Novel cell types, neurosecretory cells, and body plan of the early-diverging metazoan Trichoplax adhaerens.

BACKGROUND: Trichoplax adhaerens is the best-known member of the phylum Placozoa, one of the earliest-diverging metazoan phyla. It is a small disk-shaped animal that glides on surfaces in warm oceans to feed on algae. Prior anatomical studies of Trichoplax revealed that it has a simple three-layered organization with four somatic cell types. RESULTS: We reinvestigate the cellular organization of Trichoplax using advanced freezing and microscopy techniques to identify localize and count cells. Six somatic cell types are deployed in stereotyped positions. A thick ventral plate, comprising the majority of the cells, includes ciliated epithelial cells, newly identified lipophil cells packed with large lipid granules, and gland cells. Lipophils project deep into the interior, where they alternate with regularly spaced fiber cells whose branches contact all other cell types, including cells of the dorsal and ventral epithelium. Crystal cells, each containing a birefringent crystal, are arrayed around the rim. Gland cells express several proteins typical of neurosecretory cells, and a subset of them, around the rim, also expresses an FMRFamide-like neuropeptide. CONCLUSIONS: Structural analysis of Trichoplax with significantly improved techniques provides an advance in understanding its cell types and their distributions. We find two previously undetected cell types, lipohil and crystal cells, and an organized body plan in which different cell types are arranged in distinct patterns. The composition of gland cells suggests that they are neurosecretory cells and could control locomotor and feeding behavior.

Metabolismo de plantas de cana-de-açúcar cultivadas in vitro sob diferentes concentrações de nitrogênio

Variedades de cana-de-açúcar (RB 732577, RB 83102, RB 75126, CB 45-3, Caiana e Co 997) foram cultivadas in vitro em meio nutritivo básico MS com diferentes concentrações de N (9,83 mM, 7,37 mM, 4,92 mM, 2,46 mM, 0,49 mM e 0,0 mM), com o objetivo de avaliar a eficiência no processo de assimilação desse elemento. Após 45 dias de cultivo, foram determinados os ganhos de biomassa e os teores de amônio, aminoácidos e açúcares solúveis. A variedade Co 997 apresentou maior ganho de biomassa e maior quantidade de N incorporado em aminoácidos livres em relação às demais variedades, sugerindo maior eficiência no processo de assimilação. Os teores mais elevados de amônio foram observados nas variedades RB 83102 e RB 75126, quando cultivadas em meio desprovido de N, mostrando-se menos eficientes no processo de assimilação uma vez que apresentaram os menores valores de aminoácidos livres nas mesmas condições de cultivo.

Development of projections from auditory to visual areas in the cat.

In newborn kittens, cortical auditory areas (including AI and AII) send transitory projections to ipsi- and contralateral visual areas 17 and 18. These projections originate mainly from neurons in supragranular layers but also from a few in infragranular layers (Innocenti and Clarke: Dev. Brain Res. 14:143-148, '84; Clarke and Innocenti: J. Comp. Neurol. 251:1-22, '86). The postnatal development of these projections was studied with injections of anterograde tracers (wheat germ agglutinin-horseradish peroxidase [WGA-HRP]) in AI and AII and of retrograde tracers (WGA-HRP, fast blue, diamidino yellow, rhodamine-labeled latex beads) in areas 17 and 18. It was found that the projections are nearly completely eliminated in development, this, by the end of the first postnatal month. Until then, most of the transitory axons seem to remain confined to the white matter and the depth of layer VI; a few enter it further but do not appear to form terminal arbors. As for other transitory cortical projections the disappearance of the transitory axons seems not to involve death of their neurons of origin. In kittens older than 1 month and in normal adult cats, retrograde tracer injections restricted to, or including, areas 17 and 18 label only a few neurons in areas AI and AII. Unlike the situation in the kitten, nearly all of these are restricted to layers V and VI. A similar distribution of neurons projecting from auditory to visual areas is found in adult cats bilaterally enucleated at birth, which suggests that the postnatal elimination of the auditory-to-visual projection is independent of visual experience and more generally of information coming from the retina.

