In vitro study of antiviral activity of mycophenolic acid on Brazilian orthobunyaviruses

Objective: Oropouche, Caraparu, Guama, Guaroa and Tacaiuma are ssRNA viruses that belong to the genus Orthobunyavirus and have been associated with human febrile illnesses and/or encephalitis. In this study, we evaluated the antiviral action of mycophenolic acid (MPA) on these orthobunyaviruses to achieve a therapeutic agent to treat the diseases caused by these viruses. Methods: the in vitro antiviral evaluation to MPA was done by using plaque assay at different periods of treatment. Results: Results showed that MPA at a concentration of 10 mu g/ml has significant antiviral activity on Tacaiuma virus when treatment was initiated either 24 h before or 2 h after viral infection. Moreover, MPA has an inhibitory effect on Guama virus replication, but only when treatment was initiated before cell infection. Addition of guanosine in the culture reverted the inhibitory effect of MPA on Tacaiuma and Guama viruses, suggesting that the antiviral activity of this substance was via depletion of the intracellular guanosine pool. Conclusion: Our results suggest that MPA would not be a good therapeutic agent to treat the diseases caused by Oropouche, Caraparu, Guama, Guaroa, and Tacaiuma viruses.

Evaluation of the anti-inflammatory, analgesic and antipyretic activities of the natural polyphenol chlorogenic acid

Phenolic compounds are numerous and ubiquitous in the plant kingdom, being particularly present in health-promoting foods. Epidemiological evidences suggest that the consumption of polyphenol-rich foods reduces the incidence of cancer, coronary heart disease and inflammation. Chlorogenic acid (CGA) is one of the most abundant polyphenol compounds in human diet. Data obtained from in vivo and in vitro experiments show that CGA mostly presents antioxidant and anti-carcinogenic activities. However, the effects of CGA on the inflammatory reaction and on the related pain and fever processes have been explored less so far. Therefore, this study was designed to evaluate the anti-inflammatory, antinociceptive and antipyretic activities of CGA in rats. In comparison to control, CGA at doses 50 and 100 mg/kg inhibited carrageenin-induced paw edema beginning at the 2nd hour of the experimental procedure. Furthermore, at doses 50 and 100 mg/kg CGA also inhibited the number of flinches in the late phase of formalin-induced pain test. Such activities may be derived from the inhibitory action of CGA in the peripheral synthesis/release of inflammatory mediators involved in these responses. On the other hand, even at the highest tested dose (200 mg/kg), CGA did not inhibit the febrile response induced by lipopolysaccharide (LPS) in rats. Additional experiments are necessary in order to clarify the true target for the anti-inflammatory and analgesic effects of CGA. © 2006 Pharmaceutical Society of Japan.

American visceral leishmaniasis: Factors associated with lethality in the state of São Paulo, Brazil

Objectives. To identify factors associated with death in visceral leishmaniasis (VL) cases. Patients and Methodology. We evaluated prognostic factors for death from VL in São Paulo state, Brazil, from 1999 to 2005. A prognostic study nested in a clinical cohort was carried out by data analysis of 376 medical files. A comparison between VL fatal cases and survivors was performed for clinical, laboratory, and biological features. Association between variables and death was assessed by univariate analysis, and the multiple logistic regression model was used to determine adjusted odds ratio for death, controlling confounding factors. Results. Data analysis identified 53 fatal cases out of 376 patients, between 1999 and 2005 in São Paulo state. Lethality was 14.1 (53/376), being higher in patients older than fifty years. The main causes of death were sepsis, bleeding, liver failure, and cardiotoxicity due to treatment. Variables significantly associated with death were severe anemia, bleeding, heart failure, jaundice, diarrhea, fever for more than sixty days, age older than fifty years, and antibiotic use. Conclusion. Educational health measures are needed for the general population and continuing education programs for health professionals working in the affected areas with the purpose of identifying and treating early cases, thus preventing the disease evolution towards death. © 2012 Geraldine Madalosso et al.

