Susceptibility of Cebus apella monkey (Primates: Cebidae) to experimental Leishmania (L.) infantum chagasi-infection

In Amazonian Brazil, the Cebus apella monkey (Primates: Cebidae) has been associated with the enzootic cycle of Leishmania (V.) shawi, a dermotropic parasite causing American cutaneous leishmaniasis (ACL). It has also been successfully used as animal model for studying cutaneous leishmaniasis. In this work, there has been investigated its susceptibility to experimental Leishmania (L.) infantum chagasi-infection, the etiologic agent of American visceral leishmaniasis (AVL). There were used ten C. apella specimens, eight adult and two young, four males and six females, all born and raised in captivity. Two experimental infection protocols were performed: i) six monkeys were inoculated, intra-dermal via (ID), into the base of the tail with 2 x 10(6) promastigotes forms from the stationary phase culture medium; ii) other four monkeys were inoculated with 3 x 10(7) amastigotes forms from the visceral infection of infected hamsters by two different via: a) two by intravenous via (IV) and, b) other two by intra-peritoneal via (IP). The parameters of infection evaluation included: a) clinical: physical exam of abdomen, weigh and body temperature; b) parasitological: needle aspiration of the bone-marrow for searching of amastigotes (Giemsa-stained smears) and promastigotes forms (culture medium); c) immunological: Indirect fluorescence antibody test (IFAT) and, Delayed-type hypersensitivity (DTH). In the six monkeys ID inoculated (promastigotes forms) all parameters of infection evaluation were negative during the 12 months period of follow-up. Among the four monkeys inoculated with amastigotes forms, two IV inoculated showed the parasite in the bone-marrow from the first toward to the sixth month p.i. and following that they cleared the infection, whereas the other two IP inoculated were totally negative. These four monkeys showed specific IgG-antibody response since the third month p.i. (IP: 1/80 and IV: 1/320 IgG) toward to the 12th month (IP: 1/160 and IV: 1/5120). The DTH-conversion occurred in only one IV inoculated monkey with a strong (30 mm) skin reaction. Considering these results, we do not encourage the use of C. apella monkey as animal model for studying the AVL.

Ensaio laboratorial e clínico com Hycanthone, nôvo agente esquistossomicida

A partir do Miracil D, um derivado hidroximetílico (Hycanthone) pode ser obtido através da atividade biológica do Aspergillus sclerotiorum. Êste derivado mostrou-se muito ativo quando administrado a camundongos, hamsters e macacos Cebus experimentalmente infectados com Schistosoma mansoni. Ensaios clínicos com o Hycanthone foram feitos em 52 pacientes com esquistossomose mansoni ativa. A droga foi administrada, nas doses de 2 e 3 mg/kg/ dia, junto com um anti-ácido, duas vêzes ao dia, durante 5 dias consecutivos. Com exceção de 2 casos, todos os pacientes completaram o tratamento. Náusea e/ou vômito, anorexia, tonturas e cefaléia foram os efeitos colaterais mais comuns. Atividade terapêutica foi avaliada através de repetidos exames de fezes (4 a 6) e uma biópsia retal realizada a partir do 4.° mês após o tratamento. As percentagens de cura foram de 83,3 e 80,0% com o esquema de 2 e 3 mg/kg, respectivamente. Os dados laboratoriais e clínicos sôbre a atividade esquistossomicida do Hycanthone até agora obtidos mostram a necessidade de novos ensaios com êste promissor medicamento.

Experimental chemotherapy of Schistosomiasis III: laboratory and clinical trials with trichlorphone, an organophosphorus compound

Oogram studies have been carried out on mice, hamsters, and Cebus morikeys experimentally infected with Schistosoma mansoni and treated with trichlorphone (0,0-dimethyl 1-hydroxy-2, 2, 2-trichloroethylphosphonate). In mice, despite a slight hepatic shift of schistosomes, all animais presented oogram changes when dosed, per os, at the schedules of 200, and 100 mg/kg/day × 7. In hamsters, antischistosomal activity could be detected only at toxic leveis. In monkeys, trichlorphone showed insignificant action even after oral administration of 30 mg/kg/day for 10 consecutive days. In 5 volunteers, a sharp drop in cholinesterase plasma level was observed 24 hours after a single oral dose of 7.5 mg/kg. However, cholinesterase levels returned to the initial values within a period of 11 to 27 days. Trichlorphone was then administered to 12 schistosome patients (7.5 mg/kg/day, every fort- night, × 5). One month after therapy, interruption of egg laying was observed in 6 patients. Late parasitological control showed that all treated patients continued to pass viable S. mansoni eggs with their stools.

