Hypermethylation of the 5 ' CpG island of the gene encoding the serine protease Testisin promotes its loss in testicular tumorigenesis

The Testisin gene (PRSS21) encodes a glycosylphosphatidylinositol (GPI)-linked serine protease that exhibits testis tissue-specific expression. Loss of Testisin has been implicated in testicular tumorigenesis, but its role in testis biology and tumorigenesis is not known. Here we have investigated the role of CpG methylation in Testisin gene inactivation and tested the hypothesis that Testisin may act as a tumour suppressor for testicular tumorigenesis. Using sequence analysis of bisulphite-treated genomic DNA, we find a strong relationship between hypermethylation of a 385 bp 50 CpG rich island of the Testisin gene, and silencing of the Testisin gene in a range of human tumour cell lines and in 100% (eight/eight) of testicular germ cell tumours. We show that treatment of Testisin-negative cell lines with demethylating agents and/or a histone deacetylase inhibitor results in reactivation of Testisin gene expression, implicating hypermethylation in Testisin gene silencing. Stable expression of Testisin in the Testisin-negative Tera-2 testicular cancer line suppressed tumorigenicity as revealed by inhibition of both anchorage-dependent cell growth and tumour formation in an SCID mouse model of testicular tumorigenesis. Together, these data show that loss of Testisin is caused, at least in part, by DNA hypermethylation and histone deacetylation, and suggest a tumour suppressor role for Testisin in testicular tumorigenesis.

Testicular development of Zebu bulls after chronic treatment with a gonadotropin-releasing hormone agonist

The objective was to compare testis characteristics of Zebu bulls treated with the GnRH agonist, deslorelin, at different times and for different durations during their development. An additional objective was to determine the usefulness of a stain for the transcription factor GATA-binding protein 4 (GATA-4) as a specific marker for Sertoli cell nuclei in cattle. Bulls (54) were allocated to nine groups (n = 6) and received s.c. deslorelin implants as follows: G1 = from birth to 3 mo of age; G2 = from 3 to 6 mo; G3 = from 6 to 9 mo; G4 = from 9 to 12 mo; G5 = from birth to 15 mo; G6 = from 3 to 15 mo; G7 = from 6 to 15 mo; G8 = from 12 to 15 mo; and G9 (control) = no implant. Bulls were castrated at 19 mo of age. Paraffin sections (10 mu m) were subjected to quantitative morphometry and GATA-4 immunohistochemistry. At castration, all bulls in the control group (6/6) had attained puberty (scrotal circumference ! 28 cm), whereas a smaller proportion (P < 0.05) had reached puberty in G2 (2/5) and G6 (1/ 6). Bulls in G2 and G6 also had a lesser (P < 0.05) testis weight compared with the control group. Total volume of seminiferous epithelium and total daily sperm production in G2 and G6 were only half that observed in the control group. Spermatids were observed in less than 50% of seminiferous tubules in G2, G6, and G7 compared with 82% in the control group (P < 0.05). Staining for GATA-4 was specific for and abundant in the Sertoli cell nucleus in both pre- and postpubertal bulls, and no other cell nucleus inside the seminiferous tubule was positive for GATA-4. Total number of Sertoli cells was not affected by treatment (P = 0.45), but nuclear volume was smaller in G2 and G6 (P < 0.05) compared with the control group. In conclusion, treatment of Zebu bulls with deslorelin had no apparent beneficial effect on testis development and delayed puberty when treatment was initiated at 3 mo of age. Staining for GATA-4 was a useful method for identifying and quantifying Sertoli cell nuclei in both pre- and postpubertal bulls.

Genetic basis of human testicular germ cell cancer: insights from the fruitfly and mouse

The prevalence of tumours of the germ line is increasing in the male population. This complex disease has a complex aetiology. We examine the contribution of genetic mutations to the development of germ line tumours in this review. In particular, we concentrate on fly and mouse experimental systems in order to demonstrate that mutations in some conserved genes cause pathologies typical of certain human germ cell tumours, whereas other mutations elicit phenotypes that are unique to the experimental model. Despite these experimental systems being imperfect, we show that they are useful models of human testicular germ cell tumourigenesis.

