Thioflavin-S staining of bacterial inclusion bodies for the fast, simple, and inexpensive screening of amyloid aggregation inhibitors

Amyloid aggregation is linked to a large number of human disorders, from neurodegenerative diseases as Alzheimer"s disease (AD) or spongiform encephalopathies to non-neuropathic localized diseases as type II diabetes and cataracts. Because the formation of insoluble inclusion bodies (IBs) during recombinant protein production in bacteria has been recently shown to share mechanistic features with amyloid self-assembly, bacteria have emerged as a tool to study amyloid aggregation. Herein we present a fast, simple, inexpensive and quantitative method for the screening of potential anti-aggregating drugs. This method is based on monitoring the changes in the binding of thioflavin-S to intracellular IBs in intact Eschericchia coli cells in the presence of small chemical compounds. This in vivo technique fairly recapitulates previous in vitro data. Here we mainly use the Alzheimer"s related beta-amyloid peptide as a model system, but the technique can be easily implemented for screening inhibitors relevant for other conformational diseases simply by changing the recombinant amyloid protein target. Indeed, we show that this methodology can be also applied to the evaluation of inhibitors of the aggregation of tau protein, another amyloidogenic protein with a key role in AD.

Migração de fundoplicatura e do estômago para o hemitórax direito como complicação imediata de cardioplastia videolaparoscópica em doente portador de amiloidose

Patients with amyloidosis show deposits of protein cells that, with progression of the disease, can compress and destroy adjacent tissues and organs. The authors present a case of migration of fundoplicature after laparoscopic in surgical patients with gastroesophageal reflux symptoms (GER) and amyloidosis, into the right thorax, discussing the aspects of diagnosis and treatment.

Tratamento conservador de trauma renal grave após litotripsia extracorpórea por ondas de choque

Subcapsular and perinephric hematomas are relatively common after shock-wave lithotripsy, but high-grade kidney injuries are extremely rare. We present the first case of a high-grade kidney injury after shock-wave lithotripsy managed conservatively. A 57-year-old white female patient with left 1.5cm superior ureteral calculi was submitted to shock-wave lithotripsy.

O emprego do cateter duplo J diminui as complicações na ureterolitotomia retroperitoneoscópica

OBJETIVO: Avaliar os resultados da ureterolitotomia retroperitoneoscópica no tratamento do cálculo ureteral e a necessidade do cateter duplo J para reduzir complicações relacionadas ao procedimento. MÉTODOS: Estudo retrospectivo comparativo de 47 pacientes operados pela técnica de ureterolitotomia retroperitoneoscópica, dos quais 31 foram selecionados e divididos em dois grupos: Grupo 1, cujos pacientes não receberam cateter duplo J, e Grupo 2, que foram submetidos ao implante de cateter duplo J transoperatório. Foram coletados dados de urografia excretora pré e pós-operatória, tempo cirúrgico, analgesia pós-operatória, tempo de internação e retirada do dreno. RESULTADOS: Os grupos foram semelhantes quando comparados na idade e sexo, grau de dilatação do trato urinário, posição e tamanho médio do cálculo (Grupo 1= 15,5 ± 6,6mm; Grupo 2= 16,3 ± 6,1mm). O tempo operatório também não teve diferença significativa (Grupo 1= 130 ± 40,3min; Grupo 2= 136,3 ± 49,3min). O Grupo 1 apresentou seis pacientes (37,5 %) com complicações precoces (quatro casos de fístula urinária) e tardias (um caso de estenose de ureter, um caso de exclusão funcional do rim operado), enquanto o Grupo 2 não teve complicações, sendo esta diferença estatisticamente significativa (p=0,011). CONCLUSÃO: O emprego do cateter duplo J foi associado a um número significativamente menor de complicações na ureterolitotomia retroperitoneoscópica. Tempo cirúrgico, analgesia pós-operatória e tempo de internação foram semelhantes entre os grupos com e sem cateter.

