991 resultados para CE-3
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lheure o nous crivons, lONU enregistre 33 million de personnes touches par le VIH/Sida. Dans les perspectives actuelles de lutte contre la propagation de la pandmie, plusieurs moyens peuvent tre mis en place : utilisation du condom, dpistage, change de seringues, abstinence Mais une question se pose : quels lments nous influencent dans lutilisation dune telle ou telle pratique? Faisant usage des stratgies de marketing social, les campagnes de prvention contre le VIH/Sida mettent lemphase sur lempowerment des individus face leur prise de risque. Par ce biais, on tente de changer certains comportements et den adopter de nouveaux plus scuritaires pour la sant. Nous avons valu ici trois (3) campagnes de prvention contre le VIH/Sida Montral. Le but de cette recherche a t de distinguer les lments pouvant faciliter la planification des campagnes dans une perspective de diminution de lincidence du VIH/Sida. Lors de la prise de dcisions concernant l'valuation d'une campagne de prvention de lutte contre le VIH/Sida, plusieurs points fondamentaux sont considrer : la source de linformation, le message, le canal utilis, les caractristiques du rcepteur et leffet dsir par la campagne. Ces aspects sont primordiaux dans la prise de conscience de la campagne. Mais attention, ce type d'valuation n'est pas conu pour en dmontrer son efficacit. Notre tude nous confirme limportance de lvaluation des campagnes de prvention aux diffrents stades de leurs conceptions. Cette recherche nous pousse connatre les dtails du programme de prvention et ainsi avoir une bonne comprhension du droulement de l'intervention dans une perspective future den expliquer lefficacit
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Ce mmoire porte sur la variabilit observe dans un assemblage, compos la fois dartfacts lithiques et cramiques, reprsentatif de la plus grande collection archologique domine par une composante du Sylvicole moyen ancien connue au Qubec. Les traits caractristiques des poteries qui ont t transportes, abandonnes, et en partie manufactures sur la station 3-arrire du complexe de Pointe-du-Buisson, sont apprhends travers une acception holistique de la notion de style, qui inclut tous les aspects des attributs quelle couvre, savoir les technologiques, les morphologiques, les dcoratifs et les fonctionnels. Grce lapplication dune mthode typologique, une approche peu utilise depuis plusieurs dcennies, du moins dans le Nord-Est amricain, et dont le mrite propre rside dans sa capacit traiter lartfact dans son ensemble, des schmas comportementaux (cognitifs et procduraux) visibles sur les tessons de bord dcors ont t mis en lumire. Ces derniers sont intimement lis aux techniques dcoratives employes par les potires, et semblent stre modifis au fil du temps de la manire suivante : type sigill prcdant les types plus rcents repouss et basculant. Une analyse comparative, base sur un chantillon de sites localiss dans la rgion de Haut-Saint-Laurent et dans celles avoisinantes, a par ailleurs soulign dimportantes similarits entre lassemblage cramique de la composante du Sylvicole moyen ancien de BhFl-1d et ceux des sites de Vieux-Pont (Estrie), dOka (rivire des Outaouais), de Pointe-du-Gouvernement (Haut-Richelieu) et de Winooski (aux abords du Lac Champlain dans le Vermont). Ces rsultats appuient lidentification dune manifestation culturelle qui est trs troitement connecte aux phases Canoe Point et Winooski de la tradition Point Peninsula. Rsultant des conclusions susmentionnes, et dautres issues denqutes rcentes, des considrations dordre taxonomique sensuivent. Bien quune refonte complte du taxon Sylvicole moyen soit prmature, une critique de ce taxon savre ncessaire. Aussi des taxons tels que lEarly Horticultural Period de Snow ou le Sylvicole initial de Wright et Clermont sont discuts, dans la mesure o ils pourraient renvoyer une dfinition plus gnrale, mais aussi peut-tre plus fidle, des caractristiques anthropologiques propres aux populations qui ont vcu le long du Saint-Laurent et de ses tributaires depuis le Sylvicole infrieur jusqu la fin du Sylvicole moyen tardif.
