Ent-kaurane diterpenoids and other constituents from the stem of Xylopia laevigata (Annonaceae)

Phytochemical investigation of the hexane extract from the stem of Xylopia laevigata led to the isolation of the ent-kaurane diterpenoids, ent-kaur-16-en-19-oic acid, 4-epi-kaurenic acid, ent-16β-hydroxy-17-acetoxy-kauran-19-al, ent-3β-hydroxy-kaur-16-en-19-oic acid, and ent-16β,17-dihydroxy-kauran-19-oic acid, as well as spathulenol and a mixture of β-sitosterol, stigmasterol and campesterol. The identification of the compounds was performed on the basis of spectrometric methods including GC-MS, IR, and 1D and 2D NMR. Potent larvicidal activity against Aedes aegypti larvae with LC50 of 62.7 µg mL-1 was found for ent-3β-hydroxy-kaur-16-en-19-oic acid. This compound also showed significant antifungal activity against Candida glabrata and Candida dubliniensis with MIC values of 62.5 µg mL-1.

Antileishmanial, antimalarial and antimicrobial activities of the extract and isolated compounds from Austroplenckia populnea (Celastraceae)

Austroplenckia populnea (Celastraceae), known as ""marmelinho do campo"", is used in Brazilian folk medicine as antimicrobial, anti-inflammatory, and antitumoural agent. The aim of the present work was to evaluate the antimicrobial. antileishmanial and antimalarial activities of the crude hydroalcoholic extract of A. populnea (CHE) and some of its isolated compounds. The phytochemical study of the CHE was carried Out affording the isolation of methyl populnoate (1), populnoic acid (2), and stigmast-5-en-3-O-beta-(D-glucopyranoside) (3). This is the first time that the presence of compound 3 in A. populnea is reported. The results showed that the CHE presents antifungal and antibacterial activities, especially against Candida glabrata and Candida albicans, for which the CHE showed IC(50) values of 0.7 mu g mL(-1) and 5.5 mu g mL(-1), respectively, while amphotericin B showed an IC(50) value of 0.1 mu g mL(-1) against both microorganisms. Compounds 1-3 were inactive against all tested microorganisms. In the antileishmanial activity test against Leishmania donovani, the CHE showed an IC(50) value of 52 mu g mL(-1), while compounds 2 and 3 displayed an IC(50) value of 18 mu g mL(-1). In the antimalarial assay against Plasmodium falciparum (D6 and W2 clones), it was observed that all evaluated samples were inactive. In order to compare the effect on the parasites with the toxicity to mammalian cells, the cytotoxicity activity of the isolated compounds was evaluated against Vero cells, showing that all evaluated samples exhibited no cytotoxicity at the maximum dose tested.

Muscle-specific regulation of tropomyosin gene expression and myofibrillogenesis differs among muscle systems examined at metamorphosis of the gastropod Haliotis rufescens

The spatial and temporal association of muscle-specific tropomyosin gene expression, and myofibril assembly and degradation during metamorphosis is analyzed in the gastropod mollusc. Haliotis rufescens. Metamorphosis of tile planktonic larva to the benthic juvenile includes rearrangement and atrophy of specific larval muscles, and biogenesis of the new juvenile muscle system. The major muscle of the larva - the larval retractor muscle - reorganizes at metamorphosis, with two suites of cells having different fates. The ventral cells degenerate, while the dorsal cells become part of the developing juvenile mantle musculature. Prior to these changes in myofibrillar structure, tropomyosin mRNA prevalence declines until undetectable in the ventral cells, while increasing markedly in the dorsal cells. In the foot muscle and right shell muscle, tropomyosin mRNA levels remain relatively stable, even trough myofibril content increases. In a population of median mesoderm cells destined to form de novo the major muscle of the juvenile and adult (the columellar muscle), tropomyosin expression is initiated at 45 h after induction of metamorphosis. Myofibrillar filamentous actin is not detected in these cells until about 7 days later. Given that patterns of tropomyosin mRNA accumulation in relation to myofibril assembly and disassembly differ significantly among the four major muscle systems examined, we suggest that different regulatory mechanisms, probably operating at both transcriptional and post-transcriptional levels, control the biogenesis and atrophy of different larval and postlarval muscles at metamorphosis.