Correlação entre os níveis de Ca-125 séricos e os achados cirúrgicos em mulheres com sintomas sugestivos de endometriose

OBJETIVO: Correlacionar os níveis séricos pré-operatórios do antígeno do câncer 125 (Ca-125) e os achados laparoscópicos em mulheres com sintomas dolorosos sugestivos de endometriose. MÉTODOS:Um estudo retrospectivo foi realizado incluindo todas as mulheres com sintomas de dor pélvica suspeitos para endometriose operadas por laparoscopia no período de janeiro de 2010 a março de 2013. As pacientes foram divididas em 2 grupos de acordo com a dosagem de Ca-125 (<35 U/mL e >35 U/mL). Subsequentemente, as pacientes com endometrioma ovariano foram excluídas e uma análise adicional foi conduzida novamente de acordo com os níveis do Ca-125. Os seguintes parâmetros foram comparados entre os grupos: presença de endometrioma, presença e número de lesões de endometriose profunda infiltrativa (EPI) e escore da American Society for Reproductive Medicine. A análise estatística foi realizada com o programa Statistica versão 8.0, usando o teste exato de Fisher, o teste t de Student e o teste Mann-Whitney, quando necessário. Os valores p<0,05 foram considerados estatisticamente significativos. RESULTADOS: Durante o período de estudo, um total de 350 mulheres foram submetidas a tratamento laparoscópico de endometriose. Cento e trinta pacientes (37,1%) apresentaram Ca-125 >35 U mL e 220 (62,9%) apresentaram Ca-125 <35 U/mL. A presença de endometrioma ovariano (47,7 versus 15,9%), lesões de EPI (99,6 versus 78,6%) e lesões de EPI intestinal (60 versus 30,9%) foi mais frequente, e o escore da AFSr foi maior (34 versus 6) no primeiro grupo. Na segunda análise, excluindo as pacientes com endometrioma ovariano (>35 U/mL=68 pacientes e <35 U/mL=185 pacientes), resultados semelhantes foram obtidos. A presença de lesões de EPI (91,2 versus 76,2%), lesões de EPI intestinal (63,2 versus 25,4%), lesões de EPI de bexiga (20,6 versus 4,8%) e lesões de EPI ureteral (7,3 versus 1,6%) foi mais frequente, e o escore da AFSr foi maior (10 versus 6) no grupo Ca-125>35 U/mL. CONCLUSÕES: Em mulheres com sintomas dolorosos pélvicos suspeitos para endometriose com dosagem pré-operatória de Ca-125 >35 U/mL, a investigação de EPI é mandatória, especialmente quando não se identifica endometrioma ovariano em exames de imagem.

Urolitíase em 76 cães

Entre janeiro de 1990 e dezembro de 2010 foram necropsiados 4.872 cães no Laboratório de Patologia Veterinária da Universidade Federal de Santa Maria (LPV-UFSM). Destes, 76 (1,6%) apresentaram urólitos em algum local do sistema urinário. O perfil epidemiológico dos cães afetados demonstrou o predomínio de machos (64,5%), adultos (52,6%) e com raça definida (56,6%). Sinais clínicos indicativos de urolitíase foram reportados em 30,3% dos casos e consistiram principalmente de hematúria, anúria, disúria e incontinência urinária. Os urólitos tiveram localização única ou múltipla e os locais anatômicos mais frequentemente acometimentos, em ordem decrescente de frequência, foram: bexiga, rim e uretra. Urolitíase ureteral não foi observada. Lesões secundárias à urolitíase foram observadas em aproximadamente 40% dos cães afetados; as mais prevalentes, em ordem decrescente de frequência, foram: cistite, obstrução uretral, hidroureter, hidronefrose, ruptura vesical (com uroperitônio) e pielonefrite. Em 25% dos cães afetados ocorreu morte espontânea ou eutanásia decorrente das lesões secundárias à urolitíase. Lesões extra-renais de uremia foram observadas em 11,8% dos casos.

