Balanços de massa e energia na análise dos processos químicos

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Investigation of the interaction between Tc85-11 protein and antibody anti-T cruzi by AFM and amperometric measurements

This present work reports on development of an amperometric immunosensor for the diagnosis of Chagas' disease using a specific glycoprotein of the trypomastigote surface, which belongs to the Tc85-11 protein family of Trypanosoma cruzi (T cruzi). An atomically flat gold surface on a silicon substrate and gold screen-printed electrodes were functionalized with cystatrine and later activated with glutaraldehyde (GA), which was used to form covalent bonds with the purified recombinant antigen (Tc85-11). The antigen reacts with the antibody from the serum, and the affinity reaction was monitored directly using atomic force microscopy or amperometry through a secondary antibody tagged to peroxidase (HRP). Surface imaging allowed to us to differentiate the modification steps and antigen-antibody interaction allowed to distinguish the affinity reactions. In the amperometric immunosensor, peroxidase catalyses the L-2 formation in the presence of hydrogen peroxide and potassium iodide, and the reduction current intensity was measured at a given potential with screen-printed electrodes. The immunosensor was applied to sera of chagasic patients and patients having different systemic diseases. (c) 2006 Elsevier Ltd. All rights reserved.

Anti-diabetic activity of Bauhinia forficata decoction in streptozotocin-diabetic rats

The effects of using Bauhinia forficata leaf decoction (150 g leaf/l water; 35.2+/-7.8 ml/100 g body weight mean daily dose) as a drinking-water substitute for about I month on streptozotocin-diabetes (STZ-diabetes) in male Wistar rats were investigated. The physico-metabolic parameters measured were: body weight, food and liquid intake, urinary volume, hepatic glycogen, serum triglycerides and cholesterol, plasma glucose, urinary glucose and urea, and the weight of epididymal and retroperitoneal adipose tissue and soleus and extensor digitorum longus muscles. The STZ-diabetic rats treated with decoction showed a significant reduction in serum and urinary glucose and urinary urea as compared to the STZ-diabetic control, no difference being seen between decoction-treated and -untreated non-diabetic rats. The other physico-metabolic factors showed no changes in treated STZ-diabetic rats. The improvement in carbohydrate metabolism seen in the rats treated with Bauhinia forficata decoction does not appear to be linked to the inhibition of glycogenolysis or the stimulation of glycogenesis nor does it appear to act in a way similar to insulin or the sulfonylureas, although it may act by the inhibition of neoglycogenesis in a manner similar to that of the biguanides. (C) 2002 Elsevier B.V. Ireland Ltd. All rights reserved.

Immunosensor for the diagnosis of Chagas' disease

Trypanosoma cruzi proteins from epimastigote membranes, herein referred as antigens, have been used for the construction of an amperometric immunosensor for serological diagnosis of Chagas' disease. The proteins used had a molecular mass ranging from 30 to 100 kDa. The gold electrode was treated with cysteamine and glutaraldehyde prior to antigen immobilization. Antibodies present in the serum of patients with Chagas' disease were captured by the immobilized antigens and the affinity interaction was monitored by chronoamperometry at a potential of -400 mV (versus Ag pseudo-reference electrode) using peroxidase-labeled IgG conjugate and hydrogen peroxide, iodide substrate. The incubation time to allow maximum antigen-antibody and antibody-peroxidase-labeled IgG interactions was 20 min with a reactivity threshold at -0.104 mu A. (c) 2004 Elsevier B.V. All rights reserved.

Synthesis and in vitro evaluation of potential antichagasic hydroxymethyinitrofurazone (NFOH-121): A new nitrofurazone prodrug

The synthesis of mutual prodrugs of nitrofurazone with primaquine, using specific and nonspecific spacer groups, has been previously attempted seeking selective antichagasic agents. The intermediate reaction product, hydroxymethylnitrofurazone (NFOH-121), was isolated and tested in LLC-MK2 culture cells infected with trypomastigotes forms of Trypanosoma cruzi showing higher trypanocidal activity than nitrofurazone and benznidazol in all stages. The mutagenicity tests showed that the prodrug was less toxic than the parent drug. Degradation assays were carried out in pH 1.2 and 7.4. (C) 2003 Elsevier Ltd. All rights reserved.