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Les canaux calciques dpendants du voltage CaV font partie de la famille structurale des canaux ioniques 6 segments transmembranaires. Tout comme les canaux potassiques Kv, les canaux CaV possdent une srie de rsidus chargs dans lhlice S4 de chaque domaine ou sous-unit qui confrerait la protine une sensibilit aux changements de voltage. De plus les hlices S6 tapissent la paroi du pore et forment la porte dactivation de la protine. Comment le mouvement des hlices S4 se traduit par louverture de la porte dactivation des hlices S6 demeure une question encore non rsolue. Suite la publication de la structure cristalline du canal Kv1.2 en 2005, le groupe de MacKinnon a propos que le mouvement des hlices S4 est mcaniquement coupl la porte dactivation S6 travers le glissement de lhlice amphiphile S4-S5 selon un mcanisme nomm couplage lectromcanique (Long et al. 2005b). Dans le but de dterminer si la rgion S4-S5 joue un rle dans lactivation du canal calcique CaV2.3, nous avons tudi, par la mthode danalyse cyclique de mutations doubles ( Double Mutant Cycle Analysis , (Horovitz 1996)), le couplage entre la boucle S4-S5 et lhlice S6 du domaine II de ce canal. Les mesures dnergies dactivation, Gact, obtenues en prsence des sous-units auxiliaires CaV2 et CaV3 ont affich un couplage significatif pour lactivation entre les paires de rsidus V593G/L699G, V593G/A700G, V593G/A702G, S595G/V703G L596G/L699G, L596G/A700G, L596G/I701G, L596G/A702G, L596G/V703G, L596G/D704G, M597G/I701G, et S602G/I701G. Aucune de ces paires de rsidus na affich de couplage lors de linactivation, suggrant que les effets observs sont spcifiques au mcanisme dactivation. Mis ensemble, ces rsultats suggrent que la boucle IIS4-S5 et lhlice IIS6 interagissent et jouent un rle dterminant dans lactivation de CaV2.3.
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Le systme immunitaire se doit dtre troitement rgul afin dviter que des rponses immunologiques inappropries ou de trop forte intensit ne surviennent. Ainsi, diffrents mcanismes permettent de maintenir une tolrance priphrique, mais aussi dattnuer la rponse lorsque celle-ci nest plus ncessaire. De tels mcanismes sont cependant aussi exploits par les tumeurs, qui peuvent ainsi chapper une attaque par le systme immunitaire et donc poursuivre leur progression. Ces mcanismes immunosuppresseurs nuisent non seulement la rponse naturelle contre les cellules tumorales, mais font aussi obstacle aux tentatives de manipulation clinique de limmunit visant gnrer une rponse anti-tumorale par limmunothrapie. Lun des mcanismes par lesquels les tumeurs svadent du systme immunitaire est lexpression denzymes responsables du mtabolisme des acides amins dont lune des principales est lindoleamine 2,3-dioxygnase (IDO). Cette dernire dgrade le tryptophane et diminue ainsi sa disponibilit dans le microenvironnement tumoral, ce qui engendre des effets ngatifs sur la prolifration, les fonctions et la survie des lymphocytes T qui y sont prsents. Bien que la rgulation de lexpression de cette enzyme ait t largement tudie chez certaines cellules prsentatrices dantignes, dont les macrophages et les cellules dendritiques, peu est encore connu sur sa rgulation dans les cellules tumorales humaines. Nous avons pos lhypothse que diffrents facteurs produits par les cellules immunitaires infiltrant les tumeurs (TIIC) rgulent lexpression de lIDO dans les cellules tumorales. Nous avons effectivement dmontr quune expression de lIDO est induite chez les cellules tumorales humaines, suite une interaction avec des TIIC. Cette induction indpendante du contact cellulaire rsulte principalement de linterfron-gamma (IFN-g) produit par les lymphocytes T activs, mais est rgule la baisse par linterleukine (IL)-13. De plus, la fludarabine utilise comme agent chimiothrapeutique inhibe linduction de lIDO chez les cellules tumorales en rponse aux lymphocytes T activs. Cette observation pourrait avoir des consquences importantes en clinique sachant quune forte proportion dchantillons cliniques provenant de tumeurs humaines exprime lIDO. Enfin, les lymphocytes B, qui sont retrouvs galement dans certaines tumeurs et qui interagissent troitement avec les lymphocytes T, sont aussi susceptibles une induction transcriptionnelle et traductionnelle de lIDO. Cette enzyme est cependant produite sous une forme inactive dans les lymphocytes B, ce qui rend peu probable lutilisation de lIDO par les lymphocytes B comme mcanisme pour freiner la rponse immunitaire. Nos travaux apportent des informations importantes quant la rgulation de lexpression de la molcule immunosuppressive IDO dans les cellules cancreuses. Ils dmontrent que lexpression de lIDO est influence par la nature des cytokines prsentes dans le microenvironnement tumoral. De plus son expression est inhibe par la fludarabine, un agent utilis pour le traitement de certains cancers. Ces donnes devraient tre prises en considration dans la planification de futurs essais immunothrapeutiques, et pourraient avoir un impact sur les rponses cliniques anti-tumorales.
