Bactericidal activity of Lys49 and Asp49 myotoxic phospholipases A2 from Bothrops asper snake venom--synthetic Lys49 myotoxin II-(115-129)-peptide identifies its bactericidal region

Mammalian group-II phospholipases A2 (PLA2) of inflammatory fluids display bactericidal properties, which are dependent on their enzymatic activity. This study shows that myotoxins II (Lys49) and III (Asp49), two group-II PLA2 isoforms from the venom of Bothrops asper, are lethal to a broad spectrum of bacteria. Since the catalytically inactive Lys49 myotoxin II isoform has similar bactericidal effects to its catalytically active Asp49 counterpart, a bactericidal mechanism that is independent of an intrinsic PLA2 activity is demonstrated. Moreover, a synthetic 13-residue peptide of myotoxin II, comprising residues 115-129 (common numbering system) near the C-terminal loop, reproduced the bactericidal effect of the intact protein. Following exposure to the peptide or the protein, accelerated uptake of the hydrophobic probe N-phenyl-N-naphthylamine was observed in susceptible but not in resistant bacteria, indicating that the lethal effect was initiated on the bacterial membrane. The outer membrane, isolated lipopolysaccharide (LPS), and lipid A of susceptible bacteria showed higher binding to the myotoxin II-(115-129)-peptide than the corresponding moieties of resistant strains. Bacterial LPS chimeras indicated that LPS is a relevant target for myotoxin II-(115-129)-peptide. When heterologous LPS of the resistant strain was present in the context of susceptible bacteria, the chimera became resistant, and vice versa. Myotoxin II represents a group-II PLA2 with a direct bactericidal effect that is independent of an intrinsic enzymatic activity, but adscribed to the presence of a short cluster of basic/hydrophobic amino acids near its C-terminal loop.

New grafted PLA-g-PEG polymeric nanoparticles used to improve bioavailability of oral drugs.

Les nanoparticules (NPs) de polymère ont montré des résultats prometteurs pour leur utilisation comme système de transport de médicaments pour une libération contrôlée du médicament, ainsi que pour du ciblage. La biodisponibilité des médicaments administrés oralement pourrait être limitée par un processus de sécrétion intestinale, qui pourrait par la suite être concilié par la glycoprotéine P (P-gp). La dispersion de la Famotidine (modèle de médicament) à l’intérieur des nanoparticules (NPs) pegylées a été évaluée afin d’augmenter la biodisponibilité avec du polyéthylène glycol (PEG), qui est connu comme un inhibiteur de P-gp. L’hypothèse de cette étude est que l’encapsulation de la Famotidine (un substrat de P-gp) à l’intérieur des NPs préparées à partir de PEG-g-PLA pourrait inhiber la fonction P-gp. La première partie de cette étude avait pour but de synthétiser quatre copolymères de PEG greffés sur un acide polylactide (PLA) et sur un squelette de polymère (PLA-g-PEG), avec des ratios de 1% et 5% (ratio molaire de PEG vs acide lactique monomère) de soit 750, soit 2000 Da de masse moléculaire. Ces polymères ont été employés afin de préparer des NPs chargés de Famotidine qui possède une faible perméabilité et une solubilité aqueuse relativement basse. Les NPs préparées ont été analysées pour leur principaux paramètres physicochimiques tels que la taille et la distribution de la taille, la charge de surface (Potentiel Zeta), la morphologie, l’efficacité d’encapsulation, le pourcentage résiduel en alcool polyvinylique (PVA) adsorbé à la surface des NPs, les propriétés thermiques, la structure cristalline et la libération du médicament. De même, les formules de NPs ont été testées in vitro sur des cellules CaCo-2 afin dʼévaluer la perméabilité bidirectionnelle de la Famotidine. Généralement, les NPs préparées à partir de polymères greffés PLA-g-5%PEG ont montré une augmentation de la perméabilité du médicament, ce par l’inhibition de l’efflux de P-gp de la Famotidine dans le modèle CaCo-2 in vitro. Les résultats ont montré une baisse significative de la sécrétion de la Famotidine de la membrane basolatéral à apical lorsque la Famotidine était encapsulée dans des NPs préparées à partir de greffes de 5% PEG de 750 ou 2000 Da, de même que pour d’autres combinaisons de mélanges physiques contenant du PEG5%. La deuxième partie de cette étude est à propos de ces NPs chargées qui démontrent des résultats prometteurs en termes de perméabilité et d’inhibition d’efflux de P-gp, et qui ont été choises pour développer une forme orale solide. La granulation sèche a été employée pour densifier les NPs, afin de développer des comprimés des deux formules sélectionnées de NPs. Les comprimés à base de NPs ont démontré un temps de désintégration rapide (moins d’une minute) et une libération similaire à la Famotidine trouvée sur le marché. Les résultats de l’étude du transport de comprimés à base de NPs étaient cohérents avec les résultats des formules de NPs en termes d’inhibition de P-gp, ce qui explique pourquoi le processus de fabrication du comprimé n’a pas eu d’effet sur les NPs. Mis ensemble, ces résultats montrent que l’encapsulation dans une NP de polymère pegylé pourrait être une stratégie prometteuse pour l’amélioration de la biodisponibilité des substrats de P-gp.