Testicular germ cell tumors exhibit evidence of hormone dependence

The aim of this investigation was to test the hypothesis that testicular germ cell tumors (TGCTs) are hormone-dependent cancers. Human TGCT cells were implanted in the left testis of male severe combined immunodeficient mice receiving either no treatment or hormone manipulation treatment [blockade of gonadotropin-releasing hormone secretion and/or signaling using leuprolide or leuprolide plus exogenous testosterone]. Real-time RT-PCR analysis was used to determine the expression profiles of hormone pathway-associated genes. Tumor burden was significantly smaller in mice receiving both leuprolide and testosterone. Real-time RTPCR analysis of follicle-stimulating hormone (FSH) receptor, luteinizing hormone (LH) receptor and P450 aromatase revealed changes in expression in normal testis tissue related to presence of xenograft tumors and manipulation of hormone levels but a complete absence of expression of these genes in tumor cells themselves. This was confirmed in human specimens of TGCT. Reduced TGCT growth in vivo was associated with significant downregulation of LH receptor and P450 aromatase expression in normal testes. In conclusion, manipulation of hormone levels influenced the growth of TGCT in vivo, while the presence of xenografted tumors influenced the expression of hormone-related genes in otherwise untreated animals. Human TGCTs, both in the animal model and in clinical specimens, appear not to express receptors for FSH or LH. Similarly, expression of the P450 aromatase gene is absent in TGCTs. Impaired estrogen synthesis and/or signaling may be at least partly responsible for inhibition of TGCT growth in the animal model. (c) 2005 Wiley-Liss, Inc.

Testicular volume and reproductive status of Wild Callithrix jacchus

ARAÚJO, Arrilton ; SOUSA, Maria Bernardete Cordeiro . Testicular volume and reproductive status of Wild Callithrix jacchus. International Journal of Primatology, v.29, p.1355–1364, 2008. DOI 10.1007/s10764-008-9291-4

Testicular volume and reproductive status of Wild Callithrix jacchus

ARAÚJO, Arrilton ; SOUSA, Maria Bernardete Cordeiro . Testicular volume and reproductive status of Wild Callithrix jacchus. International Journal of Primatology, v.29, p.1355–1364, 2008. DOI 10.1007/s10764-008-9291-4

Fases do desenvolvimento e diferenciação testicular em cutias (Dasyprocta aguti) criadas em cativeiros

A cutia (Dasyprocta aguti) é um roedor silvestre encontrado amplamente na região Nordeste do Brasil. É uma espécie muito utilizada pela população humana de baixa renda como fonte alternativa de proteína na alimentação. Foram utilizadas 31 cutias, machos, provenientes da Universidade Federal do Piauí (FUFPI), Estado do Piauí e da Escola Superior de Agricultura de Mossoró Estado do Rio Grande do Norte. Os animais foram divididos em grupos etários desde o nascimento até os 14 meses de idade. O diâmetro nuclear médio foi obtido pela medida de 10 núcleos do tipo celular estudado em cada testículo, no estágio 1 do ciclo do epitélio seminífero. Nos animais que não apresentaram o epitélio organizado em estágios bem definidos em virtude da idade, foram feitas medidas em secções transversais escolhidas somente pelo contorno circular. O início da assincronia do processo espermatogênico foi observado a partir dos seis meses de idade. A puberdade, na cutia Dasyprocta aguti, foi definitivamente estabelecida a partir dos nove meses de idade, pois estavam presentes todos os tipos celulares e espermatozóides liberados no lume tubular em grande parte do parênquima testicular.

Análise histométrica do desenvolvimento testicular de cutias (Dasyprocta aguti) criadas em cativeiros

Foi estudado, por meio da histometria, o desenvolvimento testicular em 31 cutias da espécie Dasyprocta aguti desde o nascimento até 14 meses de idade. O diâmetro e a área, médios, foram obtidos a partir de 30 secções transversais de cordões e/ou túbulos seminíferos, em cada testículo, utilizando-se sistema de computadorizado de analises de imagem e uma ocular micrométrica Zeiss CPL 10X, acoplada a uma objetiva de 40X. As proporções volumétricas do testículo foram obtidas com o método estereométrico, segundo Elias, Henning e Schwartz¹. O diâmetro tubular médio apresentou crescimento lento desde o nascimento até os oito meses de idade, nas duas metodologias empregadas. Quando foi usada a ocular micrométrica observou-se que, a partir de nove meses, o diâmetro tubular teve um crescimento acelerado, chegando a duplicar o seu valor, se comparado com grupo etário que o antecedia. A proporção volumétrica dos cordões testiculares e túbulos seminíferos cresceu gradualmente, atingindo, aos nove meses, seu valor máximo (86,50%). As células de Leydig apresentaram proporção volumétrica decrescente, e seus maiores valores foram expressivos do nascimento até quatro meses de idade (7,00 ± 1,77% a 9,55 ± 0,64%) e mínimos a partir de nove meses, tendendo ainda a uma estabilização. O estroma diminuiu com a evolução da idade caindo bruscamente a partir da puberdade. Conclui-se que o diâmetro dos cordões testiculares e túbulos seminíferos apresentou maior crescimento, coincidindo com o início da puberdade e a proporção volumétrica das células de Leydig encontrou-se, respectivamente, mais alta e mais baixa no mesmo período.