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Le poly(1,3-dioxolanne) (PDOL) est un polymre semi-cristallin prsentant ltat solide quatre morphologies diffrentes (Phases I, IIa, IIb et III). Les transformations d'une phase l'autre ont t suivies par microscopie optique polarise (MOP) et microscopie force atomique (AFM) en fonction de la temprature de cristallisation et de la masse molaire. La Phase I prsente une morphologie sphrolitique tandis que la Phase IIa peut crotre partir de la Phase I ou spontanment. De faon inattendue, la Phase IIa, devient trs birfringente et cette nouvelle morphologie est appele Phase IIb. Quand la transformation IIa-IIb est termine, une nouvelle phase, la Phase III, crot partir de la Phase IIb. La Phase III n'a jamais t observe sans la prsence de Phase IIb; en outre, la Phase IIb remplace toujours la Phase IIa. Ce phnomne est appel germination croise. La mesure de la temprature de fusion des phases par MOP a permis dtablir leur stabilit relative: IIb > III >IIa. La vitesse de croissance (G) des sphrolites a t mesure sur une plage de tempratures de 10,0 24,0 C et montre une grande dpendance avec la masse molaire. Ces mesures ont rvl lexistence dune masse molaire critique, autour de 5000 g.mol-1, en-dessous de laquelle nous avons observ GIIa > GIII et au-dessus de laquelle la relation est inverse avec GIII > GIIa. Finalement, nous avons explor linfluence de lajout dun deuxime polymre amorphe sur lvolution des phases optiques dans des mlanges PDOL-PMMA, PDOL-PVC et PDOL-PVAc. Nous avons observ les mmes transitions de phases que pour le PDOL pur et un certain degr de compatibilit dans le cas du PDOL-PMMA et du PDOL-PVC.
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La thrombasthnie de Glanzmann (TG) est une maladie caractrise par un dfaut dagrgation plaquettaire. Cest une maladie gntique autosomale rcessive cause par une anomalie du rcepteur plaquettaire pour le fibrinogne. Ce rcepteur est une intgrine localise la surface plasmatique qui est forme par un complexe compos des sousunits IIb et 3. Nous avons identifi un cheval dmontrant les caractristiques clinicopathologiques de la TG. Des tudes par cytomtrie de flux ont rvl une dficience au niveau de la portion IIb du rcepteur. Ces rsultats suggrent une ou plusieurs mutations au niveau du gne codant pour cette portion IIb du rcepteur. Lobjectif de notre tude tait de caractriser lADNc et lADN gnomique codant pour les gnes ITGA2B et ITGB3 codant respectivement pour les deux sousunits IIb et 3 chez un cheval atteint de la TG. LADNc a t synthtis par RTPCR en utilisant lARN total rcolt partir des plaquettes. LADN gnomique a t extrait partir des globules blancs. Des amorces spcifiques ont t utilises pour lamplification par PCR dITGA2B et dITGB3. Les squences dADNc et dADN gnomique de notre patient ont t caractrises par squenage et compares par lanalyse BLAST (GenBank). Une substitution dune guanine par une cytosine a t mise en vidence au niveau de lexon 2 dITGA2B amenant la substitution dune arginine (Arg72) par une proline (Pro72). Ce changement dacide amin pourrait rsulter en une conformation structurelle anormale qui amnerait une sousunit IIb inactive. Lanalyse de lADN gnomique a dmontr que ce cheval tait homozygote pour cette mutation. Le squenage de lADN gnomique des parents et de la grandmre du patient a dmontr que ces individus taient htrozygotes pour cette mutation. Le squenage dITGB3 na dmontr aucune anomalie.
