999 resultados para Resistência a doenças
Resumo:
Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico (CNPq)
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Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo (FAPESP)
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Pós-graduação em Agronomia (Proteção de Plantas) - FCA
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Pós-graduação em Agronomia (Proteção de Plantas) - FCA
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Pós-graduação em Agronomia (Proteção de Plantas) - FCA
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O vírus Influenza é o responsável pela gripe, uma doença que ocasiona milhões de mortes e hospitalizações todos os anos. Nas infecções severas, especialmente em pessoas com risco para complicações, os antivirais tornam-se os principais meios para o manejo clínico, merecendo especial destaque os inibidores da neuraminidase (INAs). De fato, na pandemia de 2009 a Organização Mundial da Saúde (OMS) recomendou o uso do oseltamivir para o tratamento dos doentes. Porém, devido à evolução genética viral, surgiram cepas com mutações no gene codificador da neuraminidase (NA) responsáveis por substituições aminoacídicas que levam à resistência aos fármacos INAs. Assim, a OMS passou a recomendar a vigilância de resistência genotípica para os vírus Influenza. Este trabalho teve como objetivos verificar a ocorrência de mutações no gene codificador da NA dos vírus Influenza A (H1N1) pandêmico que possam estar relacionadas à resistência aos INAs em cepas circulantes na mesorregião metropolitana de Belém no período de maio de 2009 a maio de 2012 e analisar, através da modelagem de proteínas, as substituições aminoacídicas da NA que possam estar influenciando na conformação protéica. Durante o período de estudo, foram recebidas no Laboratório de Vírus Respiratórios 2619 amostras clínicas de pacientes que apresentavam sinais e sintomas de infecção respiratória aguda com até cinco dias de evolução. Para a detecção do genoma viral foi feita a extração do RNA viral, seguida de RT-PCR em tempo real utilizando marcadores específicos para Influenza A H1N1pdm, resultando em 744 (28,4%) positivas. Parte das amostras positivas foram então inoculadas em células MDCK. Para as amostras isoladas em cultura de células, foi feita uma nova extração do RNA viral seguida de uma RT-PCR e semi-nested (PCR) utilizando iniciadores específicos para o gene NA, e posterior análise em sequenciador automático ABI Prism 3130xl (Applied Biosystems). A modelagem molecular da NA foi realizada através dos softwares SWISS-MODEL, MODELLER 9.10, PROCHECK, VERIFY3D e PYMOL. A análise parcial das sequências da neuraminidase nas amostras sequenciadas mostrou que não houve a circulação de cepas de vírus H1N1pdm com a mutação H275Y, a principal envolvida na resistência ao oseltamivir. Porém, em duas amostras foi identificada a substituição D199N que já foi relatada em vários estudos mostrando uma possível associação com o aumento da resistência ao oseltamivir. As amostras de 2012 apresentaram duas substituições (V241I e N369K) que estão relacionadas com um possível papel na compensação dos efeitos negativos causados pela mutação H275Y. A modelagem molecular mostrou que na mutação D199N houve uma alteração na estrutura da proteína NA próxima ao sítio de ligação ao antiviral. A análise filogenética revelou que as amostras de 2012 formaram um cluster isolado, demonstrando uma variação muito mais temporal do que geográfica. Este representa o primeiro estudo de resistência dos vírus Influenza H1N1pdm na mesorregião metropolitana de Belém, representando um importante instrumento para que os profissionais de saúde adotem estratégias mais eficazes no manejo da doença e no desenvolvimento de novos fármacos anti-influenza.
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Pós-graduação em Pesquisa e Desenvolvimento (Biotecnologia Médica) - FMB
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Pós-graduação em Doenças Tropicais - FMB
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Pós-graduação em Patologia - FMB
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Pós-graduação em Agronomia (Entomologia Agrícola) - FCAV
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Pós-graduação em Agronomia (Entomologia Agrícola) - FCAV
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Pós-graduação em Doenças Tropicais - FMB
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Pós-graduação em Agronomia (Proteção de Plantas) - FCA
Resumo:
Pós-graduação em Pesquisa e Desenvolvimento (Biotecnologia Médica) - FMB
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The aim of this work was to evaluate the types of resistance of soybean genotypes to the attack of Spodoptera cosmioides (Walker, 1858), under laboratory conditions. Plants of the soybean genotypes, IAC 100, Dowling, PI 227687, PI 274454, BR 16, IGRA RA 626 RR, PI 227682, BRSGO 8360, IGRA RA 516 RR e P 98Y11 RR, were cultivated in vases and placed in a greenhouse in order to have their leaves used afterwards in free-choice and no-choice no-preference for feeding tests and evaluation of the biological parameters of S. cosmioides fed on the genotypes. For free-choice no preference for feeding test, 10 leaf discs were prepared and placed in Petri dishes equidistantly among themselves, and then two recently-hatched caterpillar per genotype were release in the center of the plate. The same test was performed for third instar larvae, so that one caterpillar per genotype was used. In non-choice test, only one genotype was used in each Petri dish, where two recently-hatched or one third instar caterpillars were released, respectively. For both tests, the attractiveness was assessed at 1, 3, 5, 10, 15, 30, 60, 120, 360, 720 and 1440 minutes after the release of the insects. In addition, the leaf area consumed was evaluated. Randomized blocks design and completely randomized design were used for free-choice and non-choice tests, respectively, with 10 replications. In biology test, recently-hatched larvae were transferred to Petri dishes with leaves of the genotypes, evaluating the period of larvae, pupae and overall (larvae + pupae), viability of larvae, pupae and overall, weight of 12 days-old larvae and 24 hours-old pupae and longevity of the adults. Completely randomized design was used for this test, with 30 replications. Genotypes IGRA RA 516 RR and IGRA RA 626 RR were the least and the most consumed by recently-hatched larvae of S. cosmioides, respectively, in non-choice non-preference for feeding test. Genotypes PI 274454 and PI 227687 were...