Complications of surgical treatment of cervical carcinoma

A total of 302 patients with stage Ib and IIa cervical carcinoma were submitted to radical hysterectomy and lymphadenectomy during the period from 1980 to 1994. The morbidity rate was 37.5% and the mortality rate 0.6%. The most common intraoperative complications were injuries to the great pelvic vessels and the most frequent postoperative complications involved the urinary tract. The leading causes of morbidity were urinary infection (20.8%), bladder dysfunction (9.2%) and ureteral fistulas (2.9%). Although the rate of complications was high, morbidity has been decreasing over the last five years. Thus, radical hysterectomy continues to be one of the methods for the treatment of early cervical carcinoma that presents an acceptable 5-year survival rate.

Interactions of laminin with the amyloid ß peptide: Implications for Alzheimer's disease

Extensive neuronal cell loss is observed in Alzheimer's disease. Laminin immunoreactivity colocalizes with senile plaques, the characteristic extracellular histopathological lesions of Alzheimer brain, which consist of the amyloid ß (Aß) peptide polymerized into amyloid fibrils. These lesions have neurotoxic effects and have been proposed to be a main cause of neurodegeneration. In order to understand the pathological significance of the interaction between laminin and amyloid, we investigated the effect of laminin on amyloid structure and toxicity. We found that laminin interacts with the Aß1-40 peptide, blocking fibril formation and even inducing depolymerization of preformed fibrils. Protofilaments known to be intermediate species of Aß fibril formation were also detected as intermediate species of laminin-induced Aß fibril depolymerization. Moreover, laminin-amyloid interactions inhibited the toxic effects on rat primary hippocampal neurons. As a whole, our results indicate a putative anti-amyloidogenic role of laminin which may be of biological and therapeutic interest for controlling amyloidosis, such as those observed in cerebral angiopathy and Alzheimer's disease.

Scintigraphy and Doppler ultrasonography for the evaluation of obstructive urinary calculi

Forty-seven patients with unilateral obstructive calculi (12 males and 35 females) were submitted to 99mTc-diethylene triamine pentaacetic acid (DTPA) or 99mTc-dimercaptosuccinic acid (DMSA) scans for assessment of renal function. The scans revealed unilateral functional deficit in 68 and 66% of the patients, respectively. A calculus size of 1.1 to 2.0 cm was significantly associated with deficit detected by DTPA, but duration of obstruction and calculus localization were not. After relief of the obstruction, the mean percent renal function of the affected kidney was found to be significantly increased from 25 ± 12% to 29 ± 12% in DTPA and from 21 ± 15% to 24 ± 12% in DMSA. Initial Doppler ultrasonography performed in 35 patients detected an increased resistive index in 10 (29%). In the remaining patients with a normal resistive index, ureteral urinary jet was observed, indicating partial obstruction. The high frequency of renal function impairment detected by DTPA and of tubulointerstitial damage detected by DMSA as well as the slight amelioration of unilateral renal function after relief of obstruction suggest that scintigraphy assessment may help evaluate the unilateral percentage of renal function and monitor renal function recovery when it occurs. The presence of a urinary jet detected by Doppler ultrasonography further indicates the severity of obstruction and the recovery prognosis.

Is a contrast study really necessary prior to ureteroscopy?

