DNA damage induced by the anthracycline cosmomycin D in DNA repair-deficient cells

Anthracyclines have been widely used as antitumor agents, playing a crucial role in the successful treatment of many types of cancer, despite some side effects related to cardiotoxicity. New anthracyclines have been designed and tested, but the first ones discovered, doxorubicin and daunorubicin, continue to be the drugs of choice. Despite their extensive use in chemotherapy, little is known about the DNA repair mechanisms involved in the removal of lesions caused by anthracyclines. The anthracycline cosmomycin D is the main product isolated from Streptomyces olindensis, characterized by a peculiar pattern of glycosylation with two trisaccharide rings attached to the A ring of the tetrahydrotetracene. We assessed the induction of apoptosis (Sub-G(1)) by cosmomycin D in nucleotide excision repair-deficient fibroblasts (XP-A and XP-C) as well as the levels of DNA damage (alkaline comet assay). Treatment of XP-A and XP-C cells with cosmomycin D resulted in apoptosis in a time-dependent manner, with highest apoptosis levels observed 96 h after treatment. The effects of cosmomycin D were equivalent to those obtained with doxorubicin. The broad caspase inhibitor Z-VAD-FMK strongly inhibited apoptosis in these cells, and DNA damage induced by cosmomycin D was confirmed by alkaline comet assay. Cosmomycin D induced time-dependent apoptosis in nucleotide excision repair-deficient fibroblasts. Despite similar apoptosis levels, cosmomycin D caused considerably lower levels of DNA damage compared to doxorubicin. This may be related to differences in structure between cosmomycin D and doxorubicin.

Spectroscopic Investigation on the Formation of a Dinuclear Me(2)SO-Ru(2)-Mercaptopyridine Bridged Complex: [Ru(2)Cl(3)(mu-pyS)(mu-dmso)(dmso)(4)]center dot 2H(2)O

A dinuclear ruthenium(II) complex double-bridged by an N-aromatic ligand 2-mercaptopyridine (2-pyridinethiol or 2-pyridyl mercaptan) and a methyl sulfoxide (dmso) have been characterized by X-ray crystallography. The reported compound with formula [Ru(2)Cl(3) (mu-pyS)(mu-dmso)(dmso)(4)] center dot 2H(2)O, [C(15)H(36)Cl(3)NO(7)S(6)Ru(2)] (P2/c, a = 13.8175(2) angstrom, b = 10.5608(2) angstrom, c = 21.3544 (3) angstrom, beta = 106.090(1)degrees, V = 2,994.05(8) angstrom(3), Z = 4) represents a seven-membered ring system with both rutheniums in an octahedral geometry. All the hydrogen bonds (C-H-Cl) and the van der Waals contacts give rise to three-dimensional network in the structure and add stability to the dinuclear compound. To our knowledge, this is the first time that the formation of a dinuclear ruthenium(II) complex double-bridged by an N-aromatic ligand 2-mercaptopyridine and dmso have been reported. The study also provided valuable insight into bioinorganic chemistry as continuing efforts are being made to develop metal-based cancer chemotherapeutics. A major feature of this paper is the resolution of a double bridged ruthenium structure which contributes to a better understanding of ruthenium reactivity.

Immobilization of lutetium bisphthalocyanine in nanostructured biomimetic sensors using the LbL technique for phenol detection

This study describes the development of amperometric sensors based on poly(allylamine hydrochloride) (PAH) and lutetium bisphthalocyanine (LuPc(2)) films assembled using the Layer-by-Layer (LbL) technique. The films have been used as modified electrodes for catechol quantification. Electrochemical measurements have been employed to investigate the catalytic properties of the LuPc(2) immobilized in the LbL films. By chronoamperometry, the sensors present excellent sensitivity (20 nA mu M(-1)) in a wide linear range (R(2) = 0.994) up to 900 mu M and limit of detection (s/n = 3) of 37.5 x 10(-8) M for catechol. The sensors have good reproducibility and can be used at least for ten times. The work potential is +0.3 V vs. saturated calomel electrode (SCE). In voltammetry measurements, the calibration curve shows a good linearity (R(2) = 0.992) in the range of catechol up to 500 mu M with a sensitivity of 90 nA mu M(-1) and LD of 8 mu M. (C) 2011 Elsevier B.V. All rights reserved.

