Estudo baseado na pesquisa de anticorpos IgM antitripanossoma no soro, destinado a avaliar a transmissão congênita da doença de Chagas, em hospital previdenciário da cidade de São Paulo

Efetuaram os autores, em hospital previdenciário da cidade de São Pauto, estudo destinado a avaliar, quantitativamente, a ocorrência de transmissão congênita da doença de Chagas. Quatrocentas e noventa e duas mulheres grávidas foram inquiridas sobre a possibilidade de terem, anteriormente, adquirido essa parasitose e, a propósito, ficou apurado que 22 poderiam, com base em dados de diversas ordens, estar infectadas pelo Trypanosoma cruzi Quanto a essas pessoas selecionadas, por ocasião do parto houve coleta de sangue do cordão umbilical, permitindo execução de provas soro lógicas para diagnóstico da protozoose em questão e, fundamentalmente, de pesquisa de anticorpos IgM antitripanossoma por imunofluorescência. Em cinco oportunidades esses testes resultaram positivos, mas nunca houve detecção dos anticorpos do tipo mencionado, demarcando a inexistência, no grupo considerado, de passagens transplancetárias do microorganismo em tela. A investigação levada a efeito não evidenciou, portanto, contaminação de recém-nascido, de origem materna. Entretanto, serve de estímulo para averiguações congêneres em outros ambientes e regiões, nas quais endemicidade da tripanossomíase a nível sócio-econômico afiguram-se diferentes dos em vigor na análise realizada.

Teste reverso para anticorpos igm na toxoplasmose, com hemácias sensibilizadas por antígenos de Toxoplasma gondii

Descreve-se um teste para anticorpos IgM-antitoxoplasma baseado na técnica de captura de IgM do soro por anticorpos anti-IgM adsorvidos a placas plásticas. Para evidenciação dos anticorpos antitoxoplasma nessa fração, utiliza-se uma suspensão de hemácias humanas, formolizadas e sensibilizadas por antígenos de Toxoplasma gondii. Nos testes positivos estas aparecem como uma camada contínua, enquanto que nos testes negativos depositam-se ao fundo das cavidades das placas. A leitura dos testes é muito mais evidente do que na técnica anteriormente proposta por Desmonts e cols, 1981, que utiliza suspensões de toxoplasmas. A suspensão de hemácias sensibilizadas pode ser preparada por simples diluição do reagente para o teste de hemaglutinação para a toxoplasmose.

Avaliação do comportamento de diferentes cepas do Trypanosoma cruzi na infecção de seis linhagens isogênicas de camundongos

O estudo da infecção de camundongos de seis diferentes linhagens isogênicas (A/J, AKR, Balb/c, C3H, C57BL/10 e DBA) pelas cepas do Trypanosoma cruzi- peruana (Tipo I), 21SF (Tipo II) e colombiana (Tipo III) demonstrou que as diferentes cepas do T. cruzi conservam os seus caracteres básicos na infecção das diversas linhagens de camundongos. O grau de resistência de cada linhagem varia conforme o tipo da cepa. Todas as linhagens mostraram alta susceptibilidade à infecção pela cepa peruana; em relação às cepas 21SF e colombiana, os padrões de resistência de cada linhagem variam de acordo com a cepa, formando um espectro, que difere entre as duas cepas citadas, sendo em geral mais reistentes as linhagens DBA e B-10 e menos resistentes as linhagens AKR e A/J. Os animais de todas as linhagens infectados com quaisquer das cepas apresentaram alterações das imunoglobulinas com diminuição precoce da IgG1 e elevação de IgG2a' IgG2b e IgM. Houve uma correlação entre o aumento de IgG2a e o grau de reação inflamatória. O infiltrado inflamatório variou de acordo com as linhagens de camundongo, sendo moderado e mononuclear nas mais susceptíveis e com predomínio de polimorfonucleares nas mais resistentes. Os resultados sugerem que as características do parasito são o fator determinante do padrão básico da infecção pelo T. cruzi