El Pla de Girona en època tardoantiga

Estudi sobre 2 viles romanes trobades a finals dels anys 80 al límit occidental del Pla de Girona, una a Montfullà i l’altra a Vilablareix, tot fixant-se en el cas de l’Església de Sant Cugat de Salt. Un dels trets més destacables d’ambdós jaciments és la relació topogràfica amb les esglésies de Sant Pere de Montfullà i Sant Menna de Vilablareix, respectivament

El projecte Xarxipèlag : pla del Govern de les Illes Balears per incorporar les noves tecnologies de la informació en la pràctica educativa dels centres docents no universitaris. 'El proyecto Xarxipèlag : plan del Govern de les Illes Balears para incorporar las nuevas tecnologías de la información a la práctica educativa de los centros docentes no universitarios'.

Resumen tomado de la revista

Estudi de les necessitats formatives a la Mancomunitat Pla de Mallorca. 'Estudio de las necesidades formativas en la Mancomunidad Pla de Mallorca'.

El objetivo de la investigación es el análisis de necesidades formativas para el Pla de Mallorca, así como elaborar un diagnóstico claro sobre la realidad socioeconómica del Pla y ver qué orientaciones y acciones pueden llevarse a cabo para poner en marcha una formación orientada profesionalmente y en estrecha relación con las necesidades del mercado de trabajo. 292 empresas de los distintos sectores de actividad económica, a excepción del agrario y de las empresas públicas; la totalidad de los alcaldes de la zona y personal de las distintas administraciones y agentes sociales. Se combina el análisis documental con el trabajo de campo (tablas de recogida de informción sobre oferta formativa de las distintas administraciones, encuesta para recoger información de las empresas, entrevistas a los alcaldes de la zona, entrevista con los agentes sociales del Pla y tabulación de los datos y elaboración del informe definitivo). Para recoger información de las empresas se ha elaborado una encuesta formulada a todos los empresarios de la zona con más de un trabajador. Con ella se pretendía: a) conocer las demandas de personal que previsiblemente se producirán a corto y medio plazo b) conocer las demandas de los distintos sectores c) constatar las necesidades formativas que los empresarios han detectado en sus trabajadores d) conocer la formación que llevan a cabo las empresas. En cuanto a la entrevista con los alcaldes, el cuestionario pretendía recoger su opinión sobre: a) la economía de su municipio. Perspectivas de futuro b) el programa de desarrollo del Pla c) iniciativas municipales o de la Mancomunidad para impulsar la economía de la zona y d) el ajuste o desajuste de la oferta formativa actual. Los cuestionarios entregados a personas representativas de los distintos sectores pretenden conocer a) Los problemas más importantes de los distintos sectores b) recursos necesarios para impulsar el sector y c) formación necesaria para cualificar a los trabajadores. Para el tratamiento estadístico se ha elaborado una base de datos con el programa OMNIS-7. 1) En la Mancomunitat Pla de Mallorca no existe oferta de formación profesional reglada y la de formación ocupacional es reciente y limitada 2) En la oferta de FP predomina la rama administrativa 3) No se observa una demanda clara de nuevos profesionales 4) Existe una necesidad de formación de profesionales que podrían dedicarse a: restauración de antigüedades, elaboración de embutidos y forja 5) Dado el peso específico del comercio en la isla, podría diversificarse la oferta de FP administrativa con un apartado propiamente comercial 6) Dada la motivación de algunos empresarios por la autoformación, sería interesante realizar los cursos de gestión empresarial y márqueting previstos en el programa del Servicio de Promoción Económica de 1993 7) No se ha detectado demanda de trabajadores cualificados en el sector de la construcción y 8) Se detecta una relativa demanda de formación en idiomas de los trabajadores de los restaurantes y bares de la zona. La formación en el Pla tendría que planificarse desde un servicio o Departamento de la Mancomunitat. Se recomienda la creación de una comisión mixta administración-empresarios-políticos y otras entidades para planificar y dinamizar estrategias de desarrollo de la formación ocupacional. Se recomienda la creación de un punto de información para dar a conocer el estado de la ocupación y asesorar a jóvenes trabajadores y empresarios. La Dirección General de Fomento del Empleo y Acción Formativa tendría que desarrollar un papel aglutinador y centralizador, con el mantenimiento de un banco de datos informatizado de carácter balear, que permitiese la consulta sobre las acciones de formación que llevan a cabo distintas instituciones en los distintos territorios de la Comunidad.