A short proregion of trialysin, a pore-forming protein of Triatoma infestans salivary glands, controls activity by folding the N-terminal lytic motif

Triatoma infestans (Hemiptera: Reduviidae) is a hematophagous insect that transmits the protozoan parasite Trypanosoma cruzi, the etiological agent of Chagas` disease. Its saliva contains trialysin, a protein that forms pores in membranes. Peptides based on the N-terminus of trialysin lyse cells and fold into alpha-helical amphipathic segments resembling antimicrobial peptides. Using a specific antiserum against trialysin, we show here that trialysin is synthesized as a precursor that is less active than the protein released after saliva secretion. A synthetic peptide flanked by a fluorophore and a quencher including the acidic proregion and the lytic N-terminus of the protein is also less active against cells and liposomes, increasing activity upon proteolysis. Activation changes the peptide conformation as observed by fluorescence increase and CD spectroscopy. This mechanism of activation could provide a way to impair the toxic effects of trialysin inside the salivary glands, thus restricting damaging lytic activity to the bite site.

Multivariant optimization, validation, and application of capillary electrophoresis for simultaneous determination of polyphenols and phenolic acids in Brazilian wines

A method for the simultaneous determination of the stilbene resveratrol, four phenolic acids (syringic, coumaric, caffeic, and gallic acids), and five flavonoids (catechin, rutin, kaempferol, myricetin, and quercetin) in wine by CE was developed and validated. The CE electrolyte composition and instrumental conditions were optimized using 2(7-3) factorial design and response surface analysis, showing sodium tetraborate, MeOH, and their interaction as the most influential variables. The optimal electrophoretic conditions, minimizing the chromatographic resolution statistic values, consisted of 17 mmol/L sodium tetraborate with 20% methanol as electrolyte, constant voltage of 25 kV, hydrodynamic injection at 50 mbar for 3 s, and temperature of 25 degrees C. The R(2) values for linearity varied from 0.994 to 0.999; LOD and LOQ were 0.1 to 0.3 mg/L and 0.4 to 0.8 mg/L, respectively. The RSDs for migration time and peak area obtained from ten consecutive injections were less than 2% and recoveries varied from 97 to 102%. The method was applied to 23 samples of inexpensive Brazilian wines, showing wide compositional variation.

The forward- and the equity-premium puzzles: two symptoms of the same illness?

In this paper we revisit the relationship between the equity and the forward premium puzzles. We construct return-based stochastic discount factors under very mild assumptions and check whether they price correctly the equity and the foreign currency risk premia. We avoid log-linearizations by using moments restrictions associated with euler equations to test the capacity of our return-based stochastic discount factors to price returns on the relevant assets. Our main finding is that a pricing kernel constructed only using information on American domestic assets accounts for both domestic and international stylized facts that escape consumption based models. In particular, we fail to reject the null hypothesis that the foreign currency risk premium has zero price when the instrument is the own current value of the forward premium.

A liberdade de concorrência como a quinta liberdade fundamental : contribuição para um Mercado Comum do Sul

A presente tese examina a contribuição da liberdade de concorrência para o estabelecimento da fase de mercado comum na Comunidade Européia, tendo como objetivo propor alternativas para o Mercosul regulamentá-la e assim possibilitar o alcance do seu verdadeiro mercado comum. O primeiro capítulo retrata as etapas que a Comunidade superou desde o seu surgimento até o estabelecimento do mercado comum e confirma que a evolução do processo, que envolveu um novo objetivo, o mercado interno, e a importância que para tanto assumiu o direito comunitário da concorrência, presente já nos Tratados constitutivos e tutelador da liberdade de concorrência, determinaram a essa uma nova classificação, qual seja a de quinta liberdade fundamental, o que foi comprovado com entendimentos doutrinários e esforços jurisprudenciais. O segundo capítulo centra-se nas reformas no direito comunitário da concorrência e nas suas contribuições para a aproximação do sistema da concorrência com o sistema das liberdades fundamentais, para a manutenção do mercado interno na Comunidade Européia e para o desenvolvimento do direito da concorrência em outros processos de integração, bem como no estudo de propostas de regulamentações de ordem internacional do direito da concorrência. No âmbito comunitário, foram consideradas a refoma ocorrida nas regras de aplicação dos artigos 81 e 82 TCE, com o Regulamento n. 1/2003, a acontecida nas regras do controle das concentrações de empresas, com o Regulamento n. 139/2004, e as mudanças nas regras aplicáveis aos Estados-membros, como, por exemplo, as trazidas pelos Regulamentos ns. 994/98 e 659/99. No âmbito internacional, recebeu atenção o Draft of International Antitrust Code, sugerido à OMC. O terceiro capítulo apresenta os objetivos alcançados e os não-alcançados desde o surgimento do processo de integração do Mercosul e o estágio em que ele atualmente se encontra. O estudo caracterizou o presente momento como o apropriado para o processo confirmar o seu desejo de alcançar a etapa de mercado comum, o que deverá ocorrer com a implantação de um eficaz direito da concorrência e com a conformação das demais liberdades fundamentais. As conclusões são que a liberdade de concorrência é a quinta liberdade econômica fundamental dos processos de integração que tenham por objetivo alcançar um mercado comum, que as reformas sofridas pelo direito comunitário da concorrência estão em sintonia com essa visão e que oferecem um aval ao sistema previsto para o Mercosul. Além disso, que a garantia da liberdade de concorrência integrou os mercados nacionais e contribuiu para que a Comunidade atingisse o mercado comum e que a visão da liberdade de concorrência como a quinta liberdade fundamental e como permitidora do seu alcance na Comunidade contribui para o estabelecimento de um direito da concorrência e este para o alcance de um verdadeiro mercado comum pelo Mercosul.