Efecto de la temperatura de la piel en la leishmaniasis cutanea experimental

The literature on the thermosensitive properties of strains or species of Leishmania and of other miercorganisms is revised. Cutaneous or mucocutaneous strains that infect animais in the coldest areas of the skin or mucosa in general can not grow in tissue culture at 37°C or higher temperatures and their respiratory metabolism decreases at these temperatures. These facts suggest a thermosensitive event in some important metabolism phase of the organisme. The strains or species that are able to produce visceral leishmaniasis were probably originated from cutaneous strains after genetioally determined physiological adaptation, to warmer temperatures. These strains can not only visceralize in animais and man but will also grow in tissue culture at 36-37°C and the respiratory metabolism will be higher at such temperatures. There are reasons to believe that intermediate strains, i. e., with properties of both groupsí do exist. A thermosensitive physiological event is a more general phenomenon and examples of it can also be found in the fields of virology, bacteriology and mycology. It has practical applications since some of the diseases produced by these agents can be cured by treatments with heat or artificial fever. Experiments along these line were performed on hamsters with a Costa Rican strain of L. braziliensis as an experimental model. Even after intraperitoneal inoculation lesions appear in the nose, ears, paws and tail with a subcutaneous temperature bellow 33°C at 22-24°C. Healing of the lesión is accomplished by increasing room temperature. A good lesión is produced in the rump of the animal if the area is depilated (comercial cream depilatory) previously and the naked skin cooled artificially. Elevated temperature, or the growing back of the hair will tend to diminish or cure the lesion.

Características epidemiológicas da leishmaniose tegumentar americana em uma região endêmica do Estado da Bahia: II leishmaniose canina

Um inquérito em cães realizado na região de Três Braços, Bahia, mostrou que 3,0% de 98 animais tinham amastigotas em lesões de pele. Parasitos não foram encontrados em pele normal da orelha. De uma amostra selecionada de 13 cães, portadores de lesão cutânea ativa, nove (69,2%) deles estavam comprovadamente infectados. Sete amostras de lesão produziram infecção em hamsters. O estudo biológico (crescimento em meio de cultura, evolução da lesão em hamster e desenvolvimento no tubo digestivo de Lutzomyia longipalpis) identificou o parasito como pertencente ao complexo L. braziliensis. A caracterização bioquímica (mobilidade eletroforética de enzimas em placas de acetato de celulose) e o estudo imunotaxonômico (anticorpos monoclonais) definiram as amostras como L. braziliensis braziliensis. O papel do cão como um possível reservatório de L. b. braziliensis na região de Três Braços é discutido.

Leishmania mexicana in Proechimys iheringi denigratus Moojen (Rodentia, Echimyidae) in a region endemic for American cutaneous leishmaniasis

Three isolates of Leishmania were recovered from five of 27 specimens of the rodent Proechimys iheringi denigratus Moojen captured near Três Braços in the Atlantic Forest region of Bahia, Brazil. Two of these isolates were recovered from hamsters inoculated with a pooled triturate of liver, spleen and skin tissue from apparently healthy P. i. denigratus. The third isolate was recovered from a triturate of only skin tissue from another. Metastasis was observed in the inoculated hamsters, the parasites grew abundantly in artificial media and a typical suprapylarial pattern of infection in Lutzomyia longipalpis was produced indicating that the parasites belong to the Leishmania mexicana complex. All isolates reacted with Leishmania mexicana mexicana and Leishmania mexicana amazonensis monoclonal antibodies. The isoenzyme analysis differentiated these isolates from standard isolates of L. m. mexicana, L. m. amazonensis, L. m. aristedesi, L. m. pifanoi, L. m. garnhami and L. m. ssp.(Goiás-W. Barbosa). These isolates seem to be a subspecies of L. mexicana very closely related to L. m. amazonensis from which they differ by decreased electrophoretic mobility of GPI, PEP and ALAT. This is the first record of the isolation of a parasite of thegenus Leishmania in a rodent captured in the State of Bahia.