Fruit of the jambolan tree (Eugenia jambolana Lam.) and experimental diabetes

The fruit of Indian Eugenia jambolana have been shown to have therapeutic properties, but because the therapeutic potential of a plant is related to the geographic region in which the plant was grown and to the part of the plant used, we investigated Brazilian Eugenia jambolana fruit using the same preparation and experimental methods as have been used in India. The well-established metabolic cage model was used to evaluate the physiological and metabolic parameters associated with streptozotocin-induced diabetes in rats (n = 10) which had been administered, by gavage, 50 mg per day of lyophilised Eugenia jambolana fruit-pulp extract for 41 days. We found that, compared to untreated controls, rats treated with the lyophilised fruit-pulp showed no observable difference in body weight, food or water intake, urine volume, glycaemia, urinary urea and glucose, hepatic glycogen, or on serum levels of total cholesterol, HDL cholesterol or triglycerides. No change was observed in the masses of epididymal or retroperitoneal adipose tissue or of soleus or extensor digitorum longus muscles. This lack of any apparent effect on the diabetes may be attributable to the regional ecosystem where the fruit was collected and/or to the severity of the induced diabetes. (C) 2004 Elsevier B.V.. All rights reserved.

Exercise training prevents hyperinsulinemia, muscular glycogen loss and muscle atrophy induced by dexamethasone treatment

Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo (FAPESP)

Heart failure alters matrix metalloproteinase gene expression and activity in rat skeletal muscle

Heart failure is associated with a skeletal muscle myopathy with cellular and extracellular alterations. The hypothesis of this investigation is that extracellular changes may be associated with enhanced mRNA expression and activity of matrix metalloproteinases (MMP). We examined MMP mRNA expression and MMP activity in Soleus (SOL), extensor digitorum longus (EDL), and diaphragm (DIA) muscles of young Wistar rat with monocrotaline-induced heart failure. Rats injected with saline served as age-matched controls. MMP2 and MMP9 mRNA contents were determined by RT-PCR and MMP activity by electrophoresis in gelatin-containing polyacrylamide gels in the presence of SDS under non-reducing conditions. Heart failure increased MMP9 mRNA expression and activity in SOL, EDL and DIA and MMP2 mRNA expression in DIA. These results suggest that MMP changes may contribute to the skeletal muscle myopathy during heart failure.

Tipos de fibras no músculo flexor longo do hálux de frangos de corte submetidos ao estresse pelo calor e frio e alimentados em pair-feeding

O objetivo deste trabalho foi avaliar o efeito da temperatura ambiente sobre as características morfométricas das fibras musculares do músculo flexor longo do hálux de frangos de corte alimentados com a mesma quantidade de ração (pair-feeding), isolando-se o efeito do consumo voluntário de alimento. Foram utilizados 16 frangos de corte machos, Ross, distribuídos em um delineamento inteiramente casualizado com dois tratamentos (estresse pelo calor e frio), com sete e nove repetições cada, respectivamente. Aos 43 dias de idade, o peso médio das aves estressadas pelo calor (1255 g) foi maior que o das aves estressadas pelo frio em pair-feeding (1086 g). O músculo das aves submetidas ao estresse pelo calor e pelo frio apresentou 22,82 e 27,93% de fibras brancas (FG - Fast Glycolytic), 52,76 e 47,67% de intermediárias (FOG - Fast Oxidative Glycolytic) e 24,42 e 24,40% de vermelhas (SO - Slow Oxidative), respectivamente. O diâmetro das fibras FG foi maior no músculo das aves submetidas ao calor (48,69 mm), quando comparado ao das aves submetidas ao frio (37,74 mm). A freqüência e o número dos tipos de fibras no músculo não diferiram entre as aves estressadas pelo calor e pelo frio. O estresse pelo frio associado à limitação no consumo de alimento determinou redução no crescimento e alterou a composição dos tipos de fibras no músculo flexor longo do hálux de frangos de corte, reduzindo o tamanho das fibras do tipo FG e mantendo o tamanho das fibras SO e FOG, as quais apresentam metabolismo oxidativo, associado à maior produção de calor.