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Ce mmoire dcrit le dveloppement dune nouvelle mthodologie dexpansion de cycle irrversible partir de N-alkyl-3,4-dhydroprolinols pour former des N-alkyl ttrahydropyridines 3-substitues en passant par un intermdiaire aziridinium bicyclique. Cette mthode permet lintroduction dun vaste ventail de substituants la position 3 et tolre bien la prsence de groupements aux positions 2 et 6, donnant accs des pipridines mono-, di- ou trisubstitues avec un excellent diastrocontrle. De plus, il est dmontr que linformation strognique du 3,4-dhydroprolinol de dpart est totalement transfre vers le produit ttrahydropyridine. Additionnellement, une mthodologie fut dvelope pour la prparation des produits de dpart 3,4-dhydroprolinols en forme nantiopure, avec ou sans substituants aux positions 2 et 5, avec un trs bon strocontrle. Le premier chapitre prsente un rsum de la littrature sur le sujet, incluant un bref survol des mthodes existantes pour la synthse de pipridines 3-substitues, ainsi quune vue densemble de la chimie des aziridiniums. Lhypothse originale ainsi que le raisonnement pour lentreprise de ce projet y sont galement inclus. Le second chapitre traite de la synthse des N-alkyl-3,4-dhydroprolinols utiliss comme produits de dpart pour lexpansion de cycle vers les ttrahydropyridines 3-substitues, incluant deux routes synthtiques diffrentes pour leur formation. Le premier chemin synthtique utilise la L-trans-4-hydroxyproline comme produit de dpart, tandis que le deuxime est bas sur une modification de la raction de Petasis-Mannich suivie par une mtathse de fermeture de cycle, facilitant laccs aux prcurseurs pour lexpansion de cycle. Le troisime chapitre prsente une preuve de concept de la viabilit du projet ainsi que loptimisation des conditions ractionnelles pour lexpansion de cycle. De plus, il y est dmontr que linformation strognique des produits de dparts est transfre vers les produits. iv Au quatrime chapitre, ltendue des composs pouvant tre synthtiss par cette mthodologie est prsente, ainsi quune hypothse mcanistique expliquant les strochimies relatives observes. Une synthse nantioslective efficace et divergente de ttrahydropyridines 2,3-disubstitues est galement documente, o les deux substituants furent introduits partir dun intermdiaire commun en 3 tapes.
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Les proprits d'une nouvelle classe de chimie de surface base sur les monocouches auto-assembles de liquides ioniques (ILs-SAMs), ont t tudies pour une utilisation dans la construction de biocapteurs bass sur la rsonance des plasmons de surface (SPR). Les biocapteurs sont utiles pour dtecter des biomolcules spcifiques dans une matrice biologique complexe. Cependant, le signal analytique de la biomolcule spcifique peut tre masqu par ladsorption non spcifique de la matrice biologique, produisant une rponse faussement positive. Par ailleurs, l'activit des rcepteurs molculaires est souvent rduite par des techniques d'immobilisation chimique. Ainsi, il est essentiel de dterminer une surface idale pour la prparation de biocapteurs. Les liquides ioniques sont bien connus pour favoriser l'activit des rcepteurs molculaires et cette tude enqute si cette proprit importante peut se traduire sur des capteurs SPR. Diffrents liquides ioniques ont t utiliss pour former des monocouches auto-assembles sur une surface d'or. Les ILs-SAMs sont tous bass sur les sels de mercapto-(chane alkyle)nCH2-mthylimidazolium avec diffrentes chanes alkyles (n = 3, 6, 9, 12) et diffrents contre-anions (Br-, BF4-, PF6-, NTf2-). Des tudes cintiques de l'adsorption non spcifique de srum bovin ont t ralises sur des capteurs SPR avec un instrument construit sur mesure, bas sur l'interrogation des longueurs dondes SPR sur un prisme dinversion dimage (dove). Par la suite, lanti-IgG de chvre slective lIgG humain a t utilis en tant que modle pour la confection de biocapteurs sur les ILs-SAMs. En solution, il est possible deffectuer des changes du contre-anion des liquides ioniques pour un contre-anion de plus en plus hydrophobe. Cependant, lchange inverse, soit vers des anions de plus en plus hydrophile, savre impossible. Toutefois, il a t observ par les travaux prsents dans ce mmoire, que les liquides ioniques immobiliss sur une surface d'or ont la capacit d'changer leurs contre-anions rversiblement, procurant une mthode simple de moduler leurs proprits physico-chimiques. Ce phnomne a t observ par la mesure dangles de contacts et par les techniques spectroscopiques de linfrarouge moyen (mid-IR), des photolectrons de rayon-X (XPS) et par la diffusion Raman exalte par les surfaces (SERS) ii ainsi que par la spectromtrie de masse (MS). La connaissance des proprits dchange danion est importante pour prdire le comportement de ces surfaces de liquides ioniques dans les tampons et fluides biologiques.