Testicular arteries systematization based on different levels of scrotal configuration in caprines

O objetivo deste trabalho foi analisar a distribuição dos vasos arteriais nos testículos em caprinos com diferentes graus de divisão escrotal. A configuração escrotal foi classificada da seguinte forma: Grupo I: constituído por caprinos com escroto único, Grupo II: com escroto separado até a metade do testículo e Grupo III: com separação escrotal estendendo-se além da metade do testículos. As artérias foram injetadas e coradas com solução de acetado de vinil, sendo os orgãos (30 pares) submetidos à corrossão para obtenção dos moldes vasculares. As artérias testiculares emergem da aorta abdominal, com trajeto retilíneo, atravessam o canal inguinal, apresentam-se espiraladas e envolvidas parcialmente pelo plexo pampiniforme. Próximo à extremidade caudada do testículo, dividem-se mais freqüentemente nos ramos cranial e caudal, os quais emitem vasos colaterais, de onde emergem ramos penetrantes. Os testículos dos animais com nível intermediário de divisão escrotal (Grupo II) apresentam menor quantidade destes ramos, sendo os quadrantes mais povoados o ventrolateral e o dorsolateral. Conclui-se que a origem, o trajeto e a distribuição das artérias testiculares não apresentam variações relacionadas ao grau de divisão escrotal em caprinos.

Influence of the bipartite scrotum on the testicular and scrotal temperatures in goats

O objetivo deste trabalho foi avaliar a influência do grau de bipartição escrotal e do período do ano sobre a termorregulação escroto-testicular em caprinos criados no Estado do Piauí. Foram utilizados 18 reprodutores caprinos machos, divididos em três grupos de seis animais: O Grupo I contendo caprinos com escroto simples, o Grupo II, caprinos com escroto bipartido até 50% do comprimento testicular e o Grupo III, caprinos com bipartição superior a 50% do comprimento testicular. Os parâmetros avaliados foram as temperaturas do escroto, testículo e funículo espermático, obtidas de forma invasiva, com um termômetro digital termoacoplável, e não invasiva, com um pirômetro, nos terços proximal, médio e distal. Os dados foram coletados nos períodos seco (outubro-novembro) e chuvoso (fevereiro-março) do ano, bem como, nos turnos da manhã (6h00 às 7h00) e tarde (14h00 às 15h00). Os resultados foram submetidos à análise de variância (ANOVA) seguida do teste SNK para comparação das médias (p<0,05). O período do ano interferiu na termorregulação escroto-testicular, pois no período seco as temperaturas do escroto, testículo e funículo espermático foram mais elevadas que as observadas no período chuvoso. O grau de bipartição do escroto foi outro fator que modificou a temperatura escroto-testicular, já que os caprinos que apresentaram escroto com maior grau de bipartição demonstraram as menores médias das temperaturas escroto-testiculares em ambos os períodos e turnos avaliados. Conclui-se, portanto, que tanto o período do ano quanto o grau de bipartição do escroto influenciaram o processo de termorregulação escroto-testicular em caprinos.

A NOVEL NON-LETHAL LAPAROSCOPIC APPROACH TO DETECT INTERSEX (TESTICULAR OOCYTES) IN LARGEMOUTH BASS (MICROPTERUS SALMOIDES) AND SMALLMOUTH BASS (MICROPTERUS DOLOMIEU)

The appearance of testicular oocytes (TO) in wild fish populations has received considerable attention in the scientific literature and public media. Current methods to quantify TO are lethal; instead, a non-lethal alternative was examined. Laparoscopic insertion into the genital pore allowed internal visualization of the gonad and detection of TO by collecting five testis biopsies in smallmouth bass Micropterus dolomieu and largemouth bass Micropterus salmoides. Overall, biopsies quantified similar levels of TO detection and severity to conventional transverse sectioning with less than 10% mortality. Suitability of surgical anesthetics, tricaine methanesulfonate and electronarcosis were examined in laboratory and field applications. Electronarcosis had the added benefit of rapid sex identification and immediate release of female fish with minimal trauma, representing significant benefits when sampling small or compromised populations. Laparoscopy may be useful for monitoring the prevalence and severity of TO in these fish species when lethal sampling is not a desired outcome.

Scrotal Exploration for Testicular Torsion and Testicular Appendage Torsion: Emergency and Reality

Background: Scrotal exploration is considered the procedure of choice for acute scrotum. Objectives: We evaluated the importance of early diagnosis and testicular salvage on the therapeutic outcomes of patients with pediatric testicular torsion (TT) and testicular appendage torsion (TAT) in our geographic area. Patients and Methods: We performed a retrospective database analysis of patients who underwent emergency surgery for TT or TAT between January 1996 and June 2009. Patient history, physical examination findings, laboratory test results, color Doppler sonography (CDS) results, and surgical findings were reviewed. Results: A total of 65 cases were included in our analysis. Forty-two cases were followed up for at least 3 months. Testicular tenderness was identified as the major clinical manifestation of TT, while only a few patients with TAT presented with swelling. CDS was an important diagnostic modality. The orchiectomy rate was 71% in the TT group. Conclusions: Cases of acute scrotum require attention in our area. Early diagnosis and scrotal exploration could salvage the testis or preserve normal function without the need for surgery.