Prospecção de proteínas relacionadas com a resistência à Meloidogyne enterolobii em Psidium spp.

O presente estudo tem por objetivo analisar as reações oxidativas que ocorrem em cultivares de goiaba (Psidium spp.) e araçá (Psidium cattleyanum), visando descobrir o que as tornam uma espécie susceptível e outra resistente, respectivamente.

Multiplicação do nematoide Meloidogyne paranaensis e velocidade de enraizamento de estacas caulinares em sete espécies de plantas medicinais

Dissertação (mestrado)—Universidade de Brasília, Faculdade de Agronomia e Medicina Veterinária, Programa de Pós-Graduação em Agronomia, 2016.

Bioactivity of Ruta graveolens and Satureja montana Essential Oils on Solanum tuberosum Hairy Roots and Solanum tuberosum Hairy Roots with Meloidogyne chitwoodi Co-cultures

As a nematotoxics screening biotechnological system, Solanum tuberosum hairy roots (StHR) and S. tuberosum hairy roots with Meloidogyne chitwoodi co-cultures (StHR/CRKN) were evaluated, with and without the addition of the essential oils (EOs) of Satureja montana and Ruta graveolens. EOs nematotoxic and phytotoxic effects were followed weekly by evaluating nematode population density in the co-cultures as well as growth and volatile profiles of both in vitro cultures types. Growth, measured by the dissimilation method and by fresh and dry weight determination, was inhibited after EO addition. Nematode population increased in control cultures, while in EO-added cultures numbers were kept stable. In addition to each of the EOs main components, and in vitro cultures constitutive volatiles, new volatiles were detected by gas chromatography and gas chromatography coupled to mass spectrometry in both culture types. StHR with CRKN co-cultures showed to be suitable for preliminary assessment of nematotoxic EOs.

First report on Meloidogyne chitwoodi hatching inhibition activity of essential oils and essential oils fractions

The Columbia root-knot nematode (CRKN), Meloidogyne chitwoodi, is an EPPO A2 type quarantine pest since 1998. This nematode causes severe damage in economically important crops such as potato and tomato, making agricultural products unacceptable for the fresh market and food processing. Commonly used nematicidal synthetic chemicals are often environmentally unsafe. Essential oils (EOs) may constitute safer alternatives against RKN. EOs, isolated from 56 plant samples, were tested against CRKN hatching, in direct contact bioassays. Some of the most successful EOs were fractionated and the hydrocarbon molecules (HM) and oxygen-containing molecules (OCM) fractions tested separately. 24 EOs displayed very strong hatching inhibitions (≥90 %) at 2 µL mL−1 and were further tested at lower concentrations. Dysphaniaambrosioides, Filipendula ulmaria, Ruta graveolens, Satureja montana and Thymbra capitata EOs revealed the lowest EC50 values (<0.15 µL mL−1). The main compounds of these EOs, namely 2-undecanone, ascaridol, carvacrol, isoascaridol, methyl salicylate, p-cymene and/or γ-terpinene, were putatively considered responsible for CRKN hatching inhibition. S. montana and T. capitata OCM fractions showed hatching inhibitions higher than HM fractions. The comparison of EO and corresponding fractions EC50 values suggests interactions between OCM and HM fractions against CRKN hatching. These species EOs showed to be potential environmentally friendly CRKN hatching inhibitors; nonetheless, bioactivity should be considered globally, since its HM and OCM fractions may contribute, diversely, to the full anti-hatching activity.

Hospedabilidade de plantas daninhas a Meloidogyne enterolobii.

O objetivo deste trabalho foi avaliar a hospedabilidade de dezesseis espécies de plantas daninhas, Acanthospermum australe, Ageratum conyzoides, Alternanthera tenella, Amaranthus hybridus, A. viridis, Bidens pilosa, Digitaria horizontalis, Eleusine indica, Euphorbia heerophylla, Hyptis sauaveolens, Ipomoea grandifolia, I. nil, Portulaca oleracea, Solanum americanum, Sida cordifolia e tagetes sp. ao nematoide-das-galhas, Meloidogyne enterolobil.