Modismes, frases fetes i refranys menorquins. Rallant en pla : literatura i societat a la Menorca del s. XVIII. 'Modismos, frases hechas y refranes menorquines. Hablando llano : literatura y sociedad en la Menorca del s. XVIII'.

Es una de las primeras publicaciones del Consell Insular de Menorca que pretende la recuperación de los elementos populares de la lengua catalana, con especial incidencia en los modismos propios del dialecto menorquín. La publicación recoge un conjunto de refranes populares, frases hechas y modismos propios, un conjunto de consideraciones sobre el dialecto menorquín en el marco de la lengua catalana y unas primeras aportaciones históricas sobre el que se ha denominado período menorquín de la lengua catalana, en el que floreció una literatura propia mientras Menorca permanecía bajo la corona inglesa y el resto de los territorios de habla catalana estaban bajo el dominio borbónico que impedía el uso oficial de la lengua catalana.

Pla experimental d'introducció de la Informàtica a l'EGB a través del Logo. 'Plan experimental de introducción de la Informática en la EGB a través del Logo'.

Diseñar un modelo pedagógico de introducción del Logo en quinto y sexto de EGB. Elaborar un modelo de Formación del Profesorado en Logo. Favorecer los procesos de aprendizaje que desarrollen la capacidad heurística de los alumnos. Crear una situación, un clima implicante que desarrolle actitudes y relaciones positivas en alumnos y profesores. 390 alumnos y 18 profesores repartidos en 6 Centros escolares, 4 públicos y 2 privados, de Catalunya. 1. Etapa: preparación del preproyecto, elaboración del modelo de Formación del Profesorado, realización del curso de Formación Inicial. 2. Etapa: diseño y desarrollo de la investigación. Paradigma alternativo-ecológico. Metodología apoyada en el método naturalista y etnográfico. Pruebas de observación, seguimiento y evaluación. Análisis cualitativo y cuantitativo. V.I.: Lenguaje Logo, metodología heurística, Formación del Profesorado, rol del profesor-investigador, aula taller, equipo de investigación, sexo, nivel, Centro. V.D.: Formación y aprendizaje heurístico, conocimiento Logo del alumno, cambios en el rol del profesor, actitudes profesor-alumno ante el Logo, ambiente del aula taller. Observación directa y sistemática, registros videográficos y magnetofónicos, cuestionarios de opinión a alumnos y profesores (preguntas abiertas y semiestructuradas), redacciones de alumnos, informes de los profesores, seminario permanente entre profesores y equipo investigador (información recopilada en diversas reflexiones y discusiones), factor G de Cattell: escala 2, test de figuras enmascaradas, test de Yerkes, prueba de razonamiento espacial del Instituto de Orientación Psicológica. Método de las dos mitades, contrastación de medias, análisis de correlación múltiple, análisis factorial, diagramas de Venn. El Logo se identifica como factor virtual respecto a otras actividades. Es conveniente continuar la investigación en una segunda fase para profundizar en otros aspectos de la Informática en EGB con estudios clínicos y mayor profundización y control de las variables. La ausencia de notas ha propiciado los momentos de reflexión en un ambiente relajado.

Tallers d'expressions : plàstica 2. 'Talleres de expresión : plástica 2'.

Publicado aunque no se ha encontrado el depósito legal

Crystallization and stereocomplexation behavior of poly(D- and L-lactide)-b-poly(N,N-dimethylamino-2-ethyl methacrylate) block copolymers

The thermal properties, crystallization, and morphology of amphiphilic poly(D-lactide)-b-poly(N,N-dimethylamino- 2-ethyl methacrylate) (PDLA-b-PDMAEMA) and poly (L-lactide)-b-poly(N,N-dimethylamino-2-ethyl methacrylate) (PLLA-b-PDMAEMA) copolymers were studied and compared to those of the corresponding poly(lactide) homopolymers. Additionally, stereocomplexation of these copolymers was studied. The crystallization kinetics of the PLA blocks was retarded by the presence of the PDMAEMA block. The studied copolymers were found to be miscible in the melt and the glassy state. The Avrami theory was able to predict the entire crystallization range of the PLA isothermal overall crystallization. The melting points of PLDA/PLLA and PLA/PLA-b-PDMAEMA stereocomplexes were higher than those formed by copolymer mixtures. This indicates that the PDMAEMA block is influencing the stability of the stereocomplex structures. For the low molecular weight samples, the stereocomplexes particles exhibited a conventional disk-shape structure and, for high molecular weight samples, the particles displayed unusual star-like shape morphology.

