Dose/frequency: A critical factor in the administration of glucan as immunostimulant to Indian white shrimp Fenneropenaeus indicus

The immunostimulatory effect of an alkali insoluble glucan extracted from marine yeast isolate Candida sake S165 was tested in Fenneropenaeus indicus. Post larvae (PL) of F. indicus, fed glucan incorporated diet at varying concentrations (0.05, 0.1, 0.2, 0.3, 0.4 g glucan/100 g feed) for 21 days were challenged orally with white spot syndrome virus (WSSV). Maximum survival was observed in PL fed the 0.2% glucan incorporated diet. Subsequently the feed incorporated with 0.2% glucan was fed to F. indicus post larvae at different feeding intervals, i.e. daily, once every two days, once every five days, once every seven days and once every ten days. After 40 days, the prawns were challenged orally with WSSV and post challenge survival was recorded. Shrimp feed containing 0.2% glucan when administered once every seven days gave maximum survival. This was supported by haematological data obtained from adult F. indicus, i.e. total haemocyte count, phenoloxidase activity and nitroblue tetrazolium reduction (NBT). The present observation confirms the importance of dose and frequency of administration of immunostimulants in shrimp health management

Molecular characterization of a crustin-like, putative antimicrobial peptide, Fi-crustin, from the Indian white shrimp, Fenneropenaeus indicus

Fish & Shellfish Immunology 28 (2010) 216-220

Alkali insoluble glucan extracted from Acremonium diospyri is a more potent immunostimulant in the Indian White Shrimp, Fenneropenaeus indicus than alkali soluble glucan

E¡ect of an extraction method on the structure of glucan and its immunostimulatory response in Fenneropenaeus indicus was investigated. Here we extracted alkali insoluble glucan (AIG) and alkali soluble glucan (ASG) from a ¢lamentous fungi Acremonium diospyri following alkali^acid hydrolysis and the sodium hypochlorite oxidation and dimethyl sulphoxide extraction method respectively. Structural analysis showed that 85% of glucan in AIG was a (1 !3)-b-D-glucan and it increased the prophenoloxidase and reactive oxygen intermediate activity when administered to F. indicus. On the other hand, ASG, which contained 93% (1 !3)-a-glucan, did not induce signi¢cant immune response in shrimp. Here we report that the di¡erence in immunostimulatory potential between AIG and ASG is due to the di¡erence in the percentage of (1 !3)-b-D-glucans present in each preparation, which varies with the method of extraction employed. Also our observations suggest that glucan can be used as a potential immunostimulant to shrimp, provided it contains (1 !3)-b-D-glucan as the major fraction.

Pathological changes in Fenneropenaeus indicus experimentally infected with white spot virus and virus morphogenesis

To demonstrate pathological changes due to white spot virus infection in Fenneropenaeus indicus, a batch of hatchery bred quarantined animals was experimentally infected with the virus. Organs such as gills, foregut, mid-gut, hindgut, nerve, eye, heart, ovary and integument were examined by light and electron microscopy. Histopathological analyses revealed changes hitherto not reported in F. indicus such as lesions to the internal folding of gut resulted in syncytial mass sloughed off into lumen, thickening of hepatopancreatic connective tissue with vacuolization of tubules and necrosis of rectal pads in hindgut. Virus replication was seen in the crystalline tract region of the compound eye and eosinophilic granules infiltrated from its base. In the gill arch, dilation and disintegration of median blood vessel was observed. In the nervous tissues, encapsulation and subsequent atrophy of hypertrophied nuclei of the neurosecretory cells were found. Transmission electron microscopy showed viral replication and morphogenesis in cells of infected tissue. De novo formed vesicles covered the capsid forming a bilayered envelop opened at one end inside the virogenic stroma. Circular vesicles containing nuclear material was found fused with the envelop. Subsequent thickening of the envelop resulted in the fully formed virus. In this study, a correlation was observed between the stages of viral multiplication and the corresponding pathological changes in the cells during the WSV infection. Accordingly, gill and foregut tissues were found highly infected during the onset of clinical signs itself, and are proposed to be used as the tissues for routine disease diagnosis.

