 e 1984. Lu. withmani foi a espécie altamente predominante no ambiente peridoméstico e no interior das residências, com percentuais de 99,0 e 97,5, respectivamente. Na floresta, as espécies predominantes foram Lu. ayrozai e Lu. yuilli, aparecendo Lu. whitmani com apenas 1,0% do total de exemplares examinados. Lu. flaviscutellata, vetor comprovado da Leishmania mexicana amazonensis, foi também coletada em baixos índices. Lu. wellcomei, vetor da L. braziliensis braziliensis na Serra dos Carajás, Pará, Brasil, não foi encontrada na região de Três Braços onde o parasito causando infecções humanas é predominantemente L. b. braziliensis. Embora não se tenha encontrado infecção natural por promastigotas em 1.832 fêmeas de diversas espécies examinadas, discute-se a possibilidade de Lu. whitmani ser um vetor da L.b. braziliensis na região, mantendo, provavelmente, a transmissão entre o cão e o homem.

Flebótomos de Vargem Grande, foco de leishmaniose tegumentar no Estado do Rio de Janeiro

Realizamos durante um ano completo coletas sistemáticas de flebótomos em Vargem Grande, onde recentemente encontráramos Lutzomyia intermedia naturalmente infectada por Leishmania braziliensis. Capturamos flebótomos pertencentes a doze espécies. Tanto dentro de casa quanto no peridomicílio, as capturas em isca humana e com armadilha luminosa, revelaram a grande predominância de L. intermedia seguida de L. migonei. Na plantação predominou L. migonei. Nas coletas simultâneas em homem e cão, L. intermedia foi mais freqüente no primeiro e L. migonei no segundo.

Indirect immunofluorescence test in new world Leishmaniasis: serological and clinical relation-ship

The indirect immunofluorescence test (IF) for anti-Leishmania antibodies (IgC and IgM) was performed with sera form the following groups of individuals: 214 cutaneous leishmaniasis patients, 28 healthy subjects with positive Montenegro's skin test (MST), 29 healthy subjects with negativeMST and 16 visceral leishmaniasis patients. The first four groups came from a suburban area of Rio de Janeiro (Jacarepaguá) where cutaneous leishmaniasis caused by Leishmania braziliensis braziliensis is endemic. It was observed that IF-IgM titers were significantly higher amongst the cutaneous leishmaniasis patients with less than four months of disease as compared to those with longer periods and that IF-IgG titers were significantly higher in patients with multiple lesions as compared to those with single lesions. The visceral leishmaniasis patients had IF-IgG titers significantly higher than those from cutaneous leishmaniasis patients. A group of 28 individuals selected amongst the 214 cutaneous leishmaniasis patients had their IF-titers (IgG and IgM) compared to those of the two control groups of healthy subjects from the endemic area, respectively with positive and negative MST. Significantly higher titers of IF-IgG and IF-IgM were found in the group with active disease. The same group of patients showed IF-IgG titers significantly lower at the end of the antimonial therapy than those observed during this tratment.

Deteccion de amastigotas en Leishmaniasis cutanea y mucocutanea por el metodo de inmunoperoxidasa, usando anticuerpo policlonal: sensibilidad y especificidad comparadas con metodos convencionales de diagnostico

Con el objeto de aumentar la sensibilidad del diagnóstico histopatológico de lesiones cutáneas y mucocutáneas causada por subespecies del complejo Leismania braziliensis y para lograr una mejor visualización de los parásitos en las lesiones, se evaluó el método de la inmunoperoxidas indirecta para localizar en forma rápida y específica los amastigotas en biopsia de tejido afectado. Los cortes de tejido se fijaron en formol y se incluyeron en parafina; después se evaluaron por inmunohistoquímica usando un antisuero policlonal producido en conejo, como reactivo primario, Se examinaron 265 biopsias de pacientes con lesiones sospechosas de leishmaniasis de la costa Pacífica y región suroriental colombiana. a 1983 (72.8%) pacientes se les estableció el diagnóstico por métodos clínicos y/o poarasitológicos. Los resultados obtenidos por la inmunoperoxidasa en el grupo de pacientes a los cuales se les confirmó la leishmaniasis se compararn con la histopatología convencional, el examen directo de frotis y el aislamiento del parásito por cultivo del aspirado de la lesión. La localización inmunoenzimática de las amastigotas fue más efectivas (61.3%) que la histopatología com hematoxilina y eosina (34.6%), y que el frotis (43,9%). En cambio, el cultivo de aspirado fue más sensible (89.8%). La eficiencia del método de inmunoperoxidasa fue mayor en las lesiones recientes (72.5%) positivos en los casos con menos de tres meses de evolución) que en las lesiones más antiguas (55.6, 37.5 y 21.1% para 3-5.9, 6-11 meses y mayores o iguales a 12 mese, respectivamente). La combinación de frotis e inmunoperoxidasa incrementó el porcentaje de caso diagnosticados a 72.0%, lo que indica la importancia de combinar métodos para obtener una mayor eficiencia de diagnóstico. La especificidad fue de 100% en controles sanos y 92.9% en pacientes con lesiones causadas por agentes etiológicos distintos a leishmania.

Evaluación de la respuesta de isotipos de inmunoglobulina especifica a Leishmania en leishmaniasis tegumentaria Americana

Con el fin de determinar las clases de anticuerpo producido contra el parásito y la cinética de los mismos en relación a la evolución de la infección, se estudiaron los sueros de 133 pacientes infectados con Leishmania del complejo braziliensis. Se utilizó la prueba de inmunofluorescencia indirecta y amastigotas de L. mexicana amazonensis como antígeno. En los sueros obtenidos al momento de consultar para el diagnóstico se encontró IgM en 54 de los sueros absorbidos con Straphylococcus aureus Cowan I y en 5 de los no absorbidos. La IgM sólo se encontro en los sueros de pacientes con tiempo devolución de las lesiones < o = de 2 meses. la IgG se detectó en todos los sueros no absorbidos. Los sueros tomados durante recurrencia y después de cicatrización sólo presentaron IgG. El uso combinado de la prueba de Montenegro y/o título de IgM específico, aumentó el porcentage de pacientes con un diagnóstico inmunológico positivo en aquéllos cuyas lesiones tenían un tiempo de evolución menor de 2 meses. En los sueros de los 10 individuos sanos no se detectó inmunoglobulina específica a Leishmania y ninguno presentó reacción positiva a la prueba de Montenegro. Entre los 16 pacientes con otra etiología, 3 con esporotricosis, mostraron en su suero IgG reactiva con Leishmania pero ninguno incluyendo 2 con menos de dos meses de evolución de las lesiones presentó IgM. concluimos que en pacientes infectados con L. braziliensis la presencia de IgM e IgG específica a Leishmania esta asociado con el tiempo de evolución de las lesiones y el estado primario recurrente de la infección; demás la detección de IgM anti-Leishmania combinada con la respuesta de Mn sería de potencial utilidad en el diagnóstico clínico de la leishmaniasis tegumentaria temprana.