Candida colonisation as a source for candidaemia

Candida spp. are important healthcare-associated pathogens. Identifying the source of infection is important for prevention and control strategies. The objective of this study was to evaluate candida colonisation sites as potential sources for candidaemia. Sixty-three consecutive patients with a positive blood culture for candida were included. Surveillance cultures were collected from urine, rectum, oropharynx, skin, intravascular catheter tip and skin around catheter. Molecular typing was performed when the same species of candida was isolated from blood and surveillance sites of a patient. C. albicans was associated with 42% of candidaemias, C. parapsilosis 33%, C. tropicalis 16% and C. guilliermondii, C. krusei, C. glabrata, C. holmii and C. metapsilosis were all 2% each. Six of 10 C. parapsilosis catheter tip isolates were indistinguishable from corresponding blood isolates (all in neonates). C. albicans isolates from blood were indistinguishable from corresponding gastrointestinal, tract isolates in 13 of 26 patients and from catheter tip isolates in two patients. In conclusion, the results suggest that gastrointestinal colonisation is the probable source of C. albicans candidaemia and C. parapsilosis is exogenous. (C) 2009 The Hospital, Infection Society. Published by Elsevier Ltd. All rights reserved.

Dual candidemia detected by nested polymerase chain reaction in two critically ill children

The use of improved microbiological procedures associated with molecular techniques has increased the identification of Candida bloodstream infections, even if the isolation of more than one species by culture methods remains uncommon. We report the cases of two children presenting with severe gastrointestinal disorders and other risk factors that contribute to Candida infections. In the first patient, C. albicans DNA was initially detected by a nested-amplification and C. tropicalis was found later during hospitalization, while blood cultures were persistently negative. In the second child, there was amplification of C. albicans and C. glabrata DNA in the same samples, but blood cultures yielded only C. albicans. Both patients received antifungal therapy but had unfavorable outcomes. These two cases illustrate that PCR was more successful than culture methods in detecting Candida in the bloodstream of high risk children, and was also able to detect the presence of more than one species in the same patient that might impact therapy when the fungi are resistant to azole compounds.

Genotypic variation in proanthocyanidin status in the Leucaena genus

The proanthocyanidin (PA) status of 116 accessions from the Leucaena genus representing 21 species, 6 subspecies, 3 varieties and 4 interspecific hybrids was evaluated under uniform environmental and experimental conditions at Redland Bay, Queensland, Australia in October 1997. The PA content of lyophilized youngest fully expanded leaves was measured spectrophotometrically by the butanol/HCl assay referenced to L. leucocephala ssp. glabrata standard PA and expressed as L. leucocephala ssp. glabrata PA equivalents (LLPAE). Considerable interspecific variation in PA concentration existed within the genus, ranging from 0-339 g LLPAE/kg dry matter (DM). Taxa including L. confertiflora, L. cuspidata, L. esculenta and L. greggii contained very high (> 180 g LLPAE/kg DM) PA concentrations. Similarly, many agronomically superior accessions from L. diversifolia, L. pallida and L. trichandra contained extremely high (up to 250 g LLPAE/kg DM) PA concentrations, although these taxa exhibited wide intraspecific variation in PA content offering the potential to select accessions with lower (120-160 g LLPAE/kg DM) PA content. Commercial cultivars of L. leucocephala ssp. glabrata, known to produce forage of superior quality, contained low amounts of PA (33-39 g LLPAE/kg DM). Artificial interspecific hybrids had PA contents intermediate to those of both parents, Lesser-known taxa. including L. collinsii, L. lanceolata, L. lempirana, L. macrophylla, L. magnifica, L. multicapitula, L. salvadorensis and L. trichodes, contained undetectable to low (0-36 g LLPAE/kg DM) quantities of PA and have potential as parents to breed interspecific hybrids of low PA status and superior forage quality. Extractable PA was the dominant PA component, accounting for 91% of total PA within the genus. Regression analysis of accession ranks from different experiments compared to these results indicated that genetic regulation of Leucaena spp. PA content was consistent (P < 0.01) under different edapho-climatic environments. The distribution of PA within the Leucaena genus did not concur with the predictions of various evolutionary and phylogenetic plant defence theories.