Efeito do pré-tratamento com amitraz sobre a febre induzida por lipopolissacarídeo (LPS) de E. coli ou interleucina-1beta (IL-1beta), em coelhos

Pós-graduação em Cirurgia Veterinária - FCAV

Estudo de arboviroses em pacientes positivos para malária da região Amazônica

Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES)

Diagnóstico molecular de arboviroses brasileiras em soros de pacientes com doença febril aguda

Pós-graduação em Microbiologia - IBILCE

Perfil epidemiológico do usuário do serviço de atendimento móvel de urgência por transtornos psiquiátricos na cidade de Bauru

Pós-graduação em Enfermagem (mestrado profissional) - FMB

Complicações intra-operatórias das anestesias do neuroeixo realizadas de maio de 1990 a maio de 2008 na FMB-UNESP: análise retrospectiva

Pós-graduação em Anestesiologia - FMB

Arbovírus Morumbi (Phlebovirus : Bunnyaviridae) - estudo histopatológico e imuno-histoquímico do fígado na infecção experimental em camundongos: comparação entre as vias cerebral, intraperitoneal e subcutânea

O vírus Morumbi é membro do sorogrupo Phlebotomus fever (família Bunyavírídae: gênero Phlebovírus) nativo da Região Amazônica. Seu vetor é desconhecido, mas supõem-se ser transmitido por flebotomíneos. Foi isolado em 1988 de ser humano apresentando quadro febril agudo. Este arbovírus, quando inoculado em camundongo por via cerebral, demonstrou viscerotropismo, induzindo inclusive lesões no fígado do animal inoculado. Com os objetivos de: i) estabelecer as características anátomo-patológicas e imuno-histoquímicas em fígado de camundongos albinos Swíss recém-nascidos experimentalmente infectados pelo vírus Morumbi; ii) verificar se o vírus apresenta hepatotropismo diferenciado na dependência de inoculação pelas vias cerebral, peritoneal ou subcutânea; iii) caracterizar detalhadamente os padrões anátomo-patológicos sequenciais no fígado; iv) demonstrar a localização do antígeno viral no tecido hepático ao longo da infecção experimental; v) estudar possíveis inter-relações entre os achados anátomo-patológicos e os imuno-histoquímicos. Foram estudados experimentalmente 71 camundongos Swíss recém-nascidos (dois e três dias), distribuídos ao final do experimento como segue: 21 animais inoculados por via intracerebral (IC), 21 por via intraperitoneal (IP) e 29 animais inoculados por via subcutânea (SC). Utilizou-se a dose infectante 5,0DL 50 /0,02ml de suspensão de vírus. Outros trinta, animais que não receberam inóculos, foram utilizados como grupo controle. Subgrupos de oito animais (seis inoculados e dois do grupo controle) foram sacrificados diariamente a intervalos de 24 em 24 horas, até 96 horas para os grupos IC e IP e até 120 horas para o grupo SC. Fragmentos de fígado de todos os animais foram fixados em solução de formalina neutra a 10%, incluídos em parafina, de onde foram obtidos cortes de 5 mm que foram corados pela técnica de hematoxilina-eosina para análise morfológica e, cortes adicionais, foram submetidos à técnica de imuno-histoquímica (Sistema Envision, DAKO, USA), utilizando a fosfatase alcalina e soro hiperimune do vírus Morumbi preparado em camundongos jovens, para detecção de antígeno viral. Foram estudados seis parâmetros de lesão em áreas portais e nove outros nos lóbulos, que foram semiquantificados numa escala que variou de zero (0) a três cruzes (+++), onde zero significou ausência de lesão e três cruzes lesão intensa. À microscopia óptica, ficou evidente que o vírus Morumbi inoculado em camundongos por três diferentes vias induz lesões em áreas portais e lobulares, caracterizando uma hepatite aguda com presença de corpúsculos acidófilos, semelhantes aos corpúsculos de Councilman -Rocha Lima, de distribuição irregular nos lóbulos, cujo aparecimento foi observado 24 horas pós-inoculação (p.i.) e atingiu o máximo de intensidade às 72 horas p.i. em animais inoculados por via IP. O exame imuno-histoquímico mostrou presença leve de antígeno viral a partir de 24 horas p.i. no grupo IC e a partir de 48 horas p.i. nos grupos IP e SC, havendo certo paralelismo em relação a intensidade de lesão morfológica, tendo- se observado o máximo de detecção de antígeno viral em animais inoculados por via IP e sacrificados às 72 horas p.i. A distribuição geral de antígeno foi observada especificamente nos lóbulos hepáticos, no citoplasma de hepatócitos íntegros e necrosados e no interior de células de Kupffer, não havendo preferência por nenhuma das três zonas do lóbulo. Concluiu-se que: i) o modelo de infecção experimental em camundongos foi excelente para o estudo das lesões causadas pelo vírus Morumbi, podendo ser selecionada a via IP como referencial; ii) em todas as vias utilizadas (IP, IC e SC) se confirmou a infecção pelo vírus Morumbi com marcante detecção de seu antígeno, no tecido hepático de camundongos Swiss; iii) a presença de antígeno do vírus Morumbi no fígado desses camundongos associou-se ao aparecimento de hepatite aguda, com necrose focal; iv)hepatite intensa pôde ser observada em fígado de camundongos sacrificados 72 h p.i. com o vírus Morumbi por via IP, o que não foi verificado com as outras duas vias; v) a hepatite aguda mostrou-se limitada, neste experimento, tendendo a desaparecer na maioria dos camundongos inoculados, com avançar das horas; vi) colestase não alteração freqüente na hepatite experimental pelo vírus Morumbi, quando inoculada por via IC, IP e SC; vii) o antígeno do vírus Morumbi teve predominância pela localização intracitoplasmática, padrão granular, nos hepatócitos e células de Kupffer; viii) antígeno viral foi detectado em fragmento hepático de animais experimentalmente inoculados com o vírus Morumbi, a partir das 24 horas via IC e a partir de 48 horas nas vias IP e SC.