Efeito da Temperatura Ambiente e da Restrição Alimentar sobre o Desempenho e a Composição de Fibras Musculares Esqueléticas de Frangos de Corte

O objetivo desta pesquisa foi estudar os efeitos da temperatura ambiente e da restrição alimentar sobre o desempenho e a composição do músculo flexor longo do hálux de frangos de corte. Trezentos e vinte e quatro pintos machos da linhagem Ross, com cinco dias de idade, foram distribuídos em um delineamento em parcelas subdivididas, considerando os tratamentos principais no esquema fatorial 3x3 inteiramente casualizado (três programas de alimentação: ad libitum, restrição precoce - 8 a 14 dias e restrição tardia - 29 a 35 dias; três níveis de temperatura: termoneutra, calor e frio). Os tratamentos secundários foram as idades das aves (seis idades: 7, 14, 21, 28, 35 e 42 dias). Não houve interação entre programa de alimentação e temperatura ou entre programa de alimentação, temperatura e idade para as características de desempenho dos frangos. Independentemente do programa de alimentação, houve efeito de temperatura para peso, ganho de peso, consumo de ração e conversão alimentar. O programa de alimentação afetou o peso e o ganho de peso das aves. Houve interação entre programa de alimentação e idade e entre temperatura e idade para peso vivo ao abate e peso do músculo da perna direita. Estas interações não foram significativas para peso do músculo da perna esquerda, área da secção transversal do músculo e relação peso do músculo/peso vivo ao abate. Conclui-se que a temperatura ambiente afeta o desempenho dos frangos de corte, porém não altera o número, diâmetro e freqüência de fibras musculares no músculo flexor longo do hálux. A restrição alimentar precoce pode ser adotada como prática de manejo, sem que se observem alterações do desempenho na idade de abate e nem na composição das fibras musculares esqueléticas dos frangos de corte.

Morfologia das fibras musculares esqueléticas de frangos de corte de diferentes linhagens criados em sistemas de confinamento e semiconfinamento

Avaliou-se o efeito da linhagem, do sistema de criação e do sexo sobre o peso vivo, o rendimento de carcaça e de pernas e os aspectos morfológicos das fibras musculares esqueléticas do músculo flexor longo do hálux de frangos de corte. O delineamento experimental foi inteiramente casualizado, em esquema fatorial 4 x 2 x 2, ou seja, quatro linhagens (Ross-308, Pescoço Pelado Label Rouge, Caipirinha e Paraíso Pedrês), dois sistemas de criação (confinamento e semiconfinamento) e dois sexos, com duas repetições por tratamento, sendo que cada ave retirada ao acaso aos 56 dias de idade foi considerada uma unidade experimental, totalizando 64 aves. A linhagem Ross apresentou maior peso vivo e maiores pesos de carcaça, de pernas, de carne de penas e do músculo flexor longo do hálux e maiores rendimentos de carcaça e de carnes de pernas que as outras linhagens. A maior massa muscular das aves selecionadas para alta taxa de crescimento está relacionada ao aumento na área dos três tipos de fibras musculares (SO, FOG e FG). Machos apresentaram maior massa muscular e musculatura mais glicolítica que fêmeas. O sistema de semiconfinamento alterou a composição de fibras musculares esqueléticas dos machos, tornando-a mais oxidativa, porém, esse efeito não foi observado nas fêmeas.

