Amplifiability of mitochondrial, microsatellite and amelogenin DNA loci from fecal samples of red brocket deer Mazama americana (Cetartiodactyla, Cervidae)

We tried to amplify mitochondrial, microsatellite and amelogenin loci in DNA from fecal samples of a wild Mazama americana population. Fifty-two deer fecal samples were collected from a 600-ha seasonal semideciduous forest fragment in a subtropical region of Brazil (21°20′, 47°17′W), with the help of a detection dog; then, stored in ethanol and georeferenced. Among these samples 16 were classified as fresh and 36 as non-fresh. DNA was extracted using the QIAamp® DNA Stool Mini Kit. Mitochondrial loci were amplified in 49 of the 52 samples. Five microsatellite loci were amplified by PCR; success in amplification varied according to locus size and sample age. Successful amplifications were achieved in 10/16 of the fresh and in 13/36 of the non-fresh samples; a negative correlation (R = -0.82) was found between successful amplification and locus size. Amplification of the amelogenin locus was successful in 22 of the 52 samples. The difficulty of amplifying nuclear loci in DNA samples extractedfrom feces collected in the field was evident. Some methodological improvements, including collecting fresh samples, selecting primers for shorter loci and quantifying the extracted DNA by real-time PCR, are suggested to increase amplification success in future studies. © FUNPEC-RP.

Fecal progestins during pregnancy and postpartum periods of captive red brocket deer (Mazama americana)

This study aimed to validate the enzyme immunoassay (EIA) for fecal progestin quantification of the species Mazama americana, define its excretion profile during periods of gestation and postpartum and determine the gestation period and resumption of postpartum ovarian activity in this species in captivity Fecal samples were collected twice a week during gestation and every day in the postpartum period, and analyzed using EIA The mean concentrations (±SEM) of fecal progestins during gestation were 2180.0 ± 299.1 ng/g in early pregnancy (week 1-11), 3271.4 ± 406.9 ng/g in middle pregnancy (week 12-22) and 5592.0 ± 1125.8 ng/g in late pregnancy (week 23-32) The gestation period determined for the species was 220.9 ± 1.2 days The concentration of progestins reached its peak prior to parturition and returned to baseline levels in 4 ± 0.31 days after parturition In the postpartum period, the mean concentrations of fecal progestins were 1564.2 ± 182.6 ng/g in the interval between parturition and resumption of ovarian activity, 469.8 ± 24.5 ng/g in the inter-luteal phase and 2401.7 ± 318.5 ng/g during the luteal phase, such that the postpartum period and the luteal phase differed from the inter-luteal phase Fecal progestin profiling permitted the detection of ovulation 26.9 ± 3.4 days after parturition in all the hinds studied and estimation of the mean duration of the estrous cycle, 21.3 ± 1.1 days Analysis established that concentrations of progestins above 3038.76 ng/g diagnosed pregnancy, a value determined from the week 12 of gestation Moreover, the quantification of fecal progestins by EIA proved to be an important tool for noninvasive endocrine monitoring and to obtain reproductive data on the species M americana in captivity © 2013 Elsevier B.V.

A PCR/RFLP methodology to identify non-Amazonian Brazilian deer species

Due to the necessity of using noninvasive samples to study animals as elusive as the deer that occur in Brazil, we realized it was important to develop a PCR/RFLP protocol to assist in identifying such samples. Thus we developed a protocol in which a fragment of the cytochrome b gene is digested with two enzymes: SspI, which distinguishes species of the genus Mazama from Blastocerus dichotomus and Ozotoceros bezoarticus, and TAQα1 which permits differentiation between the species B. dichotomus and O. bezoarticus. © 2013 Springer Science+Business Media Dordrecht.

Meiotic pairing of B chromosomes, multiple sexual system, and Robertsonian fusion in the red brocket deer Mazama americana (Mammalia, Cervidae)

Deer species of the genus Mazama show significant inter and intraspecific chromosomal variation due to the occurrence of rearrangements and B chromosomes. Given that carriers of aneuploidies and structural rearrangements often show anomalous chromosome pairings, we here performed a synaptonemal complex analysis to study chromosome pairing behavior in a red brocket deer (Mazama americana) individual that is heterozygous for a Robertsonian translocation, is a B chromosome carrier, and has a multiple sex chromosome system (XY1Y2). The synaptonemal complex in spermatocytes showed normal chromosome pairings for all chromosomes, including the autosomal and sex trivalents. The electromicrographs showed homology among B chromosomes since they formed bivalents, but they also appeared as univalents, indicating their anomalous behavior and non-Mendelian segregation. Thus, synaptonemal complex analysis is a useful tool to evaluate the role of B chromosomes and rearrangements during meiosis on the intraspecific chromosomal variation that is observed in the majority of Mazama species. © FUNPEC-RP.

