Entwicklung molekularbiologischer Methoden zum Nachweis verschiedener Sclerotiniaceae

Botrytis cinerea ist einer der wichtigsten Phytopathogene, der im Bereich der Weinbereitung als Erreger des Edel- bzw. des Grauschimmels von Trauben eine zentrale Stellung einnimmt. Taxonomisch gehört dieser Organismus zur Familie der Sclerotiniaceae, die ausnahmslos Phytopathogene sind und weltweit große Schäden bei verschiedenen Pflanzen verursachen. Die molekularbiologische Identifikation von Vertretern dieser wichtigen Gruppe von Pflanzenpathogenen ist jedoch bis heute ein Problem. Aus diesem Grund wurde in der vorliegenden Arbeit als Themenschwerpunkt die zweifelsfreie Identifikation einiger Vertreter der Sclerotiniaceae bearbeitet. Hier konnte von neun verschiedenen Organismen die ‚Internal Transcribed Spacer Region’ identifiziert und zusätzlich zur 18S rDNA für eine sichere Identifikation ausgeschlossen werden. Die Unterscheidung der einzelnen Gattungen und verschiedener B. cinerea-Stämme wurde mit Hilfe der neuartigen nSAPD-PCR Technologie erfolgreich überprüft. Hier konnten die drei Gattungen Botrytis, Monilinia sowie Sclerotinia zweifelsfrei differenziert werden. Ferner konnten von Monilinia fructigena, Sclerotinia minor und Sclerotinia sclerotiorum neue Laccase-Gene identifiziert und komplett sequenziert werden, die homolog zur Laccase2 (lcc2) von B. cinerea sind. Auf Basis dieser Sequenzen bzw. Sequenzunterschiede konnte eine Multiplex-PCR zur zweifelsfreien Identifi-kation dieser Spezies etabliert werden. Im Folgenden konnte dieses System auch an Umweltproben aus der Umgebung von Mainz und Wiesbaden, aus Flomborn (Rheinhessen) sowie aus Stollberg (Sachsen) überprüft werden. Anhand dieser Proben konnte gleichzeitig ein konstantes Vorkommen dieses Gens in allen über-prüften Organismen gezeigt werden. Somit ist es zum ersten Mal möglich, ver-schiedene Spezies der Sclerotiniaceae in einer Probe simultan nachzuweisen und zu differenzieren. Anschließend wurde die Laccase-Expression der jeweiligen Sclerotiniaceae überprüft. Für M. fructigena konnte mindestens eine konstitutiv exprimierte Laccase im Kulturüberstand detektiert werden. Im Gegensatz dazu zeigten weder S. minor noch S. sclerotiorum eine derartige Aktivität. Da B. cinerea lcc2 expri-miert, wurde dies auch für M. fructigena angenommen. Die reverse Transkription der codierenden mRNA konnte jedoch nicht erfolgreich durchgeführt werden. Die Analyse des Genoms von B. cinerea und S. sclerotiorum zeigte zudem 13 bzw. 8 mögliche Laccase-Gene. Somit ist es wahrscheinlich, dass M. fructigena mehr als einen codierenden Bereich für ein derartiges Enzym besitzt und somit eine oder mehrere andere Laccasen exprimiert. Auf Basis der codierenden DNA-Sequenzen konnten EDV-gestützte Prote-incharakterisierungen mit allen neu entdeckten Laccase-Sequenzen durchgeführt werden. Die hier ermittelten Eigenschaften legen den Schluss nahe, dass es sich ausnahmslos um Proteine handelt, die extrazellulär lokalisiert sind. So besitzen alle drei eine identisch lange Signalsequenz, die für die Translokation in die extra-zelluläre Matrix nötig ist. Des Weiteren zeigen alle Laccasen eine schwache Hydrophobizität, so dass davon ausgegangen werden kann, dass diese Enzyme keine membranständigen Proteine sind. Auch konnten zahlreiche Glykosylie-rungspositionen ermittelt werden und bei M. fructigena die Glykosylierung der akti-ven Laccase nachgewiesen werden. Des Weiteren konnten alle konservierten Kupferbindepositionen ermittelt werden. Der Vergleich zur mRNA der Lcc2 von B. cinerea offenbarte die lcc2 von M. fructigena drei nicht-codierende Intronse-quenzen, für S. minor und S. sclerotiorum jedoch lediglich die ersten beiden. Somit bleibt für alle neu identifizierten Sequenzen die Frage nach der Expression offen. Es wurden weder Deletionen von Nukleotiden noch frame-shift Mutationen in den einzelnen Genen gefunden. Auch geben die Signalsequenzen bzw. die ent-haltenen Kupferbindepositionen keine Aufschluss über das Ausbleiben der Ex-pression dieser Gene. Da das von B. cinerea synthetisierte ß-1,3-1,6-Glucan in der Kellerwirtschaft große Filtrationsprobleme verursacht, wurde als ein zusätzlicher Themenschwerpunkt die Lyse dieses Polymers mit symbiontischen Mikroorganismen aus Termitendär-men untersucht. Da Termiten auf den Abbau von Polymeren, wie Cellulose und Hemicellulosen spezialisiert sind, lag die Vermutung nahe, dass auch das ß-Glucan von symbiontischen Mikroorganismen hydrolysiert werden kann. In der hier vorliegenden Arbeit konnte zwar das ß-Glucan erfolgreich herge-stellt und in pulverisierter Form 5 verschiedenen Termitenspezies als Futter ange-boten werden, die anschließende Isolierung der Darmflora und die Untersuchung der isolierten Mikroorganismen auf ein mögliche glucanolytische Aktivität erbrach-te jedoch nicht den erhofften Erfolg. Hier wurden acht verschiedene filamentöse Ascomyceten bzw. Zygomyceten isoliert, eine lytische Aktivität konnte jedoch bei keiner dieser Spezies gezeigt werden.

