The Differential Requirement of Albumin and Sodium Citrate on the Development of In Vitro Produced Bovine Embryos

In vitro culture for bovine embryos is largely not optimal. Our study was to determine the components necessary for early embryo development. In experiment 1, IVF embryos were cultured for two days in CR1aa medium containing sodium citrate and BSA from two sources (Sigma vs. ICPbio), subsequently for additional five days with cumulus monolayer in 10% FBS CR1aa. We found that supplementation with both Sigma-BSA and sodium citrate significantly increased total blastocyst (BL) development compared with the ICPbio-BSA groups (37% vs. 19-21%), and enhanced the total number of high quality (C1 BL, IETS standard) blastocysts (26% vs. 11-17%) (P < 0.05). In experiment 2 with serum free and/or somatic free culture, we found that CR1aa culture can support a comparable embryo development with a supplement of Sigma BSA. The addition of sodium citrate did not increase blastocyst development in either the Sigma-BSA or the ICPbio-BSA groups. An inferior blastocyst development occurring in ICPbio-BSA culture (1-3%) could be rescued by culture in CRlaa supplemented with 10% FBS (29%), more importantly, by culture in CR1aa with a replacement of Sigma BSA (24%) (P <0.05). C1 blastocysts rescued by FBS and Sigma BSA in ICPbio-BSA culture possessed indistinguishable morphology to embryos developed in a Sigma-BSA, FBS and somatic co-culture system, showing similar cell number/blastocyst (129-180, P > 0.05). Our study found a beneficial effect of sodium citrate and BSA on the in vitro development of bovine IVF embryos during co-culture. We also determined that differential embryotrophic factor(s) contained in BSA and serum, probably not sodium citrate, is necessary for promoting competent morula and blastocyst development in cattle.

Plan FINES 2S : Contribuciones y limitaciones al logro de la inclusión en el nivel secundario de jóvenes y adultos

La ponencia presenta avances preliminares de la investigación en curso: ?Relaciones y trayectorias en contexto. La producción de políticas de Educación de Jóvenes y Adultos. El Plan FinEs 2 Secundaria Trayectos educativos en la Provincia de Buenos Aires 2009-2014?, realizada en el marco de la Universidad Pedagógica de la Provincia de Buenos Aires (UNIPE). Este trabajo dará cuenta de la perspectiva de los docentes y estudiantes acerca de las contribuciones y limitaciones del Plan FinEs 2S al cumplimiento de la obligatoriedad en el nivel secundario y de qué modo estos actores se expresan sobre las posibilidades y las restricciones para la inclusión en este nivel educativo a partir del formato que se propone. Se considera relevante analizar esta política con respecto a las posibilidades para fortalecer la oferta del nivel secundario desde la Educación de Jóvenes y Adultos (EDJA), considerando la masividad que está teniendo el Plan, las innovaciones que propone (desde los niveles pedagógico, curricular e institucional), y las condiciones que plantea su implementación, así como también por las discusiones que ha suscitado en la opinión pública. Desde los planteos propuestos se espera aportar a este debate

Plan FINES 2S : Contribuciones y limitaciones al logro de la inclusión en el nivel secundario de jóvenes y adultos

La ponencia presenta avances preliminares de la investigación en curso: ?Relaciones y trayectorias en contexto. La producción de políticas de Educación de Jóvenes y Adultos. El Plan FinEs 2 Secundaria Trayectos educativos en la Provincia de Buenos Aires 2009-2014?, realizada en el marco de la Universidad Pedagógica de la Provincia de Buenos Aires (UNIPE). Este trabajo dará cuenta de la perspectiva de los docentes y estudiantes acerca de las contribuciones y limitaciones del Plan FinEs 2S al cumplimiento de la obligatoriedad en el nivel secundario y de qué modo estos actores se expresan sobre las posibilidades y las restricciones para la inclusión en este nivel educativo a partir del formato que se propone. Se considera relevante analizar esta política con respecto a las posibilidades para fortalecer la oferta del nivel secundario desde la Educación de Jóvenes y Adultos (EDJA), considerando la masividad que está teniendo el Plan, las innovaciones que propone (desde los niveles pedagógico, curricular e institucional), y las condiciones que plantea su implementación, así como también por las discusiones que ha suscitado en la opinión pública. Desde los planteos propuestos se espera aportar a este debate

Plan FINES 2S : Contribuciones y limitaciones al logro de la inclusión en el nivel secundario de jóvenes y adultos