Fitopatógenos habitantes do solo na Amazônia.

Neste trabalho são descritos alguns patógenos habitantes do solo, dentre dezenas, que se destacam com os mais importantes na agricultura amazônica: Ralstonia solanacearum, raça 2. Thanatephorus cucumeris. Sclerotium coffeicola. Phytophthora drechsleri. Phytophthora palmivora. Aspergillus flavus e A. parasiticus. Lasiodiplodia theobromae. Ganoderma philippii, Rigidoporus lignosus e Phellinus noxius. Meloidogyne exigua, M. incognita e M. javanica. Radopholus similis.

Host-delivered RNAi: An effective strategy to silence genes in plant parasitic nematodes

Root-knot nematodes (Meloidogyne spp.) are obligate, sedentary endoparasites that infect many plant species causing large economic losses worldwide. Available nematicides are being banned due to their toxicity or ozone-depleting properties and alternative control strategies are urgently required. We have produced transgenic tobacco (Nicotiana tabacum) plants expressing different dsRNA hairpin structures targeting a root-knot nematode (Meloidogyne javanica) putative transcription factor, MjTis11. We provide evidence that MjTis11 was consistently silenced in nematodes feeding on the roots of transgenic plants. The observed silencing was specific for MjTis11, with other sequence-unrelated genes being unaffected in the nematodes. Those transgenic plants able to induce silencing of MjTis11, also showed the presence of small interfering RNAs. Even though down-regulation of MjTis11 did not result in a lethal phenotype, this study demonstrates the feasibility of silencing root-knot nematode genes by expressing dsRNA in the host plant. Host-delivered RNA interference-triggered (HD-RNAi) silencing of parasite genes provides a novel disease resistance strategy with wide biotechnological applications. The potential of HD-RNAi is not restricted to parasitic nematodes but could be adapted to control other plant-feeding pests.

Impact of tillage and residues from rotation crops on the nematode community in soil and surface mulch during the following sugarcane crop.

The impact of three cropping histories (sugarcane, maize and soybean) and two tillage practices (conventional tillage and direct drill) on plant-parasitic and free-living nematodes in the following sugarcane crop was examined in a field trial at Bundaberg. Soybean reduced populations of lesion nematode (Pratylenchus zeae) and root-knot nematode (Meloidogyne javanica) in comparison to previous crops of sugarcane or maize but increased populations of spiral nematode (Helicotylenchus dihystera) and maintained populations of dagger nematode (Xiphinema elongatum). However the effect of soybean on P zeae and M. javanica was no longer apparent 15 weeks after planting sugarcane, while later in the season, populations of these nematodes following soybean were as high as or higher than maize or sugarcane. Populations of P zeae were initially reduced by cultivation but due to strong resurgence tended to be higher in conventionally tilled than direct drill plots at the end of the plant crop. Even greater tillage effects were observed with M. javanica and X. elongatum, as nematode populations were significantly higher in conventionally tilled than direct drill plots late in the season. Populations of free-living nematodes in the upper 10 cm of soil were initially highest following soybean, but after 15, 35 and 59 weeks were lower than after sugarcane and contained fewer omnivorous and predatory nematodes. Conventional tillage increased populations of free-living nematodes in soil in comparison to direct drill and was also detrimental to omnivorous and predatory nematodes. These results suggest that crop rotation and tillage not only affect plant-parasitic nematodes directly, but also have indirect effects by impacting on natural enemies that regulate nematode populations. More than 2 million nematodes/m(2) were often present in crop residues on the surface of direct drill plots. Bacterial-feeding nematodes were predominant in residues early in the decomposition process but fungal-feeding nematodes predominated after 15 weeks. This indicates that fungi become an increasingly important component of the detritus food web as decomposition proceeds, and that that the rate of nutrient cycling decreases with time. Correlations between total numbers of free-living nematodes and mineral N concentrations in crop residues and surface soil suggested that the free-living nematode community may provide an indication of the rate of mineralisation of N from organic matter.

Organic inputs, tillage and rotation practices influence soil health and suppressiveness to soilborne pests and pathogens of ginger.