Biodisponibilidade de ferro em diferentes compostos para leitões desmamados aos 21 dias de idade

Avaliou-se a biodisponibilidade de ferro de diferentes compostos visando sua utilização em dietas para leitões desmamados. Utilizaram-se 44 leitões (7 não-anêmicos e 37 anêmicos) desmamados aos 21 dias de idade (7,3 ± 1,8 kg) e distribuídos em dois grupos: grupo não-anêmico e grupo anêmico. Durante sete dias, os animais do grupo não-anêmico receberam dieta com FeSO4.7H2O (sulfato ferroso hepta-hidratado) na dose de 100 mg/kg e os do grupo anêmico, dieta sem ferro (<15 mg/kg ração). No sétimo dia, depois de determinada a concentração de hemoglobina sanguínea e diagnosticada a anemia, os leitões foram agrupados segundo o produto do peso (kg) × hemoglobina (g/dL) e alojados individualmente, durante 13 dias, em gaiolas para estudos de digestibilidade, onde foram alimentados com seis rações à base de milho e leite em pó: três rações-padrão com FeSO4.7H2O em quantidade equivalente a 80, 150 e 200 mg Fe/kg de ração; duas rações experimentais com ferro (150 mg/kg) na forma de FeSO4 microencapsulado com carboximetilcelulose ou de ferro quelado com metionina; e uma controle com ferro (100 mg/kg). O consumo de ração foi medido diariamente. Nos dias 0, 3, 6, 9 e 13 do período de repleção, os animais foram pesados para avaliação do desempenho e o sangue foi coletado para determinação da concentração de hemoglobina. Ao final do ensaio, os animais foram sacrificados e o fígado foi coletado para determinação das concentrações de ferro total, ferro heme e ferro não-heme. As concentrações hepáticas de ferro heme, ferro não-heme e ferro total não diferiram entre os animais, entretanto, os do grupo controle apresentaram excesso de ferro total no fígado, relacionado à dose de ferro injetada nos leitões após o desmame. em comparação ao FeSO4.7H2O não encapsulado, os compostos de ferro microencapsulado com carboximetilcelulose e de ferro quelado com metionina promovem melhor conversão alimentar em leitões desmamados.

Integrating geo-referenced multiscale and multidisciplinary data for the management of biodiversity in livestock genetic resources

P>In livestock genetic resource conservation, decision making about conservation priorities is based on the simultaneous analysis of several different criteria that may contribute to long-term sustainable breeding conditions, such as genetic and demographic characteristics, environmental conditions, and role of the breed in the local or regional economy. Here we address methods to integrate different data sets and highlight problems related to interdisciplinary comparisons. Data integration is based on the use of geographic coordinates and Geographic Information Systems (GIS). In addition to technical problems related to projection systems, GIS have to face the challenging issue of the non homogeneous scale of their data sets. We give examples of the successful use of GIS for data integration and examine the risk of obtaining biased results when integrating datasets that have been captured at different scales.

Oxytocin promotes bone formation during the alveolar healing process in old acyclic female rats

Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES)

Temporal response pattern of biochemical analytes in experimental diabetes

The activities of the enzymes aspartate aminotransferase (AST), alanine aminotransferase (ALT), alkaline phosphatase (ALP), lactate dehydrogenase (LD), creatine kinase (CK), amylase (AMS) and angiotensin converting enzyme (ACE) have been used to assess the toxic effects of xenobiotics that have hypoglycaemic action in hepatic, pancreatic, renal and muscle tissue. Using a validated experimental model of diabetes mellitus in rats, we ascertained whether this syndrome itself affected the serum activities of these enzymes over a 53-day period. Levels of hepatic enzymes AST, ALT and ALP were higher in the streptozotocin (STZ)diabetic rats (group D), but were controlled by insulin therapy (group DI). AMS was reduced in group D and unchanged in group DI rats. Proteinuria was detected 1 day after STZ administation and partially controlled by insulin (group DI); its early presence in group D rats, and the lack of any change in serum ACE in this group, indicates that proteinuria is the better marker for microangiopathy. Microscopic examination of liver, kidney, heart and skeletal muscles (soleus and extensor digitorum longus) revealed various alterations in group D rat tissues, which were less pronounced in group DI. The liver, pancreas and kidney tissue-damage was consistent with the altered serum levels of AST, ALT, ALP and AMS and proteinuria. We conclude that: (i) rigorous control is required when these serum-enzyme levels are used as indicators of tissue toxicity in experimental diabetes, and (ii) LD, CK and bilirubin serum levels, which are unaffected by diabetes, can be used when testing effects of xenobiotics on tissues.