Degradação de Ocratoxina a: estudo de processo e toxicidade

A ocratoxina A (OTA), micotoxina encontrada em diferentes níveis e em diversas matrizes, apresenta efeitos carcinogênicos, nefrotóxicos e teratogênicos. O desenvolvimento de métodos capazes de diminuir esta contaminação a níveis permitidos pela legislação é incentivado e os processos biológicos utilizados envolvem o uso de enzimas e/ou microrganismos para degradação da OTA e são preferenciais pela especificidade, bem como pelas condições brandas para a detoxificação. O objetivo do trabalho foi estudar a ação de carboxipeptidase A nos níveis e na toxicidade de OTA, visando aplicar a técnica para detoxificar farinhas de trigo. Primeiramente foi estimado o risco de exposição à ocratoxina A pelo consumo de farinhas de trigo. Para isso foram estabelecidas condições de determinação de OTA em farinhas de trigo, empregando técnicas de estatística multivariada para definir os principais interferentes na extração de OTA pelo método de QuEChERS e detecção em CLAE-FL. O método validado permitiu a avaliação da ocorrência natural em 20 amostras de farinha de trigo, estando estas contaminadas na faixa de 0,22 a 0,85 µg.kg-1 , apresentando um valor de ingestão diária de 0,08 ngOTA.dia-1 .kgmassacorpórea -1 e uma disponibilidade de 94,4%. Em seguida foi realizada a padronização da extração de carboxipeptidase A em biomassa de Rhizopus oryzae que consistiu em agitação ultrassônica durante 30 minutos numa potencia fixa de 150 W e 40 kHz e a triagem de agentes biológicos para degradação de OTA. Para o estudo da degradação in vitro de OTA, método de extração e detecção de OTA e OTα em CLAEFL foi validado e o processo de degradação foi realizado com Rhizopus oryzae e Trichoderma reesei, obtendo-se uma redução máxima de 63,5% e 57,7%, respectivamente. A degradação apresentou uma correlação alta (R>0,9) e significativa (p<0,05) com a produção de Otα, indicando que ocorreu a produção de enzimas capazes de hidrolisar a micotoxina, por exemplo, a carboxipeptidase A. O estudo da toxicidade de OTA e seu metabólito OTα foi realizado em neutrófilos humanos, onde foi observado a ausência de efeito tóxico de OTα. Também foi determinado o mecanismo de toxicidade de OTA pelo aumento de Ca2+ intracelular pela liberação a partir das reservas internas. Esta liberação, subsequentemente, provoca uma cascata de eventos, nomeadamente: a produção de espécies reativas, depleção de ATP, perda de ΔΨm, levando à morte por necrose. Para reduzir o risco de exposição à micotoxina pela ingestão de matéria prima contaminada, carboxipeptidase A extraída de diferentes fontes foi aplicada na hidrólise de OTA em farinha de trigo para posterior determinação do conteúdo residual de OTA e OTα, empregando método validado. O estudo mostrou uma redução de OTA entre 16,8 e 78,5% e produção de OTα entre 2 a 8,2 ng.g-1 . As carboxipeptidases mais promissoras para degradação foram as provenientes de Rhizopus e Trichoderma e a carboxipeptidase comercial. Ficou demonstrado que se pode recomendar a aplicação de enzimas proteolíticas, tipo carboxipeptidase, para reduzir o risco de exposição à micotoxina quando utilizada matéria prima contaminada, por exemplo, farinha de trigo para diferentes processos. A transformação de OTA para OTα e seus efeitos na redução da toxicidade da micotoxina corroboram com esta afirmação.

Identificação e expressão de genes relacionados à via esteroidogênica e resposta antioxidante após a exposição à Atrazina em Poecilia vivipara (Poeciliidae, Cyprinodontiformes)