A field experiment was established in which an amendment of poultry manure and sawdust (200 t/ha) was incorporated into some plots but not others and then a permanent pasture or a sequence of biomass-producing crops was grown with and without tillage, with all biomass being returned to the soil. After 4 years, soil C levels were highest in amended plots, particularly those that had been cropped using minimum tillage, and lowest in non-amended and fallowed plots, regardless of how they had been tilled. When ginger was planted, symphylans caused severe damage to all treatments, indicating that cropping, tillage and organic matter management practices commonly used to improve soil health are not necessarily effective for all crops or soils. During the rotational phase of the experiment, the development of suppressiveness to three key pathogens of ginger was monitored using bioassays. Results for root-knot nematode (Meloidogyne javanica) indicated that for the first 2 years, amended soil was more suppressive than non-amended soil from the same cropping and tillage treatment, whereas under pasture, the amendment only enhanced suppressiveness in the first year. Suppressiveness was generally associated with higher C levels and enhanced biological activity (as measured by the rate of fluorescein diacetate (FDA) hydrolysis and numbers of free-living nematodes). Reduced tillage also enhanced suppressiveness, as gall ratings and egg counts in the second and third years were usually significantly lower in cropped soils under minimum rather than conventional tillage. Additionally, soil that was not disturbed during the process of setting up bioassays was more suppressive than soil which had been gently mixed by hand. Results of bioassays with Fusarium oxysporum f. sp. zingiberi were too inconsistent to draw firm conclusions, but the severity of fusarium yellows was generally higher in fumigated fallow soil than in other treatments, with soil management practices having little impact on disease severity. With regard to Pythium myriotylum, biological factors capable of reducing rhizome rot were present, but were not effective enough to suppress the disease under environmental conditions that were ideal for disease development.

Determinación del tamaño conglomerado de plantas para el muestreo de nematodos en café

Con el propósito de determinar un tamaño mínimo de muestras, que con cierto grado de precisión permita hacer una estimación confiable y con bajos costos para el productor cafetalero sobre la densidad de nematodos, se realizó un muestreo en 4 fincas del departamento de Carazo (Mª Auxiliadora, El Porvenir, San Marquitos y La Palmerita) En cada una de las fincas se seleccionó una hectárea tomando 15 plantas al azar, formando 5 conglomerados de 3 plantas cada uno, en cada planta se muestrearon 2 sitios a una distancia de 15 cm del pie de la planta y a una profundidad de 15cm en donde se recolectaron raíces simultáneamente se recolectaron muestras de raíces entre cada planta de tal manera que se formó una sola muestra por cada conglomerado a la cual nombramos " muestra compuesta". Por cada conglomerado de 3 plantas se recolectaron 3 muestras individuales y una muestra compuesta totalizando en las 4 fincas un total de 80 muestras de raices. Los géneros estudiados fueron: Meloidogyne sp., Pratylenchus sp y Rotylenchulus sp. Los resultados indican que la situación actual de la población de nematodos se encuentra agregada en el caso de los géneros Meloidogyne y Pratylenchus; mientras que en el caso del género Rotylenchulus sus poblaciones se encuentran de forma uniforme en las fincas muestreadas. La muestra individual arrojó mejores resultados que el tipo de muestra compuesta; se determinó que aceptando un 10% de error se hace necesario muestrear al azar 6 plantas(l00grs de raíz) distribuidas en 2 sitios por hectárea.

Nemátodos fitoparásitos en palma africana Elaeis guineensis (Jacq) y cocotero Cocos nucifera L. en el Atlántico Sur, Nicaragua

