Free Amino Acids in Pacu, Piaractus mesopotamicus, Eggs and Larvae

Free amino acids (FAA) are used principally as substrate in protein synthesis and the source of energy in aerobic catabolism. In marine fish, embryo and larvae FAA are used to maintain body fluid osmolality during fish early development. However, there is essentially no information about FAA concentrations in early ontogeny of freshwater neotropical species in comparison to marine fishes. Therefore, the aim of this study was to evaluate the FAA concentrations in pacu, Piaractus mesopotamicus, eggs and larvae. Broodstock fish were induced to spawn and ovulated females were stripped of their eggs and immediately sampled for analysis. Larvae were sampled right after hatching (HL) and after the completion of the yolk-sac absorption (YSA). The wet weight of the HL and YSA larvae amounted to 0.5±0.1mg and 1.1±0.3mg, respectively. HL larvae showed higher levels of most of the indispensable amino acids (IAA) in comparison to eggs and YSA larvae. Exceptions were observed with His and Trp that showed higher or similar levels, respectively, in YSA larvae. The FAA Orn, Tau, Glu, Gln, Gly, and Tyr increased concentrations in both larval stages while that of Tau was found in higher concentration in all analyzed stages. Also, the concentrations of Asn, Ala, Pro, Ser, and Asp were higher in HL larvae. Both larval stages displayed a rise in total free IAA/total free DAA (dispensable amino acids) ratio. The authors conclude that the highest level of FAA in HL pacu larvae is indicative of active proteolysis of yolk reserves and a probable catabolism regulation of some FAA through spare-effect. In addition, Tau is one of the major FAA occurring during pacu ontogeny and may be performing regulation on body fluid osmolality regulation. © Copyright by the World Aquaculture Society 2013.

Peripheral kappa and delta opioid receptors are involved in the antinociceptive effect of crotalphine in a rat model of cancer pain

Cancer pain is an important clinical problem and may not respond satisfactorily to the current analgesic therapy. We have characterized a novel and potent analgesic peptide, crotalphine, from the venom of the South American rattlesnake Crotalus durissus terrificus. In the present work, the antinociceptive effect of crotalphine was evaluated in a rat model of cancer pain induced by intraplantar injection of Walker 256 carcinoma cells. Intraplantar injection of tumor cells caused the development of hyperalgesia and allodynia, detected on day 5 after tumor cell inoculation. Crotalphine (6 μg/kg), administered p.o., blocked both phenomena. The antinociceptive effect was detected 1 h after treatment and lasted for up to 48 h. Intraplantar injection of nor-binaltorphimine (50 g/paw), a selective antagonist of κ-opioid receptors, antagonized the antinociceptive effect of the peptide, whereas N,N-diallyl-Tyr-Aib-Phe-Leu (ICI 174,864, 10 μg/paw), a selective antagonist of δ-opioid receptors, partially reversed this effect. On the other hand, D-Phe-Cys-Tyr-D-Trp-Orn-Thr-Pen-Thr amide (CTOP, 20 g/paw), an antagonist of μ-opioid receptors, did not modify crotalphine-induced antinociception. These data indicate that crotalphine induces a potent and long lasting opioid-mediated antinociception in cancer pain. © 2013 Elsevier Inc.

Molecularly designed layer-by-layer (LbL) films to detect catechol using information visualization methods