O herbicida Atrazina (ATR) é um agrotóxico utilizado há cerca de 50 anos, responsável pelo controle seletivo de plantas daninhas em cultivo de arroz, milho e cana-de-açúcar, principalmente. Estudos recentes apontam diversos efeitos desse herbicida em invertebrados e vertebrados, através da contaminação do solo, bem como da lixiviação para os ecossistemas aquáticos. Foi demonstrado que a ATR é um desregulador endócrino, além de causar efeitos como estresse oxidativo, imunotoxicidade e distúrbios no metabolismo energético. No presente estudo, a espécie nativa Poecilia vivipara foi utilizada como modelo experimental para identificar e analisar a expressão de genes atuantes na via esteroidogênica (StAR e Cyp19a1) e genes atuantes no sistema de defesa antioxidante enzimático (SOD-1 e CAT), frente a exposição à diferentes concentrações de ATR. Sequências parciais dos genes-alvo foram obtidas e comparadas com sequências disponíveis de espécies próximas. Foram analisadas a expressão órgãoespecífica para cada um dos genes isolados, bem como a expressão dos genes frente à exposição ao herbicida atrazina. Os animais foram expostos a ATR em concentrações de 2, 10 e 100 µg/L e a expressão dos genes em gônadas e fígado desses animais foram analisadas em 24 e 96 horas de exposição. As sequências obtidas dos genes StAR, Cyp19a1, SOD-1 e CAT apresentaram 821, 80, 954, 350 pares de bases respectivamente, com identidades que variam de 86 a 100% com espécies filogeneticamente próximas a P. vivipara. Os animais apresentaram uma maior expressão dos genes StAR e Cyp19a1 nas gônadas e no fígado, enquanto a menor expressão se mostrou em órgãos como intestino e baço. Já os genes SOD e CAT apresentaram uma maior expressão no fígado, e menor expressão no intestino. Em relação à expressão gênica frente à exposição à ATR, os resultados apontaram para uma indução dos genes StAR, SOD e CAT em 24 horas, nas gônadas e no fígado, enquanto 8 que a expressão do gene Cyp19a1 foi aumentada apenas após 96 horas de exposição. Foi demonstrado que o herbicida ATR, mesmo em baixas concentrações, é capaz de desregular a expressão de genes que codificam tanto para proteínas componentes da via de síntese de hormônios esteróides, quanto para enzimas atuantes na resposta antioxidante celular de P. vivipara. 

Avaliação do impacto de poluentes estrogénicos em peixes

Dissertação de Mestrado, Biologia Marinha, Faculdade de Ciências e Tecnologia, Universidade do Algarve, 2015

siRNAs sintéticos direcionados à no sintase neuronal : efeitos sobre a expressão gênica e viabilidade celular do glioma

Dissertação (mestrado)—Universidade de Brasília, Faculdade de Agronomia e Medicina Veterinária, Programa de Pós-Graduação em Saúde Animal, 2011.

Silenciamento da expressão da enzima óxido nítrico sintase neuronal (nNOS) em linhagem de neuroblastoma via siRNAs sintéticos em dupla fita

Dissertação (mestrado)—Universidade de Brasília, Faculdade de Agronomia e Medicina Veterinária, Programa de Pós-Graduação em Saúde Animal, 2011.

Modificazioni del segnale EEG in un compito di memoria visiva con distrattori visivi ‘deboli’ e ‘forti’

La valutazione del segnale elettroencefalografico acquisito durante compiti di Working Memory è utile per indagare regioni e meccanismi cerebrali alla base della capacità di immagazzinare le informazioni provenienti dall’ambiente rilevanti per il task da svolgere e di inibire stimoli irrilevanti/distraenti. In questo lavoro di Tesi è stato condotto uno studio su 13 volontari che hanno svolto un compito di memoria di lavoro visiva, consistente di prove ripetute (trial) ognuna composta di diverse fasi: Encoding (memorizzazione del memory set), Retention (mantenimento in memoria) in cui si mostra un distrattore, che può essere weak (poco interferente) o strong (maggiormente interferente). Ciascun trial termina con la comparsa della Probe, a cui il soggetto deve rispondere indicando se apparteneva o meno al memory set. Durante il task è stato acquisito il segnale EEG da 64 elettrodi, ed analizzato per indagare i potenziali evocati (ERPs) e la sincronizzazione/desincronizzazione in banda alpha (8-12 Hz) e theta (4-8 Hz) correlata agli stimoli visivi; è stata svolta anche un’analisi preliminare ricostruendo l’attività delle sorgenti corticali dal segnale EEG. Dalle analisi emerge che gli ERPs sono visibili principalmente nelle fasi di Encoding e Distractor, e nelle regioni fronto-centrali e parieto-occipitali, e che nella fase di Distractor sono maggiori per distrattore weak rispetto a strong. Si conferma la natura inibitoria del ritmo alpha e il ruolo del ritmo theta nei processi cognitivi; infatti la potenza in banda alpha aumenta nella fase pre-distrattore (sia weak che strong) e la potenza in banda theta è sostenuta durante l’intero task. Non si osservano differenze in banda alpha e theta tra i due distrattori nella fase pre-distrattore, mentre si osserva una modulazione durante la presentazione del distrattore.

Puberdade Precoce

O vídeo faz uma descrição das características de uma puberdade normal para possibilitar ao médico a identificação de distúrbios endócrinos que acarretam em uma puberdade precoce.