Dinâmica da matéria orgânica e da biomassa microbiana em solo submetido a diferentes sistemas de manejo na Amazônia Ocidental

O objetivo deste trabalho foi avaliar as alterações na atividade da biomassa microbiana como um indicador da dinâmica de C e N em solo submetido à sucessão de cobertura vegetal e de manejo na Amazônia Ocidental. Os trabalhos foram realizados em duas cronosseqüências: CA - sucessão floresta primária e cupuaçuzal (Theobroma grandiflorum) de três anos - e CB - sucessão floresta primária, pastagem de Brachiaria humidicola de oito anos e cupuaçuzal de três anos. A sucessão floresta primária-pastagem-cupuaçuzal afeta negativamente o estoque de C do solo, com diminuição significativa da matéria orgânica e do C da biomassa microbiana do solo, ao passo que na sucessão floresta primária-cupuaçuzal ocorre diminuição apenas do C da biomassa microbiana. A floresta primária apresenta menor quociente metabólico e maior relação C/N da biomassa, o que resulta em menor perda de carbono. O N da biomassa microbiana na camada de 0-10 cm, independentemente do manejo adotado, aumenta significativamente na área de cupuaçuzal, ao passo que o N total diminui. A concentração de amônio no solo diminui com a profundidade, de modo oposto ao verificado com o nitrato.

Detecting the oxidative reactivity of nanoparticles: a new protocol for reducing artifacts

Understanding the oxidative reactivity of nanoparticles (NPs; <100 nm) could substantially contribute to explaining their toxicity. We attempted to refine the use of 2′7-dichlorodihydrofluorescein (DCFH) to characterize NP generation of reactive oxygen species (ROS). Several fluorescent probes have been applied to testing oxidative reactivity, but despite DCFH being one of the most popular for the detection of ROS, when it has been applied to NPs there have been an unexplainably wide variability in results. Without a uniform methodology, validating even robust results is impossible. This study, therefore, identified sources of conflicting results and investigated ways of reducing occurrence of artificial results. Existing techniques were tested and combined (using their most desirable features) to form a more reliable method for the measurement of NP reactivity in aqueous dispersions. We also investigated suitable sample ranges necessary to determine generation of ROS. Specifically, ultrafiltration and time-resolved scan absorbance spectra were used to study possible optical interference when using high sample concentrations. Robust results were achieved at a 5 µM DCFH working solution with 0.5 unit/mL horseradish peroxidase (HRP) dissolved in ethanol. Sonication in DCFH-HRP working solution provided more stable data with a relatively clean background. Optimal particle concentration depends on the type of NP and in general was in the µg/mL range. Major reasons for previously reported conflicting results due to interference were different experimental approaches and NP sample concentrations. The protocol presented here could form the basis of a standardized method for applying DCFH to detect generation of ROS by NPs.

Cannabinoid 1 receptor promotes cardiac dysfunction, oxidative stress, inflammation, and fibrosis in diabetic cardiomyopathy.

Endocannabinoids and cannabinoid 1 (CB(1)) receptors have been implicated in cardiac dysfunction, inflammation, and cell death associated with various forms of shock, heart failure, and atherosclerosis, in addition to their recognized role in the development of various cardiovascular risk factors in obesity/metabolic syndrome and diabetes. In this study, we explored the role of CB(1) receptors in myocardial dysfunction, inflammation, oxidative/nitrative stress, cell death, and interrelated signaling pathways, using a mouse model of type 1 diabetic cardiomyopathy. Diabetic cardiomyopathy was characterized by increased myocardial endocannabinoid anandamide levels, oxidative/nitrative stress, activation of p38/Jun NH(2)-terminal kinase (JNK) mitogen-activated protein kinases (MAPKs), enhanced inflammation (tumor necrosis factor-α, interleukin-1β, cyclooxygenase 2, intracellular adhesion molecule 1, and vascular cell adhesion molecule 1), increased expression of CB(1), advanced glycation end product (AGE) and angiotensin II type 1 receptors (receptor for advanced glycation end product [RAGE], angiotensin II receptor type 1 [AT(1)R]), p47(phox) NADPH oxidase subunit, β-myosin heavy chain isozyme switch, accumulation of AGE, fibrosis, and decreased expression of sarcoplasmic/endoplasmic reticulum Ca(2+)-ATPase (SERCA2a). Pharmacological inhibition or genetic deletion of CB(1) receptors attenuated the diabetes-induced cardiac dysfunction and the above-mentioned pathological alterations. Activation of CB(1) receptors by endocannabinoids may play an important role in the pathogenesis of diabetic cardiomyopathy by facilitating MAPK activation, AT(1)R expression/signaling, AGE accumulation, oxidative/nitrative stress, inflammation, and fibrosis. Conversely, CB(1) receptor inhibition may be beneficial in the treatment of diabetic cardiovascular complications.