Efficacy of fermented prawn shell waste as a feed ingredient for Indian white prawn, Fenneropenaeus indicus

Prawn shell waste collected from shrimp-processing plants in Cochin, India, was subjected to fermentation using 20 chitinoclastic and proteolytic/non-proteolytic bacterial strains. The products generated were analysed for protein, lipid, total sugars, N-acetyl glucosamine, free amino acids and ash. Shrimp diets were prepared using these 20 fermented products and a control diet using raw prawn shell waste. Feeding experiment was conducted with postlarvae (PL21) of Indian white prawn, Fenneropenaeus indicus for a period of 21 days. Biogrowth parameters such as mean weight gain, feed conversion ratio, specific growth rate and protein efficiency ratio were estimated and the animals were challenged with white spot virus orally via diet. Enhanced growth could be observed in prawns fed F134 and F124, incorporated with the fermentation products generated using Bacillus spp., C134 and C124 respectively. The percentage survival of prawns after 7 days of challenge was found to be highest for groups fed diet F111 incorporated with fermentation product generated using Bacillus sp. These products of bacterial fermentation hold promise as growth enhancers and immunostimulants in aquaculture. KEY WORDS: biogrowth parameters, feed

Molecular characterization and phylogenetic analysis of a penaeidin-like antimicrobial peptide, Fi-penaeidin from Fenneropenaeus indicus

Antimicrobial peptides (AMPs) play a major role in innate immunity. Penaeidins are a family of AMPs that appear to be expressed in all penaeid shrimps. Penaeidins are composed of an N-terminal proline-rich domain, followed by a C-terminal domain containing six cysteine residues organized in two doublets. This study reports the first penaeidin AMP sequence, Fi-penaeidin (GenBank accession number HM243617) from the Indian white shrimp, Fenneropenaeus indicus. The full length cDNA consists of 186 base pairs encoding 61 amino acidswith an ORF of 42 amino acids and contains a putative signal peptide of 19 amino acids. Comparison of F. indicus penaeidin (Fi-penaeidin) with other known penaeidins showed that it shared maximum similarity with penaeidins of Farfantepenaeus paulensis and Farfantepenaeus subtilis (96% each). Fi-penaeidin has a predicted molecular weight (MW) of 4.478 kDa and theoretical isoelectric point (pI) of 5.3

Fenneropenaeus indicus is protected from white spot disease by oral administration of inactivated white spot syndrome virus

Fenneropenaeus indicus could be protected from white spot disease (WSD) caused by white spot syndrome virus (WSSV) using a formalin-inactivated viral preparation (IVP) derived from WSSV-infected shrimp tissue. The lowest test quantity of lyophilized IVP coated onto feed at 0.025 g–1 (dry weight) and administered at a rate of 0.035 g feed g–1 body weight d–1 for 7 consecutive days was sufficient to provide protection from WSD for a short period (10 d after cessation of IVP administration). Shrimp that survived challenges on the 5th and 10th days after cessation of IVP administration survived repeated challenges although they were sometimes positive for the presence of WSSV by a polymerase chain reaction (PCR) assay specific for WSSV. These results suggest that F. indicus can be protected from WSD by simple oral administration of IVP

Pendimethalin aplicado à casca de arroz e serragem para o controle de plantas daninhas em Ixora chinensis Lam.

A aplicação de herbicidas residuais à coberturas mortas pode aumentar a eficiência desses materiais no manejo da comunidade infestante. Objetivou-se, com este trabalho, avaliar a possibilidade de aplicação do pendimethalin à casca de arroz e à serragem para o controle de plantas daninhas em Ixora chinensis. Dois experimentos foram conduzidos aplicando-se o pendimethalin às coberturas mortas através de embebição e pulverização do herbicida, variando-se também a quantidade de cobertura utilizada. As espécies de plantas daninhas que ocorreram com maior frequência foram Alternanthera tenella, Blainvillea rhomboidea, Cenchrus echinatus e Commelina benghalensis. Há possibilidade de aplicação do herbicida pendimethalin à palha de arroz ou à serragem para controle de plantas daninhas em I. chinensis, principalmente quando ocorrem chuvas regulares e bem distribuídas. Há evidências de que a embebição da cobertura morta no herbicida seja um pouco mais eficiente no controle das plantas daninhas que a sua pulverização sobre a cobertura. Possivelmente, a quantidade de cobertura morta utilizada influencia na eficiência de controle, apesar deste fato não ter ficado claro neste trabalho.

