Viability study of a multiplex diagnostic platform for Chagas disease

A new multiplex assay platform was evaluated to detect Trypanosoma cruzi infection using the recombinant antigens CRA, FRA, CRAFRA fusion and parasite lysate. The antigens presented different sensitivity and specificity in a singleplex test when compared to a serial dilution of two pools comprising 10 positive serum samples and one pool of 10 negative samples. The recombinant protein CRA presented lower sensitivity (55%) in contrast to the 100% specificity and sensitivity of FRA, CRAFRA and T. cruzi lysate. These antigens also showed good results in a duplex test and the duplex test with CRAFRA/T. cruzi lysate showed better performance with 100% specificity and sensitivity, as well as a lower cut-off value in comparison to the other duplex test, FRA/T. cruzi lysate. Hence, when the antigens were used in duplex format, both tests showed decreased cut-off values and no interference between different bead sets, resulting in increasing sensitivity and specificity. The results of these multiplex tests show that they could be an alternative to singleplex detection for Chagas disease, and also indicate the necessity of using multiplex diagnostic tools to increase the sensitivity and specificity for diagnostic tests. Emerging data from the T. cruzi genome and from its ORFeome project will also allow the identification of new antigens for this disease detection application.

Comparative evaluation of phenol and thimerosal as preservatives for a candidate vaccine against American cutaneous leishmaniasis

For decades thimerosal has been used as a preservative in the candidate vaccine for cutaneous leishmaniasis, which was developed by Mayrink et al. The use of thimerosal in humans has been banned due to its mercury content. This study addresses the standardization of phenol as a new candidate vaccine preservative. We have found that the proteolytic activity was abolished when the test was conducted using the candidate vaccine added to merthiolate (MtVac) as well as to phenol (PhVac). The Montenegro's skin test conversion rates induced by MtVac and by PhVac was 68.06% and 85.9%, respectively, and these values were statistically significant (p < 0.05). The proliferative response of peripheral mononuclear blood cells shows that the stimulation index of mice immunized with both candidate vaccines was higher than the one in control animals (p < 0.05). The ability of the candidate vaccines to induce protection in C57BL/10 mice against a challenge with infective Leishmania amazonensis promastigotes was tested and the mice immunized with PhVac developed smaller lesions than the mice immunized with MtVac. Electrophoresis of phenol-preserved antigen revealed a number of proteins, which were better preserved in PhVac. These results do in fact encourage the use of phenol for preserving the immunogenic and biochemical properties of the candidate vaccine for cutaneous leishmaniasis.

Detection of IgG1 and IgG4 subtypes reactive against potato apyrase in schistosomiasis patients

In this paper, we showed for the first time that the conserved domains within Schistosoma mansoni ATP diphosphohydrolase isoforms, shared with potato apyrase, possess epitopes for the IgG1 and IgG4 subtypes, as 24 (80%) of the 30 schistosomiasis patients were seropositive for this vegetable protein. The analyses for each patient cured (n = 14) after treatment (AT) with praziquantel revealed variable IgG1 and IgG4 reactivity against potato apyrase. Different antigenic epitopes shared between the vegetable and parasite proteins could be involved in susceptibility or resistance to S. mansoni AT with praziquantel and these possibilities should be explored.

Antibody reactivity against potato apyrase, a protein that shares epitopes with Schistosoma mansoni ATP diphosphohydrolase isoforms, in acute and chronically infected mice, after chemotherapy and reinfection

Schistosoma mansoni ATP diphosphohydrolase isoforms and potato apyrase share conserved epitopes. By enzyme-linked immunosorbent assays, elevated levels of IgM, IgG2a and IgG1 antibody reactivity against potato apyrase were observed in S. mansoni-infected BALB/c mice during the acute phase of infection, while only IgM and IgG1 antibody reactivity levels maintained elevated during the chronic phase of infection. Antibody reactivity against potato apyrase was monitored over an 11-month period in chronically-infected mice treated with oxamniquine. Eleven months later, the level of seropositive IgM decreased significantly (~30%) compared to the level found in untreated, infected mice. The level of seropositive IgG1 decreased significantly four months after treatment (MAT) (61%) and remained at this level even after 11 months. The IgG2a reactivity against potato apyrase, although unchanged during chronic phase to 11 MAT, appeared elevated again in re-infected mice suggesting a response similar to that found during the acute phase. BALB/c mouse polyclonal anti-potato apyrase IgG reacted with soluble egg antigens probably due to the recognition of parasite ATP diphosphohydrolase. This study, for the first time, showed that the IgG2a antibody from S. mansoni-infected BALB mice cross-reacts with potato apyrase and the level of IgG2a in infected mice differentiates disease phases. The results also suggest that different conserved-epitopes contribute to the immune response in schistosomiasis.