Este estudio se llevó a cabo en plantaciones de Palma africana y cocotero de las regiones de Río San Juan y en la Región Autónoma del Atlántico Sur (R.A.A.S), con el objetivo de identificar nematodos asociados en ambos cultivos, contribuir a la actualización del listado nacional de nemátodos y determinar las infestación de Rhadinaphelencus cocophilus Cobb. en picudos (Rhynchophorus palmarum L.) de la palma y el cocotero Este trabajo se realizó en dos etapas; la primera consistió de dos muestreos (uno por región) y la última etapa fue de procesamiento y análisis de muestras. El primer muestreo se realizó en los lotes de las cooperativas Luisa A. Espinoza, El Borbollón y Teodoro Martinez en Kukra Hill para la palma africana y en coco se muestreo un lote del INTA, posteriormente se muestrearon las fincas; San Nicolás y San Mariano, luego se realizó un segundo muestreo en palma africana en el lote de la cooperativa Luisa A. Espinoza en Boca de Sábalos, Rio San Juan. La segunda etapa consistió en el análisis de las muestras; el cual se realizó inmediatamente después del muestreo. Se identificaron los géneros; Rotylenchulus, Trichodorus, Psilenchus, Aphe/enchoides, Paratylenchus, He/icotylenchus, Tylenchus, Xiphinema y Meloidogyne en el cultivo de palma africana y en cocotero se lograron identificar los siguientes géneros; Psílenchus, Aphelenchoides, Paratylenchus, Pratylenchus, Helicoty/enchus, Ty/enchus, Xiphinema y Rhadinaphelenchus. Para el cultivo de la palma africana, los géneros; Roty/enchus, Gracilacus, Psilenchus, Aphelenchoides, Paratylenchus y Meloidogyne fueron reportados por primera vez por lo que deberán ser agregados al listado nacional de plagas del MAG­FOR de la misma manera para el cultivo de coco, con los géneros; Aphelenchoides, Paratylenchus y Psilenchus. En los muestreos realizados en palma africana y coco en las localidades de Boca de Sábalos y en Kukra Hill se encontró la presencia de Rhynchophorus palmarum Linnaeus. En las fincas "San Nicolás" y "San Mariano", mas del 50 por ciento de los insectos (Rhynchophorus pa/marum Linnaeus) se encontraron infestados con el género Rhadinaphelenchus.

Evaluación de opciones alternativas al uso de agroquímicos para el manejo de nematodos fitoparasitos en el cultivo del cafe (Coffea arabica) en fincas de Masaya, Granada y Carazo

El presente estudio se realizó de octubre 2003 a marzo 2004, en cinco fincas de pequeños productores de Masaya, Granada y Carazo, con el objetivo de evaluar el efecto de alternativas de manejo no sintéticas sobre la población de nematodos fitoparásitos asociados al cultivo de café. En cada finca, se establecieron siete parcelas en las que se evaluaron los tratamientos:Gallinaza + biofertilizante + te de papaya (1); Gallinaza + biofertilizante + caldo sulfocálcico (2); Bio green + biofertilizante + te limonaria (3); Biofertilizante + torta de nim + fertilización diluida(4); Biofertilizante + pacelyn + fertilización diluida (5); Testigo absoluto (6); Cobre + fertilización diluida + Vidate L (7). Mensualmente se tomaron muestras de suelo y de raíz, las cuales fueron procesadas en el laboratorio de Nematología Agrícola de la Universidad Nacional Agraria, mediante las técnicas de tamizado más filtro de algodón, para las muestras de suelo; y licuadora más tamices para las muestras de raíz. Las muestras fueron tomadas utilizando barreno y pala, en el área comprendida entre los 15 centímetros del tronco de la planta y a 15 centímetros de profundidad. Las variables evaluadas fueron: Número de nematodos fitoparásitos por género presentes en 100 g de suelo y Número de nematodos fitoparásitos por género presentes en 25 g de raíces.Los resultados indican que tanto en muestras de suelo como de raíces, los géneros predominantes en las cinco fincas fueron Meloidogyne spp y Helicotylenchusspp. El tratamiento que presentó las poblaciones más bajas de nematodos fue Cobre + fertilización diluida + VidateL (7), y el que presentó las poblaciones más altas fue Gallinaza + biofertilizante + te de papaya. Con relación a la fluctuación población de los géneros de nematodo en las cinco fincas fue Meloidogynespp, el género que presentó las poblaciones más altas, alcanzando poblaciones hasta de 5000 nematodos en 25g de raíces en la finca Vista Alegre.En general las poblaciones de nematodos fueron altas en los meses de Noviembre y Enero, reduciéndose en los meses de Febrero y Marzo.