Actitudes y creencias en los estudiantes del Campus de Bellvitge sobre las medidas higiénicas y las precauciones estándar

Introducción: En los últimos años se han producido avances importantes en el campo de la autoprotección ante las infecciones. Por parte de los docentes que imparten temas relacionados con el campo de la autoprotección del personal de salud y la higiene en las diferentes carreras de ciencias de la salud en el Campus de Bellvitge (CB) de la Universitat de Barcelona (UB) se detectó un desconocimiento y/o confusión de materias relacionadas con la seguridad del paciente y de los profesionales. Objetivo: Mejorar la preparación de los estudiantes de Ciencias de la Salud del CB de la UB en relación con las medidas higiénicas básicas. Material y Método: Estudio de campo, causal y comparativo. Se estableció un grupo formado por los profesores implicados en estas materias para unificar criterios y llevar a cabo un análisis de la situación exhaustiva. Se hicieron entrevistas semiestructuradas a dos estudiantes de cada carrera que fueron registradas y transcritas textualmente por el análisis posterior (Atlas/Ti19). Resultados y Discusión: Del análisis de los discursos surgieron cuatro categorías: 1) El aprendizaje; los estudiantes destacan la falta de consenso entre profesores y la enseñanza demasiado teórica. 2) La experiencia laboral; los estudiantes destacan la divergencia entre la teoría y la práctica. 3) Los argumentos personales; los estudiantes relacionan las medidas con situaciones de excepcionalidad (técnicas muy invasivas) está omnipresente el discurso de"no hacer daño al paciente". 4) Las características propias de las diferentes carreras universitarias; hemos registrado percepciones de los riesgos diferentes entre ellas. Conclusiones: La formación en medidas preventivas y de higiene está contemplada en los planes de estudio como una formación puntual y no lineal en las carreras. Los estudiantes la perciben como una formación necesaria dado su grado de inexperiencia, pero que no es necesaria cuando se adquieren ciertas destrezas. Por lo que respeta a los centros de salud como a los hospitales no hay un consenso en la obligatoriedad que todos los profesionales adopten estas medidas a la práctica diaria y algunas veces los criterios entre teoría y práctica son divergentes.

Actitudes y creencias en los estudiantes del Campus de Bellvitge sobre las medidas higiénicas y las precauciones estándar

Introducción: En los últimos años se han producido avances importantes en el campo de la autoprotección ante las infecciones. Por parte de los docentes que imparten temas relacionados con el campo de la autoprotección del personal de salud y la higiene en las diferentes carreras de ciencias de la salud en el Campus de Bellvitge (CB) de la Universitat de Barcelona (UB) se detectó un desconocimiento y/o confusión de materias relacionadas con la seguridad del paciente y de los profesionales. Objetivo: Mejorar la preparación de los estudiantes de Ciencias de la Salud del CB de la UB en relación con las medidas higiénicas básicas. Material y Método: Estudio de campo, causal y comparativo. Se estableció un grupo formado por los profesores implicados en estas materias para unificar criterios y llevar a cabo un análisis de la situación exhaustiva. Se hicieron entrevistas semiestructuradas a dos estudiantes de cada carrera que fueron registradas y transcritas textualmente por el análisis posterior (Atlas/Ti19). Resultados y Discusión: Del análisis de los discursos surgieron cuatro categorías: 1) El aprendizaje; los estudiantes destacan la falta de consenso entre profesores y la enseñanza demasiado teórica. 2) La experiencia laboral; los estudiantes destacan la divergencia entre la teoría y la práctica. 3) Los argumentos personales; los estudiantes relacionan las medidas con situaciones de excepcionalidad (técnicas muy invasivas) está omnipresente el discurso de"no hacer daño al paciente". 4) Las características propias de las diferentes carreras universitarias; hemos registrado percepciones de los riesgos diferentes entre ellas. Conclusiones: La formación en medidas preventivas y de higiene está contemplada en los planes de estudio como una formación puntual y no lineal en las carreras. Los estudiantes la perciben como una formación necesaria dado su grado de inexperiencia, pero que no es necesaria cuando se adquieren ciertas destrezas. Por lo que respeta a los centros de salud como a los hospitales no hay un consenso en la obligatoriedad que todos los profesionales adopten estas medidas a la práctica diaria y algunas veces los criterios entre teoría y práctica son divergentes.