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Les expansions du codon CAG (polyQ) sont impliques dans neuf maladies neurodgnratives. Notre groupe a dmontr que, lors de la traduction de la protine ataxine-3 (Atx3) mute qui est implique dans lataxie spinocrbelleuse de type 3 (SCA3), un changement du cadre de lecture vers un cadre dcal -1 (GCA) se produit. La traduction dans ce nouveau cadre de lecture entraine la production de polyalanine et ceci amplifierait la toxicit des polyQ. Le changement de cadre de lecture (ccl) ribosomique peut se produire des virus aux mammifres mais peu de choses sont connues sur son impact chez lhumain. Afin dtudier ce phnomne dans la protine Atx3 avec expansion de polyQ, nous avons tabli un modle de Drosophile transgnique et test si ctait lARNm ou la protine mute qui tait toxique. Nous avons aussi employ un essai de toeprinting (TP) afin didentifier lemplacement prcis o les ribosomes changent de cadre de lecture sur lARNm. Nos rsultats indiquent que la toxicit est due la prsence de polyalanines faisant suite au ccl et que lARNm en soi nest pas la cause directe de la toxicit. De plus, nous avons observ que les ribosomes sarrtent au 48ime codon glutamine et que cet arrt est spcifique aux polyQ. Larrt des ribosomes a dailleurs aussi t observ dans dautres maladies avec expansions de polyQ. Puisque ces maladies ont des caractristiques communes, un blocage de ce ccl pourrait attnuer les symptmes des patients SCA3 et dautres maladies expansions de polyQ
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La plupart des conditions dtectes par le dpistage nonatal sont relies l'une des enzymes qui dgradent les acyls-CoA mitochondriaux. Le rle physiopathologique des acyls-CoA dans ces maladies est peu connue, en partie parce que les esters lis au CoA sont intracellulaires et les chantillons tissulaires de patients humains ne sont gnralement pas disponibles. Nous avons cr une modle animal murin de l'une de ces maladies, la dficience en 3-hydroxy-3-methylglutaryl-CoA lyase (HL), dans le foie (souris HLLKO). HL est la dernire enzyme de la ctogense et de la dgradation de la leucine. Une dficience chronique en HL et les crises mtaboliques aiges, produisent chacune un portrait anormal et distinct d'acyls-CoA hpatiques. Ces profils ne sont pas prvisibles partir des niveaux d'acides organiques urinaires et d'acylcarnitines plasmatiques. La ctogense est indtectable dans les hpatocytes HLLKO. Dans les mitochondries HLLKO isoles, le dgagement de 14CO2 partir du [2-14C]pyruvate a diminu en prsence de 2-ketoisocaproate (KIC), un mtabolite de la leucine. Au test de tolrance au pyruvate, une mesure de la gluconogense, les souris HLLKO ne prsentent pas la rponse hyperglycmique normale. L'hyperammonimie et l'hypoglycmie, des signes classiques de plusieurs erreurs innes du mtabolisme (EIM) des acyls-CoA, surviennent de faon spontane chez des souris HLLKO et sont inductibles par l'administration de KIC. Une charge en KIC augmente le niveau d'acyls-CoA relis la leucine et diminue le niveau d'actyl-CoA. Les mitochondries des hpatocytes des souris HLLKO traites avec KIC prsentent un gonflement marqu. L'hyperammonimie des souris HLLKO rpond au traitement par l'acide N-carbamyl-L-glutamique. Ce compos permet de contourner une enzyme actyl-CoA-dpendante essentielle pour lurogense, le N-actylglutamate synthase. Ceci dmontre un mcanisme dhyperammonimie li aux acyls-CoA. Dans une deuxime EIM des acyls-CoA, la souris SCADD, dficiente en dshydrognase des acyls-CoA chanes courtes. Le profil des acyls-CoA hpatiques montre un niveau lev du butyryl-CoA particulirement aprs un jene et aprs une charge en triglycrides chane moyenne prcurseurs du butyryl-CoA.