The hamster (mesocricetus auratus) as experimental model in chagas' disease: parasitological and histopathological studies in acute and chronic phases of Trypanosoma cruzi infection

This research characterizes the acute and chronic phases of Chagas ' disease in hamster through parasitological and histopathological studies. The acute phase was achieved with 44 young hamsters injected intraperitoneally with 100.000 blood trypomastigotes of Benedito and Y strains of T. cruzi. The chronic phase was induced in 46 hamsters injected intraperitoneally with 35.000 trypomastigotes ofVicentina, Benedito and Y strains. Animals were sacrificed at regular intervals of 24 hours of acute phase and from the 3rd to the 10th month of infection ofchronic phase. In the acute phase, parasites were easily recoveredfrom all animals and there was an inflammatory reaction characterized by mononuclear and polymorphous leukocyte infiltration of variable degree in the majority of tissues and organs, specially in the connective loose and fatty tissues, smooth muscle myocardium and skeletal muscle. In the chronic phase the lesions occurred in the same tissues and organs, but the inflammatory response was less severe and characterized by mononuclear infiltration mainly with focal or zonalfibrosis in the myocardiun. In 50% of infected animals parasites were found inmyocardiun and recoveredfrom pericardic, peritoneal and ascitic fluids in some animals. Signs of heart failure, sudden death and enlargement of bowel were observed regularly. We concluded that the hamster is an useful model for Chagas' disease studies.

Resultados preliminares de um projeto sobre a ecologia dos flebotomineos vetores de leishmaniose tegumenar no estado da Bahia

São apresentados resultados preliminares de um projeto sobre a ecologia dos flebotomíneos, vetores de leishmaniose tegumentar, numa área de plantação de cacau no sul do Estado da Bahia, Brasil. Nesta área existem 60 casas, afastadas entre si, onde vivem 229 habitantes e 31 cães. Entre os moradores, 45% tinham reação de Montenegro positiva; destes, 8,8% eram portadores de úlceras em atividade e 37% de cicatrizes de úlceras. Dos cães, 22% eram soropositivos. Dos 7 cães com úlceras, apenas 3 eram soropositivos. Em 14% das casas inspecionadas, foram encontrados flebótomos. Durante dois anos, 72 hamsters foram mantidos como sentinelas em casas de pacientes com úlceras leishmanióticas, porém nehum adquiriu a infecção. Foram coletados e identificados 5.614 exemplares de flebótomos pertencentes a 14 diferentes espécies. Entre estas, Lutzomyia whitmani (92%) e Lutzomyia intermedia (4,8 %) eram as espécies mais abundantes. Esses flebótomos, muito antropofílicos, podiam ser encontrados dentro das casas e nas suas periferias e são provavelmente, os principais vetores da doença no ambiente doméstico. As outras 12 espécies eram menos frequentes e mais encontrados em ambientes silvestres, onde também picavam o homem. A maioria das espécies começava a aparecer às 17 horas, no crepúsculo, e alcançava sua densidade máxima às 24 horas, quando declinava até desaparecer às 6 horas da manhã. L. whitmani em todas as fases lunares foi capturada com a mesma densidade, enquanto L.intermedia foi mais abundante durante a fase de lua nova. Centenas de flebótomos coletados mensalmente durante o segundo ano de observações, permanecem preservados em nitrogênio líquido, aguardando o ajustamento de técnicas de PCR para a verificação da taxa de infecção natural desses vetores por leishmânia. Os resultadosfinais de todo o projeto serão publicados tão logo seja examinado esse material.

Production and characterization of monoclonal antibodies to the edta extract of Leptospira interrogans, serovar icterohaemorrhagiae

Monoclonal antibodies (MABs) ivere produced against an etbylenediaminetetraacetate (EDTA) extract of Leptospira interrogans serovar icterohaemorrhagiae being characterized by gel precipitation as IgM and IgG (IgGl and IgG2b). The EDTA extract was detected as several bands by silver staining in SDS-PAGE. In the Western blot the bands around 20 KDa reacted with a monoclonal antibody, 47B4D6, and was oxidized by periodate and was not digested by pronase, suggesting that the determinant is of carbohydrate nature, lmmunocytochemistry, using colloidal gold labeling, showed that an EDTA extract determinant recognized by monoclonal antibody 47B4D6, is localized under the outer envelope of serovar icterohaemorrhagiae. Hoe AIAB raised against the EDTA extract was not able to protect hamsters from lethal challenge with virulent homologous leptospires.