Umbelliferone induces changes in the structure and pharmacological activities of Bn IV, a phospholipase A(2) isoform isolated from Bothrops neuwiedi

Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES)

Purification and preliminary crystallographic analysis of a new Lys49-PLA2 from B-jararacussu

BjVIII is a new myotoxic Lys49-PLA2 isolated from Bothrops jararacussu venom that exhibits atypical effects on human platelet aggregation. To better understand the mode of action of BjVIII, crystallographic studies were initiated. Two crystal forms were obtained, both containing two molecules in the asymmetric unit (ASU). Synchrotron radiation diffraction data were collected to 2.0 angstrom resolution and 1.9 angstrom resolution for crystals belonging to the space group P2(1)2(1)2(1) (a = 48.4 angstrom, b = 65.3 angstrom, c = 84.3 angstrom) and space group P3(1)21 (a = b = 55.7 angstrom, c = 127.9 angstrom), respectively. Refinement is currently in progress and the refined structures are expected to shed light on the unusual platelet aggregation activity observed for BjVIII.

Intranasal delivery of zidovudine by PLA and PLA-PEG blend nanoparticles

Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo (FAPESP)

The effect of BMP-2 on the osteoconductive properties of beta-tricalcium phosphate in rat calvaria defects

Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo (FAPESP)

Crystal structure of piratoxin-I: A calcium-independent, myotoxic phospholipase A(2)-homologue from Bothrops pirajai venom

The crystal structure of Piratoxin-I (PrTX-I) a Lys49 homologue isolated from the venom of Bothrops pirajai has been determined and refined at 2.8 Angstrom to a crystallographic residual of 19.7% (R-free = 29.7%). Amino-acid sequence differences between catalytically active phospholipases and PrTX-I in the putative Ca2+-binding loop, specifically the substitutions Tyr28-->Asn, Gly32-->Leu and Asp49-->Lys, result in an altered conformation of this loop, the analysis of the position of the E-amino group of Lys49 in the PrTX-I structure indicates that it fills the site normally occupied by the calcium ion in the catalytically active phospholipases, In contrast to the homologous monomeric Lys49 variant from Agkistrodon piscivorus piscivorus (App), PrTX-I is present as a dimer in the crystalline state, as observed in the structures of myotoxin II from Bothrops asper and Bothropstoxin I from Bothrops jararacussu. The two molecules in the asymmetric unit in the crystal structure of PrTX-I are related by a nearly perfect two-fold symmetry axis, yet the dimeric structure is radically different from the dimeric structure of the phospholipase from Crotalus atrox. In the C. atrox structure the dimer interface occludes the active sites, whereas in the PrTX-I structure they are exposed to solvent, (C) 1998 Elsevier B.V. Ltd. All rights reserved.

Crystallographic and spectroscopic characterization of a molecular hinge: Conformational changes in bothropstoxin I, a dimeric Lys49 phospholipase A2 homologue

Bothropstoxin I(BthTX-I) from the venom of Bothrops jararacussu is a myotoxic phospholipase A2 (PLA2) homologue which, although catalytically inactive due to an Asp49-->Lys substitution, disrupts the integrity of lipid membranes by a Ca2+-independent mechanism, the crystal structures of two dimeric farms of BthLTX-I which diffract X-rays eo resolutions of 3.1 and 2.1 Angstrom have been determined, the monomers in both structures are related by an almost perfect twofold axis of rotation and the dimer interfaces are defined by contacts between the N-terminal alpha-helical regions and the tips of the beta-wings of partner monomers. Significant differences in the relative orientation of the monomers in the two crystal forms results in open and closed dimer conformations, Spectroscopic Investigations of BthTX-I in solution have correlated these conformational differences with changes in the intrinsic fluorescence emission of the single tryptophan residues located at the dimer interface, the possible relevance of this structural transition in the Ca2+-independent membrane damaging activity is discussed. (C) 1998 Wiley-Liss, Inc.