Field evaluation of a sentinel mosquito (Diptera : culicidae) trap system to detect Japanese encephalitis in remote Australia

Incursions of Japanese encephalitis (JE) virus into northern Queensland are currently monitored using sentinel pigs. However, the maintenance of these pigs is expensive, and because pigs are the major amplifying hosts of the virus, they may contribute to JE transmission. Therefore, we evaluated a mosquito-based detection system to potentially replace the sentinel pigs. Single, inactivated JE-infected Culex annulirostris Skuse and C. sitiens Wiedemann were placed into pools of uninfected mosquitoes that were housed in a Mosquito Magnet Pro (MM) trap set under wet season field conditions in Cairns, Queensland for 0, 7, or 14 d. JE viral RNA was detected (cycling threshold [CT] = 40) in 11/ 12, 10/14, and 2/5 pools containing 200, 1,000, and 5,000 mosquitoes, respectively, using a TaqMan real-time reverse transcription-polymerase chain reaction (RT-PCR). The ability to detect virus was not affected by the length of time pools were maintained under field conditions, although the CT score tended to increase with field exposure time. Furthermore, JE viral RNA was detected in three pools of 1,000 mosquitoes collected from Badu Island using a MM trap. These results indicated that a mosquito trap system employing self-powered traps, such as the MosquitoMagnet, and a real-time PCR system, could be used to monitor for JE in remote areas.

Mosquito host-feeding patterns and implications for Japanese encephalitis virus transmission in northern Australia and Papua New Guinea

Japanese encephalitis (JE) virus spread to northern Australia during the 1990s, transmitted by Culex annulirostris Skuse and other mosquitoes (Diptera: Culicidae). To determine the relative importance of various hosts for potential vectors of JE virus, we investigated the host-feeding patterns of mosquitoes in northern Australia and Western Province of Papua New Guinea, with particular attention to pigs, Sus scrofa L. - the main amplifying host of JE virus in South-east Asia. Mosquitoes were collected by CDC light traps baited with dry ice and 1-octen-3-ol, run 16.00-08.00 hours, mostly set away from human habitations, if possible in places frequented by feral pigs. Bloodmeals of 2569 mosquitoes, representing 15 species, were identified by gel diffusion assay. All species had fed mostly on mammals: only 30%) were trapped where domestic pigs were kept close to human habitation. From seven of eight locations on the Australian mainland, the majority of Cx. annulirostris had obtained their bloodmeals from marsupials, probably the Agile wallaby Macropus agilis (Gould). Overall proportions of mosquito bloodmeals identified as marsupial were 60% from the Gulf Plains region of Australia, 78% from the Cape York Peninsula and 64% from the Daru area of Papua New Guinea. Thus, despite the abundance of feral pigs in northern Australia, our findings suggest that marsupials divert host-seeking Cx. annulirostris away from pigs. As marsupials are poor JE virus hosts, the prevalence of marsupials may impede the establishment of JE virus in Australia.

Epizootic activity of Murray Valley encephalitis and Kunjin viruses in an aboriginal community in the Southeast Kimberley region of Western Australia: Results of mosquito fauna and virus isolation studies

We undertook annual surveys of flavivirus virus activity in the community of Billiluna of Western Australia in the southeast Kimberley region between 1989 and 2001. Culex annulirostris was the dominant mosquito species, particularly in years of above average rains and flooding. Murray Valley encephalitis (MVE) virus was isolated in 8 of the 13 years of the study from seven mosquito species, but more than 90% of the isolates were from Cx. annulirostris. The results suggest that MVE virus is epizootic in the region, with activity only apparent in years with average or above average rainfall and increased numbers of Cx. annulirostris. High levels of MVE virus activity and associated human cases were detected only once (in 1993) during the survey period. Activity of MVE virus could only be partially correlated with wet season rainfall and flooding, suggesting that a number of other factors must also be considered to accurately predict MVE virus activity at such communities.

Vector competence experiments with Rocio virus and three mosquito species from the epidemic zone in Brazil

First-generation progeny of field-collected Psorophora ferox, Aedes scapularis, and Aedes serratus from the Rocio encephalitis epidemic zone in S.Paulo State, Brazil, were tested for vector competency in the laboratory. Psorophora ferox and Ae. scapularis are susceptible to per os infection with Rocio virus and can transmit the virus by bite following a suitable incubation period. Oral ID50S for the two species (10(4.1) and 10(4.3) Vero cell plaque forming units, respectively) did not differ significantly. Infection rates in Ae. serratus never exceeded 36%, and, consequently, an ID50 could not be calculated for this species. It is unlikely that Ae. serratus is an epidemiologically important vector of Rocio virus. The utility of an in vitro feeding technique for demonstrating virus transmission by infected mosquitoes and difficulties encountered in working with uncolonized progeny of field-collected mosquitoes are discussed.