Proposta de criação de grupo ativo para aprimorar a assistência ao paciente com Diabetes mellitus tipo 2

O município de Sabará localiza-se à 12km da capital do estado de Minas Gerais e possui uma população de 127.897 pessoas. O município conta atualmente com sete Equipes de Saúde da Família cujo desafio é adequar a rotina de atendimento para melhor atender a população adscrita. Este trabalho se baseia na análise dos usuários do PSF Fátima 1, especificamente dos pacientes com diagnóstico de diabetes mellitus tipo 2 e aborda métodos de aprimorar a prevenção secundária nos portadores de tal morbidade. O diabetes mellitus é um distúrbio endócrino de alta prevalência, cujas complicações secundárias são debilitantes e dispendiosas. Foi observado um número alto de pacientes diabéticos com complicações microvasculares em estágio avançado na área de abrangência do PSF Fátima 1, atentando para a necessidade de voltar a rotina da unidade para a prevenção de tais consequências e para o controle glicêmico. Os objetivos deste estudo são a criação de um grupo ativo de pacientes com diagnóstico confirmado de diabetes mellitus e o acompanhamento regular destes pacientes, manejo a terapêutica e transmissão de informações que permitam a prevenção de complicações. Pretendemos atingir tais objetivos através da criação de grupo ativo com reuniões semanais incluindo pacientes e a Equipe de Saúde da Família. Será aferida a glicemia capilar e este valor será classificado como adequado ou inadequado de acordo com os padrões da Sociedade Brasileira de Diabetes. Além disso será avaliada a biometria e aferição de pressão arterial e serão discutidos temas de relevância para os pacientes. O acompanhamento será feito de acordo com o número de valores de glicemia considerados como adequados ou inadequados. Esperamos com a realização do grupo ativo obter um número crescente de valores de glicemia capilar considerados adequados segundo os padrões definidos neste estudo. Concluindo, a criação do grupo ativo de diabéticos permite um acompanhamento clínico e laboratorial regular destes pacientes e a transmissão de conhecimentos que culminam em melhor controle glicêmico e prevenção de complicações importantes.

Conhecimento dos fatores de risco associados à ocorrência de diabetes mellitus Tipo 2 na comunidade de São Flélix: uma proposta de intervenção educativa

Santana do Ipanema é um município, do estado Alagoas. O nosso Programa Saúde da Familia (PSF) é o de São Félix. Na comunidade as principais causas de morbidade e mortalidade ocorridas no ano 2013, foram: doenças endócrino-metabólicas, entre elas a diabetes mellitus. Essas doenças estão ocupando lugar preponderante, principalmente em pessoas suceptíveis, por falta de conhecimento da prevenção. A diabetes mellitus é a quarta causa de morte no Brasil. Detectou-se que as principais causas de aparecimento da doença, de sua descompensação e suas complicações, incluindo a morte, está relacionada com a ignorância e também baseado nos fatores de risco e nas ações necessárias quanto ao correto controle. Decidimos elaborar um programa de educação para maior conscientização dos pacientes sobre os fatores de risco para controle da diabetes mellitus. Para elaboração do plano de intervenção ficou estabelecida uma priorização dos problemas encontrados pela estimativa rápida e, em seguida, analisaram-se as influências negativas para a população. Assim, com base nos problemas nós críticos, foram elaboradas as operações e as possíveis soluções, levando-se em conta os resultados esperados, o produto e os recursos necessários. Propusemos um plano operacional para que os pacientes aprendessem mais sobre o risco de adoecer de diabetes mellitus, oferecer linha de cuidado em relação aos hábitos tóxicos e ao estilo de vida inadequados, contribuir com melhor atendimento e acompanhamento e obter informações sobre população com fatores de risco de desenvolvimento da doença. Nossa equipe decidiu criar uma proposta para melhorar o conhecimento dos fatores de risco, e assim diminuir a morbidade e a mortalidade.

Diminuir a incidência e falta de controle da diabetes mellitus na ESF Juza-Paraiso no município Divinópolis - uma proposta de intervenção

A Diabetes Mellitus é uma doença caracterizada pela elevação dos níveis de glicose no sangue. É uma síndrome endócrino metabólica geralmente acompanhada por outras alterações, como obesidade, fatores genéticos, alcoolismo, mal hábitos alimentares, entre outros. Este trabalho tem como objetivo elaborar um plano de intervenção visando para diminuir a incidência e falta de controle da Diabetes Mellitus em pacientes da área de abrangência da Estratégia Saúde da Família. Para elaboração do plano de intervenção foi utilizado o Método do Planejamento Estratégico Situacional. Foi realizada pesquisa bibliográfica nas bases de dados informatizadas com os descritores: Diabetes Mellitus, fatores de risco e estilo de vida. Com a execução deste projeto espera-se aprimorar o conhecimento sobre os fatores de risco associados a Diabetes Mellitus visando reduzir a incidência das complicações, desenvolver programações periódicas de consultas e visitas domiciliares de controle e acompanhamento dos pacientes, promover o autocuidado, vida saudável, modificar os fatores de risco e reduzir a morbimortalidade desta população.

Controle de Diabetes e Peso na UFS Vila Nova

Meu TCC consta de temas extremamente presentes em nosso meio , diabetes , obesidade e parasitoses intestinais, este último abordado dentro do portfólio , a prevalência e relato de caso foram os modelos apresentados , de modo simples e claro , sobre um pouco da minha vivência dentro da USF de Vila Nova no município de Vigia - PA.