Evaluacion del comportamiento poblacional de nematodos fitoparasitos asociados a diferentes sistemas de manejo de cafe en el municipio de Masatepe, departamento de Masaya (ciclo 2007-2008)

De Julio 2007 a Enero 2008, se realizó un estudio en el Centro Experimental Jardín Botánico, UNICAFE y en el Centro Experimental Campos Azules, INTA en Masatepe, Masaya; con el propósito de evaluar el comportamiento de nematodos fitoparásitos asociados al cultivo del café bajo diferentes sistemas de manejo. Los tratamientos consistieron en la combinación de dos niveles de insumo: Alto Convencional y Orgánico Extensivo, con dos especies de sombra: Leguminosa y Maderable y un tratamiento sin sombra. La descripción de los tratamientos es por lo tanto: Alto Convencional Maderable, Alto Convencional Leguminoso, Orgánico Extensivo Maderable, Orgánico Extensivo Leguminoso y Pleno Sol. El diseño experimental utilizado fue bloques completos al azar, con tres réplicas, dos ubicadas en el Jardín Botánico y una en Campos Azules. Se realizaron 2 muestreos durante la época lluviosa, que consistieron en la toma de muestras de suelo y raíces. Los nematodos del suelo fueron extraídos utilizando el método Tamiz + filtro de algodón y las poblaciones en raíces con el método de macerado por licuadora + filtro de algodón con incubación por 72 horas. Las variables evaluadas fueron, número de nematodos fitoparásitos por género en 200 g de suelo y 5g de raíz en cada tratamiento. Los resultados indican que el tratamiento Alto Convencional Leguminoso registró las poblaciones más altas de Meloidogyne y Orgánico Extensivo Maderable las más bajas. Las poblaciones de Pratylenchus se registraron incrementadas en el tratamiento Pleno sol y bajas en Orgánico Extensivo Maderable. El efecto de los tratamientos sobre las poblaciones de Rotylenchulus no fue constante, especialmente para el caso del tratamiento Pleno sol. Cuando se analizaron los tratamientos a nivel de réplica (Níspero,Mamón y Campos Azules), los resultados fueron similares para todos los géneros en este estudio. Registrándose las mayores poblaciones en los tratamientos convencionales y las menores en los tratamientos orgánicos. El análisis de contrastes lineales para las poblaciones de Meloidogyne, indicó que hay diferencias significativas en Alto Convencional Maderable vs Alto Convencional Leguminoso y Convencional vs Orgánico; este mismo resultado fue similar para las poblaciones de Rotylenchulus. En el caso de Pratylenchus, hubo diferencias significativas entre Pleno sol vs Sombra. En general las poblaciones de nematodos fitoparásitos, especialmente las poblaciones de Meloidogyne spp, registradas en el segundo muestreo Enero 2008 fueron más altas que las registradas en Julio 2007.

Poblaciones de nematodos fitoparasitos asociados a diferentes sistemas de manejo de café en el municipio de Masatepe, departamento de Masaya (ciclo 2006-2007)