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Le but de ce document est doffrir une analyse dtaille de trois fugues et dune pice pour orchestre de chambre, pices composes entre 2013 et 2014 et qui constituent le sommet dune dmarche compositionnelle visant la gradation de difficult dcriture et dexcution. Leur analyse comprend : une explication dtaille de leur position dans lalbum, une explication du ou des concepts qui les sous-tendent en plus dune analyse des diffrentes sections de toutes les pices.
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Lattrait des compagnies pharmaceutiques pour des structures cycliques possdant des proprits biologiques intressantes par les compagnies pharmaceutiques a orient les projets dcrits dans ce mmoire. La synthse rapide, efficace, verte et conomique de ces structures suscite de plus en plus dattention dans la littrature en raison des cibles biologiques vises qui deviennent de plus en plus complexes. Ce mmoire se divise en deux projets ciblant la synthse de deux structures aromatiques importantes dans le monde de la chimie mdicinale. Dans un premier temps, lamlioration de la synthse de drivs phnoliques a t ralise. Lapport de la chimie en flux continu dans le dveloppement de voies synthtiques plus vertes et efficaces sera tout dabord discut. Ensuite, une revue des antcdents concernant lhydroxylation dhalognure daryle sera effectue. Finalement, le dveloppement dune nouvelle approche rapide de synthse des phnols utilisant la chimie en flux continu sera prsent, suivi dun survol de ses avantages et ses limitations. Dans un deuxime temps, le dveloppement dune nouvelle mthodologie pour la formation de 3-aminoindazoles a t ralis. Tout dabord, un rsum de la littrature sur la synthse de diffrents indazoles sera prsent. Ensuite, une prsentation de deux mthodes efficaces dactivation de liens sera effectue, soit lactivation damides par lanhydride triflique et lactivation de liens CH catalyse par des mtaux de transition. Finalement, le dveloppement dune nouvelle mthodologie pour la synthse de 3-aminoindazole utilisant ces deux approches sera discut.
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Rapport d'analyse d'intervention prsent la Facult des arts et sciences en vue de l'obtention du grade de Matrise s sciences (M. Sc.) en psychoducation.