Tipo de porta-enxerto e anelamento de ramos no pegamento da enxertia em lichieira (Litchi chinensis Sonn.)

O presente trabalho foi realizado em condições de ripado, com o objetivo de avaliar o desempenho da enxertia a inglês simples, em dois tipos de porta-enxerto (pé-franco e alporquia), em combinação com três tipos de anelamento do ramo (sem anelamento, e ramos anelados duas e quatro semanas antes da retirada do garfo), em lichia. O experimento foi conduzido em delineamento inteiramente casualizado, com seis tratamentos e três repetições. Foi somente observada diferença significativa para o tipo pé-franco, que revelou os melhores resultados.

Studies on stem cuttings of kiwi (Actinidia chinensis PL. CV Bruno)

O presente trabalho teve como objetivo, estudar o efeito de auxinas sintéticas e do boro, sobre o enraizamento de estacas caulinares de kiwi (Actinidia chinensisPlanch. cv Bruno). As estacas continham dois nós com aproximadamente 10 cm de comprimento, contendo 2 folhas cortadas ao meio. As bases das estacas receberam os seguintes tratamentos: control (H2O); NAA 300 mg.L-1; IBA 300 mg.L-1; NAA 300 mg.L-1 + B; IBA 300 mg.L-1 + B; NAA 0,5%-pó e IBA 0,5%-pó. Após os tratamentos as estacas foram plantadas em bandejas de enraizamento contendo vermiculita pura e colocadas em câmara de nebulização por 120 dias até a coleta das mesmas. Para a avaliação do efeito das auxinas e boro, foram realizadas as seguintes observações: 1. porcentagem de estacas enraizadas; 2. análise de açúcares redutores e açúcares totais (em g/100 g de matéria seca); 3. análise de triptofano (em µg/100 mg de matéria seca). Além disso, foram verificados o efeito dos tratamentos em quatro épocas, que corresponderam às estações do ano (primavera, verão, outono e inverno). Através dos resultados obtidos no processo de enraizamento de estacas caulinares de kiwi (Actinidia chinensis Planch. cv Bruno), conclui-se ser o verão a melhor época de coleta dos ramos para a produção das estacas sem a necessidade do tratamento com auxinas.

Entomofauna visitante de Belamcanda chinensis (L.) DC (Iridaceae) durante o período de floração

A study of the reproductive biology of B. chinensis (L.) DC. (Iridaceae) was realized comprising floral biology and breeding systems. The floral biology studies included analyses of nectar production, occurence of osmophores, corolla pigments, ultraviolet reflexion and absortion patterns, viability of pollen, pollinators and flower visitors. The breeding systems were studied taking into account the results of manual pollinators tests. B. chinensis is self-compatible bul cross-pollination is more frequent. The effective pollinators are Plebeia droryana (Friese, 1906) (45,7%), Trigona spinipes (Fabricius, 1793) (27,3%), Tetragonisca angustula (Latreille, 1811) (9,3%). Others insects visitors are considered nectar and pollen thieves. The flowering begins generally in January and February. The complete reproductive cicle, as here considered, begining with floral bud production ending with development of mature fruits, lasts January to June. Seed dispersion is ornitocoric.

Efeitos da aplicação de reguladores vegetais e do ácido bórico, em estacas de lichieira (Litchi chinensis Sonn.)

Estudaram-se as interações entre os ácidos indol-butírico, alfa-naftaleno-acético e bórico no desenvolvimento de calos e na sobrevivência das estacas de lichieira (Litchi chinensis Sonn.). As estacas apresentavam 25 cm de comprimento e 4 folhas cortadas pela metade, sendo retiradas em duas épocas diferentes (janeiro e abril) e colocadas para enraizar em bandejas de isopor, tendo como substrato vermiculita e em condições de câmara de nebulização. Foi feita imersão de 2,5 cm da base das estacas, em soluções aquosas por l minuto. Os tratamentos utilizados corresponderam a 5.000 e 2.000 ppm de IBA; 3.000 e 1.500 ppra de NAA; 150 microgramas/ml de H3BO3; IBA 5.000 e 2.000 ppm + H3BO(3)150 microgramas/ml; NAA 3.000 e 1.500 ppm + H3BO3 150 microgramas/ml e H2O. Avaliou-se a formação de calos e a sobrevivência das estacas após 120 dias do plantio. Através dos resultados obtidos, foi possível concluir que dos tratamentos utilizados, nenhum foi efetivo na formação de raízes, havendo somente a formação de calos. A melhor época para a retirada de estacas correspondeu ao mês de abril.