Estrutura social em fêmeas de veado-campeiro (Ozotoceros bezoarticus) no pantanal

Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES)

Caça em assentamento rural no sul da floresta amazônica

Neste trabalho investiguei os efeitos sobre as populações locais de mamíferos silvestres das atividades de caça praticadas por sitiantes de um assentamento rural na Floresta Amazônica do norte do Estado de Mato Grosso. A segunda parte do Assentamento Japuranã, na qual foi realizado este estudo, foi ocupada ha três anos. Entrevistas formais foram realizadas com 17 moradores. Informações adicionais foram coletadas informalmente, durante todo tipo de contato com assentados durante o período de estudo. A maioria dos assentados são provenientes dos estados do Sul e Sudeste do Brasil. Tipicamente, são trabalhadores rurais, semi-analfabetos, com baixa renda mensal. As principais técnicas de caça praticadas são a "espera", "cachorros" e "excursão". A carne de caça se mostrou um elemento importante na alimentação aparecendo em cerca de um terço das refeições. A atividade de 14 caçadores foi monitorada entre maio e novembro de 2003, neste período eles abateram 113 mamíferos de 17 espécies. Análises da estrutura da população baseadas em crânios foram possíveis para apenas as espécies de porco-do-mato, Tayassu pecari (queixada) e Pecari tajacu (cateto). A análise indicou que a situação da estrutura da população do T. pecari e do P. tajacu é sensível e poderia seriamente ser afetada se a pressão da caça aumentar. Estimou-se a extração de 4096,3 kg de biomassa em uma área de aproximadamente 38 km2, representando um consumo médio de carne de 0,268 kg/pessoa por dia. Levantamentos populacionais de transecção linear foram realizados em três pontos, dois no assentamento e um em uma área vizinha de floresta contínua, como "controle", na qual a caça não é praticada. Num percurso total de 108 km, foram registradas quinze espécies de mamíferos e quatro de aves, com taxas de avistamento relativamente altas em comparação com outros sítios da Amazônia central e oriental. Entretanto, a riqueza de espécies e sua abundância foram maiores em ambos os pontos do assentamento em comparação com o controle. A abundância de ungulados (porcos-do-mato e veados.), os principais alvos dos caçadores, também foi maior no assentamento (ambos os pontos de coleta) em comparação com o controle. Isto sugere claramente que a caça ainda não teve um impacto significativo sobre as populações de mamíferos do assentamento, em termos de sua abundância, pelo menos. A maior parte da atividade de caça foi de subsistência (85,8%), a restante foi para o controle de animais predadores de criações domésticas (8,0%) ou depredatória (6,2%), neste caso, basicamente para a proteção dos cachorros durante perseguições. Apesar desta pressão, a abundância relativa de mamíferos na área do assentamento sugere que a caça seja sustentável a curto prazo (três anos), possivelmente em função da abundância natural de mamíferos na região, e a densidade populacional humana ainda baixa. Entretanto, esta situação pode durar pouco, já que o desmatamento e a conseqüente fragmentação de hábitat na área do assentamento é um processo contínuo, e a caça ocorre sem qualquer controle. Os resultados deste estudos fornecem uma base importante para o desenvolvimento de planos de manejo para a fauna local, envolvendo a comunidade local, órgãos fiscalizadores, o governo e instituições de pesquisa. Serão fundamentais tanto para conservação das espécies como pelo melhor aproveitamento dos recursos de caça pelos sitiantes locais.

Effect of sex and seasons of the year on hematologic and serum biochemical variables of captive brown brocket deer (Mazama gouazoubira)

The Brown brocket deer (Mazama gouazoubira) is the most common free-living and captive deer in South America, especially in Brazil, and has great ecological and scientific significance. However, data on hematological and biochemical parameters in brown brocket deer are scarce. The goal of this study was to establish reference ranges for hematological and biochemical parameters of Mazama gouazoubira, comparing differences during the seasons of the year and between sex. Blood samples from ten adult healthy brown brocket deer (6 female and 4 male) were collected during daytime, monthly, during 12 months. The animals were maintained in individual stable, protected from noise and fed ad libitum with commercial ration and green fodder. For blood collection, animals were submitted to physical restrain for no longer than 2 minutes. The following parameters were determined: red blood cell count (RBC), haemoglobin concentration, packed cell volume (PCV), mean corpuscular volume (MCV), mean corpuscular haemoglobin (MCH), mean corpuscular haemoglobin concentration (MCHC), white blood cell count (WBC), platelet count, enzyme activity of alanine aminotransferase (ALT), aspartate aminotransferase (AST) and gamma-glutamyl transferase (GGT) and serum levels of alkaline phosphatase (ALP), creatine kinase (CK), total protein (TP), albumin, cholesterol, total calcium, ionic calcium, sodium, potassium, magnesium, triglycerides, creatinine and urea. Values were compared according to season and sex. RBC count, WBC count and MCV suggested seasonal influence. Haemoglobin concentration, PCV and MCV were influenced by sex. Serum concentration of total calcium, ionic calcium, sodium, potassium and magnesium were influenced by season. Serum magnesium was also influenced by sex. The blood parameters herein reported may be useful as reference values for diagnostic and prognostic purposes in captive brown-brocket deer.