The control of molecular architectures has been exploited in layer-by-layer (LbL) films deposited on Au interdigitated electrodes, thus forming an electronic tongue (e-tongue) system that reached an unprecedented high sensitivity (down to 10-12 M) in detecting catechol. Such high sensitivity was made possible upon using units containing the enzyme tyrosinase, which interacted specifically with catechol, and by processing impedance spectroscopy data with information visualization methods. These latter methods, including the parallel coordinates technique, were also useful for identifying the major contributors to the high distinguishing ability toward catechol. Among several film architectures tested, the most efficient had a tyrosinase layer deposited atop LbL films of alternating layers of dioctadecyldimethylammonium bromide (DODAB) and 1,2-dipalmitoyl-sn-3-glycero-fosfo-rac-(1-glycerol) (DPPG), viz., (DODAB/DPPG)5/DODAB/Tyr. The latter represents a more suitable medium for immobilizing tyrosinase when compared to conventional polyelectrolytes. Furthermore, the distinction was more effective at low frequencies where double-layer effects on the film/liquid sample dominate the electrical response. Because the optimization of film architectures based on information visualization is completely generic, the approach presented here may be extended to designing architectures for other types of applications in addition to sensing and biosensing. © 2013 American Chemical Society.

Estudo químico de Jatropha curcas e de Jatropha gossypifolia nativas e cultivadas: avaliação de ciclopeptídeos em função de habitat e hábito : prospecção e atividade biológica

Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico (CNPq)

Avaliação química e biológica do fungo endofítico Schizophyllum commune isolado de Alchornea glandulosa

Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES)

Estudo químico e biológico do fungo endofítico Phomopsis sp. isolado da Senna spectabilis

Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES)

Avaliação química e biológica do fungo endofítico Colletotrichum sp. isolado de Senna spectabilis

Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico (CNPq)

Desreplicação dos metabólitos secundários produzidos por Phomopsis stipata, um endófito de Styrax camporum (Styracaceae)

Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico (CNPq)

Avaliação de um teste bioquímico de triagem para a detecção de indivíduos heterozigotos para a fenilcetonúria

A fenilcetonúria (PKU) é uma doença metabólica hereditária resultante da deficiência da enzima fenilalanina hidroxilase (PAH) que converte o aminoácido fenilalanina em tirosina. O presente estudo teve como objetivo investigar o metabolismo dos aminoácidosfenilalanina (Phe) e tirosina (Tyr) em heterozigotos para PKU, nas condições de jejum e após uma sobrecarga oral de Phe (25 mg/Kg), aplicando diferentes parâmetros bioquímicos (níveis de Phe e Tyr e as relações Phe/Tyr e Phe²/Tyr), a fim de identificar a melhor variável que discrimine heterozigotos para a PKU de indivíduos normais. O protocolo empregado foi a dosagem de Phe e Tyr plasmática nas situações de jejum, 30, 45, 60 e 90 minutos após a sobrecarga de Phe na dose de 25mg/kg. A amostra foi composta de 50 indivíduos: 23 heterozigotos obrigatórios (10 homens e 13 mulheres) e um grupo controle de 27 indivíduos hígidos (13 homens e 14 mulheres), obedecendo a critérios de pareamento: gênero e faixa etária (18 a 44 anos). Para analisar o efeito da sobrecarga oral de Phe em cada grupo, os resultados dos parâmetros Phe, Tyr, Phe/Tyr e Phe2/Tyr após a sobrecarga foram comparadoscom os observados na situação de jejum. Foram realizadas inferências estatísticas entre os grupos nos aspectos longitudinal e transversal e aplicados os testes t de Student , teste de Wilcoxon , teste t de Student e o seu equivalente não paramétrico e teste U de Mann-Whitney. Na avaliação da Curva ROC das variáveis utilizadas, os três melhores parâmetros para classificar indivíduos heterozigotos de normais foram: a dosagem da Phe a 45 e 90 minutos, assim como o resultado da fração micromolar Phe2/Tyr após 90 minutos da sobrecarga. A função discriminante revelou 86% de acurácia e uma classificação correta de 94,4% dos indivíduos heterozigotos para PKU.