This study aimed to evaluate the effect of preoperative imaging techniques on the success and complication rates of ureteroscopy. We performed a retrospective analysis of 736 patients (455 males and 281 females), with a mean age of 45.5±15.2 years (range, 1-88 years), who underwent rigid ureteroscopic procedures for removal of ureteral stones. Patients were divided into 4 groups according to the type of imaging modality used: group I, intravenous urography (n=116); group II, computed tomography (n=381); group III, computed tomography and intravenous urography (n=91), and group IV, ultrasonography and abdominal plain film (n=148). Patients’ demographics, stone size and location, prior shock wave lithotripsy, lithotripsy technique, operation time, success rate, and rate of intraoperative complications were compared among the groups. There were no significant differences in success and complication rates among the groups. The stone-free rate after primary ureteroscopy was 87.1% in group I, 88.2% in group II, 96.7% in group III, and 89.9% in group IV (P=0.093). The overall incidence of intraoperative complications was 11.8%. According to the modified Satava classification system, 6.1% of patients had grade 1, 5.1% had grade 2, and 0.54% had grade 3 complications. Intraoperative complications developed in 12.1% of patients in group I, 12.6% of patients in group II, 7.7% of patients in group III, and 12.2% of patients in group IV (P=0.625). Our findings clearly demonstrate that ureteroscopic treatment of ureteral stones can be safely and effectively performed with no use of contrast study imaging, except in doubtful cases of anatomical abnormalities.

Comparison of totally tubeless percutaneous nephrolithotomy and standard percutaneous nephrolithotomy for kidney stones: a randomized, clinical trial

This study aimed to compare the totally tubeless percutaneous nephrolithotomy and standard percutaneous nephrolithotomy techniques regarding their rates of success and complications in patients with kidney stones. Patients were randomly assigned to two groups. Forty-four patients (24 men; mean age: 50.40±2.02 years) received totally tubeless percutaneous nephrolithotomy (PCNL; no nephrostomy catheter or ureteral catheter after PCNL) and 40 patients (18 men; mean age: 49.95±13.38 years) underwent standard PCNL (a nephrostomy catheter and ureteral catheter were used after PCNL). All surgeries were performed by one surgeon. Postoperative changes in hemoglobin, the blood transfusion rate, changes in creatinine levels, operation time, analgesic need, hospitalization time, and complication rate were compared between the groups. No significant differences were observed in age, gender, stone size, and surgery side between the groups (P<0.05). The operation time was significantly lower in the totally tubeless PCNL group than in the standard PCNL group (P=0.005). Pethidine requirements were significantly higher in the standard PCNL group than the totally tubeless PCNL group (P=0.007). Hospitalization time was significantly higher in the standard PCNL group than in the totally tubeless PCNL group (P<0.0001). The complication rate was 15% in the standard PCNL group and 9.1% in the totally tubeless PCNL group (P=0.73). The totally tubeless PCNL technique is safe and effective, even for patients with staghorn stones. This technique is associated with decreased pain, analgesic needs, and operative and hospitalization time. We believe that a normal peristaltic ureter is the best drainage tube.

Alterações anatômicas em pacientes com nefrolitíase

INTRODUÇÃO: Nefrolitíase é uma doença multifatorial e tem relação com desordens genéticas e fatores ambientais. Cálculos renais são mais comuns em adultos e são associados com várias desordens metabólicas e anatômicas. As principais anormalidades anatômicas como obstrução da junção ureteropélvica, rim em ferradura, ureter duplicado completa ou incompletamente, pelve bífida e rim esponja medular são conhecidas como responsáveis pela formação dos cálculos. O objetivo deste estudo é avaliar alterações anatômicas em pacientes com nefrolitíase em nossa região. MÉTODOS: Estudo retrospectivo em 1.378 pacientes com evidência de formação recente de cálculos renais. Investigação laboratorial e análise química foram realizadas quando houve disponibilidade. Técnicas de imagens renais incluíram pelo menos ultrassonografia renal e urografia excretora. RESULTADOS: 1.378 pacientes com nefrolitíase foram atendidos, dentre os quais somente 367 (26,5%) foram submetidos à investigação anatômica e 132 (36,0%) tiveram pelo menos uma alteração anatômica. A idade média dos pacientes investigados foi de 36,8 ± 4,3 anos e 198 (54,5%) eram do sexo feminino. As alterações anatômicas mais frequentemente encontradas foram cisto renal, ureter duplicado completa ou incompletamente e obstrução da junção ureteropélvica. CONCLUSÕES: Alterações anatômicas foram encontradas em 36% dos pacientes investigados. Cisto renal, duplicação ureteral e obstrução da junção ureteropélvica foram as alterações anatômicas mais comuns neste grupo.