[Examination results and autopsy findings in assaults on elderly people]

As the percentage of elderly people in the population grows, violence against persons of advanced age constitutes an increasing social problem. The findings of the clinical forensic examinations (CE group) and autopsies performed on elderly violence victims (> or = 60 years) between 1999 and 2008 at the Institute of Legal Medicine of the Hanover Medical School were retrospectively analysed. In all, the study material comprised 55 victims of the CE group (35 females and 20 males, median age 73.5 years) and 55 autopsies (33 females and 22 males, median age 72.7 years). In most of the autopsy cases, the suspect was a family member or partner. In contrast, the alleged perpetrator was a stranger in most cases of the CE group. Blunt force injuries were most often found in the CE group victims (63.6%). Altogether, 38.2% (CE group) and 20.0% (autopsy cases) of the violent assaults were associated with robbery. In the majority of the CE cases, the victims suffered potentially or acute life-threatening injuries. In summary, the analysis shows that elderly people frequently become victims of robbery and blunt force injury. In most homicides of old people, the perpetrator is familiar to the victim. In surviving elderly violence victims, the assault is more likely to be reported to the police if the suspect is a stranger.

[Examination reports on survived strangulation cases]

Clinical-forensic examination of strangulation victims is an increasing part of the routine of many forensic pathology institutes. The cases examined between 2004 and 2008 at the Institute of Legal Medicine of the Hanover Medical School were retrospectively analysed. In total, the study material comprised 218 victims (175 females and 43 males). In 80.7 %, the clinical-forensic examination was performed within 24 hours after the incident. In the overwhelming number of cases, the alleged perpetrator was no stranger. 128 victims (58.7 %) had strangulation marks, 32 victims (14.7 %) ligature marks and 65 victims (29.8 %) nail marks. Four victims showed injuries of the laryngeal and pharyngeal structures (reddening, hematomas, swelling and in one case a fracture of the cricoid cartilage on both sides). Extensive petechiae were predominantly seen in the conjunctivae, the buccal mucosa and the skin of the face in cases where the victims suffered a loss of consciousness. 87 cases (39.9% were classified as potentially life-threatening and 30 cases (13.8 %) as acute life-threatening events. This classification is of legal relevance for the penalty. In addition, 60 victims experienced sexual violence. These results suggest that early clinical-forensic examination is crucial for documenting forensic evidence in support of police investigations and may deliver significant details relevant in court.

[Homicide by bow and arrow]

Since the invention of firearms, arrow wounds represent a rarity in the daily routine of forensic pathologists. In the present paper, we describe a homicide by a broadhead arrow shot from a compound bow in a domestic environment. Based on this homicide, we discuss the characteristics of the lesion caused by broadhead arrows and field-tip arrows. We look critically at the free saleability of this equipment mostly used for sport shooting in Germany.

[Analysis of clinical forensic examination reports on sexually abused children]

Clinical forensic examinations of children suspected of having been sexually abused are increasingly part of the routine of medicolegal institutes. The findings collected from 2005 until 2007 at the Institute of Legal Medicine of the Hanover Medical School were analysed retrospectively. Altogether, 91 children (74 females, 17 males, mean age 8.7 years) were examined. In 87.9% of the cases, the examination had been ordered by the police. In 73.6%, the victim knew the suspected perpetrator well or he was a family member. 40.7% of the children were seen within 72 hours after the alleged abuse. 12.1% of the children had extragenital lesions. In 27% of the victims, marked anogenital injuries were found, which were characteristic of sexual abuse in 9%. In 18 cases (20.2%), swabs were taken for spermatozoa detection. 3 of 17 vaginal smears showed positive test results for sperm up to 21 hours after the incident. No spermatozoa could be detected in 4 anal and 2 oral swabs as well as in one swab taken from the skin of the victim's thigh. In summary, the evaluation shows that early clinical forensic examination of children suspected of having been sexually abused is crucial to document evidence that is highly significant for the investigation and court proceedings. Often suspected sexual child abuse cannot be proved by medical findings alone. Of course, the absence of anogenital injuries does nor rule out sexual abuse.