Estudo terapêutico aberto com sulfato de aminosidine na leishmaniose mucosa causada for Leishmania (viannia) braziliensis

No período de setembro a novembro de 1994 foram tratados 21 pacientes com leishmaniose mucosa ativa, predominantemente adultos lavradores do sexo masculino, com sulfato de aminosidine intramuscular, I6mg/kg/dia por 20 dias. Treze pacientes eram virgens de tratamento e 8 haviam sido tratados sem sucesso com Glucantime®". O diagnóstico baseou-se inicialmente em crítêrios epidemiolôgicos, clínicos e nos resultados da intrademoireação de Montenegro e a imunofluorescência indireta para anticoipos séricos antileishmânia e durante o acompanhamento nos resultados dos estudos parasitológicos. Sessenta e sete por cento dos pacientes tiveram diagnóstico parasitológico confirmado sendo a inoculação do material de biópsia das lesões em hamsters o método mais sensível. O tempo médio de acompanhamento foi de 12,6 meses. A adesão ao tratamento foi de 100%. Os efeitos colaterais foram dor no local da injeção (86%), proteinúria leve (24%), elevação do nível sérico de creatinina (5%) e perda auditiva subclínica em um dos dois pacientes que realizaram audiometria. Obsevou-se cura clínica em 48% dos pacientes e a percentagem acumulada de recidiva foi de 29% (4/14pacientes) durante o acompanhamento.

Estudo da competência vetorial de Lutzomyia intermedia (Lutz & Neiva, 1912) para Leishmania (Viannia) braziliensis, Vianna, 1911

Estudou-se a competência vetorial de Lutzomyia intermedia (Diptera: Psychodidae) do Vale do Ribeira (SP) para estirpes de Leishmania (Viannia) braziliensis (Kinetoplastida: Trypanosomatidae), mediante pesquisa de infectividade natural; exposições de fêmeas silvestres e colonizadas (F1) às lesões de hamsters experimentalmente infectados e testes de transmissão via picada. A infectividade natural e os testes de transmissão revelaram-se negativos e, nas exposições, foram obtidas positividades de 74% (123+/166 dissecados) e 70% (115+/164 dissecados) para fêmeas silvestres e colonizadas respectivamente, e o desenvolvimento das formas evolutivas compatíveis com o modelo Peripilaria. A suscetibilidade às estirpes testadas associada aos indicadores epidemiológicos concorrem para a suspeita do papel vetorial de Lutzomyia intermedia na região estudada.

Hepatocyte metaplasia in experimental chagasic pancreatitis: preliminary report

Beginning the study of chronic pathologic changes in pancreas of hamsters experimentally infected with Trypanosoma cruzi Vic strain, hepatocyte metaplasia was observed in one animal from infected group. This is the first report of oncocytes in Chagas' disease, which could be due to aberrant regenerative response to pancreas inflammatory process.

Histological evaluation of the lesion induced by inoculation of Leishmania mexicana in the cheek pouch of the hamster

We have studied the role of the immune response in the morphology of the leishmaniotic granuloma induced in the cheek pouch of hamsters, an immunologically privileged site, after inoculation of 3 x 10(5) Leishmania mexicana. Animals were histologically and immunologically evaluated until 120 days after inoculation. Independent of the time of sacrifice, the animals were always non-reactors to the footpad test (FPT). At histology, the introduction of L. mexicana in the cheek pouch leads to an abscess that evolves to a granulomatous reaction rich in amastigote forms, and later it leads to resolution, even in the absence of immune response detectable by FPT. Our results demonstrate that the development of immune response is not preponderant for the control of infection induced by L. mexicana inoculated subcutaneously in the cheek pouch of the hamster. It also suggests that the macrophages present in the leishmaniotic granuloma are capable of eliminating this parasite, even in the absence of immune response evaluated by FPT.