Exames de imagem na avaliação de anomalias urológicas em lactentes com hidronefrose fetal: avanços e controvérsias

Avanços recentes no diagnóstico pré-natal têm permitido o aprimoramento da detecção e o manejo das anormalidades do trato urinário. A ultrassonografia pré-natal permite o reconhecimento de anormalidades urológicas que somente seriam identificadas tardiamente, após o aparecimento de sintomas ou complicações. A uretrocistografia miccional pode ser reservada para casos selecionados. Exames de medicina nuclear devem ser realizados em casos de hidronefrose moderada e grave. O estudo consistiu de uma revisão da literatura atual sobre a abordagem pós-natal da hidronefrose fetal. Os dados obtidos foram confrontados com a experiência da Unidade de Nefrologia Pediátrica do HC/UFMG na conduta e no seguimento de crianças com diagnóstico de uropatias detectadas na investigação de hidronefrose fetal.

Síndrome de Hadju-Cheney: alterações renais em um relato de caso

A síndrome de Hadju-Cheney é uma doença genética caracterizada por dismorfismos craniofaciais e alterações ósseas responsáveis pelo fenótipo da doença. As alterações renais, como cistos renais corticais, refluxo vesico - ureteral e falência renal, são raramente relatadas, mas são incluídas como apresentações menos comuns. O diagnóstico genético ainda não está disponível e a patogênese é relacionada a mutações no gene NOTCH. Os autores relatam um caso de um homem de 26 anos; porém, com características fenotípicas de um paciente pediátrico. Ele se apresentou com síndrome nefrótica, hipertensão arterial, cistos renais corticais e insuficiência renal aguda requerendo hemodiálise. A biopsia renal evidenciou glomeruloesclerose focal e segmentar e o tratamento para esse paciente foi de suporte com terapia hemodialítica. O diagnóstico da síndrome de Hadju-Cheney foi dado durante investigação do quadro renal.

Five years results after intrafamilial kidney post-transplant in a case of familial hypomagnesemia due to a claudin-19 mutation

Introduction: Familial Hypomagnesaemia with hypercalciuria and nephrocalcinosis, with severe ocular impairment secondary to claudin-19 mutation, is a rare recessive autossomic disorder. Its spectrum includes renal Mg2+ wasting, medullary nephrocalcinosis and progressive chronic renal failure in young people. Objective: To report a case of kidney transplantation father to daughter in a familial occurrence of severe bilateral nephrocalcinosis associated with ocular impairment in a non-consanguineous Brazilian family, in which two daughters had nephrocalcinosis and severe retinopathy. Methods: The index case, a 19 years-old female, had long-lasting past medical history of recurrent urinary tract infections, and the abdominal X-ray revealed bilateral multiple renal calcifications as well as ureteral lithiasis, and she was under haemodialysis. She had the diagnosis of retinitis pigmentosa in the early neonatal period. The other daughter (13 years-old) had also nephrocalcinosis with preserved kidney function, retinopathy with severe visual impairment, and in addition, she exhibited hypomagnesaemia = 0.5 mg/dL and hypercalciuria. The other family members (mother, father and son) had no clinical disease manifestation. Mutation analysis at claudin-19 revealed two heterozygous missense mutations (P28L and G20D) in both affected daughters. The other family members exhibited mutant monoallelic status. In despite of that, the index case underwent intrafamilial living donor kidney transplantation (father). Conclusion: In conclusion, the disease was characterized by an autosomal recessive compound heterozygous status and, after five years of donation the renal graft function remained stable without recurrence of metabolic disturbances or nephrocalcinosis. Besides, donor single kidney Mg2+ and Ca2+ homeostasis associated to monoallelic status did not affect the safety and the usual living donor post-transplant clinical course.