Immunostimulatory property of a synthetic peptide belonging to the soluble ATP diphosphohydro-lase isoform (SmATPDase 2) and immunolocalisation of this protein in the Schistosoma mansoni egg

A peptide (SmB2LJ; r175-194) that belongs to a conserved domain from Schistosoma mansoni SmATPDase 2 and is shared with potato apyrase, as predicted by in silico analysis as antigenic, was synthesised and its immunostimulatory property was analysed. When inoculated in BALB/c mice, this peptide induced high levels of SmB2LJ-specific IgG1 and IgG2a subtypes, as detected by enzyme linked immunosorbent assay. In addition, dot blots were found to be positive for immune sera against potato apyrase and SmB2LJ. These results suggest that the conserved domain r175-194 from the S. mansoni SmATPDase 2 is antigenic. Western blots were performed and the anti-SmB2LJ antibody recognised in adult worm (soluble worm antigen preparation) or soluble egg antigen antigenic preparations two bands of approximately 63 and 55 kDa, molecular masses similar to those predicted for adult worm SmATPDase 2. This finding strongly suggests the expression of this same isoform in S. mansoni eggs. To assess localisation of SmATPDase 2, confocal fluorescence microscopy was performed using cryostat sections of infected mouse liver and polyclonal antiserum against SmB2LJ. Positive reactions were identified on the external surface from the miracidium in von Lichtenberg's envelope and, in the outer side of the egg-shell, showing that this soluble isoform is secreted from the S. mansoni eggs.

A serological, parasitological and clinical evaluation of untreated Chagas disease patients and those treated with benznidazole before and thirteen years after intervention

The etiological treatment of Chagas disease is recommended for all patients with acute or recent chronic infection, but controversies remain regarding the benefit of chemotherapy and interpretations of the parasitological cure after etiological treatment. This study compares the laboratory and clinical evaluations of Chagas disease patients who were diagnosed 13 years earlier. Fifty-eight Chagas disease patients (29 treated with benznidazole and 29 untreated) were matched at the time of treatment based on several variables. Conventional serology revealed the absence of seroconversion in all patients. However, lower serological titres were verified in the treated group, primarily among patients who had the indeterminate form of the disease. Haemoculture performed 13 years after the intervention was positive for 6.9% and 27.6% of the treated and untreated patients, respectively. Polymerase chain reaction tests were positive for 44.8% and 13.8% of the treated and untreated patients, respectively. Patients who presented with the indeterminate form of the disease at the beginning of the study exhibited less clinical progression (17.4%) compared with the untreated group (56.5%). Therefore, this global analysis revealed that etiological treatment with benznidazole may benefit patients with respect to the clinical progression of Chagas disease and the prognosis, particularly when administered to patients with the indeterminate form of the disease.

Insucesso escolar na disciplina de física do 10º ano de escolaridade, nos liceus Pedro Gomes e Domingos Ramos