La ponencia presenta avances preliminares de la investigación en curso: ?Relaciones y trayectorias en contexto. La producción de políticas de Educación de Jóvenes y Adultos. El Plan FinEs 2 Secundaria Trayectos educativos en la Provincia de Buenos Aires 2009-2014?, realizada en el marco de la Universidad Pedagógica de la Provincia de Buenos Aires (UNIPE). Este trabajo dará cuenta de la perspectiva de los docentes y estudiantes acerca de las contribuciones y limitaciones del Plan FinEs 2S al cumplimiento de la obligatoriedad en el nivel secundario y de qué modo estos actores se expresan sobre las posibilidades y las restricciones para la inclusión en este nivel educativo a partir del formato que se propone. Se considera relevante analizar esta política con respecto a las posibilidades para fortalecer la oferta del nivel secundario desde la Educación de Jóvenes y Adultos (EDJA), considerando la masividad que está teniendo el Plan, las innovaciones que propone (desde los niveles pedagógico, curricular e institucional), y las condiciones que plantea su implementación, así como también por las discusiones que ha suscitado en la opinión pública. Desde los planteos propuestos se espera aportar a este debate

Enhanced methionine levels and increased nutritive value of seeds of transgenic lupins (Lupinus angustifolius L.) expressing a sunflower seed albumin gene

With the aim of improving the nutritive value of an important grain legume crop, a chimeric gene specifying seed-specific expression of a sulfur-rich, sunflower seed albumin was stably transformed into narrow-leafed lupin (Lupinus angustifolius L.). Sunflower seed albumin accounted for 5% of extractable seed protein in a line containing a single tandem insertion of the transferred DNA. The transgenic seeds contained less sulfate and more total amino acid sulfur than the nontransgenic parent line. This was associated with a 94% increase in methionine content and a 12% reduction in cysteine content. There was no statistically significant change in other amino acids or in total nitrogen or total sulfur contents of the seeds. In feeding trials with rats, the transgenic seeds gave statistically significant increases in live weight gain, true protein digestibility, biological value, and net protein utilization, compared with wild-type seeds. These findings demonstrate the feasibility of using genetic engineering to improve the nutritive value of grain crops.

Energy transfer to a proton-transfer fluorescence probe: Tryptophan to a flavonol in human serum albumin

A protein fluorescence probe system, coupling excited-state intermolecular Förster energy transfer and intramolecular proton transfer (PT), is presented. As an energy donor for this system, we used tryptophan, which transfers its excitation energy to 3-hydroxyflavone (3-HF) as a flavonol prototype, an acceptor exhibiting excited-state intramolecular PT. We demonstrate such a coupling in human serum albumin–3-HF complexes, excited via the single intrinsic tryptophan (Trp-214). Besides the PT tautomer fluorescence (λmax = 526 nm), these protein–probe complexes exhibit a 3-HF anion emission (λmax = 500 nm). Analysis of spectroscopic data leads to the conclusion that two binding sites are involved in the human serum albumin–3-HF interaction. The 3-HF molecule bound in the higher affinity binding site, located in the IIIA subdomain, has the association constant (k1) of 7.2 × 105 M−1 and predominantly exists as an anion. The lower affinity site (k2 = 2.5 × 105 M−1), situated in the IIA subdomain, is occupied by the neutral form of 3-HF (normal tautomer). Since Trp-214 is situated in the immediate vicinity of the 3-HF normal tautomer bound in the IIA subdomain, the intermolecular energy transfer for this donor/acceptor pair has a 100% efficiency and is followed by the PT tautomer fluorescence. Intermolecular energy transfer from the Trp-214 to the 3-HF anion bound in the IIIA subdomain is less efficient and has the rate of 1.61 × 108 s−1, thus giving for the donor/acceptor distance a value of 25.5 Å.

Photochemical protease: Site-specific photocleavage of hen egg lysozyme and bovine serum albumin

Site-specific photocleavage of hen egg lysozyme and bovine serum albumin (BSA) by N-(l-phenylalanine)-4-(1-pyrene)butyramide (Py-Phe) is reported. Py-Phe binds to lysozyme and BSA with binding constants 2.2 ± 0.3 × 105 M−1 and 6.5 ± 0.4 × 107 M−1, respectively. Photocleavage of lysozyme and BSA was achieved with high specificity when a mixture of protein, Py-Phe, and an electron acceptor, cobalt(III) hexammine (CoHA), was irradiated at 344 nm. Quantum yields of photocleavage of lysozyme and BSA were 0.26 and 0.0021, respectively. No protein cleavage was observed in the absence of Py-Phe, CoHA, or light. N-terminal sequencing of the protein fragments indicated a single cleavage site of lysozyme between Trp-108 and Val-109, whereas the cleavage of BSA was found to be between Leu-346 and Arg-347. Laser flash photolysis studies of a mixture of protein, Py-Phe, and CoHA showed a strong transient with absorption centered at ≈460 nm, corresponding to pyrene cation radical. Quenching of the singlet excited state of Py-Phe by CoHA followed by the reaction of the resulting pyrenyl cation radical with the protein backbone may be responsible for the protein cleavage. The high specificity of photocleavage may be valuable in targeting specific sites of proteins with small molecules.

Human albumin administration in critically ill patients: systematic review of randomised controlled trials

Objective: To quantify effect on mortality of administering human albumin or plasma protein fraction during management of critically ill patients.