Susceptibilidade de Biomphalaria tenagophila (d'Orbigny, 1835), de Itajubá (MG), à infecção pela cepa "LE" de Schistosoma mansoni Sambon, 1907, de Belo Horizonte, MG (Brasil)

Infecções experimentais de descendentes de Biomphalaria tenagophila de Itajubá, MG (Brasil) foram realizadas utilizando-se a conhecida cepa "LE" de Schistosoma mansoni, isolada em Belo Horizonte. Como controle, utilizou-se B. glabrata de Belo Horizonte, MG. Em conseqüência, assinalou-se, pela primeira vez, a infecção de B. tenagophila de Itajubá, à cepa de S. mansoni adaptada à B. glabrata de Belo Horizonte. Isto é, ao final do experimento, 5 (3,3%) entre os 149 exemplares sobreviventes, infectaram-se. Face ao atual surto industrial da região, com grande aporte de migrantes, foi chamada a atenção para a necessidade de medidas profiláticas, em decorrência da possibilidade de instalação de foco da doença no Sul de Minas Gerais.

Colonização de Pomacea haustrum (Reeve, 1856) em localidade com esquistossomose mansoni: Baldim, MG (Brasil). (Prosobranchia, Pilidae)

Na localidade de Baldim, MG, Brasil, foram introduzidos, em agosto de 1972, 5.421 exemplares de Pomacea haustrum (Prosobranchia, Pilidae) em 5 córregos e 2 valas, nos quais predominavam Biomphalaria glabrata (Say, 1818) e, secundariamente, B. straminea (Dunker, 1848). Entre 1968 e 1971, os índices de infecção da espécie B. glabrata por Schistosoma mansoni oscilaram de 2,1% a 11,9%. Em nenhum momento foram capturados B. straminea liberando cercárias daquele trematódeo. Após a introdução do pilídeo, apenas uma única vez detectou-se 2 (0,8%) B. glabrata positivas. Observou-se decréscimo populacional de planorbineos e aumento de densidade de pomácea até 20,0 e 121,6 exemplares/m² em córregos e valas, respectivamente. A estimativa da densidade de F. haustrum foi feita através do método dos "quadrats". Foram coletados, de junho de 1968 a julho de 1972, 65,2% (1.526) dos planorbíneos. Porém, após a introdução do predador-competidor, foram registrados os seguintes dados: 1976, 15% (352); em 1977, 16,1% (377) e, em 1978, apenas 3,7% (87) do total dos exemplares capturados. As pomáceas, transferidas do ambiente lenítico (Sete Lagoas, MG), adaptaram-se às coleções lóticas de Baldim e foram capazes de substituir as populações originais de B. glabrata em vários biótopos, ou tornaram-se, pelo menos, dominantes, sem danos visíveis para os novos ecossistemas. Acredita-se que em outras situações análogas, Pomacea haustrum (Reeve, 1956) - e, por extensão, P. lineata (Spix, 1827), P. canaliculata (Lamark, 1822) e outras do mesmo táxon - poderão ser utilizadas, com sucesso, no controle biológico dos hospedeiros intermediários de Schistosoma mansoni.

Esquistossomose mansônica autóctone no Distrito Federal, Brasil

Sete casos autóctones de esquistossomose mansônica são descritos no Distrito Federal (Brasil). Todos os casos são de crianças cujas idades variavam de 3 a 13 anos e que habitavam área suburbana da cidade de Planaltina. Cinco destes casos pertencem a uma mesma família vivendo às margens de um criadouro de Biomphalaria glabrata onde foram encontrados dois caramujos infectados por Schistosoma mansoni em 229 examinados.