Prevalence of IgG and IgM anti-Toxoplasma antibodies in patients with HIV and acquired immunodeficiency syndrome (AIDS)

With the emergence of the human immunodeficiency virus (HIV), in patients with acquired immunodeficiency syndrome (AIDS), Toxoplasma gondii has arisen as an important opportunist pathogenic agent, especcially in the central nervous system, being the most common cause of intracerebral lesions. The incidence of Toxoplasma gondii in HIV-infected patients depends principally on the existence of latent Toxoplasma parasitosis in the population affected. Through the enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA), IgG and IgM anti-Toxoplasma antibodies were found in 92 patients of which 46 (50.0%) were IgG seropositive, and only one case (1.0%) had IgM antibodies.Of the 92 patients: 53 were HIV seropositives and 39 had AIDS. The detection and monitoring of anti-Toxoplasma antibodies in HIV patients is essential, since in this group there is a high percentage risk of developing cerebral toxoplasmosis, which is the second cause of death in this type of patients.

Padronização de ensaio imunoenzimático para pesquisa de anticorpos das classes IgM e IgG anti-Toxoplasma gondii e comparação com a técnica de imunofluorescência indireta

A sorologia tem sido o método de escolha para o diagnóstico da toxoplasmose. Devido a isto, padronizamos um ensaio imunoenzimático (ELISA) e comparamos seus resultados com a técnica de imunofluorescência indireta (IFI). A técnica padronizada apresentou na pesquisa de IgG sensibilidade (S) de 96,7% e especificidade (E) de 75%, com valor de predição de positividade (VPP) de 83,3% e de negatividade (VPN) de 94,7%, com uma concordância ajustada (K) de 73,5%. A IFI apresentou S de 83,8%, E de 79,1% com VPP de 83,8 % e VPN de 79,1% com K de 63%. A concordância bruta entre os dois testes (ELISA/IFI) foi de 88,3% para pesquisa de IgG e de 81,5% para pesquisa de IgM, sendo o K de 70,8% para IgG e de 1,3% para IgM, sendo o índice de correlação (r) de 0,556 para IgG e de -0,023 para IgM. Podemos concluir que a ELISA-IgG padronizada é indicada nos processos de triagem sorológica, sendo a ELISA-IgM desaconselhada uma vez que apresentou baixos índices de concordância ajustada com a técnica de referência, sugerindo pouca confiabilidade dos resultados.

The effects of immunization with recombinant Sm14 (rSm14) in reducing worm burden and mortality of mice infected with Schistosoma mansoni

To investigate whether mice immunization with the recombinant form of a 14.7 KDa Schistosoma mansoni protein (rSm14) confers protection against a S. mansoni lethal challenge infection, rSm14-immunized mice were challenged with different cercarial burdens. A significant protection was detected in immunized mice challenged with 100 or 1,000 S. mansoni cercariae when compared with their controls (p< 0.004 and p< 0.01 respectively). Differently from previous report, none of the mice from the control group (not immunized and infected with 1000 cercariae) died before the 30th day post-infection. A direct correlation between the number of challenge cercariae and the precocity of mice death was found. IgM anti-rSm14 antibodies were significantly produced (p< 0.05) mainly in the groups of immunized mice infected with 500 or 1000 cercariae. IgG and IgA anti-rSm14 antibodies were not significantly detected. In Western immunoblots, all mice sera showed a specific antibody response with a 14.7 KDa antigen being reacted with particular intensity in sera from immunized mice. The results show that immunization with rSm14 reduced mice worm burden independently of the cercariae load of challenge infection. No correlation was found between serum antibodies and worm burden reduction. In relation to cercarial load and the rate and precocity of mice mortality a direct correlation was found.