Derrame Pleural Parapneumônico: perfil e evolução de crianças internadas no Hospital Universitário João de Barros Barreto

Introdução: A pneumonia é uma das infecções mais comuns em crianças, sendo o derrame pleural uma complicação potencial, principalmente nos países em desenvolvimento, onde existem sérias limitações de recursos diagnóstico-terapêuticos. Objetivos: Conhecer o perfil das crianças portadoras de derrame pleural parapneumônico, analisando sua evolução a partir da terapêutica clínica e cirúrgica que são submetidas. Método: Estudo descritivo, transversal, de coleta prospectiva, no qual foram estudadas todas as crianças internadas em um hospital de referência de doenças infecciosas na Região Norte-Brasil com diagnóstico de derrame pleural parapneumônico, submetidas a procedimento cirúrgico para abordagem do mesmo, no período de outubro de 2010 a outubro de 2011. Resultados: A amostra foi composta por 46 crianças, com distribuição igual entre os sexos, predominância de menores de 3 anos (74%) e procedentes do interior do estado (54,3%). Parcela considerável (28%) possuía algum grau de inadequação do estado nutricional. A média de tempo de doença até à admissão na referida instituição foi de 16,9 dias, e todos os indivíduos eram provenientes de outro hospital. A duração média da internação hospitalar foi de 26,0 dias, e a do estado febril, de 9,8 dias. Foram utilizados 2,2 esquemas antimicrobianos, em média, por paciente e o Ceftriaxone foi o antibiótico mais comum. Diagnóstico etiológico só foi alcançado em um único caso. Em 22 crianças, (47,8%), havia empiema pleural, e elas apresentaram maior tempo de drenagem. Foi encontrada associação entre crianças com nanismo e cirurgias múltiplas (Teste G = 8,40; p= 0,040). A grande maioria das criança foi operada uma única vez (80,4%), e a drenagem torácica fechada foi a cirurgia mais realizada. A drenagem torácica aberta foi instalada em 24,0% dos pacientes. A toracotomia com descorticação foi realizada em 2 pacientes (4,0%). Todas as crianças da amostra obtiveram recuperação clínica e radiológica em até quatro meses após a alta hospitalar, e não houve óbito na amostra. Conclusão: A população estudada possui doença em estágio avançado e distúrbios nutricionais prevalentes, que podem influenciar na evolução. É necessária padronização da antibioticoterapia, e reconsiderar a drenagem torácica aberta no empiema pleural, a partir de novos estudos sobre o tema, principalmente na indisponibilidade da videotoracoscopia.

Associação entre marcadores da resposta inflamatória e a imunopatogênese de agentes infecciosos de natureza viral (Vírus da dengue, HTLV-1 e HTLV-2) e bacteriana (Chlamydia trachomatis e Chlamydia pneumoniae)