Biologia de Anopheles (Kerteszia) neivai H., D. & K., 1913 (Diptera: Culicidae) en la costa Pacífica de Colombia: I. Fluctuación de la población larval y características de sus criaderos

En Charambirá, localidad del município de Istmina (Chocó) en la costa Pacífica de Colombia, donde existe un problema de malaria endémica, se estudió la fluctuación de la población larval y las características de los criaderos de Anopheles (Kerteszia) neivai, especie considerada como posible vectora de malaria en esa región del país. La vegetación circundante fue dividida en tres estratos de acuerdo al grado de cobertura foliar. Se demarcaron cuadrantes de 100 m² en cada estrato para el muestreo de plantas epífitas de la família Bromeliaceae, en las cuales se acumula agua que sirve como criadero para esta especie de anofelino. Se tomaron datos de temperatura, pH y volumen del agua contenida en cada bromelia. El mayor número de larvas se detectó en el estrato 1 (manglar) a una altitud inferior a 4 m, pero no se encontró evidencia significativa de estratificación vertical de la población larval de A. neivai hasta los 8 m. Se evidenció una correlación lineal positiva entre el número de larvas y el volumen de agua contenida en cada bromelia; por otra parte se observó también una correlación directa entre la precipitación mensual acumulada y la fluctuación poblacional de esta especie. Los índices larvales mas altos se observaron entre los meses de marzo a abril y de julio a agosto. La mortalidad larval fue alta en el primer estadío (43,5%) y solo un 23,7% sobrevivió hasta el cuarto.

Avaliação do desenvolvimento larval de Anopheles darlingi criado em laboratório sob diferentes dietas

São testadas três dietas para larvas de A. darlingi, buscando-se os seguintes parâmetros indicativos de desenvolvimento nesta fase: tempo de evolução total e de cada estádio, sobrevivência ao estádio, diária e total. A metodologia utilizada na determinação desses parâmetros constitui-se da combinação de dois métodos de análise da estatística vital, adaptados ao estudo de populações mantidas em laboratório. Os tempos de evolução total e de cada estádio foram determinados gráficamente a partir das curvas de tendência dos estádios medianos da colônia, em inspeções sucessivas. Os valores de sobrevivência diária, ao estádio e total foram calculados a partir de tábuas de sobrevivência. Os resultados permitiram eleger a dieta composta de uma parte de farinha de peixe para duas partes de farinha de pão e duas partes de germe de trigo como a mais adequada ao desenvolvimento larval, com duração de 12,9 dias entre o primerio estádio e a emersão do adulto e sobrevivência total de 95%.

Studies on mosquitoes (Diptera: Culicidae) and anthropic environment: 3- Survey of adult stages at the rice irrigation system and the emergence of Anopheles albitarsis in South-Eastern, Brazil

A study of adult Culicidae ecology was carried out from January 1992 through January 1993 at the rice irrigation system of the Ribeira Valley Experimental Station. The adaptation of Anopheles albitarsis to the anthropic environment became evident through the adult collections made at its various habitats represented by the irrigation system and the edge of the residual pond, as well as at those made within the local patchy residual woods. Other potential disease vectors were prevalent in the irrigated system too. There were Aedes scapularis, Culex nigripalpus and Cx. ribeirensis that were collected at various habitats. Remarkable differences among their prevalences were obtained such as between the natural forest and anthropic environments. In the former An. albitarsis was practically non-existent, thus suggesting that it might be considered as eusynathropic. As the populations of other species seemed to increase in the anthropic environment, they may be regarded as hemisynanthropes. Observations suggest the hypothesis that the development of irrigated land may be a factor in the emergence of An. albitarsis, and some other species, as well as the possibility of an increase in the transmission of mosquito-borne diseases such as malaria.

Duration of larval and pupal development stages of Aedes albopictus in natural and artificial containers

Aedes albopictus were reared in different containers: a tree hole, a bamboo stump and an auto tire. The total times from egg hatching to adult emergence were of 19.6,27.3 and 37.5 days, respectively, according to the container. The first, second and third-instar larvae presented growth periods with highly similar durations. The fourth-instar larvae was longer than the others stages. The pupation time was longer than the fourth-instar larvae growth period. The temperature of the breeding sites studied, which was of 18° C to 22° C on average, was also taken into consideration. The mortality of the immature stages was analysed and compared as between the experimental groups; it was lower in the natural containers than in the discarded tire. The average wing length of adult females emerging from tree hole was significantly larger (p < 0.05) than that of those emerging from the tire.