Estudo prospectivo de gestantes e seus bebês com risco de transmissão de toxoplasmose congênita em município do Rio Grande do Sul

A população estudada foi composta por 2.126 gestantes atendidas em unidades do Sistema Único de Saúde da região noroeste do Estado do Rio Grande do Sul. Após o screening sorológico inicial ocorreu o acompanhamento das gestantes, durante o pré-natal, e de seus bebês. Foram realizadas dosagens de IgG, IgM, IgA, Avidez de IgG, inoculação em camundongos, PCR e coleta de placenta e de cordões umbilicais para realizar a técnica de imuno-histoquímica além de avaliações clínicas. Das gestantes avaliadas, 74,5% eram IgG reagentes e 3,6% IgM reagentes. Nas avaliações oftalmológicas, foi observada lesão em dez gestantes e uma criança apresentou lesões oftalmológicas e calcificações cerebrais. A presença de IgM específico anti-T.gondii, durante toda a gestação não caracterizou a fase aguda recente da infecção, fazendo-se necessária a realização de testes complementares. Ressalta-se a importância do acompanhamento de neonatos de mães com sorologia compatível com a infecção mesmo sem sinais e sintomas sugestivos de toxoplasmose congênita.

Presença de anticorpos da classe IgM de Leptospira interrogans em animais silvestres do Estado do Tocantins, 2002

Quatrocentos e vinte e sete amostras de soro provenientes de animais silvestres foram testadas frente a 18 sorovariedades de Leptospira interrogans. De 286 amostras de Cebus apella, 46 (16,1%) foram positivas para as sorovariedades pomona, brasiliensis, mini, swajizak, grippothyphosa, sarmin, fluminense, autumnalis, hebdomadis, guaratuba, javanica e icterohaemorhagiae. Das 82 de Alouatta caraya, 2 (2,4%) foram positivas para as sorovariedades mangus e fluminense. Das 31 de Nasua nasua, 4 (12,9%) foram positivas para as sorovariedades fluminense e javanica. Das 10 amostras de Cerdocyon thous, 2 (20%) foram positivas para as sorovariedades fluminense e brasiliensis. Sete de Dasyprocta sp, 6 de Tamandua tetradactila e 5 de Euphractus sexcintus não apresentaram reatividade.

Human serum antibody reactivity towards Paracoccidioides brasiliensis antigens treated with sodium metaperiodate

In this study, we evaluated the profile of anti-Paracoccidioides brasiliensis immunoglobulin isotypes in serum from patients with the acute and chronic forms of paracoccidioidomycosis, using the whole Paracoccidioides brasiliensis antigen and the antigen treated with sodium metaperiodate. All the immunoglobulin isotypes present in the serum from patients with the acute and chronic forms of paracoccidioidomycosis presented higher reactivity towards the whole antigen than to the antigen treated with metaperiodate (P < 0.05). The reactivity of IgG and IgM to the antigen treated with metaperiodate was greater in serum from patients with the acute form of the disease (P < 0.05), while IgA was more reactive in serum from patients with the chronic form (P < 0.05). There was greater reactivity of IgG1 and IgG2 to the whole antigen and the antigen treated with metaperiodate in the serum from patients with paracoccidioidomycosis than there was in serum from patients with other parasitic infections (P < 0.05). Furthermore, IgG1 from patients with the acute form recognized the 19kDa, 27kDa and 31kDa antigens in the western blot test. Thus, the results suggest that modifications to the epitopes of Paracoccidioides brasiliensis antigens may help to improve the immunodiagnosis of paracoccidioidomycosis.

Lagochilascaris minor: antibody production in experimentally infected mice

Lagochilascaris minor is the causative agent of lagochilascariosis, a disease that affects the neck region and causes festering abscesses, with eggs, adult parasites and L3/L4 larvae within the purulent exudates. Today, mice are considered to be intermediate hosts for the parasite. C57BL/6 mice produce immunoglobulin IgM, IgA and IgG against the crude extract of the parasite; on the other hand, antibodies produced against the secreted/excreted antigens of Lagochilascaris minor present lower levels of IgM, IgA and IgG. This is the first description of antibody detection against different antigens of Lagochilascaris minor.