Actitudes y creencias en los estudiantes del Campus de Bellvitge sobre las medidas higiénicas y las precauciones estándar

Introducción: En los últimos años se han producido avances importantes en el campo de la autoprotección ante las infecciones. Por parte de los docentes que imparten temas relacionados con el campo de la autoprotección del personal de salud y la higiene en las diferentes carreras de ciencias de la salud en el Campus de Bellvitge (CB) de la Universitat de Barcelona (UB) se detectó un desconocimiento y/o confusión de materias relacionadas con la seguridad del paciente y de los profesionales. Objetivo: Mejorar la preparación de los estudiantes de Ciencias de la Salud del CB de la UB en relación con las medidas higiénicas básicas. Material y Método: Estudio de campo, causal y comparativo. Se estableció un grupo formado por los profesores implicados en estas materias para unificar criterios y llevar a cabo un análisis de la situación exhaustiva. Se hicieron entrevistas semiestructuradas a dos estudiantes de cada carrera que fueron registradas y transcritas textualmente por el análisis posterior (Atlas/Ti19). Resultados y Discusión: Del análisis de los discursos surgieron cuatro categorías: 1) El aprendizaje; los estudiantes destacan la falta de consenso entre profesores y la enseñanza demasiado teórica. 2) La experiencia laboral; los estudiantes destacan la divergencia entre la teoría y la práctica. 3) Los argumentos personales; los estudiantes relacionan las medidas con situaciones de excepcionalidad (técnicas muy invasivas) está omnipresente el discurso de"no hacer daño al paciente". 4) Las características propias de las diferentes carreras universitarias; hemos registrado percepciones de los riesgos diferentes entre ellas. Conclusiones: La formación en medidas preventivas y de higiene está contemplada en los planes de estudio como una formación puntual y no lineal en las carreras. Los estudiantes la perciben como una formación necesaria dado su grado de inexperiencia, pero que no es necesaria cuando se adquieren ciertas destrezas. Por lo que respeta a los centros de salud como a los hospitales no hay un consenso en la obligatoriedad que todos los profesionales adopten estas medidas a la práctica diaria y algunas veces los criterios entre teoría y práctica son divergentes.

Actitudes y creencias en los estudiantes del Campus de Bellvitge sobre las medidas higiénicas y las precauciones estándar

Introducción: En los últimos años se han producido avances importantes en el campo de la autoprotección ante las infecciones. Por parte de los docentes que imparten temas relacionados con el campo de la autoprotección del personal de salud y la higiene en las diferentes carreras de ciencias de la salud en el Campus de Bellvitge (CB) de la Universitat de Barcelona (UB) se detectó un desconocimiento y/o confusión de materias relacionadas con la seguridad del paciente y de los profesionales. Objetivo: Mejorar la preparación de los estudiantes de Ciencias de la Salud del CB de la UB en relación con las medidas higiénicas básicas. Material y Método: Estudio de campo, causal y comparativo. Se estableció un grupo formado por los profesores implicados en estas materias para unificar criterios y llevar a cabo un análisis de la situación exhaustiva. Se hicieron entrevistas semiestructuradas a dos estudiantes de cada carrera que fueron registradas y transcritas textualmente por el análisis posterior (Atlas/Ti19). Resultados y Discusión: Del análisis de los discursos surgieron cuatro categorías: 1) El aprendizaje; los estudiantes destacan la falta de consenso entre profesores y la enseñanza demasiado teórica. 2) La experiencia laboral; los estudiantes destacan la divergencia entre la teoría y la práctica. 3) Los argumentos personales; los estudiantes relacionan las medidas con situaciones de excepcionalidad (técnicas muy invasivas) está omnipresente el discurso de"no hacer daño al paciente". 4) Las características propias de las diferentes carreras universitarias; hemos registrado percepciones de los riesgos diferentes entre ellas. Conclusiones: La formación en medidas preventivas y de higiene está contemplada en los planes de estudio como una formación puntual y no lineal en las carreras. Los estudiantes la perciben como una formación necesaria dado su grado de inexperiencia, pero que no es necesaria cuando se adquieren ciertas destrezas. Por lo que respeta a los centros de salud como a los hospitales no hay un consenso en la obligatoriedad que todos los profesionales adopten estas medidas a la práctica diaria y algunas veces los criterios entre teoría y práctica son divergentes.