Draft for a Mental Health strategy Lebanon

RESUMO: O Líbano é um pequeno país na costa leste do Mar Mediterrâneo, com uma população de aproximadamente 4.350.000 pessoas, incluindo 1,5 milhões de refugiados, 400 mil dos quais são palestinos atendidos pela UNRWA (Agência das Nações Unidas de Socorro aos Refugiados da Palestina) (UNHCR, 2013; OMS, 2010a). Desde 2012, um excedente de 1.000.000 refugiados sírios cruzaram a fronteira com o Líbano, representando um aumento populacional de aproximadamente 25%. Além disso, entre 1975 e 1990, a violenta guerra civil pela qual o Líbano passou, destruiu grande parte da infra-estrutura do país, incluindo os serviços de saúde. O sector da saúde, mais especificamente os serviços de saúde mental, é majoritariamente privado. Serviços especializados em Saúde Mental estão disponíveis em três hospitais psiquiátricos privados, e em 4 unidades psiquiátricas de hospitais gerais, que estão localizados centralmente em torno da capital, Beirute. O Líbano é um dos dois únicos países da região que não tem uma Política de Saúde Mental e um dos seis países que não têm uma Legislação em Saúde Mental. Nos últimos anos, a Saúde Mental está sendo colocada no topo da agenda nacional, apesar das contínuas questões políticas e de segurança. Baseando-se nas informações acima, um projecto de estratégia em Saúde Mental, conduzido pelo Ministério da Saúde e apoiado pela OMS, foi escrito para servir como um guia para trabalhar em diferentes aspectos relacionados tanto em saúde mental quanto em organização dos serviços, revisão de legislação, financiamento e proteção dos direitos humanos básicos dos usuários do serviço. Esta tese descreve o processo pelo qual o projecto de estratégia nacional de Saúde Mental foi desenvolvido, seus principais componentes, os próximos passos a serem tomados para a sua implementação, os desafios e as oportunidades para implementá-lo e propõe alguns passos iniciais a serem tomados em primeiro lugar.----------ABSTRACT: Lebanon is a small country on the eastern shore of the Mediterranean Sea with a population of approximately 4,350,000 including 1,500,000 refugees, 400,000 of whom are Palestinians served by UNRWA (the United Nations Relief and Works Agency for Palestine Refugees) (UNHCR, 2013; WHO, 2010a). Since 2012 an excess of 1,000,000 Syrian refugees have crossed the border into Lebanon accounting for approximately 25% increase in the population. In addition, from 1975 to 1990 Lebanon underwent a violent civil war that had also destroyed much of the country infrastructure including health services. The health sector, more so the mental health services, is mostly private. Specialized Mental Health services are available at three private mental hospitals, and 4 psychiatric units within general hospitals, which are located centrally around the capital, Beirut. Lebanon is one of only two countries of the region that does not have a Mental Health policy and one out of the six countries that does not have a Mental Health legislation. In recent years, Mental Health is getting placed higher on the national agenda despite the ever continuing political and security issues. Based on the above, A Mental Health strategy draft, lead by the Ministry of Health and supported by WHO, was written to serve as a guide to work on different aspects related to Mental Health from service organization, to the revision of legislation, financing and the protection of the basic human rights of service users. This thesis describes the process through which the national Mental Health draft strategy was developed, its main components, the next steps to be taken for its implementation, the challenges and the opportunities to implementing it and proposes a few initial steps to be taken first.

Prevalência da infecção canina em áreas endêmicas de leishmaniose tegumentar americana, do município de Paracambi, Estado do Rio de Janeiro, no período entre 1992 e 1993

No município de Paracambi, Estado do Rio de Janeiro, foi realizado um inquérito epidemiológico sobre a leishmaniose tegumentar americana na população canina residente em áreas endêmicas rural e semiurbana. Foram cadastrados 179 cães e 138 (77,1%) foram examinados, segundo seus aspectos clínicos e desenvolvimento de hipersensibilidade tardia ao antígeno Imunoleish® e respostas sorológicas à reação de imunofluorescência indireta e ao ensaio imunoenzimático. Dos 9 (6,5.%) animais portadores de lesões/cicatrizes suspeitas, 66,7% foram causadas por Leishmania sp; 44,4% produziram infecção em hamsters e apresentaram crescimento em meio de cultura, compatíveis com o comportamento de Leishmania do complexo braziliensis. A caracterização molecular (análises isoenzimáticas e do perfil de restrição do KDNA) identificou 2 amostras como similares à Leishmania (Viannia) braziliensis. A prevalência da infecção canina observada através do teste cutâneo, RIFI e ELISA foi, respectivamente, 10,1%, 16,7% e 27,8%. A presença das formas clínica/subclínica da LTA na população canina associada à infecção humana sugere que o cão pode atuar como possível fonte de infecção, assim como na disseminação da doença.