Human case of gastric infection by a fourth larval stage of Pseudoterranova decipiens (Nematoda, Anisakidae)

Only three cases of human infection by anisakid nematodes have been reported in Chile since 1976. In the present case, an anisakid worm, identified as a fourth-stage Pseudoterranova decipiens larva, was removed with a gastroendoscopic biopsy clipper from the stomach of a 45 year-old man from southern Chile. The patient, who presented acute epigastric pain and a continuous sensation of having an empty stomach, reported having eaten smoked fish. The worm was fixed in 70% ethanol and cleaned in lactophenol for morphological study. The morphometric characteristics of the worm are described and drawn. Anisakid larvae in fish flesh can be killed by freezing or cooking.

Susceptibilidade larval de duas populações de Aedes egypti a inseticidas químicos

OBJETIVO: A susceptibilidade dos insetos tem sido um dos mais importantes aspectos a ser monitorados em programas de saúde pública que tratam do controle de vetores. O estudo objetiva avaliar a susceptibilidade de larvas de Aedes aegypti a inseticidas químicos em áreas sujeitas ou não a controle. MÉTODOS: Bioensaios foram realizados com concentração de diagnóstico e concentração múltipla, segundo padrão da Organização Mundial de Saúde para as coletas de larvas de Aedes aegypti, em uma área não sujeita -- Campinas, SP -- e em uma outra área sujeita -- Campo Grande, MS -- a tratamentos químicos de controle. RESULTADOS: Larvas de Aedes aegypti coletadas em Campinas indicaram resistência potencial à concentração-diagnóstico (CD) de 0,04 ppm do organofosforado temephos. O teste de concentração múltipla registrou sobrevivência de 24,5% à concentração de 0,0125 ppm. A susceptibilidade dessa mesma linhagem foi avaliada para o organofosforado fenitrothion (CD=0,08 ppm) e o piretróide cipermetrina (CD=0,01 ppm), resultando em valores normais para essas concentrações. Larvas de Ae. aegypti coletadas em Campo Grande mostraram susceptibilidade normal ao temephos (CD=0,04 ppm) e à cipermetrina (CD=0,01 ppm). Também foram estabelecidas as CL50 e as CL95 de cipermetrina 25 CE, cyfluthrin 5 CE, betacyfluthrin 1,25 SC e propoxur 20 CE para Ae. aegypti. Com base nos dados da linhagem-padrão Rockefeller, foram estimadas as razões de resistência de 2,9, 2,2, 2,4 e 1,3, respectivamente, pela CL50, e de 3,5, 2,6, 3,9 e 1,3 pela CL95. CONCLUSÃO: Os resultados reforçam a necessidade de avaliações prévias e monitoramento da efetividade dos inseticidas que devem ser usados em programas de controle de mosquitos.

Susceptibilidade larval de populações de Aedes aegypti e Culex quinquefasciatus a inseticidas químicos

OBJETIVO: Avaliar a susceptibilidade a inseticidas químicos de larvas de Culex quinquefasciatus e Aedes aegypti, provenientes de áreas sujeitas ou não a tratamentos de controle. MÉTODOS: Foram coletadas larvas de mosquitos em uma área não sujeita a tratamentos com inseticidas (Campinas, SP) e em áreas sujeitas a esses tratamentos (Campo Grande, MS e Cuiabá, MT). Foram usados bioensaios com concentrações diagnóstico e concentrações múltipla de inseticidas organofosforados e piretróides, segundo padrão da Organização Mundial de Saúde, para avaliar a susceptibilidade dessas larvas. RESULTADOS: Ensaios com larvas de Culex quinquefasciatus de Campinas, SP, permitiram a suspeita de resistência à cipermetrina e evidenciaram resistência à ciflutrina. Larvas dessa espécie coletadas em Campo Grande, MS, e Campinas, SP, apresentaram resistência ao temephos. Para a colônia campineira desta espécie, foram estabelecidas as razões de resistência: RR50=6,36 e RR95=4,94, com base em linhagem susceptível padrão. Adicionalmente, os testes com Aedes aegypti mostraram susceptibilidade similar ao temephos em uma população de campo (Cuiabá, MT) e uma de laboratório. CONCLUSÕES: Os resultados indicam resistência a organofosforado e piretróides em Culex quinquefasciatus, evidenciando a necessidade de avaliações e monitoramento da efetividade dos inseticidas a serem usados nos programas de controle de mosquitos.