O presente trabalho cientifico, “Insucesso Escolar na disciplina de Física do 10º ano de escolaridade, nos liceus Pedro Gomes e Domingos Ramos”, não é fruto do acaso, mas sim, representa um esforço no sentido de trabalhar em prol de uma área disciplinar que sempre me fascinou, e por ser uma área de ensino caracterizado por grandes dificuldades por parte dos alunos e professores tanto a nível do ensino secundário como do ensino superior. O ensino secundário cabo-verdiano foi alvo de uma reforma profunda na década de noventa do século passado, onde houve novos planos de estudos e programas para as diversas cadeiras, nomeadamente a da Física; o ensino secundário via geral está estruturado em três ciclos diferentes; o 1º ciclo constituído pelo7º e 8º anos, o 2º ciclo constituído pelo 9º e 10º anos e 3º ciclo que alberga o 11º e 12º anos. No 10º ano de escolaridade começa o ensino da Física propriamente dito, com 3 horas semanais, assente em três grandes pilares de conteúdos: movimento, força e energia (Ministério de Educação Ciência e Cultura, 1997). Após completar o 2º ciclo, o aluno que escolher a área Ciência e Tecnologia pode optar por estudar Física ou Química ou ambas no 3º ciclo. Neste trabalho faço uma abordagem geral sobre o insucesso escolar versando a sua compreensão, causas e consequências, bem como uma abordagem do insucesso escolar, particularmente, na disciplina de Física do 10º ano de escolaridade. Através de um inquérito dirigido aos professores e alunos de Física do 10º ano do ensino secundário, procurei identificar as principais causas do insucesso escolar na disciplina de Física, verificar as principais dificuldades do processo de ensino e aprendizagem da Física no 10º ano de escolaridade, deixar algumas sugestões que possam contribuir para diminuir o insucesso escolar na disciplina de Física do 10º ano de escolaridade. Este trabalho assenta-se em duas hipóteses. A primeira: “O nível de pré-requisitos essenciais constitui uma das causas do insucesso escolar na disciplina de Física do 10º ano de escolaridade?”. A segunda: “A deficiente formação/qualificação dos professores constitui factores de insucesso escolar na disciplina de Física no 10º ano de escolaridade”. Este trabalho de fim de curso está estruturado em três capítulos, conclusões, constrangimentos, sugestões e anexos. No primeiro capítulo, Fundamentação Teórica, onde exponho a base teórica deste trabalho, referindo-se ao insucesso escolar de uma forma geral, falando um pouco da sua compreensão, causas, consequências, bem como, do ensino e aprendizagem da Física; no segundo capítulo, vem a Metodologia, onde caracterizo os métodos, as técnicas e os recursos utilizados para realização deste trabalho; no terceiro e último capítulo – Apresentação dos dados e discussão dos resultados; recolha, tratamento dos dados, análise e interpretação dos resultados.

A Descentralização das aulas de Educação Física na Escola Secundária de São Domingos

O tema do presente trabalho é “ A descentralização das aulas de Educação Física na Escola Secundária de São Domingos”. Analisando este caso que pensamos ser inédito na Ilha de Santiago ou quem sabe em todo o país, queremos levar a cabo um estudo sobre a descentralização das aulas de Educação Física na Escola Secundária de São Domingos. Desta feita, realizamos três questionários que aplicamos aos alunos, professores de Educação Física e pais/ encarregados de educação da escola acima referida. O trabalho tem como principal objectivo apurar até que ponto essa iniciativa foi benéfica para os alunos, professores de Educação Física e pais/ encarregados de educação e também para a própria escola. De acordo com a análise dos dados concluímos que, em relação a descentralização das aulas de Educação Física, 100% dos pais/ encarregados de educação concordaram com a descentralização das aulas de Educação Física porquê consideram que os filhos passaram a ter mais tempo para estudar ou passaram a ter mais tempo para estar em casa ou ainda passaram a deslocar menos distâncias para assistirem as aulas de Educação Física. Sobre a opinião dos professores, embora só 50% dos professores considera que a descentralização das aulas foram muito boas, o curioso é que todos os professores são da mesma opinião ao considerarem que os alunos beneficiaram com a descentralização das aulas. No que se refere a preferência na escolha dos dois modelos (antigo/ novo), professores e pais/ encarregados de educação, são unânimes nas suas opiniões ao concordarem que preferem o novo modelo de organização. Opinião que não se verificou nos alunos inqueridos, em que 82% preferem o novo modelo e 18% prefere o antigo modelo, justificando essa preferência dizendo que esse modelo facilita o convívio entre os alunos.