[Lethal atraumatic splenic rupture due to infectious mononucleosis]

The authors report on the sudden and unexpected death of a 20-year-old man from atraumatic rupture of the enlarged spleen due to infectious mononucleosis. The case exemplifies the forensic relevance of infectious mononucleosis, atraumatic splenic rupture and post-mortem serological tests.

[Aiming at the chest, but hitting the back]

Gunshot injuries in the back may suggest the unjustified use of firearms. A wound in the back inflicted by a firearm should not automatically imply that the shooter aimed at the back. A previous study demonstrated that it is possible for men to turn their trunk faster than it takes for a shooter to fire or throw a hand-operated weapon. With a high speed motion camera the authors were able to demonstrate that it is also possible for women to turn their trunk fast enough, so that a shot in the back could have been aimed at the front of the body. This conclusion is also likely to apply to hand-operated or thrown weapons, since the velocity of their projectiles is considerably lower than that of firearms.

Sulle tracce del primo Neoclassicismo. Il viaggio del principe ereditario Friedrich Christian di Sassonia in Italia (1738-1740)

Vom 13. Mai 1738 bis zum 7. September 1740 befindet sich der sächsische Kurprinz Friedrich Christian (1722-1764) auf seiner Italienreise. Sein eigenhändig geschriebenes Reisejournal, sowie die Berichte seines Tutors geben einen tiefen Einblick über das aktuelle Kunstgeschehen in Rom. Friedrich Christian wird durch die Fürsorge der Kardinäle Alessandro und Annibale Albani mit der intellektuellen Elite und mit den namhaftesten in Rom wirkenden Künstlern sowie mit der Kunst Raphaels und der bolognesisch-römischen Barock-Klassizisten bekannt beziehungsweise vertraut gemacht. In der römischen Akademie der Arkadier und in der Académie de France kommt er mit dem Ideal der Simplizität und der 'Nachahmung' der Antike in Berührung. Auf seinem Rückweg von Rom nach Venedig ist hierfür der Aufenthalt bei Scipione Maffei in Verona bezeichnend. In Venedig schließlich kann im besonderen Friedrich Christians Kenntnis von der Inventarisation des dortigen 'Statuario Pubblico', der ehemaligen Antikensammlung in der Antisala der Bibliothek von San Marco verzeichnet werden. Friedrich Christian kehrte mit diesen neuen Eindrücken nach Dresden zurück, wo Anton Raphael Mengs seine Karriere als Künstler begann und ein paar Jahre später sich Johann Joachim Winckelmann aufhielt. Unter der Obhut des Kardinals Alessandro Albani sollten Mengs und Winckelmann dann in Rom die malerische und theoretische Grundlage für den Klassizismus schaffen.

Opera seria nördlich der Alpen – venezianische Einflüsse auf das Musikleben am Dresdner Hof um die Mitte des 18. Jahrhunderts

La cultura musicale delle corti dell'Europa centrale nel '700 viene contrassegnata dal successo dell' "Opera seria", un genere musicale e drammatico che nonostante le sue origini italiane si espande e si diffonde rapidamente ovunque in Europa adattandosi da caso a caso ad esigenze e condizioni locali. La relazione prende in esame l'attività della principessa elettrice della Sassonia Maria Antonia Walpurgis di Baviera (1724 – 1780) che a partire dal suo arrivo a Dresda nel 1747 prende una parte assai attiva nella vita musicale della corte che occupava uno dei primi posti in Europa. Grazie alla sua dotazione musicale Maria Antonia stringe rapporti di lavoro con alcuni dei più importanti musicisti d'epoca che erano i suoi maestri e insegnanti, soprattutto con Johann Adolf Hasse formatosi a Venezia che dal 1730 era capo musicista della corte sassone. Hasse che soltanto ora viene riscoperto come compositore assistette la principessa nell'elaborazione delle sue "Opere serie". Essenziali anche i rapporti con Pietro Metastasio che oltre ad essere il più famoso librettista dell'Opera seria di allora era anche legato all'ambiente degli Arcadi che acclamarono socia onoraria la principessa a causa delle sue opere serie "Talestri e Il Trionfo della fedeltà" che segnano l'apice della sua attività da compositrice musicale. Viene sottolineato il ruolo importante della ricerca per il "vero buon gusto“e la preferenza per la semplicità della musica antica intesa come musica italiana in contrasto con la musica di gusto francese. Dopo il 1766 le opere della principessa segnate dall'influenza che ebbe la tradizione veneziana sulla vita musicale alla corte di Dresda venne criticata in Germania per il suo gusto italiano.