Comparing two different superovulation protocols on ovarian activity and fecal glucocorticoid levels in the brown brocket deer (Mazama gouazoubira)

Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES)

The role of chromosome variation in the speciation of the red brocket deer complex: the study of reproductive isolation in females

Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo (FAPESP)

Differentiation of deer species of the genus Mazama by track morphometry

Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo (FAPESP)

PHYSIOLOGIC EFFECTS OF THREE DIFFERENT PROTOCOLS OF ISOFLURANE ANESTHESIA IN CAPTIVE BROWN BROCKET DEER (MAZAMA GOUAZOUBIRA)

Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo (FAPESP)

Effects of laparoscopy on the cardiorespiratory system of brown brocket deer (Mazama gouazoubira) anesthetized with ketamine/ xylazine/ midazolam combination and isoflurane

A laparoscopia ainda é pouco utilizada como ferramenta para técnicas de reprodução assistida em cervídeos sul-americanos, não havendo informações sobre seus efeitos e protocolos anestésicos seguros para sua realização. Objetivaramse avaliar as possíveis alterações na freqüência cardíaca (FC), respiratória (FR), saturação de oxihemoglobina (SpO2) e temperatura retal (TR) durante a laparoscopia para visualização dos órgãos reprodutivos de seis fêmeas de veado-catingueiro (Mazama gouazoubira) anestesiadas com a associação cetamina (5mg/kg), xilazina (0,3mg/kg), midazolam (0,5mg/kg) e isofluorano. Cada animal, após anestesiado, foi posicionado em decúbito dorsal para realização de duas laparoscopias com insuflação abdominal de CO2 (14,2 ± 2,39mmHg; M ± EPM) com intervalo de 40 dias. Para avaliar os principais eventos da laparoscopia, esta foi dividida em três períodos: animal sem insuflação abdominal (P1), com insuflação abdominal (P2) e insuflação abdominal com os quadris elevados a 45º (P3). O controle foi realizado após 40 dias da última laparoscopia, para isto, cada animal foi novamente anestesiado e mantido em decúbito dorsal por um período de tempo igual ao tempo médio de duração das anestesias realizadas nas laparoscopias, sem que o procedimento laparoscópico fosse realizado. O tempo de anestesia dos controles foi também dividido em P1, P2 e P3, respeitando o tempo médio de duração de cada um destes períodos das laparoscopias. Para análise dos dados foi usado o teste de análise de variância (ANOVA) seguido do teste de Tukey e valores de P<0,05 considerados significativos. Não houve diferença significativa nos parâmetros estudados em nenhum dos períodos estabelecidos para o controle e laparoscopia. Porém, a FR média entre P1 (38,8 ± 4,42) e P3 (32,7 ± 4,81) e a TR média entre P1 (38,2ºC ± 0,17), P2 (37,6ºC ± 0,19) e P3 (37,0ºC ± 0,21) variaram significativamente, independente da laparoscopia. Tais dados permitiram concluir que a laparoscopia não promoveu alterações significativas nos parâmetros avaliados, embora o protocolo anestésico utilizado tenha contribuído para redução da temperatura retal resultando em risco de hipotermia durante a anestesia.

Evaluation of the marsh deer stifle joint by imaging studies and gross anatomy

Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo (FAPESP)

Conformational changes of the HsDHODH N-terminal microdomain via DEER spectroscopy

The human enzyme dihydroorotate dehydrogenase (HsDHODH) has been studied for being a target for development of new antineoplasic and antiproliferative drugs. The synthetic peptide N-t(DH) represents the N-terminal microdomain of this enzyme, responsible for anchoring it to the inner mitochondrial membrane. Also, it is known to harbor quinones that are essential for enzyme catalysis. Here we report structural features of the peptide/membrane interactions obtained by using CD and DEER spectroscopic techniques, both in micelles and in lipid vesicles. The data revealed different peptide conformational states in micelles and liposomes, which could suggest that this microdomain acts in specific regions or areas of the mitochondria, which can be related with the control of the quinone access to the HsDHODH active site. This is the first study to report on conformational changes of the HsDHODH N-terminal microdomain through a combination of CD and DEER spectroscopic techniques.