Investigation of measles IgM-seropositive cases of febrile rash illnesses in the absence of documented measles virus transmission, State of São Paulo, Brazil, 2000-2004

INTRODUCTION: To review measles IgM-positive cases of febrile rash illnesses in the State of São Paulo, Brazil, over the five-year period following interruption of measles virus transmission. METHODS: We reviewed 463 measles IgM-positive cases of febrile rash illness in the State of São Paulo, from 2000 to 2004. Individuals vaccinated against measles < 56 days prior to specimen collection were considered to be exposed to the vaccine. Serum from the acute and convalescent phases was tested for evidence of measles, rubella, parvovirus B19 and human herpes virus-6 infection. In the absence of seroconversion to measles immunoglobulin-G, measles IgM-positive cases were considered false positives in individuals with evidence of other viral infections. RESULTS: Among the 463 individuals with febrile rash illness who tested positive for measles IgM antibodies during the period, 297 (64%) were classified as exposed to the vaccine. Among the 166 cases that were not exposed to the vaccine, 109 (66%) were considered false positives based on the absence of seroconversion, among which 21 (13%) had evidence of rubella virus infection, 49 (30%) parvovirus B19 and 28 (17%) human herpes virus-6 infection. CONCLUSIONS: Following the interruption of measles virus transmission, thorough investigation of measles IgM-positive cases is required, especially among cases not exposed to the vaccine. Laboratory testing for etiologies of febrile rash illness aids interpretation of these cases.

Interpretation of the presence of IgM and IgG antibodies in a rapid test for dengue: analysis of dengue antibody prevalence in Fortaleza City in the 20th year of the epidemic

INTRODUCTION: The diagnosis of dengue and the differentiation between primary and secondary infections are important for monitoring the spread of the epidemic and identifying the risk of severe forms of the disease. The detection of immunoglobulin (Ig)M and IgG antibodies is the main technique for the laboratory diagnosis of dengue. The present study assessed the application of a rapid test for dengue concerning detection of new cases, reinfection recognition, and estimation of the epidemic attack rate. METHODS: This was a retrospective, cross-sectional, descriptive study on dengue using the Fortaleza Health Municipal Department database. The results from 1,530 tested samples, from 2005-2006, were compared with data from epidemiological studies of dengue outbreaks in 1996, 2003, and 2010. RESULTS: The rapid test confirmed 52% recent infections in the tested patients with clinical suspicion of dengue: 40% detected using IgM and 12% of new cases using IgG in the non-reactive IgM results. The positive IgM plus negative IgG (IgM+ plus IgG-) results showed that 38% of those patients had a recent primary dengue infection, while the positive IgG plus either positive or negative IgM (IgG+ plus IgM+/-) results indicated that 62% had dengue for at least a second time (recent secondary infections). This proportion of reinfections permitted us to estimate the attack rate as >62% of the population sample. CONCLUSIONS: The rapid test for dengue has enhanced our ability to detect new infections and to characterize them into primary and secondary infections, permitting the estimation of the minimal attack rate for a population during an outbreak.

Immunologic evaluation in infective endocarditis

OBJECTIVE: To analyze the immune response in peripheral blood of patients with infective endocarditis. METHODS: We studied 10 patients with infective endocarditis, age range from 20 to 50 years-old, males and females, and 20 healthy subjects in the same age range. The diagnosis of the disease was based on the clinical picture, echocardiogram, and hemoculture based upon samples drawn and tested before the treatment started. The were no history of atopy or malnutrition, no autoimmune disease, and they were not using any immunosuppressant or antibiotic medication. RESULTS: The patients with endocarditis had significantly higher T and B lymphocyte, CD4+ and CD8+ cell counts, IgM and IgG serum levels, and C4 component of the complement than the control group; no significant difference concerning serum IgA and neutrophil oxidative metabolism; a significant decrease in C3, chemotaxis, and monocyte phagocytosis;cryoglobulins were detected in 66.6% of patients and they were formed by IgG, IgM, IgA, C3, and C4. CONCLUSION: The patients with infective endocarditis were immunocompetent in most sectors of immune response and, at a certain moment, an autoimmune component may be present.