A base genética das doenças é frequentemente estudada a partir dos polimorfismos dos genes de citocinas. O presente estudo investigou marcadores da resposta inflamatória associados a infecções virais e bacterianas que possam influenciar o curso da infecção. Foram medidos os níveis séricos (por ensaio imunoenzimático) e os polimorfismos de TNF-α (-308), TNF-β (+252), IFN-γ (+874) e da proteína C reativa, por meio de PCR e RFLP ou PCR alelo específico, em grupos de pessoas infectadas pelo vírus da dengue (n=80), com doença febril, não infectados (100), um grupo de infectados pelo HTLV (30 sintomáticos e 47 assintomáticos), um grupo com doença coronariana (58 com sororreatividade para Chlamydia e 31 com sorologia negativa) e um grupo controle (99 pessoas com sorologia negativa para dengue, HTLV e Chlamydia). Nenhum grupo mostrou associação com informações demográficas. O Vírus da dengue 3 (66,2%) e o HTLV-1 (90% em sintomáticos e 76,6% em assintomáticos) foram os agentes mais frequentes dentre os grupos respectivos. A maioria com doença coronariana (65,1%) apresentou anticorpos para Chlamydia (39,6% para C. trachomatis e C. pneumoniae, 58,6% apenas para C. trachomatis e 1,7% somente para C. pneumoniae). Foram significantes as diferenças encontradas entre: (i) os níveis séricos de TNF-β, IFN-γ e PrtCR dos grupos dengue positivo e dengue negativo com o grupo controle (p< 0,01); (ii) os níveis séricos de TNF-α, TNF-β, e IFN-γ dos grupos de HTLV (incluindo os tipos) e grupo controle; (iii) os níveis séricos de TNF-α, TNF-β, IFN-γ e PrtCR entre os pacientes com doença coronariana e sorologia positiva para Chlamydia e o grupo controle; (iv) a presença de anticorpos para C. trachomatis e C. pneumoniae e o grupo controle na comparação com a TNF-β, IFN-γ e PrtCR. As distribuições de frequências genotípicas foram estatisticamente significantes para os polimorfismos: (i) dos genes TNF-α (p=0,0494) e IFN-γ (p= 0,0008), entre os grupos dengue positivo, dengue negativo e controle e para o IFN-γ (p= 0,0007) entre os grupos DEN 1, DEN 2 e DEN 3 e o controle; (ii) do gene IFN-γ (p= 0,0023) nos grupos de pacientes com doença coronariana e sorologia positiva para C. trachomatis e C. pneumoniae, assim como nos monoreativos na comparação entre a positividade para C. trachomatis e o grupo controle.

Otimização multiobjetivo no controle da dengue

Pós-graduação em Biometria - IBB

Identification of Novel Compounds Inhibiting Chikungunya Virus-Induced Cell Death by High Throughput Screening of a Kinase Inhibitor Library

Chikungunya virus (CHIKV) is a mosquito-borne arthrogenic alphavirus that causes acute febrile illness in humans accompanied by joint pains and in many cases, persistent arthralgia lasting weeks to years. The re-emergence of CHIKV has resulted in numerous outbreaks in the eastern hemisphere, and threatens to expand in the foreseeable future. Unfortunately, no effective treatment is currently available. The present study reports the use of resazurin in a cell-based high-throughput assay, and an image-based high-content assay to identify and characterize inhibitors of CHIKV-infection in vitro. CHIKV is a highly cytopathic virus that rapidly kills infected cells. Thus, cell viability of HuH-7 cells infected with CHIKV in the presence of compounds was determined by measuring metabolic reduction of resazurin to identify inhibitors of CHIKV-associated cell death. A kinase inhibitor library of 4,000 compounds was screened against CHIKV infection of HuH-7 cells using the resazurin reduction assay, and the cell toxicity was also measured in non-infected cells. Seventy-two compounds showing >= 50% inhibition property against CHIKV at 10 mu M were selected as primary hits. Four compounds having a benzofuran core scaffold (CND0335, CND0364, CND0366 and CND0415), one pyrrolopyridine (CND0545) and one thiazol-carboxamide (CND3514) inhibited CHIKV-associated cell death in a dose-dependent manner, with EC50 values between 2.2 mu M and 7.1 mu M. Based on image analysis, these 6 hit compounds did not inhibit CHIKV replication in the host cell. However, CHIKV-infected cells manifested less prominent apoptotic blebs typical of CHIKV cytopathic effect compared with the control infection. Moreover, treatment with these compounds reduced viral titers in the medium of CHIKV-infected cells by up to 100-fold. In conclusion, this cell-based high-throughput screening assay using resazurin, combined with the image-based high content assay approach identified compounds against CHIKV having a novel antiviral activity -inhibition of virus-induced CPE - likely by targeting kinases involved in apoptosis.

Vigilância do vpirus da dengue e circulação dos sorotipos presentes em São José do Rio Preto entre 2011 e 2014

Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES)

Isolation and characterization of mayaro virus from a human in Acre, Brazil

Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo (FAPESP)