Efeitos do microcrédito na geração de renda em microempreendimentos: avaliação de impacto do programa Real Microcrédito

O trabalho realiza uma investigação empírica sobre impacto do microcrédito produtivo orientadode um banco comercial privado, sobre renda disponível no domicílio de microempreendedores. O objeto de estudo foram os clientes da Real Microcrédito, uma empresa resultante da parceria entre o Banco Real, terceiro maior banco privado brasileiro, e a ONG Acción International,organização não-governamental com foco em microfinanças. Foram analisados 22.994 contratos de concessão de microcrédito, correspondendo a um total de 20.628 clientes do período de agosto de 2004 a abril de 2007, dos quais 2.366 possuíam duas ou mais tomadas de crédito. A variável dependente adotada para análise do impacto da renda do domicílio foi vendas médias. Utilizando a técnica de modelos hierárquicos lineares (HLM) para analisar os dados de evolução do indivíduo ao longo do tempo não foi possível concluir que os indivíduos apresentam mudanças nas suas vendas médias ao longo do tempo, pois não foi possível afirmar com significância estatística que há mudanças nas trajetórias das vendas médias para o conjunto de tomadores no período analisado. Analisando-se as diferenças entre os indivíduos foi possível concluir que a variável gênero feminino está associada ao aumento de renda do indivíduo participante do programa. No caso das demais variáveis analisadas no segundo nível (grupo solidário, localização geográfica e atividade econômica) não foi possível identificar mudanças da renda estatisticamente significativas explicadas por elas. A tese apresenta duas contribuições para o avanço do conhecimento no campo de microfinanças. A primeira é uma contribuição metodológica: o uso de modelos Hierárquicos Linerares para análise de impacto de microcrédito. Esta metodologia, inovadora, supera diversos problemas existentes nas metodologias tradicionais de avaliação de impacto, tais como a definiçãode grupos de controle e possibilidade de diversos prazos de entrada no programa.

Promoção da atividade física nos intervalos e hora do almoço em alunos do 2º e 3º Ciclos: adaptação do SOPLAY e proposta de intervenção

Os tempos livres na escola, nomeadamente intervalos e hora do almoço são uma oportunidade para a promoção de um estilo de vida ativo. Neste contexto, foram objetivos desta investigação: (i) adaptar o sistema de observação SOPLAY; (ii) caraterizar os níveis de atividade física geral (AFg) nos intervalos das aulas (AF_Int) e hora do almoço (AF_Alm), e (iii) apresentar uma proposta de intervenção para a promoção da AF naqueles períodos. O sistema de observação SOPLAY (Mckenzie et al., 2006) é um instrumento validado para caraterizar os níveis de AF durante os intervalos. Assim, numa 1ª fase procedeu-se à adaptação do protocolo do sistema de observação, treino da equipa de observadores e determinação da fiabilidade inter e intraobservadores. Numa 2ª fase, procedeu-se à avaliação dos níveis de AFg de 555 rapazes e raparigas (9 a 17 anos de idade) de duas escolas de 2º e 3º Ciclos da RAM, através do questionário PAQ-C (Crocker et al., 1997). Posteriormente, procedeu-se à observação, caraterização e análise do envolvimento institucional e perfil de atividade física. Os resultados obtidos na fiabilidade da adaptação do SOPLAY mostram uma elevada consistência inter- (CCI: 0,850 - 0,994) e intra-observador (CCI: 0,665 - 0,977), e entre os elementos da equipa de observadores e o observador de referência (CCI: 0,831 - 0,976). Os rapazes em média reportaram níveis de AFg superiores comparativamente às raparigas (2,80 ± 0,64 vs 2,19± 0,52, respetivamente). Nos intervalos, os alunos optam maioritariamente por atividades sedentárias (75,2%), estando caraterísticas do envolvimento institucionais, como disponibilidade de equipamentos e tipologia das áreas (formais), associadas a um perfil mais ativo (p<0,05). Atendendo à influência do envolvimento institucional nos níveis de AF, desenhou-se uma proposta de programa de intervenção focalizado no (i) envolvimento físico e (ii) envolvimento político escolares-