Modulação nitrérgica na regulação ocitocinérgica da secreção do peptídeo natriurético atrial em cardiomiócitos

Historicamente conhecida por suas ações sobre o sistema reprodutor, hoje se sabe que a ocitocina (OT) também pode contribuir para a regulação da homeostase cardiovascular e hidroeletrolítica. A OT é produzida nos núcleos supra-óptico e paraventricular do hipotálamo e liberada para o plasma a partir de terminais neurais da pituitária posterior, no entanto, muitos estudos identificaram locais extra-cerebrais de produção OT, incluindo o coração e o endotélio vascular. A ativação de seus receptores em células endoteliais, bem como em sistemas hipotalâmicos/hipofisários e cardíaco, pode resultar na produção de óxido nítrico (NO). O presente trabalho teve como objetivo verificar o papel do NO na regulação da secreção de peptídeo natriurético atrial (ANP) estimulada por OT em cultura primária de cardiomiócitos de embriões de camundongos. Para tal, corações de embriões de camundongos Balb C, com 19 a 21 dias de vida intra-uterina, foram isolados e cultivados para os ensaios com OT e demais substâncias interferentes na síntese de NO e GMPc seu segundo mensageiro. A adição de concentrações crescentes de OT (0.1, 1, 10 e 100 μM) induziu aumento proporcional na secreção de ANP e nitrato para o meio, confirmando a ação estimuladora da OT em cardiomiócitos. O bloqueio da liberação de ANP estimulada por OT (10 μM) foi observada após adição de Ornitina Vasotocina (CVI-OVT) (100 μM), um antagonista específico de OT. Este antagonista inibiu a secreção basal de ANP, quando adicionado individualmente, sugerindo que a OT pode atuar via mecanismo autócrino, tônico estimulatório sobre a secreção de ANP. Amplificação da secreção de ANP estimulada por OT (10 μM) foi observada após sua associação com L-NAME, um inibidor da sintase de óxido nítrico (NOS) (600 μM), e ODQ (100 μM), um inibidor da guanilato ciclase solúvel, sugerindo a ocorrência de feedback negativo nitrérgico na liberação de ANP estimulada por OT no cardiomiócito. Os resultados obtidos mostraram modulação nitrérgica inibidora sobre a secreção de ANP estimulada por OT.

Estudo químico e biológico de fungos endofídicos associados a Senna spectabilis

Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES)

Busca de substâncias bioativas em fungos associados com a espécie Michelia champaca L. (Magnoliaceae)

Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES)

Characterization, subsite mapping and N-terminal sequence of miliin, a serine-protease isolated from the latex of Euphorbia milii

Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo (FAPESP)

Study of pK Values and Effective Dielectric Constants of Ionizable Residues in Pentapeptides and in Staphylococcal Nuclease (SNase) Using a Mean-Field Approach

Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo (FAPESP)

Transport of amino acids from milk whey by Caco-2 cell monolayer after hydrolytic action of gastrointestinal enzymes

The bioavailability of amino adds from milk whey protein hydrolysates was evaluated using diffusion of the substances through semi-permeable membranes (dialyzability) and transport by Caco-2 cell cultures. The hydrolysates with low degree of hydrolysis (LDH) and high degree of hydrolysis (HDH) were obtained after 120 min of reaction time at 50 degrees C after the initial addition of pepsin, followed by the addition of trypsin, chymotrypsin and carboxypeptidase-A. The proteins and hydrolysates were further subjected to in vitro digestion with pepsin plus pancreatin. HPLC was used to determine the concentrations of dialyzable amino adds (48.4% of the non-hydrolyzed proteins, 63.2% of the LDH sample and 58.3% of the HDH sample), demonstrating the greater dialyzability of the hydrolysates. The LDH and HDH whey protein hydrolysates prepared with pepsin, trypsin, chymotrypsin and carboxypeptidase-A showed only 14.7% and 20.8% of dialyzable small peptides and amino acids, respectively. The efficiency of absorption was demonstrated by the preferential transport of Ile, Lou and Arg through a layer of cells. In the LDH hydrolysate, Tyr was also transported. Prior high- and low-degree hydrolysis of the whey provided transport by 5.7% and 6.6%, respectively, in comparison with 23% for non-hydrolyzed proteins, considering the total amount of these amino adds that was applied to the cells. (C) 2014 Elsevier Ltd. All rights reserved.