Indirect immunofluorescence(IgG and IgM) tests for toxoplasmosis on 203 persons, with no symptomatology suggesting the disease, located in the city of Rio de Janeiro. Serological follow up one to two years later.

Clinical and serological follow up examinations were performed on 203 persons, from three to twenty years of age, from the otolaryngology department of a hospital in the city of Rio de Janeiro, with no symptomatology suggesting toxoplasmosis, but suffering from chronic tonsillitis. According to results obtained during the first indirect immunofluorescence tests, the patients were divided into following groups: Group I (non-reactive IgG and IgM), 98 persons (48.3%); Group II (1:16 ≤ IgG ≤ 1:256 and non-reactive IgM), 74 persons (36.5%); Group III (IgM ≥ 1:1024 and non-reactive IgM), 18 persons (8.8%), and Group IV (IgG and IgM reactive), 13 persons (6.4%). One to two years later, 131 (64.5%) of the 203 persons were reexamined by a second indirect immunofluorescence test. In the case of 66 persons (Group I) whose serum was non-reactive in the IgG and IgM classes during the first indirect immunofluorescence test, serum conversion was observed in aproximately 21.2%. in 65 individuals (49.6%), (Groups II, III and IV),with reactive serum in the IgG classes during the first indirect immunofluorescence test, the second reaction showed an increase in titres in 20% of the cases, a decrease in 67.7% of the cases, or no alterations in 12.3 of the cases. In the IgM class, all 131 sera were non-reactive at 116 dilution the second immunofluorescence test, including the 13 cases that had previously been reactive in the immunoglobulin class, Symptomatology suggesting toxoplasmosis was only observed in one case during the second testing, this patient's principal physical sign being hypertrophied lymph nodes. during this period, the Toxoplasma antibodies showed titres of IgG 1:32000 and non-reactive IgM, whilst one year previously, during the first test, these titres were IgG 1:1024 and IgM 1:64. Differences in the age, sex and skin coloring of patients were not statistically significant as regards alterations in the indirect immunofluorescence test titres.

Efeito da dieta láctea na supressão da parasitemia e no desenvolvimento da imunidade humoral durante o curso da infecção malárica em camundongos

Estudou-se o efeito da dieta láctea, por um período de 150 dias em camundongos infectados com diferentes números das formas sangüíneas de Plasmodium berghei, e observou-se o desenvolvimento da imunidade humoral nestes animais pela dosagem das imunoglobulinas das classes IgG e IgM no soro, usando o teste de imunofluorescência indireta. Os resultados indicam que a administração do leite, como único alimento em camundongos, protege-os cotnra infecção malárica fatal, independentemente do número de parasitas inoculados. Os animais desenvolveram altos níveis de anticorpos IgG, os quais persistiram no soro por longo período de tempo. Contudo, os anticorpos IgM somente foram detectáveis no soro durante as primeiras duas semanas de infecção. O P. berghei continua presente na circulação periférica, após dois meses de infecção, uma vez que o sangue destes animasi inoculados em camundongos mantidos em dieta norma, produziu infecção fatal nos recipientes. No entanto, ao exame microscópico não foi possível detectar o parasita da malária no sangue periférico destes animais. O protozoário esteve presente no baço e fígado dos camundongos durante todo o tempo de duração da pesquisa. A presença contínua do P. berghei nestes animais, em nível de infecção subclínica, ofereceu ao hospedeiro o desenvolvimento de uma imunidade sólida contra subseqüente infecção. Esta imunidade adquirida esteve presente, nestes animais, até cinco meses após a infecção.