Quantification of polyphenols with potential antioxidant properties in wines using reverse phase HPLC

A RP-HPLC method with photodiode array detection (DAD) was developed to separate, identify and quantify simultaneously the most representative phenolic compounds present in Madeira and Canary Islands wines. The optimized chromatographic method was carefully validated in terms of linearity, precision, accuracy and sensitivity. A high repeatability and a good stability of phenolics retention times (a3%) were obtained, as well as relative peak area. Also high recoveries were achieved, over 80.3%. Polyphenols calibration curves showed a good linearity (r2 A0.994) within test ranges. Detection limits ranged between 0.03 and 11.5 lg/mL for the different polyphenols. A good repeatability was obtained, with intra-day variations less than 7.9%. The described method was successfully applied to quantify several polyphenols in 26 samples of different kinds of wine (red, ros and white wines) from Madeira and Canary Islands. Gallic acid was by far the most predominant acid. It represents more than 65% of all phenolics, followed by p-coumaric and caffeic acids. The major flavonoid found in Madeira wines was trans-resveratrol. In some wines, (–)-epicatechin was also found in highest amount. Canary wines were shown to be rich in gallic, caffeic and p-coumaric acids and quercetin.

A especialização metabólica em jovens futebolistas do escalão de iniciados e infantis

O trabalho com jovens futebolistas deverá ser escudado em elevados níveis de conhecimento sobre as capacidades físicas e a forma como estas se desenvolvem nas crianças. O objetivo do presente trabalho é de perceber se se observa a existência de especialização metabólica em jovens futebolistas pertencentes ao escalão de iniciados (idade: 13 a 15 anos) e infantis (idade: 10 a 12 anos). Para responder ao objetivo definido, avaliou-se a potência aeróbia (PA) e a potência anaeróbia (PAN) de uma amostra constituída por 64 participantes. Destes, 11 eram praticantes federados infantis de futebol (idade: 11,7 ± 0,5 anos; peso: 44,1 ± 6,9 Kg; IMC: 20,6 ± 2,7 kg/m2), e 21 participantes federados iniciados de futebol (Idade: 13,9 ± 0,7 anos; Peso: 54,9 ± 10,6 Kg; IMC: 20,5 ± 3,0 kg/m2). O grupo de controlo era constituído por 11 participantes do escalão etário de infantis (Idade 10,9 ± 0,3 anos; Peso 40,1 Kg ± 7,3; IMC: 19,2 ± 2,4 kg/m2) e 21 participantes do escalão etário de iniciados (Idade: 13,9 ± 0,8 anos; Peso: 58,9 ± 11,7 Kg; IMC: 22,1 ± 4,4 kg/m2), mas sem prática desportiva federada. A PA (protocolo de Balke modificado com análise direta de gases) e a PAN (protocolo Wingate para o trem inferior) foram avaliadas e comparadas entre grupos, assim como o nível de correlação entre as variáveis aeróbias e as variáveis anaeróbias (SPSS 20.0). Os resultados verificados indicam que para o escalão de infantis o treino não é um factor conducente a uma superior PA e PAN entre os grupos mas que para o escalão dos iniciados a prática regular da modalidade produz efeitos sobre estas componentes. No entanto, no que concerne há especialização metabólica, esta não se verifica em nenhum escalão embora se possa admitir que há indicadores de que esta se comece a manifestar no escalão de iniciados.

Períodos de interferência das plantas daninhas na cultura do algodoeiro (Gossypium hirsutum)

Com o objetivo de determinar os efeitos de períodos de controle e de convivência das plantas daninhas na produtividade da cultura do algodoeiro (Gossypium hirsutum), cultivar Delta-Opal, realizou-se um experimento que constou de dois grupos de tratamentos. No primeiro, a cultura permaneceu livre da competição das plantas daninhas desde a emergência até 7, 14, 21, 28, 35, 42, 49, 56, 63 dias e colheita (159 dias). No segundo, a cultura permaneceu em competição com a comunidade infestante desde a emergência até os mesmos períodos descritos para a primeira série de tratamentos. Dentre as espécies de plantas daninhas encontradas na área experimental, destacaram-se a tiririca (Cyperus rotundus), o fedegoso (Senna obtusifolia), a anileira (Indigofera hirsuta) e o capim-carrapicho (Cenchrus echinatus). Pelas condições edáficas, climáticas e florísticas sob as quais foi conduzida a cultura de algodão, o Período Anterior à Interferência (PAI) dessa comunidade que reduziu em 5% a produtividade da cultura foi de oito dias após a emergência da cultura (DAE); o Período Total de Prevenção da Interferência (PTPI) foi de 66 DAE; e o Período Crítico de Prevenção da Interferência (PCPI) foi dos 8 aos 66 DAE.