Suscetibilidade de Biomphalaria straminea (Dunker, 1848) de Piripiri (Piauí, Brasil) a duas cepas de Schistosoma mansoni Sambon, 1907

A suscetibilidade de exemplares de B. straminea descendentes de uma amostra originária do município de Piripiri (Piauí, Brasil), foi testada face a duas cepas de Schistosoma mansoni: "LE" (Belo Horizonte) e "SJ" (São José dos Campos). Verificou-se que a cepa "SJ" infectou 12,5 (8) dos exemplares sobreviventes de B. straminea e 63,6% (14) de B. glabrata usadas como controle. Quando exposta à cepa "LE" do trematódeo, B. straminea mostrou-se refratária, enquanto 84,0% (42) dos exemplares de B. glabrata utilizadas como controle encontravam-se positivas para o S. mansoni. Foram discutidos aspectos relacionados a suscetibilidade de B. straminea e a importância dos resultados obtidos.

Ação inibidora de termofosfato magnesiano sobre a fecundidade de planorbídeos e seu possível significado no controle da esquistossomose mansoni

A eficácia de termofosfato magnesiano (fertilizante e corretivo do solo) na alimentação de planorbídeos, em laboratório, foi testada ao longo de cinco semanas, verificando-se o crescimento da concha de populações experimentais de Bimphalaria glabrata (Say, 1818) e Helisoma duryi (Wetherby, 1879). Reversamente observou-se que aquele produto mineral bloqueou a oviposição de ambas as espécies, a partir da segunda semana do experimento, quando proporcionado, isoladamente ou associado, a latoso ou a folhas de alface. Em conseqüência, supõe-se que sua ampla utilização nas novas áreas de cultivo, obtidas através de métodos modernos de irrigação, poderá, adicionalmente - ao ser carreado pelas chuvas, para ecossistemas lênticos ou lóticos - reduzir as populações pioneiras de diferentes espécies de Bimphalaria constituindo-se útil meio de controle da esquistossomose mansoni, em zonas rurais. Ademais, poderá ser eficaz no controle dos hospedeiros intermediários de Schistosoma mansoni que, usualmente, se estabelecem em lagoas de criação de peixes - cuja multiplicação, em áreas tropicais, vem sendo incentivada, quer como atividade econômica alternativa para o pequeno proprietário rural quer como exigência de necessidade nutricional das comunidades humanas mais pobres. Supõe-se, ainda, que o material testado poderá controlar populações de limneídeos, hospedeiros intermediários de Fasciola hepatica. São sugeridos testes de campo que possam efetivamente comprovar a hipótese levantada, e também estudos destinados ao conhecimento do mecanismo de ação do elemento magnésio no bloqueio da fertilidade de moluscos. Salienta-se a necessidade de pesquisas especiais sobre o efeito de diferentes concentrações de magnésio em ovos e formas juvenís de planorbídeos, bem como sobre miracídios e cercárias (intra-caramujos e livre-natantes) de trematódeos.

Diagnóstico da esquistossomose mansônica mediante técnica de imunofluorescência com esporocistos em tecidos de planorbídeos

Propõe-se uma técnica de imunofluorescência para diagnóstico da esquistossomose mansônica, adotando-se tecidos de Biomphalaria glabrata contendo esporocistos secundários de Schistosoma mansoni. A reação de imunofluorescência indireta é executada sobre cortes histológicos preparados por inclusão em parafina.

Ocorrência de linhagens humana e silvestre de Schistosoma mansoni, na pré-amazônia: I - estudo em moluscos

Foram isoladas na região da Baixada Maranhense (Brasil), linhagens humana (H) e silvestre(S) de Schistosoma mansoni a partir de miracídios eclodidos de ovos encontrados em fezes de doentes humanos autóctones da Região e de fígados de roedores silvestres naturalmente infectados. Biomphalaria glabrata, descentes de caramujos coletados no campo, foram expostos, isoladamente, aos miracídios H e S, mantidos isolados em moluscário e observados durante 100 dias. Moluscos normais foram mantidos nas mesmas condições de ambiente em que foram submetidos os infectados e tomados como controle da experiência. Foram anotados os indices de infecção dos moluscos, as datas da eliminação de cercárias, quantidade de larvas eliminadas e mortalidade dos moluscos. Os dados sugeriram melhor adaptação do esquistossomo da linhagem H à B. glabrata. A linhagem S, por sua vez, foi três vezes mais virulenta do que a linhagem H. Estes dados foram comparados com os encontrados na literatura especializada e verificado diversidades nos comportamentos parasitológicos das linhagens em estudo, quando comparados com os encontrados nas linhagens H e S oriundas do Vale do Rio Paraíba do Sul, no Estado de São Paulo (Brasil).