Biofiltração da água e tipos de substrato na larvicultura do pacamã

O objetivo deste trabalho foi avaliar o uso de diferentes biofiltros e substratos na qualidade da água e no desempenho de larvas de Lophiosilurus alexandri. Os tratamentos usados foram: sistema sem biofiltro (SB); biofiltro interno ao tanque com substrato de cascalho de diâmetro médio de 1,6 cm (CMe); biofiltro interno ao tanque com cascalho de diâmetro médio de 2,1 cm (CMa); biofiltro interno ao tanque com substrato constituído de uma mistura de 70% de brita (diâmetro médio de 1,3 cm) e 30% de concha (diâmetro médio de 1,1 cm) (CB); e sistema fechado (SF) com biofiltro externo aos tanques, com substrato de brita e concha. O experimento foi realizado em delineamento inteiramente casualizado, com cinco tratamentos e cinco repetições, durante 16 dias. Para íon amônio, nitrito, nitrato e ortofosfato, houve interação entre sistemas x dias de cultivo. Os sistemas SF, CMe e CB registraram menores concentrações de íon amônio e nitrito; o sistema SB, maiores concentrações de íon amônio e menores concentrações de nitrato; o SF, concentrações de ortofosfato superiores. A sobrevivência de L. alexandri foi inferior no SF. O crescimento não foi afetado pelos diferentes sistemas. Os biofiltros melhoraram a qualidade da água quanto aos compostos nitrogenados emfunção do tipo de substrato.

Leaf development and growth of selected sugarcane clones in a subtropical environment

The objective of this work was to compare phyllochron and leaf area on individual stalks of selected sugarcane (Saccharum officinarum) clones grown in a subtropical environment. A two-year field experiment was carried out in Santa Maria, RS, Brazil, during the 2007/2008 and 2008/2009 growing seasons. Three sugarcane clones were used: IAC 822045 (early), SP 711406 (median) and CB 4176 (late), in a complete randomized block design, with four replications. Expanded leaf and total leaf (tips) number were determined, and expanded leaf area was measured. The phyllochron (ºC day leaf-1) based on expanded and tip leaf number was estimated, using 10ºC as base temperature. Allometric relationships between individual area and number of expanded leaves were fitted. Phyllochron was analysed as a four-factor experiment: clone, growing season, phyllochron phase, and phyllochron type. The early clone had the greatest potential for growing in a subtropical climate because of higher leaf output and leaf area.

Cannabidiol protects against hepatic ischemia/reperfusion injury by attenuating inflammatory signaling and response, oxidative/nitrative stress, and cell death.