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De nombreux travailleurs sont exposs aux hydrocarbures aromatiques polycycliques (HAP). Le benzo(a)pyrne (BaP) fait partie de ce groupe de polluants. Cette substance a t classe cancrogne reconnu chez lhumain. Pour valuer l'exposition aux HAP cancrognes, plusieurs chercheurs ont propos dutiliser la mesure du 3-hydroxybenzo(a)pyrne (3-OHBaP) dans lurine des travailleurs exposs. Dans le cadre du prsent projet, deux approches de modlisation ont t dveloppes et appliques pour permettre une meilleure comprhension de la toxicocintique du BaP et son biomarqueur dintrt actuel, le 3-OHBaP, et pour aider interprter les rsultats de surveillance biologique. Un modle toxicocintique plusieurs compartiments a t dvelopp sur la base des donnes pralablement obtenues sur le rat par notre groupe. Selon le modle, le BaP inject par voie intraveineuse est rapidement distribu du sang vers les tissus (t 4 h), avec une affinit particulire pour les poumons et les composantes lipidiques des tissus. Le BaP est ensuite distribu vers la peau et le foie. Au foie, le BaP est promptement mtabolis et le 3-OHBaP est form avec une demi-vie de 3 h. Le mtabolisme pulmonaire du BaP a galement t pris en compte, mais sa contribution la cintique globale du BaP a t juge ngligeable. Une fois form, le 3-OHBaP est distribu vers les diffrents organes presque aussi rapidement que la molcule mre (t 2 h). Le profil temporel du 3-OHBaP dans le rein montre une accumulation transitoire en raison de la diffrence observe entre le taux dentre (t = 28 min) et le taux de sortie (t = 4,5 h). La clairance totale de 3-OHBaP du corps est principalement gouverne par le taux de transfert de la bile vers le tractus gastro-intestinal (t 4 h). Le modle toxicocintique plusieurs compartiments a russi simuler un ensemble indpendant de profils urinaires publis sur le 3-OHBaP. Ce modle toxicocintique compartiments s'est avr utile pour la determination des facteurs biologiques dterminants de la cintique du BaP et du 3-OHBaP. Par la suite, un modle pharmacocintique base physiologique (PCBP) reproduisant le devenir du BaP et du 3-OHBaP chez le rat a t construit. Les organes (ou tissus) reprsents comme des compartiments ont t choisis en fonction de donnes exprimentales obtenues in vivo chez le rat. Les coefficients de partition, les coefficients de permabilit, les taux de mtabolisation, les paramtres d'excrtion, les fractions absorbes et les taux d'absorption pour diffrentes voies dexposition ont t obtenus directement partir des profils sanguins, tissulaires, urinaires et fcaux du BaP et du 3-OHBaP. Les valeurs de ces derniers paramtres ont t calcules par des procdures Monte-Carlo. Des analyses de sensibilit ont ensuite t ralises pour sassurer de la stabilit du modle et pour tablir les paramtres les plus sensibles de la cintique globale. Cette modlisation a permis didentifier les facteurs dterminants de la cintique: 1) la sensibilit leve des paramtres de la mtabolisation hpatique du BaP et du 3-OHBaP ainsi que du taux d'limination; 2) la forte distribution du BaP dans les poumons par rapport d'autres tissus; 3) la distribution considrable du BaP dans les tissus adipeux et le foie; 4) la forte distribution du 3-OHBaP dans les reins; 5) le transfert limit du BaP par la diffusion tissulaire dans les poumons; 6) le transfert limit du 3-OHBaP par la diffusion tissulaire dans les poumons, les tissus adipeux et les reins; 7) la recirculation entro-hpatique significative du 3-OHBaP. Suite des analyses de qualit des ajustements des quations du modle aux donnes observes, les probabilits que les simulations reproduisent les donnes exprimentales par pur hasard se sont avres toujours infrieures 10% pour les quatre voies dexposition : intraveineuse, orale, cutane et respiratoire. Nous avons extrapol les modles cintiques du rat lhumain afin de se doter dun outil permettant de reconstituer les doses absorbes chez des travailleurs exposs dans diverses industries partir de mesures de l'volution temporelle du 3-OHBaP dans leur urine. Les rsultats de ces modlisations ont ensuite t compars ceux de simulations obtenues avec un modle toxicocintique compartiment unique pour vrifier lutilit comparative dun modle simple et complexe. Les deux types de modle ont ainsi t construits partir de profils sanguins, tissulaires, urinaires et fcaux du BaP et du 3-OHBaP sur des rats exposs. Ces donnes ont t obtenues in vivo par voie intraveineuse, cutane, respiratoire et orale. Ensuite, les modles ont t extrapols lhumain en tenant compte des dterminants biologiques essentiels des diffrences cintiques entre le rat et lhumain. Les rsultats ont montr que l'inhalation n'tait pas la principale voie d'exposition pour plusieurs travailleurs tudis. Les valeurs de concentrations de BaP dans lair utilises afin de simuler les profils dexcrtion urinaire chez les travailleurs taient diffrentes des valeurs de concentrations de BaP mesures dans lair. Une exposition au BaP par voie cutane semblait mieux prdire les profils temporels observs. Finalement, les deux types de modlisation se sont avrs utiles pour reproduire et pour interprter les donnes disponibles chez des travailleurs.