Controle biológico: Pomacea haustrum Reeve, 1856 (Mollusca, pilidae) sobre planorbíneos, em laboratório

Foi acompanhado em laboratório o controle de planorbíneos (Biomphalaria straminea Dunker, 1848; B. tenagophila Orbigny, 1835 e B. glabrata Say, 1818), hospedeiros intermediários da esquistossomose mansoni, através da predação de suas desovas pelo pilídeo Pomacea haustrum Reeve, 1856. De 829 desovas ovipostas por B. straminea, 203 (24,5%) foram expostas a 10 exemplares de P. haustrum; destas, 200 (98,3%) foram predadas. De 892 desovas ovipostas por B. tenagophia, 201 (22,5%) foram expostas a 10 exemplares de P. haustrum; destas, 194 (97,0%) foram predadas. De 1.300 desovas ovipostas por B. glabrata, 657 (50,5%) foram expostas a 10 exemplares de P. haustrum sendo totalmente predadas. Paralelamente, procurou-se observar as possíveis interações ocorridas entre pomáceas e planorbíneos quando da coabitação do mesmo aquário.

Importância epidemiológica de alguns animais silvestres na esquistossomose mansônica

Com o intuito de averiguar a importância de alguns roedores como possíveis reservatórios do S. mansoni, na ausência do homem parasitado, foi realizada pesquisa, visando contribuir para o esclarecimento de aspectos ligados à cadeia epidemiológica da esquistossomose, bem como conhecer alguns parâmetros da biologia de certos roedores, em seu habitat semi-natural. O experimento foi realizado num viveiro de 952 m², no município de Taubaté, São Paulo (Brasil), numa área endêmica de esquistossomose mansônica humana, e teve a duração de três anos e seis meses (agosto de 1973 a dezembro de 1976). Foram utilizados como hospedeiros definitivos, Holochilus brasiliensis leucogaster, Zygodontomys lasiurus, Oryzomys nigripes eliurus e Cavia aperea aperea; como hospeideiro intermediário, Biomphalaria tenagophila e posteriormente B. glabrata. Entre agosto de 1973 e janeiro de 1976, não houve encontro de B. tenagophila eliminando cercárias de S. mansoni; não se verificou, também, infecção natural de roedores. Em agosto de 1975, houve introdução acidental de desovas da B. glabrata, cujos adultos, em 1976, apresentaram infecção por S. mansoni em três ocasiões, com índices de 2,0; 1,6 e 0,8%. No mesmo ano de 1976, dois Holochilus, nascidos no Viveiro, eliminaram ovos viáveis de S. mansoni. Foi possível obter dados de 41 H. b. leucogaster, 28 introduzidos e 14 nascidos no local. O exemplar que sobreviveu mais tempo completou 346 dias. Os animais nascidos no Viveiro e capturados pela primeira vez pesavam, em média, 20 a 50 g. Notou-se que o peso corporal aumentou com o tempo e parece não estacionar até a morte do animal. Z. lasiurus e C. a aperea não procriaram e nem adquiriram infecção ao S. mansoni. O. n. eliurus, procriou e permaneceu vivo, em média, menos de 100 dias; não foi observada eliminação de ovos do parasita. É pouco provável que H. b. leucogaster e B. tenagophila mantenham o ciclo da esquistossomose na ausência da contaminação humana, na natureza. Porém, é possível que, futuramente, H. b. leucogaster na presença de B. glabrata, possa servir de reservatório da esquistossomose, na natureza, quando encontrados em abundância e desde que adaptados com cepas adequadas do parasita.