Ischemia/reperfusion (I/R) is a pivotal mechanism of liver damage after liver transplantation or hepatic surgery. We have investigated the effects of cannabidiol (CBD), the nonpsychotropic constituent of marijuana, in a mouse model of hepatic I/R injury. I/R triggered time-dependent increases/changes in markers of liver injury (serum transaminases), hepatic oxidative/nitrative stress (4-hydroxy-2-nonenal, nitrotyrosine content/staining, and gp91phox and inducible nitric oxide synthase mRNA), mitochondrial dysfunction (decreased complex I activity), inflammation (tumor necrosis factor α (TNF-α), cyclooxygenase 2, macrophage inflammatory protein-1α/2, intercellular adhesion molecule 1 mRNA levels; tissue neutrophil infiltration; nuclear factor κB (NF-κB) activation), stress signaling (p38MAPK and JNK), and cell death (DNA fragmentation, PARP activity, and TUNEL). CBD significantly reduced the extent of liver inflammation, oxidative/nitrative stress, and cell death and also attenuated the bacterial endotoxin-triggered NF-κB activation and TNF-α production in isolated Kupffer cells, likewise the adhesion molecule expression in primary human liver sinusoidal endothelial cells stimulated with TNF-α and attachment of human neutrophils to the activated endothelium. These protective effects were preserved in CB(2) knockout mice and were not prevented by CB(1/2) antagonists in vitro. Thus, CBD may represent a novel, protective strategy against I/R injury by attenuating key inflammatory pathways and oxidative/nitrative tissue injury, independent of classical CB(1/2) receptors.

Major mite allergen Der f 1 concentration is reduced in buildings with improved energy performance.

BACKGROUND: Environmental conditions play a crucial role in mite growth, and optimal environmental control is key in the prevention of airway inflammation in chronic allergic rhinoconjunctivitis or asthma. OBJECTIVE: To evaluate the relationship between building energy performance and indoor mite allergen concentration in a cross-sectional study. METHODS: Major allergen concentration (Der f 1, Der p 1, mite group 2, Fel d 1 and Bla g 2) was determined by quantitative dot blot analysis from mattress and carpet dust samples in five buildings designed for low energy use (LEB) and in six control buildings (CB). Inhabitants had received 4 weeks prior to mite measurement a personal validated questionnaire related to the perceived state of health and comfort of living. RESULTS: Cumulative mite allergen concentration (with Der f 1 as the major contributor) was significantly lower in LEB as compared with CB both in mattresses and in carpets. In contrast, the two categories of buildings did not differ in Bla g 2 and Fel d 1 concentration, in the amount of dust and airborne mould collected. Whereas temperature was higher in LEB, relative humidity was significantly lower than in CB. Perceived overall comfort was better in LEB. CONCLUSIONS: Major mite allergen Der f 1 preferentially accumulates in buildings not specifically designed for low energy use, reaching levels at risk for sensitization. We hypothesize that controlled mechanical ventilation present in all audited LEB may favour lower air humidity and hence lower mite growth and allergen concentration, while preserving optimal perceived comfort.

Intracellular targeting of GLUT4 in transfected insulinoma cells: evidence for association with constitutively recycling vesicles distinct from synaptophysin and insulin vesicles.

In adipocytes and muscle cells, the GLUT4 glucose transporter isoform is present in intracellular vesicles which continuously recycle between an intracytoplasmic location and the plasma membrane. It is not clear whether the GLUT4-vesicles represent a specific kind of vesicle or resemble typical secretory granules or synaptic-like microvesicles. To approach this question, we expressed GLUT4 in the beta cell line RINm5F and determined its intracellular localization by subcellular fractionation and by immunofluorescence and immunoelectron microscopy. GLUT4 was not found in insulin granules but was associated with a subpopulation of smooth-surface vesicles present in the trans-Golgi region and in vesicular structures adjacent to the plasma membrane. In the trans-Golgi region, GLUT4 did not colocalize with synaptophysin or TGN38. Incubation of the cells with horseradish peroxidase (HRP) led to colocalization of HRP and GLUT4 in some endosomal structures adjacent to the plasma membrane and in occasional trans-Golgi region vesicles. When cells were incubated in the presence of Bafilomycin A, analysis by confocal microscopy revealed GLUT4 in numerous large spots present throughout the cytoplasm, many of which costained for TGN38 and synaptophysin. By immunoelectron microscopy, numerous endosomes were observed which stained strongly for GLUT4. Together our data demonstrate that ectopic expression of GLUT4 in insulinoma cells reveals the presence of a subset of vesicular structures distinct from synaptic-like vesicles and insulin secretory granules. Furthermore, they indicate that GLUT4 constitutively recycles between the plasma membrane and its intracellular location by an endocytic route also taken by TGN38 and synaptophysin.