Resumo:
Le transport actif de sodium par les cellules pithliales alvolaires est le principal mcanisme impliqu dans la rgulation du niveau de liquide dans le poumon distal. Le canal pithlial sodique (ENaC) exprim par les cellules pithliales alvolaires est essentiel la rsorption du liquide des poumons la naissance ainsi que la rsolution de l'dme pulmonaire chez l'adulte. L'activit et l'expression du canal ENaC sont modules par de nombreux stress pathophysiologiques. L'inflammation pulmonaire constitue un facteur important dans l'inhibition de l'expression du canal ENaC et pourrait favoriser la formation d'dme pulmonaire. Nous avons prcdemment dmontr que diffrentes cytokines pro-inflammatoires, ainsi que les lipopolysaccharides (LPS) de Pseudomonas aeruginosa, inhibent l'expression de l'ARNm ENaC par des mcanismes de rgulation transcriptionnelle et post-transcriptionnelle. Ces rsultats suggrent que les mcanismes qui modulent la stabilit des ARNm ENaC pourraient jouer un rle important dans la rgulation du niveau dexpression du transcrit en condition inflammatoire. Le principal objectif de mes travaux tait de caractriser les mcanismes de modulation de lARNm ENaC dans les cellules pithliales alvolaires lors de diffrents stress pathophysiologiques et dterminer si cette modulation pouvait sexpliquer en partie par une rgulation de la stabilit du transcrit. Mes travaux montrent que les LPS et la cycloheximide inhibent lexpression de lARNm ENaC de faon similaire via lactivation des voies de signalisation des MAPK ERK1/2 et p38. Cependant, les mcanismes de modulation de lexpression de l'ARNm ENaC sont diffrents puisque les LPS rpriment la transcription du gne, alors que la cycloheximide diminuerait la stabilit du transcrit via des mcanismes post-transcriptionnels impliquant la rgion 3' non traduite (3'UTR) de l'ARNm ENaC. Pour mieux tudier le rle du 3'UTR dans ce processus, nous avons dvelopp un modle Tet-Off nous permettant de mesurer la demi-vie de lARNm ENaC indpendamment de lutilisation dun inhibiteur de la transcription comme l'actinomycine D (Act. D). Nous avons montr que la demi-vie de lARNm ENaC tait de 100min, un temps beaucoup plus court que celui rapport dans la littrature. Nous avons dmontr que lAct. D a un effet stabilisateur important sur lARNm ENaC et quil ne peut tre utilis pour valuer la stabilit du transcrit. laide de diffrents mutants de dltion, nous avons entrepris de dterminer la nature des rgions du 3UTR impliques dans la modulation de la stabilit du transcrit. Nous avons trouv que le 3UTR joue un rle la fois de stabilisation (rgion 3UTR proximale) et de dstabilisation (rgion 3UTR distale) du transcrit. Notre systme nous a finalement permis de confirmer que la diminution de lARNm ENaC observe en prsence de TNF- sexpliquait en partie par une diminution importante de la stabilit du transcrit induite par cette cytokine. Enfin, nous avons identifi la nature des protines pouvant se lier au 3UTR de lARNm ENaC et dtermin lesquelles pouvaient moduler la stabilit du transcrit. Des trois protines candidates trouves, nous avons confirm que la surexpression de DHX36 et TIAL1 diminue le niveau de transcrit par un mcanisme impliquant la stabilit du messager. Les travaux prsents ici montrent la complexit des voies de signalisation induites par diffrents stress sur les cellules pithliales alvolaires et montrent comment la stabilit de lARNm ENaC et en particulier, les squences du 3UTR jouent un rle important dans la modulation du niveau de transcrit. Le modle Tet-Off que nous avons dvelopp permet destimer le temps de demi-vie rel de lARNm ENaC et montre que le 3UTR du messager joue un rle complexe dans la stabilisation du messager en condition de base ainsi quen condition pro-inflammatoire. Enfin, nous avons identifi deux protines liant lARNm qui pourraient jouer un rle important dans la modulation de la stabilit du transcrit.