se realizo un estudio en café agroforestal de Mayo 200 6 a Enero 2007 de café agroforestal, en el Ensayo de sistemas establecido en el “Jardín Botánico” UNICAFE y en “Campos azules” INTA en Masatepe, Masaya, con el objetivo de evaluar el comportamiento poblacional de nematodos fitoparásitos asociados al cultivo del café bajo diferentes sistemas de manejo. Los tratamientos consistieron en la combinación de dos niveles de insumo (convencional intensivo y orgánico extensivo) con dos tipos de especies de sombra (leguminosas y no leguminosas) ya pleno sol (CIM, CIL, OEM, OEL, CIPS). Se realizaron 2 muestreos, que consistieron en la toma de muestras de suelo y raíces. Las muestras de suelo fueron analizadas con el método de tamiz + filtro de algodón y las de raíces con el método de macerado por licuadora + filtro de algodón. Se evaluaron las variables, población de nematodos fitoparásitos por género encontrados en 200 g de suelo y 25 g de raíz por tratamiento. Los géneros de nematodos fitoparásitos encontrados en suelo y raíces fueron: Meloidogyne, Pratylenchus, Rotylenchus, Xiphinema, Criconemoide y nematodos de vida libre. El género más abundante en raíces y suelo fue Meloidogyne, los géneros con menor abundancia: Xiphinema y Criconemoide. En muestras de suelo Meloidogyne mostro poblaciones altas en los tratamientos CIL y PS, de la réplica el Níspero, bajas poblaciones se identificaron en el tratamiento PS de la réplica Campos Azules. En muestras de suelo Rotylenchulus presento altas poblaciones en el tratamientos CIM de la réplica el Níspero y el Mamón, en el segundo muestreo, bajas poblaciones se identificaron en los tratamientos CIL, de la replica el Níspero en ambos muestreos y en el tratamiento PS de la réplica Campos Azules en el segundo muestreo; en muestras de raíz las poblaciones más altas se encontraron en el tratamiento OEM y CIL en la réplica el Níspero en el primer muestreo, bajas poblaciones se registraron en el OEL y OEM en la réplica el Níspero en el primer muestreo y en CIM en la réplica Campos azules en el primer muestreo, Pratylenchus presentó altas poblaciones en el tratamiento PS de la réplica el Mamón y en OEM de la réplica el Níspero en el primer muestreo. Los tratamientos PS y OEL de la réplica el Mamón en el segundo muestreo mostraron mayor diversidad de nematodos de vida libre. El tratamiento CIM de la réplica Campos azules en el segundo muestreo presento menor diversidad de nematodos de vida libre.

Efecto de counter diez g (Terbufos) y fertilizante (N-P) sobre los nemátodos asociados a café en vivero

El café (coffea arábiga L.) representa uno de los cultivos de mayor importancia en Nicaragua Este cultivo se ve afectado por nematodos fitoparasito de los géneros Meloidogyne Spp. Pratylenchus spp0, y Rotylenchulus spp. Se probó el efecto de combinaciones del nematicida counter 10 G y fertilizante N-P sobre los nematodos fitoparasito con un ensayo en el Centro Experimental del Café Mauricio López Munguía”, Masatepe entre los meses de abril y Octubre de 1986. El diseña utilizado fue en bifactorial en bloques completos al azar con cuatro repeticiones. Los tratamientos fueron al nematicida counter 10 G (terbufos) en dosis de 0; 017: 0.25 y 0, 32 gr de la planta; el fertilizante N-P de la fórmula 18-46 o en dosis de 0.5 y 10 gr/planta, aplicados sobre y en combinación lo que se Hizo un total de 12 tratamientos. la aplicación del nematicida se hizo una sola vez y el fertilizante en dos ocasiones d. A los 55 y 100 DDA se midió el numero de nematodos en el suelo (Meloidogyne spp., Rotylenchulus spp, y pratylenchus spp) nematodos en las raíces (Meloidogyne spp), altura de planta, Numero de hojas y peso de raíz. Los resultados de este ensayo demostraron qué el nematicida tuvo efecto sobre Rotylenchulus spp y Rotylenchulus spp. Pero no sobre Meloidogyne spp en el suelo y en la raíz: No se encontró ningún defecto del fertilizant4e sobre las poblaciones de nematodos. Las combinaciones de nematicida-fertilizante tuvieron un efecto de amplia variabilidad sobre las poblaciones de nematodos lo que dificulto la recomendación de una determinada combinación: La dosis de fertilizantes que resulto con los mejores promedios sobre las variables altura de la planta, Número de hojas y peso de raíz fue la de 5gr, /planta Se encontró una correlaciona negativa significativa entre el género Meloidogyne spp y la altura de la plata a los 55 DDA, no observándose estos mismos resultados a los 100 DDA: también se encontró una correlación positiva significativa entre el número de Meloidogyne spp, del suelo y de la raíz a los 55 y 100 DDA; entre pratylenchus y rotylenchulus a los 55 DDA y entere el número de Nódulos causados por Meloidogyne a los 55 DDA y el peso de la Raíz a los 100 DDA.