Aedes albopictus em bromélias de solo em Ilhabela, litoral do Estado de São Paulo

OBJETIVO: Analisar a presença de Aedes albopictus em bromélias de solo localizadas em ambientes ecologicamente distintos, em termos de positividade, densidade e volume de água. MÉTODOS: O estudo foi realizado no município de Ilhabela, litoral norte do Estado de São Paulo. Realizaram-se coletas quinzenais, de março de 1998 a julho de 1999, em tanques de bromélias localizadas nos ambientes urbano, periurbano e mata; o conteúdo aquático das plantas foi medido e registrado. O tratamento dos dados baseou-se na análise da freqüência de bromélias com presença de Ae. albopictus (ANOVA), abundância (Kruskal-Wallis) e volume de água das bromélias positivas (Teste t de Student). RESULTADOS: A presença e a densidade de Ae. albopictus em bromélias de solo variou com o tipo de ambiente. Os maiores percentuais de positividade (85%) e abundância (81%) foram observados nas plantas localizadas em ambiente urbano. Constatou-se ainda preferência dos mosquitos pelas bromélias com maiores volumes de água (média de 300 ml). CONCLUSÕES: As diferentes freqüências com que Ae. albopictus foi registrado nos ambientes e suas respectivas densidades mostraram sua capacidade de invasão a novos habitats. Recomenda-se intensificar a vigilância entomológica nessas plantas, dada a sua capacidade em traduzir-se em criadouros permanentes. A presença desse mosquito de importância médica em bromélias em área preservada da Mata Atlântica poderá resultar em agravo à saúde.

Primary screening of the bioactivity of brackishwater cyanobacteria: toxicity of crude extracts to artemia salina larvae and paracentrotus lividus embryos

Cyanobacteria are a diverse group of Gram-negative bacteria that produce an array of secondary compounds with selective bioactivity against vertebrates, invertebrates, plants, microalgae, fungi, bacteria, viruses and cell lines. The aim of this study was to assess the toxic effects of aqueous, methanolic and hexane crude extracts of benthic and picoplanktonic cyanobacteria isolated from estuarine environments, towards the nauplii of the brine shrimp Artemia salina and embryos of the sea urchin Paracentrotus lividus. The A. salina lethality test was used as a frontline screen and then complemented by the more specific sea urchin embryo-larval assay. Eighteen cyanobacterial isolates, belonging to the genera Cyanobium, Leptolyngbya, Microcoleus, Phormidium, Nodularia, Nostoc and Synechocystis, were tested. Aqueous extracts of cyanobacteria strains showed potent toxicity against A. salina, whereas in P. lividus, methanolic and aqueous extracts showed embryo toxicity, with clear effects on development during early stages. The results suggest that the brackishwater cyanobacteria are producers of bioactive compounds with toxicological effects that may interfere with the dynamics of invertebrate populations.

Associação entre incidência de dengue e variáveis climáticas

OBJETIVO: Descrever a ocorrência de casos de dengue autóctone segundo sexo, faixa etária e local provável de infecção e sua relação com variáveis climatológicas. MÉTODOS: Os registros de casos autóctones em São Sebastião, SP, de 2001 a 2002, e confirmados laboratorialmente foram estudados. A densidade larval foi verificada pelos índices de predial, recipientes e Breteau. A relação entre dados de pluviosidade, temperatura e número de casos foi analisada pela correlação de Spearman utilizando-se o conceito time-lag. RESULTADOS: Os coeficientes de incidência anuais para 2001 e 2002 foram de 80,31 e 211,1 por 10.000 habitantes, respectivamente. A maioria dos casos de dengue (n=1.091; 65%) foi registrada na área central do município. O sexo feminino foi o mais acometido (n=969; 60%) e ambos os sexos nas faixas etárias entre 20 e 29 e 30 e 39 anos. Não foi observada correlação entre variáveis climatológicas e número de casos do mesmo mês, entretanto, esta associação ocorre a partir do segundo mês estendendo-se até o quarto mês. CONCLUSÕES: A associação entre o número de casos de dengue e fatores abióticos identificou o intervalo de tempo em que a chuva e a temperatura contribuíram na geração de novos casos. Tais aspectos, associados à vulnerabilidade turística da região litorânea, propiciaram condições para ocorrência da doença. A urbanização sem a devida estrutura de saneamento possivelmente influenciou na densidade de mosquitos e na incidência de dengue. Esses fatores podem ter contribuído para a dispersão do mosquito e disseminação dos vários sorotipos da doença.

Caraterização dos habitats propícios à conservação da Estrelinha-de-Santa-Maria (Regulus regulus sanctaemariae)

Dissertação de Mestrado, Gestão e Conservação da Natureza, 11 de Junho de 2014, Universidade dos Açores.