Enraizamento de estacas de lichia (Litchi chinensis Sonn.)

Estudou-se os efeitos de auxilias exógenas e ácido bórico, no enraizamento de estacas de lichia (Litchi chinensis Sonn.). As estacas foram uniformizadas, com 25 cm de comprimento e 4 folhas cortadas pela metade. Cerca de 2,5 cm da base das mesmas foi mergulhado nos tratamentos: H2O; Boro 150 µg/ml; IBA 5.000 ppm, IBA 2.000 ppm; IBA 5.000 ppm + Boro 150 µg/ml; IBA 2.000 ppm + Boro 150 µg/ml; NAA 3.000 ppm; NAA 1.500 ppm; NAA 3.000 ppm + Boro 150 µg/ml; NAA 1.500 ppm + Boro 150 µ/g/ml. A estaquia foi realizada no mês de setembro (Hemisfério sul), sendo que as estacas foram colocadas em bandejas de isopor, tendo como substrato vermiculita e mantidas sob nebulização intermitente. Os resultados obtidos permitiram concluir que o IBA 5.000 ppm por 1 minuto foi o tratamento mais efetivo, proporcionando 83,33% de estacas enraizadas em 120 dias, enquanto o tratamento testemunha (H2O), apresentou somente 16,67% de estacas enraizadas.

Enraizamento de estacas caulinares de kiwi (Actinidia chinensis Planch cv Abbott) tratadas com auxinas e boro

O trabalho teve como finalidade, estudar o efeito de várias auxinas sintéticas em formulações comerciais e do boro, sobre o enraizamento de estacas caulinares de kiwi (Actinidia chinensis Planch, cv Abbott.). As estacas utilizadas continham dois nós e duas folhas cortadas ao meio, com aproximadamente 10 cm de comprimento, onde o corte basal em bisel foi realizado logo abaixo de um nó e o apical acima do outro nó. O efeito das auxinas, sobre o enraizamento de estacas caulinares de kiwi foi verificado mediante os seguintes tratamentos, aplicados sobre as bases das estacas: T1 H(2)0); T2 (NAA 300 ppm); T3 (IBA 300 ppm); T4 (NAA 300 ppm + B); T5 (IBA 300 ppm + B); T6 (NAA 0,5%-pó) e T7 (IBA 0,5%-pó). Após o tratamento das estacas, estas foram plantadas em bandejas de enraizamento, contendo vermiculita pura e colocadas em câmara de nebulização, onde permaneceram por 120 dias, até a sua coleta. Para a avaliação do efeito de auxinas e do ácido bórico, sobre o enraizamento de estacas caulinares de kiwi, foram realizadas as seguintes observações: 1. porcentagem de estacas enraizadas; 2. análise de açúcares redutores e açúcares totais (em g/100 g de matéria seca); 3. análise de triptofano (em µg/100 mg de matéria seca). Os resultados obtidos no processo de enraizamento de estacas caulinares de kiwi (Actinidia chinensis Planch.) variedade Abbott, levou a concluir que o inverno e outono foram as melhores épocas de coleta dos ramos de auxinas para a confecção das estacas. O processo de enraizamento foi ainda incrementado com a aplicação exógena na base das estacas, sendo que o alto teor de açúcares redutores e totais beneficiou a maior porcentagem de enraizamento.

EFEITO do GA3 NA GERMINAÇÃO DE SEMENTES DE KIWI (Actinidia chinensis Planch.)

Com o objetivo de analisar a aplicação de ácido giberélico (GA3) na germinação de sementes de Actinidia chinensis Pl, sementes foram extraídas de frutos maduros, lavadas e secas à sombra, recebendo os seguintes tratamentos: T1 - estratificação (5oC por 2 semanas); T2 - testemunha; T3 - GA3 à 50 mg.L-1 ; T4 - GA3 à 100 mg.L-1 e T5 - GA3 à 150 mg.L-1. Durante a primeira semana o substrato dos tratamentos T3, T4 e T5 foi umedecido com GA3. O tratamento mais efetivo para aumentar a porcentagem de germinação e diminuir o tempo médio de germinação foi com 150 mg.L-1 de GA3.