Metodologias do Ensino – Aprendizagem da Escrita na 1ª Fase do EBI, no Pólo Nº VI de Cutelo Branco Concelho de S. Domingos

O presente estudo subordina – se ao tema “Metodologias do Ensino – Aprendizagem da Escrita na 1ª Fase do Ensino Básico Integrado, no Pólo Nº VI de Cutelo Branco Concelho de S. Domingos”. Tendo em consideração o carácter nuclear da disciplina de Língua Portuguesa, no currículo do Ensino Básico, do nosso sistema educativo, estudamos as metodologias do ensino – aprendizagem da Escrita na 1ª Fase no Pólo Nº VI, Cutelo Branco – S. Domingos. Para este estudo aplicamos durante o mês de Março 2007 um questionário aos professores da fase no referido Pólo, com o objectivo de Verificar se na base do insucesso da Escrita dos alunos do Ensino Básico Integrado, estarão as metodologias utilizadas pelos professores da 1ª Fase. Pelos dados do questionário aplicado aos professores da 1ªFase do Ensino Básico, concluímos que os professores desta fase utilizam metodologias diversificadas para o ensino – aprendizagem da Escrita. Contudo, apresentaram crianças com dificuldades na área da Escrita e apontaram como principais causas a falta de atenção/concentração dos alunos, a falta de afectividade e dificuldades de percepção. A amostra foi de oito professores da fase, que representam 100%, no Pólo de Cutelo Branco – Concelho de S. Domingos.

Criação de uma Biblioteca Multiuso, pólo educativo nºVI de Cutelo Branco – São Domingos

O projecto ressalta a importância da criação da Biblioteca Multiuso na Escola Básica, atendendo as exigências do currículo e do Pólo, incentivando o hábito de leitura, desenvolvendo a capacidade de pesquisa e oferecendo oportunidades de aquisição de conhecimentos básicos da informática. Tendo em consideração a pertinência do tema, no momento que tanto se fala das Tecnologias da Informática e Comunicação (TIC), projectamos a criação de uma Biblioteca Multiuso no Ensino Básico, na Escola Cutelo Branco em São Domingos, a maior escola do Concelho de São Domingos, porque engloba maior número de alunos a nível do concelho é de fácil acesso. Para este projecto fizemos uma entrevista não estruturada, durante o mês de Março 2010 a um grupo de beneficiários (professores e alunos) do referido Pólo, com o objectivo de coadunar a opinião dos mesmos em relação a criação e utilização da biblioteca na Escola Cutelo Branco. Pelas respostas às perguntas feitas aos representantes dos beneficiários, concluímos que a criação da Biblioteca é uma necessidade prioritária, mas que a Escola precisa elaborar projectos para angariar os recursos que faltam, uma vez que, não reúne de verbas para o efeito. Tudo dependerá de financiamentos ou doações concedidos pelos parceiros. Contudo, o Pólo apresenta uma vasta quantidade de recursos doados pela entidade patronal e também recentemente oferecidos por uma entidade particular estrangeira. O número de entrevistados foram oito professores que representam 53,3% do nº dos professores que trabalham na escola central de Cutelo Branco e oito alunos, sendo quatro da 3ª Fase e quatro da 2ª Fase. O projecto será endereçado às várias instituições para análise e financiamento dentro das possibilidades. O orçamento total do projecto está num valor de setecentos e sessenta e dois mil e quinhentos escudos (762 500$00), perspectivamos a sua concretização num período de oito meses.

A Música Como Recurso Pedagógico Na Educação Pré – Escolar: Jardim Infantil da Aldeia SOS São Domingos

Reconhecendo a importância da música na educação pré-escolar e pensando na música como um recurso pedagógico e não como um instrumento que oferece ocupações às crianças dicidimos fazer um trabalho de pesquisa que tem como objectivo identificar se a música na educação pré-escolar pode ser um recurso pedagógico, que representa um magnífico auxílio aos educadores no processo ensino-aprendizagem. A pesquisa foi levada a cabo por meio de bibiografias (componente teórica), observações, actuações, questionários (componente prática) que, respondidos pelas educadoras da educação pré-escolar, foram avaliadas diferentes ideias de várias educadoras com formação e em formação no ramo da educação pré-escolar. O resultado da pesquisa indica que a música é importante na apredizagem da criança, que pode ser utilizada perfeitamente pelos educadores como recurso pedagógico eficiente e eficaz, fazendo com que as crianças expressem seus sentimentos, emoções, facilitando a aprendizagem e a socialização.